天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠海马CA1区分子层突触可塑性的影响超微结构定量研究

背景中枢神经的突触可塑性是行为依赖性学习记忆的核心基础,治疗阿尔茨海默病的天然中药是否通过增加突触可塑性来改善学习记忆尚罕见报道.目的观察天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及神经突触可塑性的影响.设计随机对照实验.单位深圳市中西医结合研究所.材料实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成.实验动物为昆明种小鼠.方法从21个月龄昆明种小鼠筛选出自发阿尔茨海默病(记忆障碍)鼠52只,随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号6.80 g/kg组、天泰1号20.41 g/kg组,另设13只老年学习记忆正常鼠为老年正常组.西药对照组给以甲磺酸二氢麦角碱0.6 mg/kg,天泰1号6.80 g/kg,20.41 g/kg组分别予天泰1号方6.80 g/kg及20.41 g/kg,以上均研配成0.5 mL液体灌胃给药,连续60 d,老年正常组和老年痴呆组均灌以等量双蒸水.用跳台实验检测学习记忆成绩;海马CA1区脑组织超薄切片,透射电镜观察,并全自动显微图像分析系统定量检测突触可塑性参数.主要观察指标①天泰1号不同剂量对自发阿尔茨海默病鼠学习记忆的影响.②突触电镜观察及体视学定量检测结果.结果实验过程中实验动物无脱失,均进入结果分析.①天泰1号不同剂量对自发阿尔茨海默病鼠学习记忆的影响天泰1号6.80 g/kg组,20.41 g/kg组的学习、记忆错误次数均小于老年痴呆组,且天泰1号20.41 g/kg组的学习、记忆错误次数小于天泰1号6.80 g/kg组;天泰1号6.80 g/kg组,20.41 g/kg组的学习训练逃避潜伏期小于老年痴呆组,记忆测试安全平台潜伏期大于老年痴呆组,且天泰1号20.41 g/kg组的记忆测试安全平台潜伏期大于天泰1号6.80 g/kg组.②突触电镜观察及体视学定量检测与老年正常鼠相比,老年痴呆鼠出现突触数明显减少,部分突触间隙模糊不清,突触连接间断,突触小泡大小不等等变性现象,其余各组也可见突触变性改变,但程度较模型组轻.天泰1号可明显增高其海马CA1区分子层突触的数密度和面密度,且天泰1号20.41 g/kg组所增高的幅度大于天泰1号6.80 g/kg组.结论天泰1号可明显改善自发阿尔茨海默病模型鼠的学习记忆障碍,这一作用可能与其促进突触再生,改善其大脑的突触可塑性有关,其作用呈现出一定的量效关系.     

天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响

背景：药物治疗早、中期阿尔茨海默病患者已证实有一定的疗效，可延缓其进展。 目的：观察天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响。 设计：随机对照实验。 单位：深圳市中西医结合研究所。 材料：实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成。实验动物为昆明种小鼠。 方法：从21个月龄昆明种小鼠筛选出自发阿尔茨海默病（记忆障碍）鼠52只，随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号6．80g/kg组、天泰1号20．41g／kg组，另设13只老年学习记忆正常鼠为老年正常组。西药对照组给以Hydergine 0．6mg/kg，天泰1号6．80g/kg，20．41g／kg组分别予正交优化的天泰1号方6．80g／kg及20．41g／kg，以上均研配成0．5mL液体灌胃给药，连续60d，老年正常组和老年痴呆组均灌以等量双蒸水。用跳台实验检测学习记忆成绩，比较各组的学习错误次数、记忆错误次数、学习训练逃避潜伏期和记忆测试安全平台潜伏期。 主要观察指标：天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用。 结果：实验过程中实验动物无脱失，均进入结果分析。天泰1号6．80g/kg组，20．41g/kg组的学习、记忆错误次数均小于老年痴呆组（5．08&;#177;2．18，3．77&;#177;1．48，931&;#177;3．65；1．85&;#177;1.221，1.54&;#177;0．88，4.27&;#177;9.58），且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆错误次数多于天泰1号20．41g/kg组；天泰1号6．80g/kg组，20．41g／kg组的学习训练逃避潜伏期小于老年痴呆组，记忆测试安全平台潜伏期大于老年痴呆组[（18．9&;#177;7．5），（19．9&;#177;5．9），（33．7&;#177;9．3）s；（91．7&;#177;32．0），（101．5&;#177;40．9），（43．6&;#177;20．7）s]，且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆测试安全平台潜伏期小于天泰1号20．41g/kg组。 结论：自发阿尔茨海默病模型小鼠有明显的智能行为障碍，天泰1号可显著改善其学习记忆障碍，其作用呈现一定的量效相美美系．     

天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠海马CA1区分子层突触可塑性的影响：超微结构定量研究

背景：中枢神经的突触可塑性是行为依赖性学习记忆的核心基础，治疗阿尔茨海默病的天然中药是否通过增加突触可塑性来改善学习记忆尚罕见报道。 目的：观察天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及神经突触可塑性的影响。 设计：随机对照实验。 单位：深圳市中西医结合研究所。 材料：实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成。实验动物为昆明种小鼠。 方法：从21个月龄昆明种小鼠筛选出自发阿尔茨海默病（记忆障碍）鼠52只，随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号6．80g/kg组、天泰1号20．41g／kg组，另设13只老年学习记忆正常鼠为老年正常组。西药对照组给以甲磺酸二氢麦角碱0．6mg／kg，天泰1号6．80g／kg，20．41g／kg组分别予天泰l号方6．80g／kg及20．41g／kg，以上均研配成0．5mL液体灌胃给药，连续60d，老年正常组和老年痴呆组均灌以等量双蒸水。用跳台实验检测学习记忆成绩；海马CA1区脑组织超薄切片，透射电镜观察，并全自动显微图像分析系统定量检测突触可塑性参数。 主要观察指标：①天泰1号不同剂量对自发阿尔茨海默病鼠学习记忆的影响。②突触电镜观察及体视学定量检测结果。 结果：实验过程中实验动物无脱失，均进入结果分析。①天泰1号不同剂量对自发阿尔茨海默病鼠学习记忆的影响：天泰1号6．80g／kg组，20．41g／kg组的学习、记忆错误次数均小于老年痴呆组，且天泰1号20．41g／kg组的学习、记忆错误次数小于天泰1号6．80g／kg组；天泰1号6．80g／kg组，20．41g／kg组的学习训练逃避潜伏期小于老年痴呆组，记忆测试安全平台潜伏期大于老年痴呆组，且天泰1号20．41g／kg组的记忆测试安全平台潜伏期大于天泰1号6．80g／kg组。（参突触电镜观察及体视学定量检测：与老年正常鼠相比，老年痴呆鼠出现突触数明显减少，部分突触间隙模糊不清，突触连接间断，突触小泡大小不等等变性现象，其余各组也可见突触变性改变，但程度较模型组轻。天泰1号可明显增高其海马CA1区分子层突触的数密度和面密度，且天泰1号20．41g／kg组所增高的幅度大于天泰1号6．80g／kg组。 结论：天泰1号可明显改善自发阿尔茨海默病模型鼠的学习记忆障碍，这一作用可能与其促进突触再生，改善其大脑的突触可塑性有关，其作用呈现出一定的量效关系。     

天泰1号对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响

背景:天泰1号由天麻、当归、槟榔等组成,具有补肝养髓和益智开窍的功能。目的:观察天泰1号对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及中枢胆碱能活性的影响。设计:随机对照观察。单位:深圳市中西医结合研究所。材料:选取昆明种雄性小鼠,13个月龄,饲养至21个月龄,筛选自发老年性痴呆鼠52只。随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组4组。同期选取13只筛选出的老年学习记忆正常鼠做正常对照组。方法:西药对照组给以Hydergine0.6mg/kg,天泰1号6.80g/kg组和20.41g/kg组分别予天泰1号6.80g/kg及20.41g/kg,连续60d,正常对照和空白对照组均灌以等量双蒸馏水。采用跳台实验检测学习记忆成绩鸦脑组织冰冻切片,Hedreen法示胆碱酯酶纤维,Burt及Silver法示胆碱乙酰转移酶,全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区胆碱酯酶纤维及胆碱乙酰转移酶活性。主要观察指标:①观察天泰1号对老年性痴呆大鼠学习记忆的影响。②观察颞叶皮质和海马CA1区的胆碱酯酶阳性纤维面密度。③观察基底前脑Meynert核区胆碱乙酰转移酶活性。结果:①天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用:天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组、正常对照组和西药对照组的错误次数显著低于空白对照组(5.08±2.18,3.77±1.48,3.25±1.27,6.17±3.12,9.31±3.65,P<0.05)。②胆碱酯酶阳性纤维面密度:在颞叶皮质区,天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组、正常对照组和西药对照组显著高于空白对照组(20.19±4.18,25.01±6.44,26.38±6.52,19.44±4.33,14.36±3.21,P<0.05)。在海马CA1区,天泰1号20.41g/kg组和正常对照组显著高于空白对照组、西药对照组和天泰1号6.80g/kg组(13.88±3.07,14.11±4.36,6.57±2.30,10.13±2.94,9.63±2.40,P<0.05)。③神经元胆碱乙酰转移酶活性:天泰1号20.41g/kg组、天泰1号6.80g/kg组、西药对照组和正常对照组显著高于空白对照组(0.683±0.179,0.589±0.179,0.552±0.173,0.705±0.141,0.354±0.131,P<0.05)。结论:天泰1号可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍,显著增强其中枢胆碱能系统活性,且呈现明显的量效关系。     

自发老年性痴呆模型相关脑区神经元型一氧化氮合酶的变化及天泰 1号的调节作用

背景神经元型一氧化氮( NO)与突触可塑性有关,为正常学习记忆的关键递质.神经元型一氧化氮合酶( nNOS)是神经元内 NO的生物合成酶.阿尔茨海默病( AD)患者大脑 nNOS活性特别是颞叶皮质和海马 CA1区 nNOS阳性神经纤维的变化尚少见报道. 目的观察自发老年性痴呆模型大脑 nNOS活性特别是颞叶皮质和海马 CA1区 nNOS阳性神经纤维的变化,并观察天泰 1号对其 nNOS活性的影响. 设计随机对照的实验研究. 单位深圳市中西医结合研究所. 材料实验在深圳市中西医结合研究所二级动物实验室完成.实验动物为 65只昆明种小鼠. 方法实验动物饲养至 21个月龄,按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选老年性痴呆小鼠;实验动物随机分为 4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰 1号小剂量组、天泰 1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组,下同),每组 13只.西药对照组给以 Hydergine 0.6 mg/kg,天泰 1号小、大剂量组分别予天泰 1号 6.80 g/kg及 20.41 g/kg,连续 60 d,老年正常和老年痴呆组均灌以等量双蒸水 ;用跳台实验( step down test)检测学习记忆成绩 ;脑组织冷冻切片, NBT 组织化学法示大脑 nNOS活性,全自动显微图像分析系统定量. 主要观察指标①天泰 1号不同剂量对自发老年性痴呆鼠学习记忆的影响.②大脑 nNOS活性的检测. 结果 老年痴呆鼠学习记忆能力显著降低( P< 0.01),其 nNOS阳性反应较正常老年鼠明显减弱,首次发现痴呆鼠颞叶皮质和海马 CA1区 nNOS阳性神经纤维面密度(分别为 9.48± 2.09, 5.11± 2.74)明显低于正常老年鼠(分别为 17.75± 3.47, 11.95± 2.00)( P< 0.01);同时,首次发现皮质、海马 nNOS活性与学习记忆成绩呈显著正相关.天泰 1号能显著增强老年痴呆鼠皮质及海马 nNOS阳性神经纤维的面密度,其中天泰 1号小剂量组的值分别为 11.57± 2.44, 8.18± 2.92;天泰 1号大剂量组的值分别为 12.59± 2.88, 9.33± 2.18 (P< 0.01～ 0.05). 结论老年痴呆鼠中枢 nNOS活性低下,大脑皮质和海马 nNOS阳性神经纤维显著减少;颞叶皮质和海马 CA1区 nNOS阳性神经纤维的面密度与学习记忆成绩显著相关; 天泰 1号可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍,增强其大脑皮质和海马 nNOS活性.     

天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠相关脑区超氧化物歧化酶和脂褐素的定量研究

背景阿尔茨海默病发病的自由基学说以及氧化损害与阿尔茨海默病发病的关系使抗氧化药物研究成为热点,天然中药中的抗氧自由基损伤作用是否可产生对阿尔茨海默病的干预效应?目的观察天然中药科研制剂天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及氧自由基代谢的影响.设计以实验动物为研究对象,完全随机分组设计的实验研究.单位一所市级中西医结合临床研究所.材料实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成.实验动物为昆明种小鼠,清洁级,雄性,13月龄,体质量40～50 g,购自中山医科大学实验动物中心(合格证号粤检证字第95A07号).干预实验动物饲养至21月龄,按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选阿尔茨海默病小鼠;实验动物随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号小剂量组、天泰1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组,下同).西药对照组给以甲磺酸双氢麦角毒碱片(Hydergine)0.6 mg/kg,天泰1号小、大剂量组分别予天泰1号6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,空白对照组和老年正常组均灌以等量双蒸水.主要观察指标用跳台实验检测学习记忆成绩;脑组织冰冻切片,免疫组织化学法示大脑皮质及海马超氧化物歧化酶活性;海马CA1区脑组织超薄切片,透射电镜法观察神经元细胞脂褐素;全自动显微图像分析系统定量检测超氧化物歧化酶及脂褐素.结果阿尔茨海默病鼠学习记忆能力显著降低(P＜0.01);天泰1号能显著改善自发阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆障碍(P＜0.05～0.01),并明显增强中枢大脑皮质和海马超氧化物歧化酶活性(P＜0.05～0.01),降低其神经元细胞脂褐素含量(P＜0.05～0.01),且其作用呈现出一定的量效关系.结论自发老年痴呆鼠学习记忆相关脑区神经元超氧化物歧化酶活性明显降低,脂褐素显著增多;天泰1号具有显著的抗氧自由基损伤的药效学作用,能显著提高阿尔茨海默病鼠皮质和海马神经元超氧化物歧化酶活性,并降低其脂褐素含量,改善其超微结构.     

天泰1号对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响

背景：天泰1号由天麻、当归、槟榔等组成，具有补肝养髓和益智开窍的功能。目的：观察天泰1号对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及中枢胆碱能活性的影响。设计：随机对照观察。单位：深圳市中西医结合研究所。材料：选取昆明种雄性小鼠，13个月龄，饲养至21个月龄，筛选自发老年性痴呆鼠52只。随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号6．80g／kg组、天泰1号20.41g/kg组4组：同期选取13只筛选出的老年学习记忆正常鼠做正常对照组。方法：西药对照组给以Hydergine 0．6mg／kg，天泰1号6．80g／kg组和20．41g/kg组分别予天泰1号6．80g/kg及20.41g／kg，连续60d，正常对照和空白对照组均灌以等量双蒸馏水。采用跳台实验检测学习记忆成绩；脑组织冰冻切片，Hedreen法示胆碱酯酶纤维，Burr及Silver法示胆碱乙酰转移酶，全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区胆碱酯酶纤维及胆碱乙酰转移酶活性。主要观察指标：①观察天泰1号对老年性痴呆大鼠学习记忆的影响。②观察颞叶皮质和海马CA1区的胆碱酯酶阳性纤维面密度。③观察基底前脑Meynert核区胆碱乙酰转移酶活性。结果：①天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用：天泰1号6．80g／kg组、天泰1号20．41g/kg组、正常对照组和西药对照组的错误次数显著低于空白对照组（5．08&;#177;2．18，3．77&;#177;1．48，3．25&;#177;1．27，6．17&;#177;3．12，9．31&;#177;3．65，P〈0．05）。②胆碱酯酶阳性纤维面密度：在颞叶皮质区，天泰1号6．80g／kg组、天泰1号20．41g/kg组、正常对照组和西药对照组显著高于空白对照组（20．19&;#177;4．18，25．01&;#177;6．44，26．38&;#177;6．52，19．44&;#177;4．33，14．36&;#177;3．21，P〈0．05）。在海马CA1区，天泰1号20．41g／kg组和正常对照组显著高于空白对照组、西药对照组和天泰1号6．80g／kg组（13．88&;#177;3．07，14．11&;#177;4．36，6．57&;#177;2．30，10．13&;#177;2．94，9．63&;#177;2．40，P〈0．05）。③神经元胆碱乙酰转移酶活性：天泰1号20．41g／kg组、天泰1号6．80g/kg组、西药对照组和正常对照组显著高于空白对照组（0．683&;#177;0．179，0．589&;#177;0．179，0．552&;#177;0．173．0．705&;#177;0．141，0．354&;#177;0．131．P〈0．05），结论：天泰1号可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍，显著增强其中枢胆碱能系统活性，且呈现明显的量效关系．     

自发老年性痴呆模型相关脑区神经元型一氧化氮合酶的变化及天泰1号的调节作用

背景：神经元型一氧化氮(NO)与突触可塑性有关，为正常学习记忆的关键递质。神经元型一氧化氮合酶(nNOS)是神经元内NO的生物合成酶。阿尔茨海默病(AD)患者大脑nNOS活性特别是颞叶皮质和海马CA1区nNOS阳性神经纤维的变化尚少见报道。目的：观察自发老年性痴呆模型大脑nNOS活性特别是颞叶皮质和海马CA1区nNOS阳性神经纤维的变化，并观察天泰1号对其nNOS活性的影响。设计：随机对照的实验研究。单位：深圳市中西医结合研究所。材料：实验在深圳市中西医结合研究所二级动物实验室完成。实验动物为65只昆明种小鼠。方法：实验动物饲养至21个月龄，按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选老年性痴呆小鼠；实验动物随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号小剂量组、天泰1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组，下同)，每组13只。西药对照组给以Hydergine 0.6mg／kg，天泰1号小、大剂量组分别予天泰1号6．80g／kg及20．41g／kg，连续60d，老年正常和老年痴呆组均灌以等量双蒸水；用跳台实验(step-down test)检测学习记忆成绩；脑组织冷冻切片，NBT组织化学法示大脑nNOS活性，全自动显微图像分析系统定量。主要观察指标：①天泰1号不同剂量对自发老年性痴呆鼠学习记忆的影响。②大脑nNOS活性的检测。结果：老年痴呆鼠学习记忆能力显著降低(P&;lt;0．01)，其nNOS阳性反应较正常老年鼠明显减弱，首次发现痴呆鼠颞叶皮质和海马CA1区nNOS阳性神经纤维面密度(分别为9.48&;#177;2.09，5．11&;#177;2．74)明显低于正常老年鼠(分别为17.75&;#177;3．47，11．95&;#177;2．00)(P&;lt;0．01)；同时，首次发现皮质、海马nNOS活性与学习记忆成绩呈显著正相关。天泰1号能显著增强老年痴呆鼠皮质及海马nNOS阳性神经纤维的面密度，其中天泰1号小剂量组的值分别为11．57&;#177;2．44，8．18&;#177;2.92；天泰1号大剂量组的值分别为12．59&;#177;2．88，9．33&;#177;2．18（P&;lt;0．01～0．05)。结论：老年痴呆鼠中枢nNOS活性低下，大脑皮质和海马nNOS阳性神经纤维显著减少；颞叶皮质和海马CA1区nNOS阳性神经纤维的面密度与学习记忆成绩显著相关；天泰1号可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍，增强其大脑皮质和海马nNOS活性。     

天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠相关脑区超氧化物歧化酶和脂褐素的定量研究

背景：阿尔茨海默病发病的自由基学说以及氧化损害与阿尔茨海默病发病的关系使抗氧化药物研究成为热点，天然中药中的抗氧自由基损伤作用是否可产生对阿尔茨海默病的干预效应?目的：观察天然中药科研制剂天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及氧自由基代谢的影响。设计：以实验动物为研究对象，完全随机分组设计的实验研究。单位：一所市级中西医结合临床研究所。材料：实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成。实验动物为昆明种小鼠，清洁级，雄性，13月龄，体质量40～50g，购自中山医科大学实验动物中心(合格证号：粤检证字第95A07号)。干预：实验动物饲养至21月龄，按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选阿尔茨海默病小鼠；实验动物随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号小剂量组、天泰1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组，下同)。西药对照组给以甲磺酸双氢麦角毒碱片(Hydergine)0．6mg／kg，天泰1号小、大剂量组分别予天泰1号6．80g／kg及20．41g／kg，连续60d，空白对照组和老年正常组均灌以等量双蒸水。主要观察指标：用跳台实验检测学习记忆成绩；脑组织冰冻切片，免疫组织化学法示大脑皮质及海马超氧化物歧化酶活性；海马CA1区脑组织超薄切片，透射电镜法观察神经元细胞脂褐素；全自动显微图像分析系统定量检测超氧化物歧化酶及脂褐素。结果：阿尔茨海默病鼠学习记忆能力显著降低(P&;lt;0．01)；天泰1号能显著改善自发阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆障碍(P&;lt;0．05～0．01)，并明显增强中枢大脑皮质和海马超氧化物歧化酶活性(P&;lt;0．05～0．01)，降低其神经元细胞脂褐素含量(P&;lt;0．05～0．01)，且其作用呈现出一定的量效关系。结论：自发老年痴呆鼠学习记忆相关脑区神经元超氧化物歧化酶活性明显降低，脂褐素显著增多；天泰1号具有显著的抗氧自由基损伤的药效学作用，能显著提高阿尔茨海默病鼠皮质和海马神经元超氧化物歧化酶活性，并降低其脂褐素含量，改善其超微结构。     

补肝养髓方对自发老年性痴呆模型神经信使分子一氧化氮代谢的影响

目的:观察补肝养髓方对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及神经信使分子一氧化氮代谢的影响。方法:从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆(记忆障碍)鼠,随机分为4组即空白对照组、hydergine对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称正常对照组,下同)。hyderglne对照组给以Hydergine0.6mg/kg,补肝养髓小、大剂量组分别予补肝养髓方天泰1号6.80g/kg及20.41g/kg,连续60d,正常对照和痴呆对照组均灌以等量DW;用跳台实验(step-downtest)检测学习记忆成绩;脑组织冷冻切片,NBT组织化学法示大脑神经元型一氧化氮合酶(NOS1)活性,全自动显微图像象分析系统定量。结果:天泰1号能显著改善自发老年性痴呆模型小鼠的学习记忆障碍(P<0.05～0.01),并明显增强中枢大脑皮质和海马NOS1活性及其纤维密度(P<0.05～0.01),其作用呈现出一定的量效关系。此外,研究还发现颞叶皮质、海马NOS1活性与学习记忆成绩呈显著性正相关(相关系数为0.877,0.965,P<0.01)。结论:中枢NOS1活性与学习记忆成绩显著相关;补肝养髓方可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍。     

酸性肽对阿尔茨海默病鼠学习记忆能力的影响

背景:酸性肽是由3个谷氨酸连接而成的三肽,不可能像单个谷氨酸一样直接作为兴奋性神经递质而由突触前释放并与突触后的NMDA受体结合而发挥兴奋性神经信号传递作用,但通过与多种代谢性谷氨酸受体结合而促进神经细胞增殖或释放神经生长因子而发挥作用具有很大的可能性。目的:探讨酸性肽是否能够引起阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的变化。设计:随机对照单一实验。单位:郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2003-02/07在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室的第二研究室和实验动物房完成。选取雄性SD大鼠100只,用跳台实验除去反应迟钝的动物,共84只大鼠纳入实验,随机分为7组:正常对照组,模型组,生理盐水组,吡拉西坦治疗组,酸性肽60,30,15mg/kg治疗组,12只/组。酸性肽为本课题组从牛脑中分离出的一个新的小分子肽,由三个谷氨酸连成的三肽。方法:除正常对照组外,其余各组大鼠常规饲养1周后,均采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术,脑海马注射5μg鹅膏蕈氨酸,以损毁大鼠双侧迈纳特基底核建立阿尔茨海默病模型。正常对照组和模型组不给药,生理盐水组用生理盐水灌胃,吡拉西坦治疗组用0.3g/kg吡拉西坦灌胃,酸性肽60,30,15mg/kg治疗组分别用60,30,15mg/kg酸性肽灌胃,连续20d,1次/d,2mL/次。灌胃期满后通过跳台实验测定各组大鼠的学习和记忆能力。将动物放在跳台装置的安全台上,适应环境3min,然后通以36v电流,受到电击后动物跳至铜栅为错误反应,跳回安全区为正确反应,记录3min内的上台潜伏期与正确反应次数。主要观测指标:各组大鼠学习与记忆能力的比较。结果:纳入实验的84只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠学习能力的比较:与模型组比较,酸性肽15,30,60mg/kg治疗组的上台潜伏期均明显缩短[(102.03±5.33),(71.77±4.38),(68.28±9.53),(69.13±8.79)s,P<0.01];正确反应次数均明显提高[(12.92±2.91),(16.17土2.79),(15.83±3.27),(16.33±2.53)次,P<0.01]。②各组大鼠记忆能力的比较:与模型组比较,酸性肽15,30,60mg/kg治疗组的上台潜伏期均明显缩短[(43.17±4.66),(29.78土4.48),(26.20±3.28),(22.09±4.43)s,P<0.01];正确反应次数均明显提高[(15.67±2.15),(20.92土2.68),(20.83±2.29),(20.25±2.05)次,P<0.01]。结论:酸性肽能够明显缩短阿尔茨海默病鼠在跳台实验中的上台潜伏期,提高正确反应次数,表明酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力具有良好的干预作用。     

脑栓康对D-半乳糖诱导小鼠脑功能衰退的保护作用

目的探讨脑栓康(NSK)对D-半乳糖诱导小鼠脑功能衰退的保护作用. 方法 ICR小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、银杏叶提取物(天保宁片)40 mg/kg组、NSK 25 mg/kg组、NSK 50 mg/kg组、 NSK 100 mg/kg组.小鼠每日颈背部皮下注射D-半乳糖 120 mg/kg,采用水迷宫试验,测试小鼠的学习记忆能力,并通过测定模型小鼠的学习记忆能力和脑组织超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)和脂褐素含量,观察 NSK对模型小鼠脑功能衰退的保护作用. 结果 NSK 25,50,100 mg/kg可不同程度地改善模型小鼠的学习能力 [3组小鼠平均到达 B点时间为( 43±18) ,(54±29),(59±61)s;而模型对照组到达 B点时间为(63±26) s,t=2.525～2.731,P< 0.05]和记忆能力 [NSK-25 mg/kg组和模型对照组小鼠平均到达 B点时间为(25±26),(50±35) s, t=2.254,P< 0.05]. 3个剂量均可以增强模型小鼠脑组织 SOD, GSH Px活力,降低 MDA和脂褐素含量( t=-2.675～2.712,P< 0.05, t=-8.806～ 15.989,P< 0.01). 结论抑制脑组织脂质过氧化反应,提高脑组织的抗氧化能力,可能是 NSK改善行为学异常,防治老年期痴呆的作用机制之一.     

补肾益气和活血祛瘀中药治疗血管性痴呆的实验研究

背景血管性痴呆( vascular dementia,VD)是老年期痴呆中常见的一种.补肾益气法、活血祛瘀法是治疗 VD的常用中医治疗方法.而对这两种方法的比较研究尚少. 目的比较补肾益气方、活血祛瘀方对血管性痴呆大鼠的治疗作用,并探讨中药治疗血管性痴呆大鼠的机制. 设计完全随机设计,对照实验研究. 地点与材料地点为浙江省中医院脑病研究室.材料为清洁级健康成年雄性 SD大鼠 75只,鼠龄 18～ 20月,体质量 (400± 30) g.由浙江省中医学院实验动物中心提供并饲养. 方法采用双侧颈总动脉永久性结扎造成血管性痴呆大鼠模型,并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力,海马 CA1区锥体细胞的形态及数量的影响. 结果①补肾益气组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.24± 0.17) s,造模用药后 59 d( 2.73± 0.34) s, 造模用药后 60 d( 2.35± 0.28) s.活血祛瘀组大鼠跳台测试成绩,造模前( 2.41± 0.57) s, 造模用药后 59 d( 2.62± 0.41) s, 造模用药后 60 d( 2.34± 0.44) s.补肾益气方,活血祛瘀方可明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力.②补肾益气方,活血祛瘀方有减轻缺血对海马 CA1区锥体细胞损伤的作用. 结论①中药补肾益气方、活血祛瘀方为治疗血管性痴呆大鼠的有效方,但活血祛瘀方的治疗作用更好.②活血祛瘀方治疗血管性痴呆大鼠的机制可能与减轻缺血对海马 CA1区椎体细胞的损伤有关.     

酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体、神经生长因子和β淀粉样蛋白水平的调节作用

背景:一些研究已经证实酸性肽对痴呆模型大鼠有良好的治疗作用,但其发挥作用的途径尚需探讨。目的:观察酸性肽能否抑制阿尔茨海默病大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白的产生以及促进神经生长因子的产生和分泌。设计:随机对照动物实验。单位:郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2005-03/2006-05在郑州大学生物活性肽研究所第一实验室和郑州大学基础医学院细胞培养中心完成。选取10周龄的健康且经Y-迷宫测定无痴呆症状的雄性SD大鼠70只,单纯随机分为7组,正常对照组、模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组、酸性肽15,30,60mg/kg组,每组10只。方法:正常对照组不干预,其他6组用鹅膏蕈氨酸损毁大鼠双侧迈内特基底核,建立阿尔茨海默病病的动物模型,造模后谷氨酸0.3g/kg组灌胃谷氨酸0.3g/kg,酸性肽15,30,60mg/kg组灌胃相应剂量酸性肽(自制),生理盐水组灌胃等量生理盐水,1次/d,2mL/次,连续20d。主要观察指标:①灌胃期满后各组大鼠即做Y-迷宫实验以检测大鼠的学习记忆能力,以正确反应次数为指标。②学习记忆测试结束后,各组大鼠断头取脑,免疫组化染色,再用BiosensDigitalImagingSystem灰度扫描仪扫描以检测大鼠脑内神经生长因子、N-甲基-D-天冬氨酸受体、淀粉样β蛋白的水平。结果:70只大鼠全部进入结果分析。①Y-迷宫实验中正确反应次数:其他6组均低于正常组(P<0.01);酸性肽30,60mg/kg组高于模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组(P<0.01)。②基底前脑神经生长因子灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组低于正常对照组(69.60±2.41,69.62±1.46,69.62±1.46,69.73±1.87,80.77±2.72,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(79.39±2.23,80.20±1.7,P>0.05),但高于其他几组。③大脑皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白表达的灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组高于正常对照组(N-甲基-D-天冬氨酸受体:81.01±1.38,81.31±2.06,81.37±1.39,79.38±1.23,69.50±1.04;淀粉样β蛋白:74.26±1.39,74.89±8.66,74.88±1.46,74.16±2.48,67.40±3.06,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(N-甲基-D-天冬氨酸受体:70.55±2.89,69.78±1.24;淀粉样β蛋白:67.66±2.25,67.58±2.21,P>0.05),但低于其他几组。结论:30,60mg/kg的酸性肽能明显改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,其治疗作用途径可能是通过上调基底前脑中的神经生长因子水平,下调大脑皮质中N-甲基-D-天冬氨酸受体和β淀粉样蛋白的水平实现的。     

纳洛酮对三氯化铝致急性衰老小鼠记忆障碍的保护作用及其机制

背景老年性痴呆患者脑细胞中铝的含量普遍增高.大脑铝中毒与老年性痴呆有一定内在联系.纳洛酮是阿片受体特异性拮抗剂,国外有用于老年性痴呆治疗的报道.目的探讨纳洛酮对三氯化铝所致急性衰老小鼠记忆障碍的保护作用及其机制.设计随机对照观察.单位吉林医药学院.材料实验于2001-02/2003-02在吉林医药学院(原吉林军医学院)药理学实验室完成,选择健康成年昆明种小鼠100只,随机分为5组,每组20只,即对照组,模型组,纳洛酮0.1,0.3,0.9mg/kg组,除对照组外,每组小鼠每天皮下注射1次氯化铝70 mg/kg,连续注射7 d;纳洛酮组每只鼠除皮下注射氯化铝外,腹腔分别注射纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg,/kg,对照组皮下注射等量的生理盐水.方法用跳台、避暗等实验方法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠肝丙二醛、脑B型单胺氧化酶的含量.主要观察指标①三氯化铝所致衰老模型跳台实验结果.②三氯化铝所致急性衰老模型避暗法实验结果.③各组丙二醛和B型单胺氧化酶的比较.结果①三氯化铝所致衰老模型跳台实验结果与模型组相比较,对照组及纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg/kg剂量组能够明显减少三氯化铝小鼠5 min内受电击次数和受电击的动物数,24 h重复实验,纳洛酮能够明显延长小鼠第1次跳下平台潜伏期(P＜0.01),同时,纳洛酮能够降低三氯化铝小鼠3 min内错误总数和错误频率(P＜0.01).②三氯化铝所致急性衰老模型避暗法实验结果与模型组相比,对照组及纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg/kg剂量组能够明显延长三氯化铝小鼠进入暗箱的潜伏期及小鼠5 min内受电击次数(P＜0.01).③各组丙二醛和B型单胺氧化酶的比较模型组丙二醛明显高于对照组和纳洛酮各剂量组(P＜0.01).模型组B型单胺氧化酶活性明显高于其他各组(P＜0.01).结论纳洛酮对三氯化铝所致急性衰老小鼠记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力.其作用机制可能和降低B型单胺氧化酶、清除过氧化脂质作用有关.     

祁州漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响

背景脂质过氧化损害可导致学习记忆障碍,而漏芦能抑制脂质过氧化,具有提高细胞免疫功能、抗自由基过氧化等作用.目的通过脑组织中过氧化脂质及脂褐质含量的变化,探讨漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响.设计随机对照实验.单位沈阳药科大学药学院药理教研室,中国医科大学第一临床学院中医教研室,沈阳药科大学中药学院天然药化教研室.材料实验于1994-02/10在沈阳药科大学药学院药理教研室完成.选取清洁级昆明种小鼠185只,随机分成7组漏芦乙醇提取物3.125g/(kg·d)组30只、漏芦乙醇提取物1.56 g/(kg·d)组30只、漏芦乙醇提取物0.78 g/(kg·d)组30只、漏芦乙醇提取物0.39g/(kg·d)组15只、吡拉西坦组15只、空白对照组30只、模型组35只.方法漏芦乙醇提取物3.125,1.56,0.78,0.39g/(kg·d)组分别灌服漏芦乙醇提取物3.125,1.56,0.78,0.39 g/(kg·d),吡拉西坦组灌服吡拉西坦0.2g/(kg·d),空白对照组和模型组分别灌服同容积蒸馏水.除空白对照组外,其余各组小鼠每天均皮下注射50 g/L D-半乳糖0.5 mL/只,连续40 d,建立小鼠衰老模型.40 d后,采用跳台法及避暗法测定各组小鼠的学习记忆能力.主要观察指标①各组小鼠在跳台法检测中的错误次数.②各组小鼠在避暗法检测中的错误次数及潜伏期的变化.③各组小鼠脑组织过氧化脂质及脂褐质含量生成的比较.结果实验纳入小鼠185只,共169只进入结果分析.①各组小鼠在跳台法检测中的错误次数与模型组比较,漏芦乙醇提取物3.125,1.56,0.78 g/(kg·d)组均明显减少[(1.68±1.25),(0.92±0.73),(0.78±0.79),(0.97±0.67)次,P＜0.01,P＜0.001,P＜0.01].②各组小鼠在避暗法检测中的错误次数及潜伏期的变化与模型组比较,漏芦乙醇提取物3.125,1.56,0.78g/(kg·d)组均明显减少(P＜0.05或0.01);且潜伏期均有所延长(P＜0.05或0.01).③各组小鼠脑组织过氧化脂质及脂褐质含量生成的比较与模型组比较,漏芦乙醇提取物3.125,1.56,0.78 g/(kg·d)组均明显减少(P＜0.05或0.01).结论漏芦乙醇提取物具有抗衰益智作用,其抗自由基过氧化、减少脑组织中过氧化脂质及脂褐质生成可能与其改善记忆障碍作用有关.