三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响

目的:本文旨在探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响及其作用机制。方法:将20周龄MRL/lpr狼疮鼠和正常C57BL/6J小鼠随机分组,分别接受ATO(0.4mg·kg~(-1)·d~(-1))和同体积生理盐水(NS)治疗2个月,分离脾脏淋巴细胞,然后用实时荧光定量PCR法检测T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的mRNA水平及T-bet/GATA3 mRNA的比值,Western blot法检测T-bet和GATA3的蛋白表达,ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的浓度。结果:(1)MRL/lpr狼疮鼠NS组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、Tbet/GATA3 mRNA比值均高于C57BL/6J小鼠NS组(P0.05),而GATA3、IL-4的mRNA及其蛋白表达均低于C57BL/6J小鼠NS组(P0.05);(2)在MRL/lpr狼疮鼠中,与NS组相比,ATO组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、T-bet/GATA3 mRNA比值均下降(P0.05),而2组中GATA3、IL-4的mRNA及蛋白表达无明显差异;(3)在C57BL/6J小鼠中,NS组和ATO组之间以上指标均无显著性差异。结论:ATO可能通过影响MRL/lpr狼疮鼠Tbet/GATA3信号通路,降低T-bet表达,从而减少Th1型细胞因子IFN-γ的表达和分泌。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和淋巴细胞亚群的影响

目的研究三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和淋巴细胞亚群的影响。方法将MRL/lpr狼疮鼠随机分为:ATO组、生理盐水(NS)组和环磷酰胺(CTX)组。另设正常C57/BL小鼠,随机分为ATO治疗组(0.4 mg/kg.d)和对照组(0.25 mL)。以上每组各6只,隔日腹腔注射,给药2个月后处死,称体重和脾脏重量算出脾脏指数;ELISA法测各组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平;流式细胞术测脾脏细胞亚群百分比。结果(1)MRL/lpr小鼠ATO治疗组脾脏指数、血清抗ds-DNA抗体水平和CD19 、CD3 、CD3 CD4 细胞百分比均低于NS对照组(P<0.01或P<0.05),NK细胞百分比明显高于NS对照组(P<0.05);(2)ATO治疗组小鼠的脾脏指数和CD3CD4双阳性细胞百分比显著低于CTX组(P<0.01),CTX治疗组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平均较对照组明显降低(P<0.01),但ATO治疗组的抗体水平较CTX治疗组高(P<0.05);(3)在C57/BL小鼠中,ATO治疗组和NS治疗组之间以上指标均无差异。结论ATO抑制MRL/lpr狼疮鼠T、B淋巴细胞活化同时上调NK细胞功能,减少体内自身抗体产生;但是对正常小鼠的抗体水平和细胞亚群并无明显影响。     

具有SLE疾病症状的MRL/lpr小鼠体内自噬水平检测

目的检测16周龄MRL/lpr小鼠发病情况,并研究发病后的MRL/lpr小鼠脾脏自噬水平。方法采用雌性MRL/lpr小鼠和雌性C57BL/6小鼠,分别于16周龄时检测2组小鼠脏器系数,ELISA检测血清抗ds-DNA、ANA的水平,淋巴结、肾脏病理HE染色观察,以检测MRL/lpr小鼠发病情况。取发病小鼠,Western blot检测2组小鼠脾脏自噬相关蛋白Beclin-1、ATG5、P62、LC3Ⅱ/Ⅰ的表达,Real-time PCR检测自噬相关基因Beclin-1、ATG5、Atg12、LC3B mRNA的表达,流式检测2组小鼠脾脏中B细胞和浆细胞的比例。结果 16周龄MRL/lpr小鼠脾脏、淋巴结脏器系数升高,血清中自身抗体水平显著升高,淋巴结和肾脏均出现一定程度的病理性改变。此时脾脏中的自噬相关蛋白Beclin-1、ATG5、LC3Ⅱ/Ⅰ表达均高于C57BL/6小鼠,P62的表达显著低于C57BL/6小鼠,自噬相关基因ATG5 mRNA的表达也显著升高。此外,相较于C57BL/6小鼠,MRL/lpr小鼠脾脏中B细胞数量减少,而抗体分泌型浆细胞数量显著升高。结论 16周龄MRL/lpr小鼠已出现狼疮样症状,出现自噬水平异常升高的现象,并且脾脏中抗体分泌型浆细胞的增多可能与异常升高的自噬水平密切相关。     

健康者与狼疮患者骨髓间充质干细胞移植治疗MRL/lpr鼠的疗效比较

为了比较健康者及狼疮患者骨髓来源间充质干细胞(MSC)移植治疗MRL/lpr狼疮鼠的疗效,24只17周龄MRL/lpr狼疮鼠随机分为三组,健康者骨髓MSC治疗组(H-MSC)、SLE患者骨髓MSC治疗组(L-MSC)及PBS对照组(PBS)。分别给予不同MSC或PBS治疗后观察8周,处死所有小鼠,评价移植疗效及检测相关免疫学指标。结果显示H-MSC组小鼠生存率显著高于PBS组。H-MSC组小鼠蛋白尿水平显著低于L-MSC组及PBS组。H-MSC组及L-MSC组小鼠肾脏总体病理学评分均显著低于PBS组,但两治疗组之间无显著差异。H-MSC组和L-MSC组小鼠肾小球补体IgG沉积水平均显著低于PBS组,且H-MSC组肾脏C3沉积水平显著低于L-MSC组和PBS组。H-MSC组及L-MSC组小鼠脾脏CD3+CD4+T淋巴细胞绝对数均显著低于PBS组。结果表明H-MSC及L-MSC移植治疗MRL/lpr狼疮鼠均有疗效,但H-MSC疗效优于L-MSC,MSC移植可能通过抑制CD3+CD4+T淋巴细胞发挥对MRL/lpr的治疗作用。     

巨噬细胞衍生趋化因子在MRL/lpr小鼠肾组织中的异常表达

目的:研究巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)在红斑狼疮小鼠狼疮肾炎中的作用。方法:比较MRL/lpr狼疮小鼠和BALB/c小鼠24h尿蛋白,并用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测两组小鼠肾组织MDCmRNA及蛋白表达情况。结果:MRL/lpr小鼠24h尿蛋白高于BALB/c小鼠(P0.05);MRL/lpr小鼠肾组织MDCmRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P0.05);MRL/lpr小鼠肾小球、肾小管及间质均有明显MDC蛋白表达,而BALB/c小鼠肾脏未见MDC表达。结论:MDC在红斑狼疮小鼠肾脏组织中的表达增高,说明MDC可能参与介导了小鼠狼疮性肾炎的病变过程。     

Rho激酶抑制剂Y-27632对MRL/lpr狼疮小鼠的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Rho激酶抑制剂Y-27632对MRL/lpr狼疮小鼠的保护作用机制。方法 MRL/lpr狼疮小鼠20只随机分为MRL/lpr对照组、5 mg/kg Y-27632处理组,每组10只;野生型对照组C57BL/6小鼠10只。采用ELISA检测各组小鼠血清、脾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,ELISA检测血清核因子κB(NF-κB)相关炎症因子白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;采用Western blot法检测各组小鼠脾脏组织中硫氧还蛋白结合蛋白(Txnip)/硫氧还蛋白(Trx)、丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)相关蛋白胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38MAPK以及NF-κB的水平;Western blot法检测各组小鼠脾脏T淋巴细胞Txnip、p38MAPK、NF-κB蛋白水平;ELISA检测T淋巴细胞上清液IL-6、IL-1β、TNF-α水平。结果 Y-27632提高MRL/lpr狼疮小鼠血清及脾脏组织SOD水平;降低血清及脾脏组织MDA水平;降低血清、脾脏组织和脾脏T淋巴细胞上清液IL-6、IL-1β、TNF-α水平;抑制脾脏和脾脏T淋巴细胞Txnip、MAPK相关蛋白ERK、JNK和p38MAPK以及NF-κB表达,增加Trx含量。结论 Rho激酶抑制剂Y-27632对MRL/lpr狼疮小鼠有保护作用。     

LRCH1维持狼疮肾炎模型小鼠调节性T细胞的功能

目的 探讨富含亮氨酸的重复序列和钙调理蛋白同源域1(LRCH1)在狼疮肾炎模型小鼠调节性T细胞(Tregs)中的表达和功能.方法 6月龄C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠,用流式细胞仪分选脾脏和肾脏内的CD45+CD4+CD25+CD127low Tregs,RT-qPCR检测Tregs LRCH1 mRNA水平....     

LTβR在MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎病理发生中的作用及其机制初探

目的研究淋巴毒素β受体(lymphotoxinβreceptor,LTβR)在狼疮性肾炎病理发生中的作用及其机制。方法选取12周龄、雌性的MRL/lpr小鼠作为狼疮性肾炎小鼠模型,将其随机分为3组:生理盐水处理组、Human-Ig处理组和LTβR-Ig处理组,分别腹腔注射生理盐水(100μl),Human-Ig(100μg/只,100μl)和LTβR-Ig(100μg/只,100μl),每周1次,连续8周。同周龄和性别的C57BL/6小鼠为狼疮性肾炎模型小鼠的正常对照,每周腹腔注射生理盐水1次(100μl),连续8周。Human-Ig和LTβR-Ig处理组小鼠在首次处理后第2、4、6、8周称体质量。最后一次处理1周后,处死以上4组小鼠,收集肾组织。qRTPCR,IHC和Western blot比较C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠肾组织中LTβR的表达情况。然后通过HE染色肾组织,qRT-PCR检测肾组织中LTβR、IL-6、MCP-1、TNF-α的表达水平;Western blot检测肾组织核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的活化情况,以C57BL/6小鼠肾组织作为正常对照,比较Human-Ig处理组和LTβR-Ig处理组小鼠(MRL/lpr小鼠)以上指标的变化。结果与C57BL/6小鼠相比,MRL/lpr小鼠肾组织中LTβR表达显著升高;与Human-Ig处理组相比,用LTβR阻断肽(LTβRIg)处理的MRL/lpr小鼠肾组织受损明显减轻,肾组织中炎症相关分子IL-6、MCP-1和TNF-α等的表达显著下降,NF-κB的活化明显下调。结论 LTβR可能通过促进狼疮性肾炎相关炎症因子的表达和NF-κB的活化,在狼疮性肾炎的病理发生中发挥重要作用。     

miR-1-5p修饰的脐带间充质干细胞对MRL/lpr狼疮小鼠的治疗作用研究北大核心CSCD

目的:探讨miR-1-5p修饰的脐带间充质干细胞对MRL/lpr狼疮小鼠的治疗作用及可能的机制。方法:选取年龄和性别相匹配的系统性红斑狼疮(SLE)患者和健康体检者各26例,实时荧光定量PCR检测两组外周血单个核细胞中的miR-1-5p表达水平;15只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为5组,分别为MRL/lpr狼疮小鼠未处理组(Control组)、PBS治疗组(PBS组)、UC-MSCs治疗组(UC-MSCs组)、miRNA negative control转染UC-MSCs治疗组(UC-MSCs+miR-NC组)、miR-1-5p转染UC-MSCs治疗组(UC-MSCs+miR-1组)。治疗结束1周后处死小鼠,采用HE染色观察各组小鼠肾组织和肺组织的病理改变;ELISA检测各组小鼠血清抗炎因子IL-10的浓度;流式细胞术检测小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的分化情况。结果:①与健康对照组相比,miR-1-5p在SLE患者中的表达显著下调(P<0.05);②miR-1-5p修饰的UC-MSCs可以有效改善MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎和间质性肺炎的病理变化;③miR-1-5p修饰的UC-MSCs可抑制MRL/lpr小鼠脾脏肿大;④与Control组相比,UC-MSCs+miR-1组血清IL-10表达水平显著升高(P<0.05);⑤与Control组相比,UC-MSCs+miR-1组小鼠胸腺Treg细胞比例显著升高,且差异有统计学意义(P<0.05);流式检测各组Th17细胞比例及Th17/Treg,差异均无统计学意义(P>0.05);与Control组相比,UC-MSCs+miR-1组小鼠胸腺Th2细胞比例显著升高,且差异有统计学意义(P<0.05);流式检测各组Th1细胞比例及Th1/Th2,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-1-5p修饰的UC-MSCs可能通过促进MRL/lpr小鼠胸腺Treg细胞和Th2细胞分化以及IL-10的表达,减轻MRL/lpr小鼠肾组织和肺组织损害,起到治疗作用。     

早期细胞凋亡引起活动期狼疮小鼠的B 细胞比例下降

目的:探索活动期MRL/lpr狼疮小鼠中B细胞数量的变化及其调节机制。方法:利用流式细胞仪,首先分析了18周龄活动期MRL/lpr狼疮小鼠与正常C57/B6小鼠脾脏中B细胞的周期和B细胞占脾脏淋巴细胞的百分比;用Annexin V和PI标记方法检测了B细胞及其亚类凋亡情况;进一步磁珠分选纯化小鼠脾脏B细胞,实时定量PCR方法检测相关凋亡基因的表达变化。结果:与C57/B6小鼠相比,活动期MRL/lpr狼疮小鼠的B细胞比例明显减少(P0.01),而凋亡比例显著增加(P0.01),其中B细胞的早期凋亡比例增加(P0.01),而晚期凋亡未改变;凋亡的B细胞包括未成熟和成熟B细胞。进一步发现,活动期狼疮小鼠B细胞中抗凋亡蛋白BIRC3明显降低(P0.01),而促凋亡蛋白BCL2L1和BBC3(PUMA)明显增加(P0.01)。结论:活动期狼疮小鼠B细胞的数目减少及早期凋亡的增加可能归功于抗凋亡与促凋亡蛋白的平衡改变,提示活动期SLE患者B细胞的减少可能与其早期凋亡相关。     

饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响

目的确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平,并初步研究SOCS2对糖异生的影响。方法动物分3组:C57BL/6J小鼠、对照组(饱食)和实验组(饥饿24 h);糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食;肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠(饱食)。处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR,荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平;使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,Western blot检测SOCS2蛋白的表达,葡萄糖生成实验检测糖输出。结果饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调,db/db和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降(P0.05),调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升。在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,得到大小为Mr 23 000的蛋白,糖输出受到明显抑制。结论初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生,可能是治疗糖尿病的一个新靶点。     

激活FXR抑制MRL/lpr狼疮小鼠肝损害的研究

 目的:观察法尼酯衍生物X受体（FXR）激活是否减轻MRL/lpr狼疮小鼠肝损害。方法:检测FXR在MRL/lpr狼疮小鼠及正常BALB/c小鼠肝脏的表达;观察BALB/c小鼠和鹅去氧胆酸（CDCA）激活FXR的MRL/lpr小鼠再以伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导肝脏炎症反应后的肝脏酶学、炎症因子及病理学的变化。结果:FXR在MRL/lpr狼疮小鼠肝脏中低表达;ConA能在MRL/lpr小鼠诱导出较对照BALB/c小鼠更严重的肝损害;激活FXR减轻MRL/lpr狼疮小鼠ConA诱导的肝脏炎症损伤,并减少一系列炎症因子的释放。结论: CDCA激活FXR 后,能减轻狼疮小鼠肝脏损害。FXR可能是系统性红斑狼疮肝损害的一个保护性因素,激活FXR可能成为狼疮肝损害的一个治疗途径。     

间充质干细胞增强巨噬细胞功能治疗SLE实验研究

目的从对巨噬细胞功能调控角度探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC)对狼疮鼠的治疗机制,为临床用于治疗狼疮患者提供理论依据。方法 24周龄B6.MRL-Fas~(lpr)(B6/lpr)狼疮鼠随机分为空白对照组、UCMSC移植治疗组和成纤维样滑膜细胞(fibroblast like synoviocytes,FLS)移植对照组,同周龄雌性C57BL/6鼠作为正常对照。UCMSC和FLS组均给予1×10~6数量尾静脉输注,各组小鼠于28周龄处死。HE检测小鼠肾脏病理,评估疗效。分离纯化小鼠腹腔和肾脏巨噬细胞,无菌条件下取8周龄雌性C57BL/6小鼠脾脏,磁珠分选CD4~+T细胞,在抗CD3/28刺激下,将其以5∶1比例与小鼠巨噬细胞共培养4 d,CFSE法检测CD4~+T细胞增殖。2μm荧光微球与小鼠巨噬细胞共培养2 h,流式细胞术检测巨噬细胞吞噬活性。结果 (1)UCMSC组可显著改善狼疮鼠肾脏病理;(2)UCMSC移植治疗可显著提高狼疮鼠巨噬细胞的免疫调节能力,使其对CD4~+T细胞增殖的抑制能力显著增强;(3)UCMSC组狼疮鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著增强。结论 UCMSC移植治疗狼疮鼠可以改善肾脏病理损伤,UCMSC对巨噬细胞免疫调节和吞噬功能的调控是其发挥治疗作用的机制之一。     

姜黄素对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠的作用及机制研究

目的:观察姜黄素(Cur)对狼疮性肾炎(LN)的作用及其可能的机制。方法:将30只10周龄的MRL/Lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组及Cur低、高剂量组(Cur-L和Cur-H组),对照组(NC组)为C57BL/6小鼠,每组10只。Cur-L组和Cur-H组分别给予100和200 mg/kg Cur灌胃处理,NC组和MRL/lpr组灌胃等体积的生理盐水,每天1次,连续12周。检测各组小鼠的尿蛋白变化,给药结束后HE染色观察肾组织形态学变化;检测血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和血清抗双链DNA(dsDNA)水平,以及血清和肾组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot检测肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平。结果:与MRL/lpr组比较,Cur组处理后小鼠尿蛋白含量显著降低,肾损伤有一定缓解,SCr、BUN及血清抗dsDNA水平显著降低,血清和肾脏中IL-1β、IL-6及TNF-α水平显著降低,肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平也显著低于MRL/lpr组(P0.05)。结论:Cur对MRL/lpr小鼠肾脏具有一定保护作用,其机制可能与抑制NF-κB和NLRP3通路有关。     

双氢青蒿素对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾皮质Fractalkine表达的调节作用研究

目的通过研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾脏病变和肾皮质Fractalkine(FKN)、NF-κB表达的作用,并与泼尼松的作用进行比较,以探讨青蒿素治疗狼疮性肾炎的可能作用机制,试图明了双氢青蒿素对狼疮性肾炎FKN表达的调节作用。方法选取32只12周龄的雌性MRL/lpr小鼠,随机分为4组:DHA组,每天给予DHA灌胃;泼尼松组,每天给予泼尼松(prednisone,P)灌胃;DHA+泼尼松组,每天给予DHA和泼尼松灌胃;正常对照组,每天给予生理盐水灌胃;共8周。通过光镜观察肾组织病理改变,通过RT-PCR检测肾皮质FKN和NF-κB p65 mRNA的表达,免疫组织化学染色法检测肾皮质FKN及NF-κB p65蛋白的表达。结果 MRL/lpr小鼠肾皮质中检测到FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达,DHA可减少MRL/lpr小鼠的蛋白尿、改善肾功能、减轻肾脏病变。DHA下调MRL/lpr小鼠肾皮质中FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达。结论双氢青蒿素可通过调节FKN和NF-κB的表达实现其对狼疮性肾炎的治疗作用,与泼尼松联用效果更佳。     

2型糖尿病KKAy模型小鼠肾脏中TGF-β及其受体和细胞外基质蛋白表达的关系

探讨2型糖尿病动物模型KKAy小鼠肾脏细胞外基质蓄积的原因和TGF-β及其受体的关系.15只KKAy小鼠和18只C57BL/J小鼠,分成3组,分别于16、20和24周处死动物,常规测体重、肾功能、血脂和尿蛋白,取肾皮质常规切片、染色,观察肾脏病理改变.用免疫组化和免疫印迹法检测不同周龄的KKAy小鼠及参照组C57BL/J小鼠肾皮质TGF-β1及TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的表达,并用RT-PCR方法检测肾皮质细胞外基质Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白(fibronectin, FN)mRNA水平.KKAy小鼠16周龄以后便开始出现明显的肥胖、高血糖、高胰岛素血症和蛋白尿,符合2型糖尿病早期肾病特点.其FN和Ⅳ型胶原mRNA表达都比同龄参照组C57BL/J小鼠高2～4倍,其中以16周时最为显著, FN为1.53±0.46比较0.63±0.16(P＜0.001); Ⅳ型胶原为5.08±1.92比较1.21±0.25(P＜0.01).KKAy小鼠肾小球内TGF-β1及TGF-βⅠ型受体的水平明显低于C57BL/J小鼠,而Ⅱ型受体表达却高于C57BL/J小鼠.2型糖尿病KKAy小鼠早期肾病时,肾皮质细胞外基质合成增加,与TGF-βⅡ型受体表达增加有关.     

BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响北大核心CSCD

目的:探讨BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响及其治疗作用。方法:12周龄MRL/lpr小鼠分别腹腔注射JQ150 mg/(kg·d)或10%DMSO;每2周检测24 h尿蛋白定量;6周后检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、补体C3、补体C4、抗ds-DNA抗体、ANA及IgG、IgG1、IgG2a、IgM等免疫球蛋白水平;PAS染色观察肾脏组织病理学改变,免疫荧光染色观察IgG和C3免疫复合物沉积情况。利用流式细胞术检测小鼠B细胞各亚群细胞的比例;RT-qPCR检测脾脏prdm1 mRNA表达水平。结果:与DMSO组相比,JQ1治疗组小鼠24 h尿蛋白定量显著减少,血清BUN、Cr水平明显降低,补体C3、C4水平明显升高,抗ds-DNA抗体、ANA以及IgG、IgG1、IgG2a和IgM等免疫球蛋白水平明显降低;此外,JQ1治疗组小鼠肾小球、肾血管的病理损害程度均明显减轻,肾脏IgG和C3免疫复合物沉积显著减少。同时,JQ1治疗组小鼠脾脏、淋巴结、外周血B细胞中浆细胞和记忆B细胞亚群的比例显著下降;JQ1治疗亦显著抑制狼疮小鼠B细胞内调节浆细胞分化的关键转录因子prdm1 mRNA表达。结论:BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠具有显著的治疗作用,通过抑制Blimp1表达进而调节浆细胞分化可能是其发挥治疗作用的机制之一。BET蛋白可能是SLE治疗的新靶标。     

N-乙酰半胱氨酸治疗系统性红斑狼疮动物模型的疗效分析

观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)治疗系统性红斑狼疮模型小鼠MRL/lpr小鼠的疗效以及对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的修复作用。将NAC加入到8周龄MRL/lpr雌性小鼠的饮用水中,8周后处死小鼠,作为NAC治疗组;以16周龄的C57BL/6小鼠及MRL/lpr小鼠为对照组。ELISA法检测外周血抗ds-DNA抗体及抗核抗体(Antinuclear antibody,ANA)水平,BCA法检测小鼠尿蛋白浓度,HE染色观察肾脏病理。取这3组小鼠的骨髓MSC体外分离培养,免疫荧光染色观察F-actin的排列,流式细胞术观察胞内ROS水平。NAC治疗组小鼠较未治疗MRL/lpr小鼠体重显著下降(P0.01);脾脏显著减小(P0.01);外周血抗ds-DNA抗体水平显著下降(P0.05),而ANA水平有下降趋势(P0.05);肾脏病理变化有所缓解,但尿蛋白浓度无显著减少(P0.05)。NAC治疗组小鼠骨髓MSC细胞骨架F-actin的排列较MRL/lpr组整齐有序,胞内ROS水平降低(P0.01)。结果表明,NAC对MRL/lpr小鼠有一定的治疗作用,且对其骨髓MSC异常有一定修复功能。     

姜黄素对MRL/lpr狼疮鼠肾组织富含脯氨酸的酪氨酸激酶2信号转导途径表达的影响

目的 探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(PYK2)信号转导途径在MRL/lpr模型鼠狼疮肾炎中所起的作用以及姜黄素对PYK2信号转导途径活化的影响.方法 选用MRL/lpr转基因狼疮鼠为研究对象,给予姜黄素干预治疗后,采用免疫组化方法研究狼疮鼠肾脏磷酸化PYK2的组织分布情况,采用Western blot方法研究磷酸化PYK2蛋白的定量表达.结果 MRL/lpr狼疮鼠肾脏的磷酸化PYK2蛋白明显活化,给予姜黄素干预治疗后肾脏的磷酸化PYK2蛋白表达降低.结论 狼疮鼠肾脏PYK2信号转导途径的活化与狼疮肾炎的发病密切相关,姜黄素可以降低PYK2信号转导途径的表达.     

S3I-201在狼疮鼠肾小管间质病变中的作用

目的探讨STAT3信号抑制剂S3I-201在狼疮性肾炎小鼠肾小管间质病变中的作用。方法 MRL/lpr鼠随机分为狼疮肾炎组、S3I-201处理组和溶剂对照组,以MRL/Mp J鼠作为正常对照组,收集血、尿进行生化指标检测;收集肾组织后免疫组化染色检测FN蛋白的表达;Western blot法检测E-cadherin、α-SMA、MCP-1、ICAM-1及STAT3和p-STAT3的表达水平。结果与正常对照鼠相比,MRL/lpr鼠肾小管上皮细胞E-cadherin表达减少,而α-SMA表达增多,肾组织中炎症因子MCP-1和ICAM-1以及细胞外基质蛋白FN的表达上调,同时存在STAT3信号的磷酸化激活。S3I-201干预可抑制STAT3的磷酸化,同时下调E-cadherin、α-SMA、MCP-1、ICAM-1及FN的表达。结论 S3I-201可能通过抑制STAT3活化改善狼疮鼠肾小管间质病变。