重组人血管内皮抑制素联合EP方案对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的增殖抑制和促细胞凋亡作用

目的:本研究旨在评估依托泊苷(etoposide,VP-16)、顺铂(cisplatin,DDP)(EP方案)联合重组人血管内皮抑制素对小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC) NCI-H446细胞的促凋亡和抑制细胞增殖的协同作用.方法:EP方案、重组人血管内皮抑制素单药以及EP方案联合重组人血管内皮抑制素作用于NCI-H446细胞72 h后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法测定药物对NCI-H446细胞的增殖抑制作用,FCM检测药物对NCI-H446细胞的细胞周期分布的影响,ELISA法检测药物对NCI-H446细胞分泌血管内皮细胞生长因子(vascularendothelial cell growth factor,VEGF)水平的影响.结果:EP方案联合重组人血管内皮抑制素的细胞增殖抑制率明显高于EP方案组(P＜0.01).EP方案组和EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞大多被阻滞于G1期,EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞凋亡率显著高于EP方案组(P＜0.01).与EP方案和重组人血管内皮抑制素单药相比,EP方案联合重组人血管内皮抑制素可显著抑制NCI-H446细胞分泌VEGF(P＜0.05).结论:EP方案联合重组人血管内皮抑制素在抑制SCLC NCI-H446细胞增殖和促细胞凋亡方面,具有协同作用.     

重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪增强抗黑素瘤作用及其机制研究

目的:探讨重组人血管内皮抑制素(recombinant human endostatin, rh-endostatin)联合达卡巴嗪(Dacarbazine)能否增强抗黑素瘤作用,并初步分析其作用机制.方法:分别采用MTT法和FCM法检测重组人血管内皮抑制素单药及其联合达卡巴嗪对黑素瘤B16F10细胞增殖和凋亡的影响;Western印迹法检测重组人血管内皮抑制素对黑素瘤细胞中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)磷酸化的影响;建立C57BL/6黑素瘤荷瘤小鼠模型,研究重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪能否增强体内抗黑素瘤的作用.结果:重组人血管内皮抑制素、达卡巴嗪以及两药联合处理对黑素瘤B16F10细胞增殖的抑制率分别为(9.67±2.89)%、(22.67±3.06)%和(30.33±1.16)%,差异有统计学意义(P<0.05);重组人血管内皮抑制素组黑素瘤细胞的ERK分子磷酸化水平明显降低.接种肿瘤18 d时,重组人血管内皮抑制素组、达卡巴嗪组和两药联合组荷瘤小鼠的肿瘤体积分别为(6.45±1.24)cm3、(8.94±2.04)cm3和(4.56±0.98)cm3,两药联合组的肿瘤体积明显低于达卡巴嗪单药组(P<0.05).结论:重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪体外可增强抗黑素瘤B16F10细胞增殖的作用,体内可增强达卡巴嗪对荷瘤小鼠黑素瘤生长的抑制作用,并提高荷瘤小鼠的存活率.推测抑制黑素瘤细胞中ERK分子酪氨酸磷酸化可能是重组人血管内皮抑制素发挥其抗黑素瘤作用的机制之一.     

重组人血管内皮抑制素联合贝伐珠单抗体内抑瘤作用的效果及分析

背景与目的研究重组人血管内皮抑制素和贝伐珠单抗在体内对肺腺癌抑制作用的差别及联合用药的效果。方法首先建立A549肺腺癌细胞系的荷瘤Balb/c小鼠动物模型,然后将小鼠随机分为4组,对照组使用普通生理盐水每日瘤周注射。重组人血管内皮抑制素治疗组使用重组人血管内皮抑素(3mg/kg)每日瘤周注射连续16天贝伐珠单抗治疗组使用贝伐珠单抗(5mg/kg)每周两次瘤周注射给药。贝伐珠单抗、重组人血管内皮抑制素联合用药组使用贝伐珠单抗(5mg/kg)每周两次瘤周注射给药+重组人血管内皮抑素(3mg/kg)每日瘤周注射给药。治疗16天后处死所有实验鼠切取肿瘤标本比较实体瘤大小,采用Westernblot的方法检测血管内皮生长因子A和C(vascularendothelialgrowthfactor/VEGF-A,C)在各组表达情况的差异。结果重组人血管内皮抑制素和贝伐珠单抗在体内实验中均表现出了抑制肿瘤生长的作用,贝伐珠单抗作用更加明显(52.36%vs38.68%)。联合使用可获得更好的效果(64.15%)。贝伐珠单抗只对VEGF-A有抑制作用(60.8%),重组人血管内皮抑制素对VEGF-A/C都有抑制作用(14.6%,30.3%)。联合用药组对VEGF-A/C的抑制作用最强(79.4%,44.2%)。结论重组人血管内皮抑制素和贝伐珠单抗都在裸鼠动物模型试验中表现出了明显的抑瘤效果,联合使用抑制肿瘤效果更加明显。恩度对肿瘤组织内VEGF-A/C都表现出了抑制作用贝伐珠单抗对VEGF-A表现出了较明显的抑制作用联合用药组对VEGF-A/C抑制作用更加明显。     

3天持续静脉泵注重组人血管内皮抑制素联合方案治疗实体瘤的不良反应观察与分析

目的 观察与评估3天持续静脉泵注重组人血管内皮抑制素联合方案治疗实体瘤期间不良反应的发生情况.方法 设计不良反应观察与记录表格,对接受3天持续静脉泵注重组人血管内皮抑制素联合方案治疗的127例实体瘤患者治疗期间的不良反应进行观察与记录,计算不良反应发生率.结果 127例实体瘤患者中,92例(72.44％)接受重组人血管内皮抑制素联合化疗方案,26例(20.47％)接受重组人血管内皮抑制素联合化疗+程序性死亡受体1(PD-1)单抗方案,4例(3.15％)接受重组人血管内皮抑制素单药方案,5例(3.94％)接受重组人血管内皮抑制素联合PD-1单抗方案.血液学不良反应发生率为21.26％(27例),其中白细胞减少3.94％(5例),血小板减少2.36％(3例),贫血14.96％(19例);非血液学不良反应发生率为59.06％(75例),其中心肌酶异常3.15％(4例),心悸1.57％(2例),出血3.15％(4例),转氨酶异常22.05％(28例),肾功能异常6.30％(8例).3级血液学不良反应发生率为2.36％(3例),2级和3级转氨酶异常发生率分别为7.87％(10例)和1.57％(2例).结论 3天持续静脉泵注重组人血管内皮抑制素联合治疗方案,不良反应可控,安全性可接受.非预期的转氨酶异常与3天持续静脉泵注重组人血管内皮抑制素的相关性需进一步评估.     

阿霉素联合重组人血管内皮抑制素对人骨肉瘤细胞OS-732作用的体外实验研究

目的确定阿霉素和重组人血管内皮抑制素两种药物联合对人骨肉瘤细胞的体外作用。方法阿霉素、重组人血管内皮抑制素及两药联用处理人骨肉瘤细胞OS-732,分别在24h、72h及144h应用MTT法测定其细胞毒性,同时用倒置相差显微镜观察细胞形态学改变。结果在阿霉素10μg/ml和100μg/ml作用72h和144h后,细胞增殖活性受抑制率达到50%以上,重组人血管内皮抑制素在第72h时对骨肉瘤细胞抑制率为7.3%～9.2%,联合用药组细胞增殖活性与阿霉素单药组无显著性差异。阿霉素和联合用药组细胞均发生细胞变小,核碎裂,失去细胞正常形态,而重组人血管内皮抑制素单药组细胞形态与对照组相似。结论重组人血管内皮抑制素仅在给药后短期内对人骨肉瘤细胞有轻度的抑制作用,重组人血管内皮抑制素不影响阿霉素对骨肉瘤细胞的细胞毒作用。     

腔内应用重组人血管内皮抑制素联合铂类治疗恶性胸腹腔积液疗效及安全性的Meta分析

目的 采用Meta分析方法评价腔内应用重组人血管内皮抑制素联合铂类治疗恶性胸腹腔积液的疗效及安全性.方法 计算机检索The Cochrane Library、PubMed、Embase、CBM、CNKI、维普及万方数据库.对符合纳入标准的研究进行方法学质量评价,并采用RevMan 5.3版软件进行Meta分析.结果 共纳入20项研究,包括1571例恶性胸腹腔积液患者.Meta分析结果显示,与胸腹腔灌注铂类单药治疗相比,腔内应用重组人血管内皮抑制素联合铂类治疗可以提高恶性胸腹腔积液的完全缓解率(OR=2.34,95％CI:1.78～3.07,P﹤0.01)、部分缓解率(OR=1.75,95％CI:1.41～2.18,P﹤0.01)、总有效率(OR=3.30,95％CI:2.65～4.11,P﹤0.01),并改善患者的生活质量(OR=2.55,95％CI:1.81～3.61,P﹤0.01).不良反应方面,与胸腹腔灌注铂类单药治疗相比,腔内应用重组人血管内皮抑制素联合铂类治疗并未增加恶性胸腹腔积液患者胃肠道反应、骨髓抑制、肝功能异常及心率异常的发生率(P﹥0.05).结论 腔内应用重组人血管内皮抑制素联合铂类治疗恶性胸腹腔积液可以提高治疗有效率,改善患者的生活质量,同时并未增加治疗相关不良反应.     

恩度联合尼莫司汀治疗复发脑胶质瘤的临床观察

血管内皮抑制素（Endostatin）能特异性的抑制内皮细胞的增殖及血管生成,使肿瘤处于休眠状态,从而抑制肿瘤生长。重组人血管内皮抑制素（Endostar,恩度）是我国学者自主研发的新型人血管内皮抑制素,Ⅰ、Ⅱ期临床研究结果证实该药单药应用有效,且恩度与化疗联合可能具有协同作用,因此我们选择恩度联合尼莫司汀治疗复发脑胶质瘤,取得良好的效果,现报告如下。     

重组人血管内皮抑制素联合顺铂腔内化疗治疗非小细胞肺癌合并恶性胸腔积液临床观察

目的 观察重组人血管内皮抑制素联合顺铂(DDP)腔内化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)合并恶性胸腔积液的疗效和安全性.方法 将60例NSCLC合并恶性胸腔积液患者随机分为2组,每组30例,排尽胸腔积液后,分别给予DDP 60 mg联合重组人血管内皮抑制素60 mg(治疗组)及单独DDP 60 mg(对照组)腔内化疗.结果 治疗组有效率为53.33%,对照组为26.67%,比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗组生活质量改善率为73.33%,对照组改善率为56.67%,比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗组毒副反应与对照组相近,未明显增加.结论 重组人血管内皮抑制素联合DDP腔内化疗治疗NSCLC合并恶性胸腔积液安全有效.     

血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响

目的:探讨血管内皮抑制素的不同给药方法对A549肺癌细胞、脐静脉血管内皮细胞及BALB/c裸鼠移植瘤生长的影响。方法:用不同浓度的血管内皮抑制素作用于A549细胞及脐静脉血管内皮细胞,用MTT法检测其对细胞增殖的影响;构建BALB/c裸鼠A549移植瘤模型,观察不同给药方法下肿瘤体积、重量的变化;应用免疫组化法检测肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达差异。结果:在各组不同浓度的血管内皮抑制素作用下,A549细胞增殖能力并未随抑制素浓度的增加而降低,仅在浓度为1μg/ml时与对照组有差异(P<0.05);脐静脉血管内皮细胞增殖能力与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。在体内实验中,单独使用血管内皮抑制素及血管内皮抑制素联合顺铂治疗,各实验组肿瘤体积较对照组均有不同程度的缩小(P<0.05),联合用药疗效优于单用血管内皮抑制素;单独使用血管内皮抑制素时隔日给药肿瘤抑制率最高(50.74%),联合用药3周(血管内皮抑制素1次/日+顺铂1次/周)抑瘤效果最好(96.41%);免疫组织化学结果显示各实验组肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达均下降(P<0.05)。结论:血管内皮抑制素在体外浓度为1μg/ml时对A549细胞生长有抑制作用,而对脐静脉内皮细胞生长没有明显抑制作用。血管内皮抑制素与顺铂联合使用较单独使用的抑瘤效果明显。血管内皮抑制素联合化疗时,每日连续给药抑瘤效果更好。     

重组人血管内皮抑素对鼻咽癌细胞系及其裸鼠移植瘤的放射增敏研究

近年肿瘤的抗血管生成治疗研究较多,但抗血管生成与放射联合治疗恶性肿瘤的研究较少[1].为此进行重组人血管内皮抑制素(恩度)对鼻咽癌细胞系及裸鼠皮下鼻咽癌移植瘤的放射增敏效应研究.     

内皮抑素联合微波消融治疗裸鼠肾癌移植瘤研究

目的研究内皮抑素联合微波消融对裸鼠肾癌移植瘤的抑制作用。方法将人源性肾癌细胞接种到48只小鼠的背部皮下,肿瘤直径约1.5 cm时随机分成4组,对照组：隔日尾静脉生理盐水;联合治疗组：隔日尾静脉推注内皮抑素＋皮下肿瘤微波消融;微波消融组：皮下肿瘤微波消融;内皮抑素组：隔日尾静脉推注内皮抑素。首先对联合治疗组及微波消融组局部皮下肾移植瘤进行微波消融治疗,其后经尾静脉注射药物。14天后每组处死6只小鼠,比较各组瘤重,计算抑瘤率,检测血浆VEGF浓度,剩余6只小鼠观察其存活期。结果联合治疗组小鼠肿瘤体积显著小于其他各组（P〈0.0 5）,其血浆VEGF水平较其他各组显著减低（P〈0.0 5）,存活时间较其他各组显著延长（P〈0.05）。结论内皮抑素联合微波消融抗肿瘤作用优于单用内皮抑素或微波消融治疗,并使小鼠存活期延长。     

重组人血管内皮抑素联合常规化疗、体部立体定向放疗治疗局部晚期胰腺癌的临床观察

目的 观察重组人血管内皮抑素联合常规化疗、体部立体定向放疗治疗局部晚期胰腺癌的有效性和安全性.方法 64例不能手术切除的局部晚期胰腺癌患者接受体部立体定向放疗、吉西他滨+顺铂化疗、重组人血管内皮抑素靶向治疗.治疗后评价疗效和毒副反应.结果 治疗后3个月全组总有效率为73.4%(47/64),生活质量改善率达到78.1%(50/64).全组患者出现的Ⅲ~Ⅳ度毒副反应主要是白细胞减少(4.7%)、血小板减少(7.8%)及恶心呕吐(6.2%),主要与化疗有关.未出现治疗相关性死亡.结论 重组人血管内皮抑素联合吉西他滨+顺铂化疗、体部立体定向放疗治疗局部晚期胰腺癌患者近期疗效较好,毒副反应可耐受,且能提高患者的生存质量,是治疗局部晚期胰腺癌较好的方法.     

重组人血管内皮抑制素联合放化疗治疗肺癌临床研究

目的:观察重组人血管内皮抑制素(恩度)联合放化疗治疗肺癌的近期疗效及毒副反应。方法:经病理学确诊的肺癌患者16例,平均年龄57.2岁,接受恩度治疗同时联合NP、GP或EC方案的全身化疗及体部伽玛刀治疗,其中恩度治疗2-7个周期,平均3.3个周期,非小细胞癌患者化疗用NP、GP方案,小细胞癌患者用CE方案,每组患者均完成2-6个周期化疗,平均2.8个周期。体部伽玛刀治疗局部病灶3.3Gy-4.3Gy/次,共10-12次,靶区总剂量36Gy-46Gy。按照RECIST标准评价近期疗效,参照Karnofsky评分标准(KPS)评价生活质量(QOL)。结果:全组16例患者近期疗效:CR 3例,PR 9例,SD 3例,PD 1例。临床有效率(CR+PR)75%(12/16)。疾病控制率(DCR)94%(15/16)。生活质量评价6例QOL改善,7例QOL稳定,3例患者出现QOL下降。毒副反应较轻,经对症处理均可缓解。结论:恩度与放化疗联合治疗肺癌疗效较好。具有协同作用,安全性亦较好,毒副作用可以耐受。     

恩度联合化疗药物治疗恶性胸腹腔积液的临床观察

目的 观察胸膜腔及腹腔内注入重组人血管内皮抑素(恩度)联合化疗药物治疗癌性胸腹水的疗效及安全性.方法 46例晚期癌性胸、腹水患者,其中实验组23例分别在胸膜腔或腹腔内注入恩度30mg-60mg和化疗药物(胸水者予以DDP 60mg+IL-2 200万U或BLM 60mg+IL-2 200万U;腹水者予以DDP 60mg+5-FU 1.0+ IL-2 200万U)治疗,对照组23例仅在胸膜腔或腹腔内注入化疗药物(胸水者予以DDP 60mg+IL-2 200万U或BLM 60mg+IL-2 200万U;腹水者予以DDP 60mg+5-FU 1.0+ IL-2 200万U)治疗,每7天一次连续给药2-4次,参照RECISE非靶病灶评价方法和WHO毒性反应分级标准,评价客观疗效及不良反应,并由KPS评分变化情况评价患者的生活质量改善.结果 实验组23例患者CR 8 例、PR 9例、NC 6例,有效率73.1%,对照组23例患者CR 6 例、PR 7例、NC 10例,有效率55.6%,两组差异有统计学意义P<0.05;实验组患者QOL改善稳定率为82.6%;对照组患者QOL改善率73.9%;两组差异有统计学意义P<0.05.结论 胸膜腔、腹腔内注入恩度和化疗药物治疗癌性胸腹水有较高的疗效且不良反应少.     

重组人血管内皮抑素联合肝动脉化疗栓塞治疗结直肠癌术后肝转移的临床应用

目的探讨重组人血管内皮抑素联合肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗结直肠癌术后肝转移的临床疗效与安全性。方法 32例结直肠癌术后肝转移患者分为治疗组和对照组,治疗组采用重组人血管内皮抑素联合TACE治疗,对照组常规TACE治疗,两次治疗间隔1月。3周期后,按照RECIST标准评价疗效,观察Karnofsky评分(KPS)、CEA表达水平变化情况,对相关数据进行统计学分析。结果两组术后均无CR患者,治疗组在治疗效果、K氏评分明显好于对照组,CEA表达水平与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。不良反应与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人血管内皮抑素联合肝动脉化疗栓塞治疗结直肠癌术后肝转移可以改善患者K氏评分,提高治疗有效率及疾病控制率,且不良反应小,安全性好,长期结果有待进一步观察。     

重组人血管内皮抑制素联合放化疗治疗宫颈癌研究进展

宫颈癌是全球女性最常见恶性肿瘤之一, 局部晚期宫颈癌的治疗以放化疗为主, 存在复发率高、生存率低等问题。贝伐珠单抗为一种作用于血管内皮生长因子的血管生成抑制剂, 在2013年被美国国立综合癌症网络指南推荐用于复发/转移性晚期宫颈癌的一线治疗。近年来, 内皮抑制素等新型血管生成抑制剂靶向药物的研发, 进一步优化了局部晚期及晚期宫颈癌患者的靶向治疗新策略。重组人血管内皮抑制素(恩度, endostar)为中国科学家自主研发的一种新型抗血管生成药, 虽然已有研究将其应用于宫颈癌治疗, 但其是否能成为宫颈癌靶向治疗的新选择, 尚需高级别的循证医学证据进一步证实。本文对恩度联合放疗和/或化疗方案的综合治疗模式治疗宫颈癌的临床研究做一综述, 为宫颈癌治疗策略的优化提供参考。     

重组人血管内皮抑制素联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌

 【摘要】　目的　评价重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度）联合吉西他滨加顺铂（GP）方案治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效和安全性。方法　采用非随机同期对照的方法,以接受重组人血管内皮抑制素联合化疗的NSCLC患者32例为试验组,单纯GP方案化疗者40例为对照组。比较两组有效率（RR）、临床受益率（CBR）、肿瘤进展时间（TTP）、生活质量（QOL）及安全性。结果　试验组和对照组的总RR分别为40.6 %（13／32）和 20.0 %（8／40）,差异无统计学意义（χ2＝3.66,P＝0.07）,总 CBR分别为68.8 %（22 ／32）和42.5 %（17／40）,差异有统计学意义（χ2＝4.93,P＝0.034）,总的中位TTP分别为 5.2个月和3.9个月,差异有统计学意义（P＝0.042）。试验组与对照组不良反应的发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　重组人血管内皮抑制素联合 GP方案能明显提高晚期NSCLC的RR、CBR及中位TTP,安全性好,具有较好的临床应用前景。     

Endostatin improves radioresponse and blocks tumor revascularization after radiation therapy for A431 xenografts in mice

PURPOSE: Clinical trials of antiangiogenic agents used alone for advanced malignancy have been disappointing but preclinical studies suggest that the addition of radiation therapy could improve antitumor efficacy. To test the hypothesis that antiangiogenic therapy combined with radiation therapy can overcome the limitations of antiangiogenic monotherapy, we studied the effects of endostatin combined with radiation on the growth and vascularization of A431 human epidermoid carcinomas growing intramuscularly in the legs of mice. METHODS AND MATERIALS: Mice with established A431 human epidermoid leg tumors were treated with radiation, endostatin, both radiation and endostatin, or vehicle control. The experiment was repeated and mice from each group were killed at 2, 7, and 10 days after irradiation so that tumor tissue could be obtained to further analyze the kinetics of the antitumor, antivascular, and antiangiogenic response to therapy. RESULTS: Endostatin enhanced the antitumor effects of radiation, and prolonged disease-free survival was observed in the combined treatment group. Endothelial cell proliferation was increased in tumors after irradiation but was blocked by the concurrent administration of endostatin, and the combination of endostatin with radiation enhanced endothelial cell apoptosis within 48 h after irradiation. Expression of vascular endothelial growth factor, interleukin-8, and matrix metalloproteinase-2 were increased in tumors after irradiation, and this increase was blocked by concurrent administration of endostatin. CONCLUSION: These data indicate that endostatin can block tumor revascularization after radiation therapy and thereby augment radioresponse.     

Adeno-associated virus-mediated delivery of a mutant endostatin in combination with carboplatin treatment inhibits orthotopic growth of ovarian cancer and improves long-term survival

A human ovarian cancer cell line, which migrates to mouse ovaries and establishes peritoneal carcinomatosis, was used to evaluate the cooperative effect of an antiangiogenic gene therapy combined with chemotherapy. The ovarian carcinoma cell line MA148 was genetically modified by "Sleeping Beauty" transposon-mediated delivery of DsRed2 fluorescent protein. Stable, high-level expression of DsRed protein enabled in vivo imaging of peritoneal dissemination of ovarian cancer. Both external and internal imaging, along with histopathology, showed migration of i.p. injected human ovarian cancer cell line to mouse ovaries. Using this model, we evaluated the effect of adeno-associated virus (AAV)-mediated expression of a mutant endostatin either alone or in combination with carboplatin treatment. A single i.m. injection of recombinant AAV (rAAV)-mutant human endostatin with P125A substitution (P125A-endostatin) showed sustained expression of mutant endostatin. Antiangiogenic gene therapy inhibited orthotopic growth of ovarian cancer and resulted in 33% long-term tumor-free survival. A single cycle of carboplatin treatment combined with mutant endostatin gene therapy resulted in 60% of the animals remaining tumor free for >200 days, which was significantly better than rAAV-LacZ and/or carboplatin. Combination treatment delayed tumor appearance in 40% of the animals, wherein the residual tumors were smaller in size with limited or no peritoneal metastasis. These studies suggest that AAV-mediated gene therapy of P125A-endostatin in combination with carboplatin is a useful method to inhibit peritoneal dissemination of ovarian carcinoma.