L-亮氨酸对人类胎盘碱性磷酸酶的抑制

①目的确定Ｌ－亮氨酸（Ｌ－Ｌｅｕ）对人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）的抑制类型，并探讨其抑制机理。②方法应用分光光度法分别测定有Ｌ－Ｌｅｕ和无Ｌ－Ｌｅｕ存在下的酶活力，根据其活力变化求出酶的相对活力；用双倒数作图法，确定Ｌ－Ｌｅｕ对ＰＬＡＰ的抑制类型并求出其抑制常数（Ｋｉ）；同时也观察了ｐＨ对抑制作用的影响。③结果Ｌ－Ｌｅｕ对ＰＬＡＰ有明显地抑制作用，抑制程度与ｐＨ有关；双倒数作图得到一组平行线，Ｋｉ为１．９８ｍｍｏｌ／Ｌ．④结论Ｌ－Ｌｅｕ是ＰＬＡＰ的反竞争性抑制剂，其抑制作用受ｐＨ的影响     

五氯酚对人类胎盘碱性磷酸酶的抑制

（１）目的：探讨五氯酚（ＰＣＰ）对人类胎盘碱性碱酸酶（ＰＬＡＰ）的作用，为ＰＣＰ中毒的防治提供理论依据。（２）方法：应用比色法分别测定有ＰＣＰ和无ＰＣＰ存在下ＰＬＡＰ的酶活力，根据其活力变化求出酶的相对活力；用双倒数作图法，确定ＰＣＰ对ＰＬＡＰ的抑制类型并求其抑制常数（Ｋ１）（３）结果：ＰＣＰ的存在抑制下了酶活力，当ＰＣＰ的浓度在６ｍｍｏｌ／Ｌ之内，随其浓度的增加而酶活力逐渐降低，当ＰＣＰ的浓度为     

铅对人类胎盘碱性磷酸酶活力与构象的影响

目的研究铅对人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）的作用，以探讨铅影响胎儿发育的分子机制。②方法应用分光光度法测定不同浓度Ｐｂ（ＮＯ３）２存在下的ＰＬＡＰ活力，用荧光法检测其荧光光谱的变化；用双倒数作图法确定Ｐｂ（ＮＯ３）２对该酶的抑制类型。③结果低浓度的Ｐｂ（ＮＯ３）２（＜０．５０ｍｍｏｌ／Ｌ）对酶活力无明显影响，但其内源荧光强度略有增加，发射峰位蓝移；当Ｐｂ（ＮＯ３）２的浓度为０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ时，酶活力及其荧光强度均迅速下降；当Ｐｂ（ＮＯ３）２浓度＞０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ时，随其浓度的增加，酶活力与其荧光强度逐渐降低，但发射峰位蓝移减少；当Ｐｂ（ＮＯ３）２浓度为１０．００ｍｍｏｌ／Ｌ时，酶活力丧失，荧光熄灭。Ｐｂ（ＮＯ３）２是ＰＬＡＰ的反竞争性抑制剂，其抑制常数为１．４０ｍｍｏｌ／Ｌ．④结论Ｐｂ（ＮＯ３）２抑制了ＰＬＡＰ的活力，并使其构象发生了改变，这可能是铅影响胎儿发育的重要分子机制之一。     

五氯酚对人类胎盘碱性磷酸酶的抑制

①目的 探讨五氯酚(PCP)对人类胎盘碱性磷酸酶(PLAP)的作用,为PCP中毒的防治提供理论依据。②方法 应用比色法分别测定有PCP和无PCP存在下PLAP的酶活力,根据其活力变化求出酶的相对活力;用双倒数作图法,确定PCP对PLAP的抑制类型并求其抑制常数(K_1)。③结果PCP的存在抑制了酶活力。当PCP的浓度在6mmol/L之内,随其浓度的增加而酶活力逐渐降低;当PCP的浓度为6mmol/L时,酶的相对活力为52.4%．PCP是PLAP的非竞争性抑制剂,其K_1为3.49mmol/L.④结论PCP对PLAP有抑制作。     

何杰金病单克隆抗体免疫组化研究

应用标记Ｒ－Ｓ细胞、Ｂ淋巴细胞和Ｔ淋巴细胞的５种单克隆抗体ＬｅｕＭ１、ＢｅｒＨ２、ＬＣＡ、Ｌ２６和ＵＣＨＬ１对４３例何杰金病的石蜡标本进行了免疫组织化学染色，以Ｔ、Ｂ细胞淋巴瘤各１５例作对照研究。结果：非淋巴细胞为主型何杰金病的Ｒ－Ｓ细胞对ＬｅｕＭ１的阳性率为６４．３％，对ＬＣＡ、Ｌ２６和ＵＣＨＬ１呈阴性反应；而非何杰金淋巴瘤，ＬｅｕＭ１仅偶在Ｔ细胞淋巴瘤呈阳性（６．７％），ＬＣＡ、Ｌ２６和ＵＣＨ     

汞对人类胎盘碱性磷酸酶活力与荧光光谱的影响

目的研究汞对人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）活力及其荧光光谱的影响,以探讨汞对ＰＬＡＰ抑制的分子机制。②方法应用分光光度法测定不同浓度ＨｇＣｌ２存在下的酶活力,用荧光法检测其荧光光谱;用双倒数作图法确定ＨｇＣｌ２对该酶的抑制类型。③结果当ＨｇＣｌ２浓度为０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ时,酶活力及其荧光强度迅速下降,最大发射峰位由３４７ｎｍ蓝移至３４０ｎｍ;ＨｇＣｌ２浓度为０．２５～１．００ｍｍｏｌ／Ｌ时,酶活力、荧光强度及峰位均无显著变化;当ＨｇＣｌ２浓度＞１．００ｍｍｏｌ／Ｌ时,随其浓度增加,酶活力和荧光强度又快速下降,但峰位不变;ＨｇＣｌ２浓度高达１０．００ｍｍｏｌ／Ｌ时,酶仍有部分活力。ＨｇＣｌ２是ＰＬＡＰ混合性抑制剂,其抑制常数为３．６０ｍｍｏｌ／Ｌ．④结论ＨｇＣｌ２抑制了ＰＬＡＰ的活力,并使其构象发生了改变。     

不平衡支链氨基酸对胃癌细胞体外增殖和化疗敏感性的影响

在不含缬氨酸（Ｌ－Ｖａｌ）的ＭＥＭ培养基基础上，以普通ＭＥＭ培养基Ｌ－Ｖａｌ（４６ｍｇ／Ｌ）和亮氨酸（Ｌ－Ｌｅｕ）含量（５２ｍｇ／Ｌ）为准，配制１２种限制Ｌ－Ｖａｌ，增加Ｌ－Ｌｅｕ的不平衡支链氨基酸培养基，用ＭＴＴ法观察其对胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１体外增殖的影响和对该细胞株化疗药物敏感性的影响。结果表明，限制Ｌ－Ｖａｌ至正常的１／４对ＳＧＣ－７９０１细胞即有明显的抑制作用（Ｐ〈０．０１），随着Ｖ     

天冬氨酸激酶的部分提纯和特性研究

研究了Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ菌的天冬氨酸激酶（下简称为Ａｓｐ激酶）的部分纯化和某些特性。由于使用了添加硫酸铵和天冬氨酸的磷酸缓冲液，成功地获得了纯度较高、比活力提高１０～１５倍的Ａｓｐ激酶。当硫酸铵以０．１～０．８Ｍ浓度添加时，对酶活性的促进作用最强。对照研究了一些氨基酸对脱盐酶液和Ｇ－２００酶液的不同影响，在５２４菌株种子培养时，以２０小时种龄，２５０ｍｌ／Ｌ装量，激酶的比活力最高；发酵培养时，２３小时后酶活力开始明显下降，但可随尿素的添加而回升。Ａｓｐ激酶的动力学常数是：ＫＡＳＰ为２０１．４ｍＭ；ＫＡＴＰ为３６．４ｍＭ；最适ｐＨ为９．０－９．５；Ｌ－苏氨酸Ｌ－苏氨酸＋Ｌ－赖氨酸对该酶的抑制，与ＡＳＰ是竞争性的，而与ＡＴＰ则是混合性的。     

人肝癌细胞分化过程中各项生化指标改变的研究

研究探讨人肝癌细胞分化过程中生化指标的变化。方法：用丁酸钠处理Ｂｅｌ－７４０２人肝癌细胞，测定甲胎蛋白，γ－谷氨酰转肽酶，醛缩酶，酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶，碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的比活性变化，并观察细胞增殖速度改变。结果；２．５ｍｍｏｌ／Ｌ和５ｍｍｏｌ／ＬＳＢ处理后，Ｂｅｌ－７４０２细胞增殖明显抑制，ＡＦＰ分泌量明显低于对照组细胞，反映肝细胞癌变标志酶ＧＴ和ＡＬＤ比活力也明显降低，而反映肝细胞要     

何杰金病单克隆抗体免疫组化研究

应用标记Ｒ－Ｓ细胞、Ｂ淋巴细胞和Ｔ淋巴细胞的５种单克隆抗体ＬｅｕＭ_１、ＢｅｒＨ_２、ＬＣＡ、Ｌ_（２６）和ＵＣＨＬ_１对４３例何杰金病（ＨＤ）的石蜡标本进行了免疫组织化学染色，以Ｔ、Ｂ细胞淋巴瘤各１５例作对照研究。结果：非淋巴细胞为主型何杰金病（ｎｏｎＬＰＨＤ）的Ｒ－Ｓ细胞对ＬｅｕＭ_１的阳性率为６４．３％，对ＬＣＡ、Ｌ_（２６）和ＵＣＨＬ_１呈阴性反应；而非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ），ＬｅｕＭ_１仅偶在Ｔ细胞淋巴瘤中呈阳性（６．７％），ＬＣＡ、Ｌ_（２６）和ＵＣＨＬ_１标记ＮＨＬ、Ｂ－ＮＨＬ和Ｔ－ＮＨＬ阳性率分别是８３．３％、７３．３％和６６．７％。因此，在石蜡切片上联合应用ＬｅｕＭ１、ＬＣＡ、Ｌ_（２６）和ＵＣＨＬ_１对鉴别ＨＤ与ＮＨＬ有重要的参考价值。淋巴细胞为主型何杰金病（ＬＰＨＤ）的Ｒ－Ｓ细胞对ＬＣＡ和Ｌ_（２６）的阳性率为５３．３％和６０％，ｎｏｎＬＰＨＤ中Ｒ－Ｓ细胞对ＢｅｒＨ_２的阳性率为２１．４％。提示ＬＰＨＤ的Ｒ－Ｓ细胞来源于Ｂ淋巴细胞，ｎｏｎＬＰＨＤ的Ｒ－Ｓ细胞可能与活化的淋巴细胞有关。     

血清LDL－VLDL－GGT测定178例临床分析

用速率法测定了１７８例血清低密度脂蛋白－极低密度脂蛋白结合的γ谷氨酰转肽酶（ＬＤＬ－ＶＬＤＬ－ＧＧＬ）的活力，结果表明该酶活力肝癌组与其余各组间比较有极显著性差异（Ｐ＜０．０１），提示血清ＬＤＬ－ＶＬＤＬ－ＧＧＴ活力测定对肝癌的鉴别诊断有一定的价值。     

寿春胶囊降脂及抗脂质过氧化反应的实验研究

寿春胶囊对高脂血症模型大鼠的脂质代谢及其脂质过氧化反应影响的实验表明，寿春胶囊能明显降低高脂大鼠血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）及低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃ）的含量，升高血清高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ｃ）的水平及ＨＤＬ－ｃ／ＴＣ的比值，降低动脉硬化指数（ＡＩ）值；抑制血清和肝中过氧化脂质（ＬＰＯ）的生成，增强血液中超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）的活力，提示寿春胶囊具有降低血脂、预防动脉粥样硬化的作用。     

吡喹酮代谢的特异抑制剂一硝苯吡啶及有关细胞色素P450同功酶的探讨

硝苯吡啶（Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ，ＮＦ）在人肝徽粒体内对（－）－和（＋）－ＰＱＴ的代谢均有竞争性抑制作用，抑制原药消除的Ｋｉ分别为１．４和６．１μｍｏｌ／Ｌ有明显立体选择性，抑制（－）－ＰＱＴＭＩ生成的Ｋｉ为１．５μｍｏｌ／Ｌ；在大鼠肝微粒体内，ＮＦ对（－）－ＰＱＴ代谢的抑制作用远比在人肝微粒体内弱，其抑制（－）－和（＋）－ＰＱＴ原药消除的Ｋｉ分别为１１．６和１０μｍｌ／Ｌ，抑制（－）－ＰＱＴ代谢物生成的Ｋｉ为１０μｍｏｌ／Ｌ。然而，ＮＦ在人肝微粒体内对美多洛尔α－羟化酶和乙基吗啡Ｎ－脱甲基酶几乎无抑制作用，对７－乙氧基香豆素Ｏ－脱乙基酶仅有较弱的抑制作用，说明ＮＦ是ＰＱＴ特别是（－）－ＰＱＴ代谢的特异抑制剂。     

产核苷磷酸化酶大肠杆菌的培养及2‘—脱氧—5—氟尿苷的酶法…

研究了产核苷磷酸化酶大肠杆菌的摇瓶培养和发酵罐培养特征以及乙酸盐和底物诱导对核苷磷酸化酶活力的影响。结果表明：摇瓶培养时，延长菌体培养时间，菌体部分自溶时酶的转化率最高；发酵培养基中加入１０ｇ／Ｌ乙酸钠可使底物转化率提高７．７％，０．００１ｇ／Ｌ的底物ｄＵ诱导可使酶活力提高１１．０％；流加底物ｄＵ对酶反应转化率无显著影响，表明该酶促反应为非２＇－脱氧尿苷底物抑制型；反应过程存在扩散控制，酶反应的最     

用BOC-Leu-Ser-Thr-Arg-pNA建立前激肽释放酶活性测定法

作者发现发色底物ＢＯＣ－Ｌｅｕ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－ｐＮＡ对激肽释放酶具有良好的敏感性和特异性。它受激肽释放酶作用的Ｋｍ和Ｖｍａｘ。分别为２３５ｐｍｏｌ·Ｌ－１和３３７ｎｍｏｌ（ＰＮＡ）·Ｓ－１·Ｕ－１（ｋＫ）；抑制试验显示，该底物对ＡＴ－Ⅲ和ＬＢＴＩ不敏感，用作激肽释放酶测定的回收率为９７．２％～１０２．ｌ％，ＣＶ值２．３％～４．６％。用它建立了血浆激肽释放酶活性测定法，标准曲线线性甚佳，线性范围６．２５％～３００．０％（激肽释放酶活性）．测得健康人、妊娠妇女、肝功能衰竭病人和晚期癌症病人的血浆前激肽释放酶活性分别为１１３．９％，１４５．７％，４０．０％和９０．０％。作者认为，发色底物ＢＯＣ－Ｌｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－ｐＮＡ是ＰＫ（ＫＫ）活性测定的良好底物，建立的ＰＫ活性测定法简便、快速、敏感、可靠，实用价值大。     

穿心莲有效成分API_0134抗血小板聚集的机理

ＡＰＩ０１３４是一种新的穿心莲有效成分，为黄酮类化合物。体外研究证实ＡＰＩ０１３４能有效地抑制ＡＤＰ诱导的人血小板聚集，其半抑制浓度（ＩＣ５０）为７０ｇ／ｍｌ；ＡＰＩ０１３４能强烈的抑制钙调蛋白（ＣａＭ）的活力，ＩＣ５０为３４ｇ／ｍｌ，但其对ＣａＭ依赖性磷酸二酯酶（ＰＤＥ－Ｉ）的基础活力无影响。在浓度增高时ＡＰＩ０１３４也能抑制ＣａＭ不依赖性磷酸二酯酶（ＰＤＥ－Ⅱ）活力，ＩＣ５０为２４０ｇ／ｍｌ；动力学分析的结果表明，ＡＰＩ０１３４虽不能改变ＰＥＤ－Ⅱ的表观Ｋｍ值但可降低Ｖｍａｘ。这就表明ＡＰＩ０１３４对（ＰＤＥ－Ⅱ）的抑制为非竞争性。本文的结果揭示，抑制ＣａＭ和ＰＤＥ活力可能是ＡＰＩ０１３４抗血凝的作用机理之一。     

产核苷磷酸化酶大肠杆菌的培养及2′-脱氧-5-氟尿苷的酶法合成

研究了产核苷磷酸化酶大肠杆菌的摇瓶培养和发酵罐培养特征以及乙酸盐和底物诱导对核苷磷酸化酶活力的影响。结果表明：摇瓶培养时，延长菌体培养时间，菌体部分自溶时酶的转化率最高；发酵培养基中加入１０ｇ／Ｌ乙酸钠可使底物转化率提高７．７％，０．００１ｇ／Ｌ的底物ｄＵ诱导可使酶活力提高１１．０％；流加底物ｄＵ对酶反应转化率无显著影响，表明该酶促反应为非２′－脱氧尿苷底物抑制型；反应过程存在扩散控制，酶反应的最佳摇床转速为１６０ｒ／ｍｉｎ。     

内侧视前区注射阿片受体激动脉对麻醉大鼠心血管和呼吸系统的…

研究μ型阿片受体激动剂羟甲芬太尼及δ阿片受体激动主Ｄ－ｓｅｒ＾－２Ｌｅｕ－Ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ－Ｔｈｒ（ＤＳＬＥＴ）对麻醉大鼠心血管和呼吸系统的影响，两药均用微量注射法注入内侧视前区（ｍｅｄｉａｌｐｒｅｏｐｔｉｃａｒｅａ，ＭＰＯ）＿。结果：注射５ｎｍｏｌＯＭＦ可引起血压下降，心率减慢；注射１０ｎｍｏｌＯＭＦ引起血压，心率上升；注射δ型阿片受体激动主１０ｎｍｏｌＤＳＬＥＴ引起血压下降，但对心率无明显     

人类胎盘碱性磷酸酶部分性质的研究

目的探讨纯化的人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）的部分性质,为其结构与功能的研究积累资料。②方法应用分光光度法观察了温度、酸碱度及抑制剂对酶活力的影响;同时对其紫外吸收光谱进行了测定。③结果在该实验条件下,酶的最适温度为６５℃,对热稳定,－２５℃冷冻后酶的活力明显下降;最适ｐＨ为１１．０,在ｐＨ７．０～１１．５之间稳定;以对硝基酚磷酸二钠为底物,其Ｋｍ值为０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ;Ｌ－苯丙氨酸是ＰＬＡＰ的反竞争性抑制剂,其抑制常数为２．３５ｍｍｏｌ／Ｌ,而ＮａＨ２ＰＯ４是ＰＬＡＰ的竞争性抑制剂,其抑制常数为０．９９ｍｍｏｌ／Ｌ;酶蛋白的最大紫外吸收波长为２８０ｎｍ．④结论了解纯化ＰＬＡＰ的上述性质,有助于其结构与功能的研究。     

铅对人类胎盘碱性磷酸酶活力与构象的影响

研究铅对人类胎盘性碱磷酸 的作用，以探讨铅影响台儿发育的分子机制。（２）方法应用分光光度法测定不同浓度Ｐｂ（ＮＯ３）２存在下的ＰＬＡＰ活力，用荧光法检测其荧光光谱的变化；用双倒数作图法确定Ｐｂ（ＮＯ３）２对该酶的抑制类型。