慢性粒细胞白血病降钙素基因甲基化的研究

慢性粒细胞白血病降钙素基因甲基化的研究王顺清洪文德彭爱华罗绍凯戴木水戴丽君慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）是起源于多能干细胞的肿瘤性疾病，其急变发生的机制不清楚。近来有人报道人类降钙素基因（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ，ＣＴ基因）的高度甲基化与不少肿瘤性疾...     

DNA甲基化异常与皮肤肿瘤

DNA甲基化（DNA methylation）异常主要指基因组中CpG岛发生甲基化修饰,引起基因表达异常。近几年的研究表明,DNA甲基化异常与肿瘤的发生关系密切。其主要的致癌机制为：抑癌基因启动子区被异常甲基化导致基因表达沉默进而导致肿瘤的发生;细胞周期调控基因甲基化异常致使细胞调控周期紊乱使得肿瘤细胞增殖过速;肿瘤侵袭相关基因甲基化异常致使肿瘤扩散转移以及DNA损伤修复基因异常甲基化使得肿瘤的发生机率增加。     

用降钙素基因甲基化做白血病恶性克隆增殖的标志

微小残留病的检测是当今白血病研究领域受人关注的问题之一。检测残留病的关键是寻找肿瘤标志。降钙素基因高度甲基化为急性白血病，特别是急性髓细胞白血病的ＭＲＤ提供了一新的基因标志，对研究白血病，骨髓增生异常综合征的发生发展，可能具有较大意义。     

抑癌因子DNA高甲基化与肿瘤

肿瘤DNA甲基化的异常包括基因组整体甲基化水平降低或和某些基因启动子区域甲基化水平异常升高。前者可导致原癌基因活化及基因组不稳定等,而基因启动子区域发生异常高甲基化则可导致基因转录沉默,使重要基因如抑癌基因等低表达或不表达及增加点突变,并通过影响多条细胞信号转导通路来干预细胞周期和细胞凋亡等,从而影响肿瘤的发生发展及预后和治疗。了解抑癌因子DNA高甲基化与肿瘤的研究现状,可望为揭示肿瘤发生机制提供新的思路,为肿瘤诊断和治疗提供新的标记物和靶点。     

降钙素及其基因高甲基化在血液恶性肿瘤中的诊断价值

本文综述降钙素族与急性白血病的关系，降钙素基因高甲基化与血液恶性疾病的关系及其发生机理和测定原理，以及降钙素基因高度甲基化作为一分子基因标志用来检测残留微小白血病病灶和预示疾病的发展。     

p16基因异常甲基化检测对周围型肺癌的诊断价值

目的:了解周围型肺癌患者外周血血浆中p16基因异常甲基化发生情况及其在周围型肺癌临床辅助诊断中的应用价值。方法:选取56例肺周围型结节手术患者的血浆和组织标本,其中31例为周围型肺癌,25例为肺部良性结节,采用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测p16基因启动子的异常甲基化情况。结果:在周围型肺癌患者的血浆和肿瘤组织中,p16基因甲基化检出率分别为64.5%(20/31)和70.9%(22/31);周围型肺癌患者血清、肿瘤组织中p16基因的甲基化异常事件与肿瘤分期、分型无明显相关性。在25例良性肺部疾病患者中,3例血浆和手术切除标本检测出p16基因启动子的异常甲基化存在;良、恶性肺周围型结节的p16基因异常甲基化发生情况差异存在显著性。结论:检测周围型肺癌患者血浆中p16基因异常甲基化情况有可能成为有价值的临床辅助诊断手段。     

PCR检测骨髓增生异常综合征降钙素基因的高度甲基化

ＰＣＲ检测骨髓增生异常综合征降钙素基因的高度甲基化禹华玮刘祥荣谭齐贤乔宏降钙素（ＣＴ）基因位于人类１１号染色体短臂１１ｐ１５。约９０％的非霍奇金Ｔ和Ｂ细胞淋巴瘤和９５％的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）的肿瘤细胞，其ＣＴ基因５′端ＣＣＧＧ位点高度甲基...     

降钙素基因甲基化对白血病前期基因诊断的研究

探讨降钙素基因甲基化对白血病基因诊断的价值。方法：利用多聚酶链反应，扩增ＣＴ基因５‘端第４个甲基化位点的ＤＮＡ的序列，的有样本ＤＮＡ在做ＰＣＲ前用过量的这内切酶ＨＰａⅡ消化。检测２１例骨髓增生异常综合征及１２例再障患者，细胞系ＨＬ－６０作阳性对照，５例正常人骨髓作正常对照组。     

甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施

DNA甲基化是高等脊椎动物生物体内酶介导的化学修饰过程，其影响着基因的转录表达，与肿瘤发生有着密切的联系。DNA甲基化改变是肿瘤发生的一个关键因素，也是肿瘤抑制基因的失活方式之一，它通过基因遗传机制和基因表遗传学机制导致细胞增殖和分化的相关基因表达异常，造成细胞失去正常的基因调控作用而发生恶变形成肿瘤。而目前对DNA甲基化状态的检测方法不多，甲基化特异聚合酶链反应（methylation—specific PCR，MSP）是一种快速敏感的基因甲基化分析方法”。其可以检测1／1000等位基因发生甲基化的肿瘤细胞，特异性近于100％。该法灵敏度高，可以进行超微量分析和同源基因分析；     

DNA甲基化与人类肿瘤

DNA甲基化不仅是最常见的真核DNA的修饰方式,而且正常的甲基化还维持着细胞和器官的正常功能.如果正常的甲基化模式遭到破坏,就会导致一些疾病的发生,如智力发育迟缓、免疫缺陷、散发性或遗传性肿瘤等.无论是生长调节基因的异常失活,还是整个染色体的去稳定,这些异常甲基化的无序状态都能促进肿瘤细胞的形成.一些基因的异常甲基化还与肿瘤化疗效果和患者的生存期直接相关,因此甲基化与人类肿瘤的关系越来越受到人们的重视.     

表观遗传修饰与白血病

表观遗传修饰（epigenetic modification），如DNA甲基化、组蛋白乙酰化和甲基化、RNA相关性沉默与细胞生长、分化、凋亡、转化及肿瘤进展相关基因的转录密切相关。白血病的发生和发展与表观遗传修饰异常直接相关。本文综述细胞周期调节基因甲基化，组蛋白翻译后修饰异常及siRNA对白血病细胞的作用，为白血病治疗提供新策略。     

膀胱移行细胞癌组织基因的P14ARF、DAPK、RARβ甲基化变异分析

目的 通过检测新鲜冰冻膀胱癌组织中P14ARF、DAPK、RARβ基因的启动子CpG岛基因的甲基化状态,探讨P14ARF、DAPK、RARβ在膀胱癌发生过程中的作用及诊断意义.方法 采用甲基化特异性PCR技术检测48例手术切除的膀胱癌组织和其中13例相应癌旁组织标本、17例非肿瘤患者正常膀胱组织中DAPK、RARβ、P14ARF基因的甲基化情况.结果 48例膀胱癌组织中发现P14ARF基因异常甲基化13例(27.0%),DAPK基因异常甲基化13例(27.0%);RARβ基因异常甲基化44例(91.6%);17例腺性膀胱炎组织中发现P14ARF基因异常甲基化0例,DAPK基因异常甲基化2例(11.7%);RARβ基因异常甲基化3例(17.6%);13例正常膀胱组织中,仅有2例RARβ基因异常甲基化,P14ARF基因、RARβ基因异常甲基化膀胱癌组织与腺性膀胱炎组织差异有统计学意义(P<0.01;P<0.05).结论 P14ARF、DAPK、RARβ基因异常甲基化与膀胱癌发病密切相关,RARβ基因可作为正常膀胱组织与癌组织鉴别诊断的标志物.     

甲基化特异性PCR法检测胰腺癌组织E-cadherin基因甲基化

目的:探讨胰腺癌组织E-cadherin(E-cad,上皮钙粘附素)5’-CpG岛异常甲基化情况;进一步讨论DNA异常甲基化在临床早期诊断、预后中的应用。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)检测27例胰腺癌组织和9例良性胰腺组织E-cad基因甲基化情况。结果:①在9例胰腺良性肿瘤及正常胰腺组织中,E-cad基因非甲基化PCR扩增均为阳性,未见甲基化PCR扩增。②在27例胰腺癌组织E-cad基因甲基化PCR扩增阳性9例(33.33%,9/27),其中完全甲基化6例,部分甲基化3例;而非甲基化PCR扩增阳性为18例(66.67%,18/27)。③E-cad基因异常甲基化与性别、年龄大小、肿瘤大小之间均无显著性差异(P>0.05),但与肿瘤的组织学分级相关。结论:在胰腺癌组织中E-cad基因异常甲基化是胰腺癌组织区别于其它胰腺良性病变的生物学标志之一。     

DNA甲基化与人类肿瘤

DNA甲基化不仅是最常见的真核DNA的修饰方式 ,而且正常的甲基化还维持着细胞和器官的正常功能。如果正常的甲基化模式遭到破坏 ,就会导致一些疾病的发生 ,如智力发育迟缓、免疫缺陷、散发性或遗传性肿瘤等。无论是生长调节基因的异常失活 ,还是整个染色体的去稳定 ,这些异常甲基化的无序状态都能促进肿瘤细胞的形成。一些基因的异常甲基化还与肿瘤化疗效果和患者的生存期直接相关 ,因此甲基化与人类肿瘤的关系越来越受到人们的重视。一、DNA甲基化在哺乳类动物中 ,胞嘧啶的甲基化是惟一已知的DNA内源性修饰。通过酶催化作用 ,甲基化基…     

肿瘤基因启动子区异常甲基化与肿瘤的发生

肿瘤的发生和发展是一个与多基因、多步骤的致癌因素相关的复杂过程,包括了原癌基因及肿瘤抑制基因的改变、错配修复基因的突变、DNA甲基化和微卫星不稳定性。癌基因的低甲基化与抑癌基因的高甲基化在肿瘤发生、发展中的基因表达调控、基因结构的稳定等方面发挥重要作用。DNA甲基化是指生物体在DNA甲基转移酶的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸（SAM）为甲基供体,将甲基转移到特定碱基上的过程。甲基化异常被认为是肿瘤的一个特征,是基因组中一种重要的表观遗传修饰,与肿瘤的发生、浸润及转移相关。基因局部甲基化模式的改变已成为令人瞩目的研究领域。本文就DNA甲基化及肿瘤基因启动子区甲基化研究的相关进展作简要综述。     

膀胱移行细胞癌组织基因的P14ARF、DAPK、RARβ甲基化变异分析

目的通过检测新鲜冰冻膀胱癌组织中P14ARF、DAPK、RARβ基因的启动子CpG岛基因的甲基化状态,探讨P14ARF、DAPK、RARβ在膀胱癌发生过程中的作用及诊断意义。方法采用甲基化特异性PCR技术检测48例手术切除的膀胱癌组织和其中13例相应癌旁组织标本、17例非肿瘤患者正常膀胱组织中DAPK、RARβ、P14ARF基因的甲基化情况。结果 48例膀胱癌组织中发现P14ARF基因异常甲基化13例(27.0%),DAPK基因异常甲基化13例(27.0%);RARβ基因异常甲基化44例(91.6%);17例腺性膀胱炎组织中发现P14ARF基因异常甲基化0例,DAPK基因异常甲基化2例(11.7%);RARβ基因异常甲基化3例(17.6%);13例正常膀胱组织中,仅有2例RARβ基因异常甲基化,P14ARF基因、RARβ基因异常甲基化膀胱癌组织与腺性膀胱炎组织差异有统计学意义(P<0.01;P<0.05)。结论 P14ARF、DAPK、RARβ基因异常甲基化与膀胱癌发病密切相关,RARβ基因可作为正常膀胱组织与癌组织鉴别诊断的标志物。     

微流控芯片电泳技术检测肿瘤患者血浆中p16基因甲基化的应用

p16基因甲基化是癌症诊断的标志物之一。目前检测p16基因甲基化的甲基化特异性聚合酶链反应法（MSP）灵敏度有限，对血浆中脱落肿瘤细胞少的标本易报告为假阴性。而微流控芯片电泳技术具有高灵敏度、成本低、分析速度快等特点。本研究用微流控芯片电泳技术检测肿瘤患者血浆中p16基因异常甲基化，并探讨其临床应用价值。     

降钙素基因甲基化对白血病前期基因诊断的研究

目的：探讨降钙素（ＣＴ）基因甲基化对白血病前期基因诊断的价值。方法：利用多聚酶链反应（ＰＣＲ），扩增ＣＴ基因５’端第４个甲基化位点附近的ＤＮＡ序列，所有样本ＤＮＡ在做ＰＣＲ前用过量的限制性内切酶ＨＰａⅡ消化。检测２１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）及１２例再障患者，细胞系ＨＬ－６０作阳性对照，５例正常人骨髓作正常对照组。结果：再障组与正常对照组ＣＴ基因处于正常甲基化状态。２１例ＭＤＳ中１６例ＣＴ基因高度甲基化。３例ＣＴ基因高度甲基化的ＭＤＳ转化成ＡＭＬ。ＣＴ基因高度甲基化与原始细胞计数无相关性（ｒ＝００４２）。结论：ＣＴ基因高度甲基化可作为ＭＤＳ基因诊断的一个指标，为探知ＭＤＳ的发病机理以及与白血病的关系提供了有价值的诊断方法。     

MSP技术检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因甲基化异常

目的 建立检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因CpG岛甲基化状态改变的方法.方法 提取外周血DNA,经亚硫酸盐修饰,然后采用甲基化特异性PCR技术检测9例慢性淋巴细胞白血病患者及5例正常对照外周血DNA 孕激素受体B基因CpG岛甲基化状态.结果 在9例慢性淋巴细胞白血病患者外周血中5例成功地检测到孕激素受体B基因甲基化异常,而正常对照均没有发现甲基化异常.结论 建立的检测慢淋孕激素受体B基因异常甲基化的方法是可靠的,该方法可能对监测肿瘤进程有一定作用.     

ID4基因甲基化检测在判断骨髓增生异常综合征患者临床预后中的价值

DNA结合抑制因子4(ID4)是最近发现的ID家族成员,ID4基因异常甲基化导致ID4基因在一些实体瘤中表达下调.于力等[1]利用小鼠白血病模型发现ID4在白血病中存在异常甲基化导致的表达下调,而该基因表达可被去甲基化药物逆转,提示该基因是肿瘤抑制基因.