化学发光检测方法学在丙型肝炎病毒的临床诊断价值

目的探讨化学发光发在丙型肝炎病毒(HCV)检测中的临床诊断应用价值。方法采用化学发光法(HCV-CLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法、胶体金法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法,分别对50例疑似丙型肝炎病毒感染的血液标本进行检测,并对结果进行统计分析。结果 HCV-CLIA检测阳性为46例,阳性率为92%。ELISA法阳性37例,阳性率为74%。胶体金法阳性32例,阳性率为64%。FQ-PCR法42例,阳性率为84%。其中FQ-PCR法和ELISA法、胶体金法比较符合率分别为88.09%和76.19%,HCV-CLIA法和FQ-PCR法比较符合率为91.30%。当化学发光发的S/CO值低于2.00时,HCV-CLIA法和FQ-PCR法比较符合率为33.33%。结论在丙型肝炎病毒(HCV)实验室的检测方法学中,CLIA法检出灵敏性和特异性显著高于ELISA法、胶体金法,有统计学意义。当CLIA法S/CO低于2.00时,假阳性率显著增高,有统计学意义。在感染早期使用CLIA法做临床筛查HCV病毒时,建议结合临床表现和作进一步FQ-PCR法确诊。     

血清HCV RNA载量、HCV抗体及ALT相关性研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者血液中HCV RNA载量、HCV抗体及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相互关系。方法经ELISA法检测的HCV抗体阳性血样,采用胶体金法检测HCV抗体,同时用荧光RT-PCR检测血清HCV RNA载量,用全自动生化仪定量检测ALT。结果 255份ELISA检测为HCV抗体阳性样本中,154份胶体金法阳性,139份HCV RNA阳性,59份ALT结果异常。HCV抗体高值组(S/CO值≥10)中HCV RNA阳性率为85.49%,胶体金阳性率为96.95%,ALT异常率35.88%,均显著高于S/CO低值组(1S/CO5)和S/CO中值组(5≤S/CO10)。胶体金阳性样本,HCV RNA阳性率(74.03%)显著高于胶体金阴性样本的HCV RNA阳性率(24.75%),二者差异有统计学意义(P0.05)。胶体金阳性样本的ALT异常率(32.47%)显著高于胶体金阴性样本的ALT异常率(8.91%),二者差异有统计学意义(P0.05)。HCV RNA阳性者的ALT异常率(35.50%)显著高于HCV RNA阴性者的ALT异常率(8.57%),二者差异有统计学意义(P0.05)。ALT异常率随着HCV RNA载量的增高而升高,有一定相关性(r=0.975,P=0.001),而ALT变化与HCV RNA载量无相关性(r=-0.26,P=0.63)。结论对人群HCV感染的筛查,可在ELISA法检测HCV抗体基础上,对S/CO高值人群进行HCV RNA的检测,提高检出率的同时最大程度地降低成本。     

利用CLIA法筛查重庆口岸出入境人员梅毒抗体

目的 探讨应用全自动化学发光免疫分析仪检测出入境人员梅毒抗体，确定化学发光法（CLIA）检测的最佳S/CO临界值。方法 选取2018年8月—2022年1月的142份经CLIA法初筛梅毒抗体阳性（S/CO≥1）的样本，用CLIA法复检，两次检验结果一致的标本再用TPPA确认，绘制ROC曲线获取最佳临界值。结果 CLIA复检阳性标本140份，TPPA检测阳性100份，两种方法阳性符合率为71.43%。根据ROC曲线，得到CLIA法检测出入境人员梅毒抗体S/CO最佳临界值为2.685，此时CLIA法和TPPA检测的符合率为95.6%。结论 基于CLIA法获得出入境人员梅毒抗体的S/CO最佳临界值，可指导实验室减少TPPA法的确诊试验，为提高检测时效提供参考。     

探讨两种全自动化学发光免疫分析仪检测方法在梅毒检测中的应用价值

目的:探讨i2000和Centaur XP两种全自动化学发光免疫分析仪在梅毒检测中的应用价值。方法:选取在医院体检、门诊和住院行梅毒血清学筛查的120例患者的120份血清标本,分别使用i2000型全自动化学发光免疫分析仪化学发光微粒子免疫试验(CMIA)和Centaur XP型全自动化学发光免疫分析仪化学发光免疫试验(CLIA),对梅毒螺旋体(TP)抗体进行血清学检测。以样本吸光度与临界值的比值(S/CO)≥1.0为阳性,并与以TP明胶凝集试验(TPPA)梅毒特异性抗体确认方法平行测定的S/CO结果进行比较。结果:在120例受检者中,CMIA检测阳性结果94例,阳性率为78.33%;CLIA检测阳性结果72例,阳性率为60.00%;TPPA检测阳性结果74例,阳性率为61.67%。以TPPA试验作为确认方法,CMIA检测的灵敏度和特异度分别为97.30%和52.17%,CLIA分别为94.59%和95.65%。CMIA与TPPA检测的阳性率、符合率比较差异均有统计学意义(χ²=14.101,χ²=7.937;P<0.05)。两种全自动免疫化学发光分析法与TPPA检测的阳性符合率均呈正相关。结论:两种全自动化学发光免疫分析检测方法在梅毒S/CO值>10.00时均具有较高的灵敏度和特异度;当CMIA的S/CO值为1.00~10.00时可选用CLIA复核,缩短标本周转时间;当CLIA的S/CO值<4.70时可附加TPPA复核,以保证检测结果的准确性。     

化学发光免疫分析法与酶联免疫法检测艾滋病抗体的对照研究

目的对照研究化学发光免疫分析法(CLIA)与酶联免疫法(ELISA)检测艾滋病(HIV)抗体的效果,以便探究CLIA检测HIV抗体的可行性。方法于2013年2月至2015年3月随机抽查我市3 542例艾滋病高危人员,采集血清,分别采用CLIA与ELISA法检测血清中的HIV抗体,并采用蛋白印迹检测法对检测结果进行确证。结果 ELISA法检测显示血清标本为阳性的56份,阳性率为1.58%,而CLIA检测阳性61份,阳性率为1.72%;3 542份血清标本中,11份标本ELISA法与CLIA法检测结果不一致;CLIA法的阳性预测值为96.72%,检测灵敏度为98.33%,特异度为99.94%;ELISA法的阳性预测值为96.43%,检测灵敏度为90.00%,特异度为99.94%;ELISA法与CLIA法在阳性预测值、检测灵敏度、特异度等指标上无显著的差异性(P>0.05)。结论 CLIA的灵敏度、特异度、准确性高,可用于HIV抗体检测。     

梅毒螺旋体抗体检测ELISA法与TPPA法相关性研究

目的:探讨酶联免疫法检测梅毒螺旋体抗体(TP-ELISA)的S/CO值与梅毒螺旋体抗体明胶颗粒试验(TPPA)检测阳性率的关联性,为临床诊断梅毒病例提供及时、准确的实验依据。方法:应用TP-ELISA法和TPPA法分别对445份血清标本进行梅毒螺旋体抗体检测获取相对应的S/CO值和抗体效价值。结果:405份TP-ELISA法S/CO值≥1的标本,经TPPA法检测确认阳性374份,阳性符合率92.35%,40份TP-ELISA法S/CO值1的标本,TPPA法检测均阴性,阴性符合率100%,301份TPELISA法S/CO值≥6.0的标本TPPA法检测结果均阳性。结论:TPPA法的阳性率随TP-ELISA法S/CO值的升高呈明显上升趋势,当TP-ELISA法S/CO值≥6.0时,两方法的检测阳性符合率达到100%,TP-ELISA法S/CO值与TPPA法抗体效价呈正相关,检测过程中可根据TP-ELISA法的S/CO值高低来预测TPPA确认试验结果和梅毒螺旋体抗体效价水平,为诊断和治疗提供依据。     

化学发光法检测梅毒抗体在献血者血液筛查中的应用

目的探讨化学发光免疫分析(CLIA)法检测梅毒抗体在献血者血液筛查中的应用价值。方法用CLIA法对献血者标本、ELISA法筛查阳性标本进行检测,分析检测结果,并与ELISA、TPPA方法进行比较。结果 3 405份献血者标本CLIA检出阳性9份,与ELISA比较差异无统计学意义。103份ELISA筛查阳性标本经CLIA检出阳性75份。所有筛查阳性标本经TPPA确认阳性67份,CLIA法S/CO比值高低与TPPA确认阳性、梅毒抗体效价密切相关。结论 CLIA检测梅毒抗体,在献血者血液筛查的应用中,具有检测敏感性高、检测线性范围宽、重复性好、易自动化等优点,是梅毒血清学试验中较理想的一种方法,值得在采供血系统中推广。     

微粒子化学发光免疫分析检测乙肝核心抗体阳性结果的意义

目的某院将HBV血清标志物检测方法由ELISA法更换为微粒子化学发光免疫分析(ARCHITECT-i4000)检测后,依据ARCHITECT i系统给定的参考值判定结果,发现临床乙肝核心抗原(HBc Ab)阳性率显著增高。本研究旨在探讨ARCHITECT-i4000检测HBc Ab阳性结果的意义。方法先将所有血清标本用ARCHITECT-i4000检测,再将其中HBs Ag为阴性且HBc Ab为阳性标本的血清(30倍稀释或不稀释)用ELISA法检测。结果用原倍血清(作为流行病学调查依据),ELISA法与RCHITECT-i4000法检测HBc Ab的阳性符合率为100.00%;ELISA法采用生理盐水30倍稀释的标本(作为临床诊断依据)检测,阳性符合率仅为43.97%。ELISA检测为阳性标本的ARCHITECT-i4000检测值(S/CO,9.25±1.23)明显高于阴性标本(S/CO,4.88±2.35),P0.001。将ARCHITECT-i4000检测值在1.0~8.10 S/CO之间判为阴性,HBs Ab+HBc Ab+模式中HBc Ab的阳性符合率仅有18.8%,而"大三阳"和"小三阳"的阳性符合率可高达95.5%。结论 ARCHITECT-i4000用原倍血清检测HBc Ab,其检测的阳性结果 S/CO值在1.0~8.10可能更具有流行病学调查的意义。     

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附试剂检测结果可信度的分析

[目的]分析丙型肝炎病毒（HCV）抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断试剂的可信度。（方法）本研究对应用2种国产ELISA试剂从大连口岸出入境人员中检出的HCV阳性标本采用免疫印迹试验（RIBA）进行确证,并对检测结果进行综合分析。[结果]138份标本中万泰（WT）、丽珠（LZ）2种ELISA试剂检测均为阳性的120份,进行RIBA确证阳性115份,阳性率95．8％;仅WT阳性的10份标本,RIBA确证阳性4份,阳性率40．0％;仅LZ阳性的8份标本,RIBA确证阳性3份,阳性率37．5％。对ELISA检测真阳性和假阳性标本的S／CO值进行统计学处理,发现差异有显著性（P〈0．05）。对16份假阳性标本进行RIBA条带分析,其中Core条带有10条,占62．5％;NS3-1条带有3条,占18.8％;NS3—2条带有2条,占12．5％;NS4条带有1条,占6.3％;没有出现NS5条带。[结论]本研究的结果与美国疾病预防与控制中心（CDC）在对美国公司所生产的抗HCV试剂可信度评价的基础上规定：当S／CO值在3．8以下时,样品需进行确证方可确定其阴、阳性的要求相一致。当HCV的ELISA检测结果S／CO值较低或1种ELISA试剂检测结果为阴性时应进行RIBA确证试验。     

144例HIV抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果对比研究

目的对比分析(ELISA方法检测)H IV抗体试验阳性与免疫印迹试验(WB)结果,探求H IV抗体筛查阳性与确证实验结果的关系。方法对144份ELISA方法检测阳性样本的结果与WB法确证结果进行比较,分析ELISA检测S/CO值变化与WB结果的关系。结果 144例H IV抗体筛查阳性标本经免疫印迹确证试验,阳性的有86例,均为H IV-1抗体阳性,阴性34例,结果不确定的24例。ELISA与WB的阳性符合率为59.7%。确认为阳性标本的S/CO平均值为15.7;不确定的标本S/CO值平均为3.04;阴性的标本S/CO值平均为1.24。在阳性标本中,p55条带出现的频率最低为48.8%,其它均达到85%以上,其中gp160、gp120达到100%;不确定标本中,p24条带出现的几率最高,达75%,其它都在20%以下。结论筛查试验存在假阳性结果,H IV抗体结果的报告必须以确认结果为准。高S/CO值预示H IV抗体阳性的可能性较大,而S/CO值较低时H IV抗体阴性及不确定的可能性较大。WB确认方法在不确定标本检测中存在一定的缺陷。     

2472例HIV抗体筛查(ELISA)与免疫印迹试验的对比研究

目的 对比分析HIV抗体筛查(ELIA)与免疫印迹试验结果,探讨两种方法检测HIV抗体的差异性.方法 参照2004年<全国艾滋病检测技术规范>的要求,对HIV抗体初筛检测呈阳性反应的标本采用免疫印迹试验进行确证.结果 2472例HIV抗体复核标本中,两种ELISA都呈阳性反应的为2467例,与WB的阳性符合率为97.97%;ELISA1呈阳性反应且ELISA2呈阴性反应的为5例,与WB的阳性符合率为0%;S/CO值落在了1～5.9之间,阳性符合率为43.48%;S/CO值在6～9.9之间,确证试验阳性符合率为95.56%;S/CO值≥10,确证试验阳性符合率为99.64%;所有的确证标本中,gp160、gp120、sp41、p24的出现都在95%以上,同时也出现了36例gp36的标本.结论 ELISA诊断试剂存在有一定的假阳性,随着S/CO值的增高,与确证试验的阳性符合率也将升高,但是高S/CO值的样品并不代表感染HIV,HIV抗体阳性的报告建议以确证试验的结果为准;WB确证方法在不确定标本中存在一定的缺陷.     

丙型病毒性肝炎患者血清检测结果分析

目的 探讨丙型肝炎病毒最合适的实验室检测方法,提高丙肝筛查的准确性.方法 对94 例确诊的丙型病毒性肝炎患者血清样本,采用ELISA 和CLIA 法检测HCV-Ab,实时荧光定量PCR (FQ-PCR) 法检测HCV-RNA.结果 ELISA法、CLIA法和PCR法的检测阳性率分别为88.3%、91.5%、97.5%.结论 在临床检测中,可使用CLIA法对HCV抗体进行检测,提高早期检出率和丙肝筛查的准确性,从而及时有效地阻断HCV的传播.     

丙肝病毒抗体检测结果的分析与解读

目的探讨以电化学发光法对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)进行初筛检测时,需要进行旁证试验的阳性结果水平。方法收集2009年和2011年华西医院抗-HCV的检测结果,比较两年的阳性检出率并对阳性结果分层分析。将2011年同时检测了抗-HCV和HCV RNA的样本结果进行符合性分析。采用重组免疫印迹试验(RIBA)对2012年收集的16份电化学发光法检测抗-HCV阳性(COI≥1.0)的样本进行确证分析,结合抗-HCV、RIBA、HCV RNA结果和临床资料进行综合分析。结果 2009年ELISA检测抗-HCV的阳性率为1.38%,2011年CLEIA检测抗-HCV的阳性率为1.49%,两年的丙肝抗体检测阳性率无统计学差异。用RIBA检测2012年CLEIA方法初筛阳性的16例标本,COI200的13例中RIBA阴性7例,不确定6例,RIBA阴性的7例HCV RNA均为阴性,RIBA不确定的6例中5例HCV RNA阴性,1例阳性。结论用罗氏诊断的电化学发光试剂检测抗-HCV时,当阳性检测结果的COI200,尤其当COI50时需通过其他的旁证试验来进行确证。     

微量凝集试验与酶联免疫吸附试验检测军团菌抗体的比较

目的比较微量凝集试验(MAT)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中嗜肺型军团菌(Legionella pneumophila,Lp)抗体的优缺点。方法用MAT法和ELISA法检测400份南京地区公共场所从业人员的血清标本中嗜肺军团菌抗体,采用描述流行病学方法进行分析。结果 MAT法检出阳性标本51份,阳性率为12.75%,ELISA法共检出阳性标本47份,总阳性率为11.75%,差异无统计学意义(χ2=0.186,P0.05),结果高度一致(k=0.930,u=32.75)。ELISA法检出LpIgM阳性标本28份,阳性率为7.00%,与MAT法检测结果差异有统计学意义(χ2=7.430,P0.05);ELISA法检出Lp-IgG阳性42份,阳性率为10.50%,与MAT法检测结果差异无统计学意义(χ2=0.986,P0.05);ELISA法检出Lp-IgM和LpIgG阳性率差异无统计学意义(χ2=3.188,P0.05)。结论 ELISA法快速、操作简便,与MAT法检测嗜肺军团菌抗体结果高度一致,可应用于大批量标本检测。     

化学发光法测定肺炎支原体肺炎患儿血清MP抗体对诊断效果的影响

目的探究化学发光法测定肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清肺炎支原体(MP)抗体对诊断效果的影响。方法选择2017年5月-2018年5月疑似MPP患儿共212例作为观察组,其中经支原体培养阳性确诊为MPP的患儿88例,124例为非MPP患儿。分别使用化学发光免疫分析技术(CLIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)和被动凝集法(PA)检测MP抗体,比较CLIA与ELISA和PA的检测一致性,并比较三种方法的诊断效能。结果 CLIA与ELISA检测MP-IgG抗体结果差异有统计学意义(χ~2=18.382,P=0.000),Kappa值为0.805。CLIA与ELISA检测MP-IgM抗体结果差异有统计学意义(χ~2=9.500,P=0.002);CLIA与PA检测MP抗体结果差异有统计学意义(χ~2=20.251,P=0.000),Kappa值为0.655。CLIA的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均显著高于ELISA和PA法(P0.05)。结论 CLIA与ELISA对MP-IgG抗体、MP-IgM抗体的检测一致性较好;CLIA与PA对MP抗体的检测一致性一般;CLIA对MP具有更好的诊断效能。     

TRFIA测定HCV的假阳性和解决方法

目的了解时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测HCV的假阳性率,为临床检测HCV提供参考方法。方法 TRFIA法检测了3854份血清标本,筛选HCV结果为弱阳性的28份标本,用酶联免疫吸附试验(EL1SA)复核检测,复查ELISA为阳性的发阳性报告;ELISA法检测结果阴性者,用PCR法再次复查,阴性者发阴性报告。结果 TRFIA法检测HCV的假阳性率为0.441%(17/3854),而用PCR法再次复查后假阳性占总检测标本百分比降至0.415%(16/3854)。结论 TRFIA法检测HCV假阳性偶有发生,绝大多数可以通过用ELISA法复检加以纠正。     

免疫印迹法在献血员梅毒抗体筛查中的应用

目的研究梅毒螺旋体免疫印迹试验(TP-WB)在献血员梅毒抗体筛查中的应用价值。方法使用梅毒标准血清盘,分析2种TP-ELISA试剂和1种TPPA试剂检测的准确性及不足;使用WB法对无偿献血筛查的279份TP-ELISA试剂阳性标本进一步检测,分析ELISA阳性结果与WB结果的相关性及WB阳性条带的分布特征。结果在40份以TP-WB结果为金标准的血清盘中,XC和WT两公司的TP-ELISA试剂的检测灵敏度均为100.00%,高于TPPA的88.46%,但两公司试剂检测的特异性分别为92.86%与85.71%,均低于TPPA的100.00%;在筛查的279份TP-ELISA法检测阳性标本中,WB确认阳性216份,阳性率为77.42%;其中包括S/CO值5且两种ELISA试剂检测同时阳性的标本205份,其WB确认试验阳性率为100.00%,占216份WB确认阳性标本数的99.91%。有序Logistic回归分析显示,ELISA法S/CO值5和双试剂阳性,与WB检测阳性分别存在统计关联(P0.01);216份TP-WB阳性标本WB条带分布分析,其中TP17条带与梅毒抗体Ig M阳性、TP15条带与Ig G及Ig G+Ig M阳性分别存在统计关联(P均0.01)。结论 ELISA法双试剂阳性且S/CO值5,基本可确诊为梅毒,WB试验条带阳性结果对献血者感染状况的判断有一定的指导意义。     

河南省丙型肝炎流行病学分析

目的了解河南省普通人群丙型肝炎流行状况,探讨联合运用多种实验室检测方法对丙型肝炎诊断的意义。方法采用多阶段随机抽样方法,于2012年4—7月,在河南全省18个省辖市对1~75岁的普通人群进行问卷调查,并采集静脉血标本,采用多种试剂对样本进行丙型肝炎病毒(HCV)检测。结果共调查32 203人,河南省1~75岁人群的HCV抗体、HCV RNA标化阳性率分别为0.64%、0.35%;HCV抗体筛查试验1≤S/CO3.8和3.8≤S/CO10的两组样本蛋白印迹补充试验阳性率差异有统计学意义(χ2=11.23,P0.01);筛查试验1≤S/CO10和10≤S/CO18.3的2组样本的HCV RNA核酸阳性率差异有统计学意义(χ2=71.84,P0.001)。结论河南省属丙型肝炎低流行区,HCV抗体筛查后,须进行补充试验,特别是核酸检测,多种试剂联合检测有助于明确丙型肝炎诊断。     

湖南省美沙酮门诊就诊者感染丙型肝炎病毒基因型特征分析

目的 了解湖南省美沙酮门诊就诊者感染丙型肝炎病毒(HCV)基因型特征。 方法 收集湖南省内14个市州18岁以上、未接受抗病毒治疗、既往HCV抗体阳性的美沙酮门诊患者的血浆样本,每市州样本15份,共210份。对收集到的血浆样本分别进行HCV抗体ELISA复检、荧光PCR法定量HCV-RNA检测和基因分型检测。 结果 在210名调查对象中,ELISA法复检HCV抗体阳性标本202例,阳性率96.19%;荧光PCR法检出HCV- RNA病毒载量>15 IU/ml标本181例,阳性率86.19%。HCV基因型分别为1型18例(9.94%),2/3型51例(28.18%),1型混合2/3型47例(25.97%),其他型别65例(35.91%)。区域分布以非1型为主,2/3型普遍分布。 结论 湖南省HCV基因型比较复杂,有待深入研究。     

广州市808例HIV抗体筛查阳性孕产妇复核和确证结果分析

目的了解孕产妇HIV抗体检测结果特点、内在规律以及假阳性情况,为科学实施艾滋病母婴干预策略提供参考。方法回顾分析2004—2013年广州市HIV抗体筛查阳性孕产妇样本的酶联免疫吸附法(ELISA)复核和免疫印迹法(WB)确证检测结果。结果 808份HIV抗体筛查阳性样本中复检阳性538份,复检试验阳性符合率为66.58%(538/808)。538份复检阳性样本经WB确证检测,320份为HIV-1抗体阳性,确证试验阳性符合率为59.48%(320/538);62份为确证检测不确定样本,不确定率为11.52%(62/538)。62份不确定样本中追踪45份,3份阳转,阳转率为6.67%(3/45)。S/CO值4的样本,WB试验均未检出阳性,当S/CO值≥4时样本开始检出阳性,阳性率随着S/CO值升高而升高。结论孕产妇HIV抗体检测假阳性率较高,应根据实验结果并结合流行病学史等相关资料作出HIV感染判断,科学实施母婴干预工作,同时应积极采取措施规避假阳性结果。