Th17细胞在哮喘小鼠发病中的作用机制研究

目的 初步探索Th17细胞在哮喘小鼠发病中的作用机制.方法 30只小鼠随机均分为对照组和哮喘组.哮喘组小鼠于第0天(开始实验当天)和第14天给予腹腔注射生理盐水混悬液(含OVA 2mg,氢氧化铝乳化液5mg)200μl致敏,第21天开始给予含1%卵蛋白(OVA)的生理盐水40ml,雾化吸人,1次/d,每次40min,连续6d.对照组以等体积生理盐水代替致敏液及雾化液,余同哮喘组.观察2组小鼠BALF中细胞比例变化和气道病理改变;流式细胞术检测外周血、胸腺和肺组织中的Th17细胞.结果 哮喘组BALF中细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分率均显著高于对照组(P<0.01).病理观察可见哮喘组小鼠的气道炎症以中性粒细胞及嗜酸性粒细胞浸润为主,而对照组无此变化.哮喘组外周血及胸腺中Th17细胞(分别为3.62%±0.58%、6.96%±1.35%)显著增高,与对照组(分别为0.68%±0.26%、0.80%±0.30%)比较有显著性差异(P<0.01);而肺组织中Th17细胞很少,哮喘组(0.64%±0.30%)与对照组(0.55%±0.23%)相比无统计学差异(P>0.05).结论 Th17细胞在哮喘中的作用可能是通过胸腺释放入外周血,促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集,参与哮喘气道炎症的发生.     

哮喘模型小鼠脾脏和肺脏CD8~+T细胞的作用机制研究

目的建立哮喘小鼠模型,探讨CD8+T细胞在哮喘中的作用。方法将32只BALB/c小鼠随机均分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠建立哮喘模型。测定两组小鼠的气道反应性,对肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类和计数,观察肺组织的病理变化。用免疫磁珠纯化柱纯化两组小鼠脾、肺组织的CD8+T细胞,加入卵蛋白(OVA)刺激,用ELISA法检测培养96h后CD8+T细胞上清中IL-4、IL-10及IFN-γ的水平。结果哮喘组小鼠存在气道高反应性,证明模型构建成功。哮喘组BALF中的细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的比例均较对照组明显增加(P<0.05),巨噬细胞比例明显降低(P<0.05)。哮喘组肺间质中有大量炎性细胞浸润,气道上皮损伤,杯状细胞肥大增生,有大量黏液分泌,黏膜下胶原纤维沉积。对照组无明显的炎症改变。哮喘组肺CD8+T细胞分泌的IL-4(203.20±16.59pg/ml)较对照组(3.29±1.61pg/ml)明显增加(P<0.05),IL-4在两组脾CD8+T细胞培养上清中均未检出。哮喘组脾CD8+T细胞分泌IFN-γ水平(4997.05±189.07pg/ml)较对照组(4509.73±378.10pg/m...     

n-3多不饱和脂肪酸对运动性哮喘豚鼠气道炎症和气道高反应性的影响

目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3PuFA)对运动性哮喘(EIA)豚鼠支气管肺灌洗液(BALF)、肺组织病理学、气道阻力和动态肺顺应性的影响及其可能机制。方法:20只豚鼠随机分为正常对照组(n=6)、EIA模型组(n=7)和EIA+n-3PuFA干预组(n=7)。实验第1、14天对照组腹腔注射生理盐水,其它两组腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)+甲双吡丙酮(Metyrapon1,MET)。n-3PuFA干预组每天给予n-3PuFA液灌胃(0.04g/kg),对照组和EIA模型组补充同剂量的蒸馏水。各组豚鼠在第21天测试气道阻力(RL)和动态肺顺应性(Cydn),建立运动性哮喘模型后麻醉处死,取豚鼠肺组织观察BALF细胞总数及分类、豚鼠气道反应性及肺组织形态学的变化。结果:EIA模型组豚鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)显著高于对照组(P<0.01);RL显著性增高,Cydn明显下降(P<0.05);肺组织可见嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞浸润。EIA+n-3PuFA干预组豚鼠BALF中细胞总数、EOS显著低于EIA模型组(P<0.05),气道阻力RL呈下降趋势,Cydn表现出升高趋势;支气管粘膜上皮伴少许炎性细胞浸润。结论:运动性哮喘存在气道粘膜的炎症改变和气道高反应性,n-3PuFA可以通过减少气管粘膜炎性介质的产生改善EIA的通气情况。     

腹腔注射干扰素对小鼠哮喘模型GATA-3及Th2细胞因子表达的影响

目的研究腹腔注射IFN-γ对支气管哮喘的防治作用及机制。方法36只BALB/c小鼠随机分为3组,正常对照组(A组,12只)、哮喘模型组(B组,12只)、腹腔注射IFN-γ组(C组,12只),B、C组采用卵蛋白(OVA)、氢氧化铝建立哮喘模型,并分别于第23~30天激发前腹腔注射0·25mlPBS液和IFN-γ5μg,1次/天。31天时取肺泡灌洗液(BALF)测定细胞成分、IL-4和IL-5的浓度,取血测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3的表达。结果C组BALF中的嗜酸性粒细胞(EOS)为0·3±0·2,明显低于B组(21·1±6·7,P<0·01)。C组BALF中的IL-4(3·0±2·5)和IL-5(11·4±3·2)的水平明显低于B组的IL-4(90·5±22·4)和IL-5(55·6±10·7),差异有显著性(P<0·01)。C组血浆中总IgE(24·3±7·6)和OVA特异性IgE(12·3±3·6)水平显著低于B组的IgE(67·2±9·7)和OVA特异性IgE(34·6±7·8),差异有显著性(P<0·01)。HE染色示B组支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,并有EOS为主的炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,支气管壁周围有EOS为主的炎性细胞浸润,而C组小鼠的上述炎症性改变则明显减轻。免疫组化显示B组肺组织中GATA-3的表达明显增加,而C组GATA-3的表达明显减少,B组与A组及C组GATA-3阳性表达细胞数差异显著(P<0·01)。结论腹腔注射IFN-γ可以抑制哮喘鼠IL-4、IL-5的合成,抑制EOS在气道内的炎性浸润及血浆中总IgE和OVA特异性的IgE水平,其机制可能与IFN-γ阻断GATA-3的表达,从而继发抑制Th2型反应有关。     

特异性p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对哮喘气道黏液高分泌的抑制作用

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB203580对哮喘模型小鼠气道黏液高分泌的抑制作用。方法取BABL/C小鼠40只,按随机数字表法分为哮喘组、SB203580治疗组、地塞米松治疗组和正常对照组,每组10只。高碘酸希夫(AB-PAS)特染法检测各组小鼠小支气管杯状细胞的数量,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC含量,RT-PCR法检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达水平,并采用图像分析法进行灰度分析。结果与正常对照组相比,哮喘组的上皮杯状细胞数量、支气管肺泡灌洗液中MUC5AC含量、肺组织MUC5AC mRNA表达水平均显著增加(P<0.01)。经过SB203580和地塞米松分别干预后,上述指标均明显低于哮喘组(P<0.01),而且SB203580对杯状细胞、肺组织MUC5AC mRNA的抑制能力比地塞米松更强(P<0.01)。结论p38 MAPK特异性抑制剂SB203580在一定程度上能够抑制杯状细胞增生与MUC5AC合成,在哮喘气道黏液高分泌的防治中具有潜在的临床应用前景。     

实验性哮喘小鼠肺组织中转录因子GATA-3的表达及意义

 目的探讨GATA-3表达在支气管哮喘(哮喘)小鼠发病机制中的作用.方法12只C57BL/6小鼠随机均分为2组,对照组(A组)、哮喘组(B组).B组建立哮喘模型,各组小鼠HE染色切片观察小鼠气管、肺组织病理变化,免疫组化测定肺组织中GATA-3表达及含量.结果在同一视野对照组支气管黏膜下未见炎性细胞,哮喘组可见大量炎性细胞浸润.免疫组化染色A组GATA-3表达(6±0.5),B组GATA-3表达(64±0.2).结论哮喘小鼠肺部存在GATA-3高表达,支气管哮喘小鼠肺组织存在多种炎性细胞浸润,其机制之一与支气管小鼠肺组织中GATA-3高表达有关.     

吲哚胺2,3-双加氧酶基因转染未成熟树突细胞对卵蛋白致敏小鼠模型CD4+T细胞的影响

目的以pEGFP-N1-IDO真核表达载体转染未成熟树突细胞,观察吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因对CD4 T细胞的影响。方法体外扩增小鼠骨髓来源的未成熟树突细胞,采用光镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术鉴定后,采用DOTAP脂质体转染法进行转染,倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。同时建立卵蛋白致敏小鼠模型,分离并纯化脾脏CD4 T细胞,用3H-TdR掺入法进行混合淋巴细胞反应实验,观察IDO转染未成熟树突细胞对卵蛋白致敏小鼠模型脾脏CD4 T细胞增殖的影响,并用TUNEL法检测CD4 T细胞凋亡情况。结果IDO基因转染未成熟树突细胞能抑制卵蛋白致敏小鼠模型CD4 T细胞增殖,pEG-FP-N1-IDO质粒转染组CD4 T细胞减少,与pEGFP-N1空质粒转染组和对照组比较差异显著(P<0.05);IDO基因转染未成熟树突细胞可诱导CD4 T细胞凋亡,pEGFP-N1-IDO质粒转染组CD4 T细胞凋亡率为15.3%±2.6%,明显高于对照组和pEGFP-N1空质粒转染组和对照组(P<0.01)。结论IDO基因表达的上调可能是诱导哮喘免疫耐受的机制之一。     

黄芪甲苷对哮喘模型小鼠气道炎症及IL-22的影响

目的 观察白介素22(IL-22)在哮喘模型中的作用,研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对哮喘小鼠模型气道炎症及IL-22的调控作用,探讨AS-Ⅳ治疗哮喘的作用机制.方法 32只4周龄BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德(BUD)组和AS-Ⅳ组4组,用卵清蛋白(OVA)致敏、激发小鼠以制备哮喘模型.小鼠肺组织行HE及AB-PAS染色,进行气道炎症评分,ELISA法检测4组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中IL-22的水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测小鼠肺组织中IL-22 mRNA的表达水平,流式细胞术检测小鼠脾单细胞悬液中Th22的比例.结果 与对照组相比,哮喘小鼠肺组织炎症评分增加(P<0.05),BALF中IL-22水平增高(P<0.01),肺组织中IL-22 mRNA表达水平升高(P<0.01),脾单细胞悬液中Th22比例增加(P<0.01),差异具有统计学意义.给予BUD及AS-Ⅳ治疗后,小鼠气道炎症评分降低(P<0.05),IL-22 mRNA的表达水平及Th22细胞的比例均较哮喘组降低(P<0.01),差异具有统计学意义.结论 AS-Ⅳ对哮喘气道炎症发挥治疗性作用,这可能与AS-Ⅳ通过抑制Th22细胞分化、抑制IL-22的表达和分泌有关.     

哮喘气道上皮杯状细胞合成GM-CSF及其调控机制的研究

目的 观察哮喘小鼠气道上皮杯状细胞合成粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的能力,探讨钙激活Cl^-通道(CLCA)在合成中的调控作用。方法 取成年雄性BALB／c小鼠,采用卵蛋白致敏法制备哮喘模型。AB-PAS特染法检测哮喘小鼠小支气管杯状细胞的分布;同一解剖部位采用免疫组化染色法检测GM-CSF的表达。体外培养人气道黏液上皮细胞系NCI-H292,采用含人hCLCA1的重组质粒pIRKS2-EGFP／hcLCA1转染该细胞。筛选到稳定表达hCLCA1的细胞后,免疫组化法及RT-PCR法检测该细胞GM-CSF的表达、转录水平。设非转染细胞和CLCA阻断剂NFA干预的转染细胞为两个对照组。结果 哮喘小鼠气道杯状细胞GM-CSF免疫组化染色为阳性。转染hCLCA1细胞的GM-CSF表达与转录水平明显高于两个对照组;NFA能抑制转染细胞GM-CSF的表达和转录。结论 哮喘气道上皮杯状细胞能合成GM-CSF,特定CLCA表达升高是促进GM-CSF合成的机制之一。     

静脉注射T-bet重组腺病毒对小鼠过敏性气道炎症的抑制作用研究

目的 探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘小鼠过敏性气道炎症的作用.方法 48只C57BL/6小鼠随机均分为AdT-bet处理组(A组)、AdLacZ处理组(B组)、PBS处理组(C组)和正常对照组(D组),每组12只.A、B、C组采用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝建立哮喘模型,于第19天激发前分别静脉注射50μl AdT-bet(108pfu)、AdLacZ、PBS.第26天测定肺泡灌洗液(BALF)中的细胞组分和IL-4、IL-5、IFNγ浓度,测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3表达.结果 A组BALF中的嗜酸性细胞(EOS)、IL-4、IL-5分别为0.6%±0.2%、6.8±3.7pg/ml、12.5±4.8pg/ml,明显低于B组(分别为20.9%±6.8%、92.4±23.0pg/ml、56.5±11.8pg/ml)和C组(分别为20.8%±6.7%、90.4±22.8pg/ml、57.3±12.2pg/ml)(P＜0.01),而A组的IFNγ水平(720.0±50.0pg/ml)则明显高于B组(13.3±3.6pg/ml)和C组(12.3±5.0pg/ml).A组血浆中总IgE(38.8±9.5μg/ml)及OVA特异性IgE(19.2±4.8U/ml)水平显著低于B组(分别为66.9±10.2μg/ml、35.2±7.8U/ml)和C组(分别为68.6±9.6μg/ml、36.1±8.5U/ml)(P＜0.01).肺组织病理学观察提示B组和C组GATA-3表达明显增加,支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,而A组GATA-3的表达明显减少,炎症性反应明显减轻.结论 静脉应用AdT-bet可抑制哮喘鼠IL-4、IL-5的合成,增强IFNγ的表达,抑制EOS在气道内的炎性浸润及血浆中IgE水平,其机制可能与AdT-bet增强Th1型反应,抑制GATA-3表达,从而抑制Th2型免疫反应有关.     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡与活性的影响

目的：观察雷公藤甲素（ＴＰ）对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ０中嗜酸细胞（Ｅｏｓ）调亡及活性的影响,探讨ＴＰ治疗哮喘的机制。方法：以卵蛋白致敏激发制作豚姒哮喘模型,随机分为哮喘组、ＴＰ组,密度梯度分离法分离ＥＡＬＦ中的低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏｓ）及正常密度Ｅｏｓ数量均明显低于哮喘组（Ｐ〈０．０１）,以ＨＥｏｓ下降为明显（Ｐ〈０．０５）,ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ以ＮＥｏｓ ＥＧ２＾＋。结果：用ＴＰ ２４ｈ后     

肺表面活性蛋白A在皮质类固醇调节哮喘小鼠树突细胞共刺激分子表达中的作用

目的 研究皮质类固醇激素调节小鼠哮喘模型树突细胞表面共刺激分子表达的机制，以及肺表面活性蛋白A（SP-A）在其调节中的作用。方法 BALB/c小鼠30只，分为3组：哮喘组，采用卵蛋白（OVA）致敏和激发；对照组，以生理盐水代替OVA；治疗组，每次OVA激发后10min，腹腔注射地塞米松01mg。用免疫组化法检测SP-A在肺内的表达情况。采用Leica DM Snk软件进行图像采集，并用Qwin软件计算小气道内棕色区域面积，取平均值，进行统计分析。分离培养脾脏树突细胞，用流式细胞仪（FACS）检测树突细胞表面共刺激分子CD80的表达变化。结果 哮喘组肺组织表现为嗜酸性细胞及淋巴细胞浸润为主的炎症变化，治疗组和对照组无此变化。哮喘组的SP-A表达明显低于对照组和治疗组（P〈0．01），CD80的表达率明显高于治疗组（P〈0.01）；哮喘组小气道内SP-A表达与树突细胞CD80阳性率呈负相关（r=-0．907，P〈0．01）。结论 皮质类固醇对小鼠哮喘模型的肺表面活性蛋白有明显的保护作用，可通过激发肺表面活性蛋白抑制树突细胞表面共刺激分子CD80的表达。     

Creatine activates airway epithelium in asthma

Airway epithelium plays important roles in the pathophysiology of asthma. Creatine supplementation (Cr) was shown to increase asthma features in a murine model of allergic asthma; however, the role of the airway epithelium in this inflammatory response is not known. BALB/c mice were divided into control, creatine supplementation, ovalbumin-sensitized (OVA) and OVA plus creatine supplementation groups. OVA sensitization occurred on days 0, 14, 28 and 42, and ovalbumin challenge from days 21-53. Cr was also given on days 21-53. Total and differential cells counts in BALF were evaluated. Quantitative epithelial expression of interleukin (IL)-4, IL-5, IL-13, CCL11, CCL5, CCL2, iNOS, VCAM-1, ICAM-1, NF-κB, VEGF, TGF-β, IGF-1, EGFR, TIMP-1, TIMP-2, MMP-9, MMP-12 and arginase II were performed. Cr increased the number of total cells and eosinophils in BALF, the epithelial content of goblet cells and the epithelial expression of IL-5, CCL2, iNOS, ICAM-1, NF-κB, TGF-β, TIMP-1 and MMP-9 when compared to the control group (p<0.05). Creatine supplementation also exacerbated goblet cell proliferation, and IL-5 and iNOS expression by epithelial cells compared to the OVA group (p<0.01). Creatine up-regulates the pro-inflammatory cascade and remodelling process in this asthma model by modulating the expression of inflammatory mediators by epithelial cells.     

布地奈德联合孟鲁司特治疗小儿支气管哮喘的临床研究

目的研究布地奈德联合孟鲁司特治疗小儿支气管哮喘的有效性与安全性。方法入选128例支气管哮喘患儿,按照随机数字方法分成2组,每组64例,其中对照组给予布地奈德雾化吸入,而研究组给予布地奈德雾化吸入加孟鲁司特口服。治疗12 w后,观察与分析两组患儿的相关临床资料。结果在治疗后,研究组的PEF和FEV1均较对照组有显著改善（P〈0.05）;两组患儿在疗程中哮喘急性发作例数、支气管哮喘症状及体征消失天数均具有统计学差异（P〈0.05）;对照组的总有效率为71.88%,研究组为96.88%,二者具有统计学差异（P〈0.05）;对照组的不良反应总发生率为18.75%,研究组不良反应总发生率为20.31%,二者没有统计学差异（P〉0.05）。结论布地奈德雾化吸入联合孟鲁司特治疗小儿支气管哮喘疗效确切而迅速。     

不同雾化吸入方法在小儿支气管哮喘中的效果比较及护理

目的探讨不同雾化吸入方法在小儿支气管哮喘中的治疗效果,并观察其护理效果。方法选取2008年10月～2009年10月于我院进行治疗的81例小儿支气管哮喘患儿为研究对象,将其随机分为对照组（常规雾化吸入组）40例和观察组（氧驱动雾化给药组）41例,对所有患者行针对性的护理,给予患者个性化的护理模式,后将两组患者的治疗总有效率及心肺功能、副作用发生率等进行统计分析,并加以比较。结果经研究比较发现,观察组的治疗总有效率明显高于对照组,副作用发生率明显低于对照组,FVC、FEV1、VC、FEV1%、PEFR、PaO2、SaO2改善效果均优于对照组,经比较,P均〈0.05,均有显著性差异。结论在小儿支气管哮喘的治疗及护理中,采用氧驱动雾化给药的方式及针对性的护理模式效果较佳,值得推广应用。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与气道炎症关系

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺组织的表达及其与哮喘气道炎症的关系。方法实验分为3组,随机将30只BALB/c小鼠分为对照组（N）、哮喘组（A）、原矾酸钠干预组（S）,每组10只。哮喘组采用OVA腹腔注射致敏、长时间反复OVA雾化吸入复制慢性哮喘动物模型。对照组采用等量生理盐水腹腔注射,生理盐水雾化吸入。原矾酸钠组早期同哮喘模型组一样采用OVA腹腔注射及OVA雾化吸入,在动物处死前末周采用原矾酸钠溶液腹腔注射。末次激发后24h内处死动物,支气管肺泡灌洗液（BALF）作细胞计数测小鼠的白细胞总数及分类,免疫组化测IL-4R的表达,逆转录PCR测小鼠肺组织SHP-1mRNA的表达。结果细胞总数A组（7.35±0.589）×105/ml与N组（1.35±0.369）×105/ml比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（7.55±0.925）×105/ml与N组差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。IL-4RIODA组（149.221±11.154）与N组（92.676±16.414）比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（150.337±10.832）与N组差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。SHP-1mRNA含量积分光密度A组（0.0763±0.018）与N组（2.728±0.101）比较差异有统计学意义（P〈0.05）,S组（0.064±0.011）与N组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,A组与S组差异无统计学意义（P〉0.05）。各组肺组织中IL-4R与SHP-1mRNA均呈负相关,相关系数分别是A组r=-0.963,S组r=-0.909,N组r=-0.956。结论 SHP-1mRNA的表达与哮喘小鼠炎性细胞及IL-4R的表达呈负相关。     

卵白蛋白致敏时减毒活菌卡介苗干预对哮喘小鼠气道炎性反应的影响

 目的 探讨分别在卵白蛋白致敏时和致敏前以不同剂量接种卡介苗对哮喘小鼠气道炎性反应及黏液分泌的影响.方法 将C57BL/6小鼠随机分为模型组、阴性对照组、4组卡介苗接种组.105、106集落形成单位致敏前接种依次为A1组、A2组,致敏时接种依次为B1组、B2组.收集肺泡灌洗液和外周血,分别测定其中IL-5、IFN-γ浓度;病理观察肺组织炎性反应及气道黏液分泌情况,测算杯状细胞化生指数、上皮黏液储备指数.结果 卡介苗接种后,只有B1组、B2组能抑制化生指数(P＜0.05);B2组较A1组、A2组明显地降低了储备指数(P＜0.05),降低了肺泡灌洗液中IL-5/IFN-γ比值(P＜0.01).结论 致敏时接种卡介苗较致敏前接种能更有效抑制哮喘小鼠气道炎性反应、减少黏液分泌,并且存在一定量效关系,可能与纠正Th1/Th2失衡有关.     

哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞凋亡及活性变化

目的：研究哮喘时肺内不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡与活性的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法：健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液（BALF）中低密度Eos(HEos）及正常密度Eos(NEos),TNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学方法检测Eos EG2^ 。结果：哮喘组不同密度Eos均显著高于正常组,以HEos为著(P＜0.01);Eos凋亡率明显低于正常组（P＜0.01）。HEos、NEos细胞数与细胞凋亡率明显负相关,EG2^2检测显示,嗜喘组明显高于正常组,哮喘组HEos明显高于NEos。HEos、NEos凋亡与Eos EG2^ 明显负相关。结论：哮喘时Eos存在凋亡抑制,细胞活性增加,细胞凋亡受阻是哮喘Eos增多、活性增加的原因之一。