热休克预处理对晶状体上皮细胞过氧化氢氧化损伤的保护作用

目的热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用,并初步探讨其机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞株HLB3细胞,分为正常对照组、氧化损伤组和热休克处理组,观察过氧化氢(H2O2)处理后各组细胞活力、SOD、CAT的改变情况;AnnexinⅤFITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡;RTPCR检测各组中HSP27及p21基因的表达。结果热休克预处理可诱导HSP27产生,显著增加细胞活力0.27±0.04(与氧化损伤组0.24±0.02相比P<0.05),细胞凋亡率明显降低(8.34±1.19)%(与氧化损伤组15.69%±1.54%比较P<0.05),保护超氧化物岐化酶0.61±0.07(与氧化损伤组0.41±0.08比较P<0.05)、过氧化氢酶活性0.99±0.14(与氧化损伤组0.33±0.06相比P<0.05),降低p21mRNA的表达。结论热休克预处理可能通过诱导HSP27的表达保护氧化损伤的晶状体上皮细胞;降低p21基因表达并抑制氧化损伤后晶状体上皮细胞凋亡可能是其保护机制之一。     

大鼠钝挫性眼外伤动物模型中晶状体上皮细胞热休克蛋白70和27的表达及其热耐受的调节作用

目的探讨大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞HSP70和HSP27的表达,并给予预先的热刺激(热休克),观察热休克对晶状体上皮细胞HSP70和HSP27表达的调节。方法48只Sprague-Dawley(SD)大鼠,应用随机数字表法随机分成扑打组和水浴组,每组24只鼠,右眼为实验眼。扑打组:20g铁球20cm高度拍打眼球100次。水浴组:给大鼠体温提高至40.5~41.5℃8min诱导出热耐受,2~3h后再给予20g铁球20cm高度拍打眼球100次。逆转录聚合酶链反应检测晶状体上皮细胞HSP70和HSP27基因的表达丰度。结果钝挫性眼外伤可造成晶状体上皮细胞HSP70基因表达的增强,扑打眼球后1h HSP70表达升高至4.59±0.12,3h后达到高峰7.72±0.27,24h后降至正常1.32±0.14。预先的热刺激导致HSP70基因表达增高至1.83±0.30。两组HSP27基因表达丰度均无明显改变。结论钝挫性眼外伤中晶状体上皮细胞HSP70表达的增强提示HSP70可能在钝挫性外伤过程中对晶状体变性蛋白起保护作用,给予预先的热刺激可能通过提高HSP70的表达保护晶状体。(中华眼科杂志,2006,42:241-245)     

ZnSO4对紫外线诱导的大鼠晶状体氧化损伤的保护作用

目的:探讨ZnSO4对紫外线诱导的大鼠晶状体氧化损伤的保护作用。方法:离体培养大鼠晶状体,随机分为三组:(1)阴性对照组(正常组);(2)阳性对照组(紫外线照射);(3)实验组(紫外线照射+ZnSO4)。观察晶状体的混浊程度,晶状体组织中GSH-Px和SOD的含量,晶状体上皮细胞中HSP70表达的变化。结果:实验组晶状体混浊程度较同时段阳性对照组轻,差异有统计学意义(P<0.05)。紫外线照射后,晶状体上皮细胞中HSP70的表达明显增加,实验组晶状体上皮细胞中HSP70的表达较同时段的阳性对照组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。阳性对照组中GSH-Px和SOD含量显著低于同时段阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组中GSH-Px和SOD含量明显高于同时段阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在晶状体中,ZnSO4可诱导HSP70的表达进而对晶状体的氧化损伤起到保护作用。     

P38有丝分裂素激活蛋白激酶信号转导通路介导过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞中热休克蛋白27表达的研究

目的研究P38有丝分裂素激活蛋白激酶(MAPK)在H2O2诱导的人晶状体上皮细胞热休克蛋白质27(HSP27)表达中的作用。方法使用100和200μmol/LH2O2分别以不同时间刺激培养的人晶状体上皮细胞系B3,在阻断实验中加入特异性P38MAPK阻断剂SB203580阻断P38MAPK信号转导通路。采用逆转录聚合酶链反应检测刺激不同时间的人晶状体上皮细胞HSP27mRNA的表达情况,采用免疫印迹法(Westernblotting)检测细胞中HSP27和磷酸化P38MAPK的表达情况。结果(1)H2O2刺激后的人晶状体上皮细胞中HSP27mRNA及其蛋白的表达显著增加;(2)100和200μmol/LH2O2刺激30min,人晶状体上皮细胞应激活化蛋白激酶的活性(平均灰度值)分别增强至800±081和825±050,6h后恢复至基线水平(P<001);磷酸化P38MAPK的表达随H2O2浓度的增高而增加,且在H2O2刺激后15min达到峰值,随后逐渐下降;(3)加用特异性P38MAPK阻断剂SB203580预处理后,200μmol/LH2O2刺激6h的人晶状体上皮细胞HSP27表达(平均灰度值)从3600±082降至875±126,受到显著抑制(P<001)。结论P38MAPK信号转导途径参与H2O2诱导的人晶状体上皮细胞HSP27的表达。(中华眼科杂志,2005,414751)     

藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线诱导的永生化人晶状体上皮细胞系HLECB3的保护作用

目的 研究藏药十五味萝蒂明目丸对紫外线所致的人类晶状体上皮细胞系-B3(human lens epithelial cells-B3,HLEC-B3)氧化损伤的保护机制.方法 紫外线照射人晶状体上皮细胞,采用免疫印迹法(Western blotting,WB)检测不同剂量(800 mg·L-1、400 mg·L-1、200 mg·L-1)十五味萝蒂明目丸对照射后12 h、24 h、48 h、72 h人晶状体上皮细胞中晶状体上皮源性生长因子(lens epithelium-derived growth factor,LEDGF)和热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)的表达;并应用流式细胞仪检测其对人晶状体上皮细胞凋亡的影响.结果 Western blotting结果显示:晶状体上皮细胞在受到紫外线照射后,LEDGF和HSP27表达均升高,与正常对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05),并且在24 h达到最高;在应用藏药十五味萝蒂明目丸之后,二者表达进一步升高,高剂量组与阳性药物组相比,差异有统计学意义(P<0.05);48 h后LEDGF和HSP27表达水平均降低,并且持续降低,至72 h后甚至降至12 h水平.流式细胞术检测发现:正常对照组晶状体上皮细胞平均凋亡率为1.20%,经紫外线照射后,阴性对照组晶状体上皮细胞凋亡平均率为5.62%;应用十五味萝蒂明目丸后,高剂量组晶状体上皮细胞凋亡平均率为1.31%,阳性药物组晶状体上皮细胞凋亡平均率为2.55%,并且在不同时间点中,阴性对照组在24 h晶状体上皮细胞凋亡平均率明显高于其他几个时间点,而高剂量组晶状体上皮细胞凋亡率除正常组外,均低于其他几组.结论 藏药十五味萝蒂明目丸能够促进LEDGF及HSP27的表达,起到抗氧化损伤的作用,并且对受到紫外线照射后的晶状体上皮细胞具有抑制细胞凋亡的作用.     

谷氨酰胺体外对大鼠晶状体上皮细胞HSP70和NF-κB表达的影响

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)体外对晶状体上皮细胞HSP70和NF-κB的作用。方法:采用ELISA法检测在MEM培养液里培养3,12和24h晶状体上皮细胞HSP70和NF-κB的表达水平。结果:谷氨酰胺注射各组HSP70蛋白的表达量均显著高于对照组(P<0.05),谷氨酰胺注射各组NF-κB的表达较对照组显著降低(P<0.05)。结论:谷氨酰胺能诱导晶状体上皮HSP70蛋白的表达,抑制NF-κB的表达。     

人晶状体上皮细胞内热休克蛋白mRNA的表达

目的通过观察HSP27、HSP70、HSP90在高温、氧化应激的人晶状体上皮细胞中的表达情况,探讨白内障的发病机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50mmol·L-1H2O2)条件下培养30min后,恢复至正常条件,于不同时间段(0h、2h、4h、6h、16h、24h)采用RTPCR法检测HSP27、HSP70、HSP90的表达情况。结果晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP的表达。热休克和氧化应激后2h导致热休克蛋白mRNA表达明显增加。其中HSP27在2种应激后6h表达最高;HSP70于高温后2h表达最高,以后逐渐降低,而在氧化组中6h表达最高;HSP90在2种应激后4h达到峰值。随后逐渐降低,但它们在16h后仍维持在较高水平。结论晶状体上皮细胞中存在HSP。应激情况下,诱导HSP合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用。     

HSP60在早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞的表达

目的观察热休克蛋白(hot shock protein,HSP)在早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞的表达及变化,探讨HSP60在糖尿病性白内障病变中的作用。方法鼠龄为6~8周的SD大鼠随机分成糖尿病组及对照组,每组18只,糖尿病组在禁食12 h后一次性腹腔注射10 g·L-1链脲佐菌素诱发糖尿病模型,成功诱导糖尿病模型后4周、8周、12周分别应用免疫组织化学法及Western blot分析晶状体上皮细胞上HSP60的表达变化。结果对照组大鼠晶状体上皮细胞上未发现有HSP60表达,糖尿病组大鼠在造模后4周、8周、12周均可见晶状体上皮细胞上有HSP60表达,两组间有显著差异(均为P<0.05)。糖尿病组大鼠造模后4周和8周间表达量无明显差异(P>0.05);而12周时其表达量开始减少,和4周及8周相比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞有大量HSP60表达,而且随着时间的延长,表达量呈下降趋势。     

HSP27在培养的人晶状体上皮细胞中的应激表达

目的观察在高温、氧化应激条件下,热休克蛋白27(HSP27)在人品状体上皮细胞中的表达和定位情况。探讨自内障的发病机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50mmol/LH,O2)条件下培养30min后,恢复至正常条件,于不同时间段(0、2、4、6、16、2411)采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测HSP27的表达情况。结果晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP27的表达。热休克和氧化应激后2h导致HSP27mRNA和蛋白表达明显增加,6h达最高峰,16h仍维持在较高水平。应激导致的HSP27蛋白阳性颗粒由胞浆转移至胞核,并随着时间逐渐转移回胞浆。结论晶状体上皮细胞中存在HSP27。应激情况下,诱导HSP27合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用。     

3-氨基苯甲酰胺抑制糖尿病大鼠晶状体混浊的实验研究

目的:探讨PARP(聚腺苷二磷酸核糖聚合酶)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对糖尿病大鼠晶状体混浊程度的影响及其可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、3-AB干预组。糖尿病组和3-AB干预组大鼠予以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,正常对照组注射等体积柠檬酸盐缓冲液。建模成功后3-AB组每日按照30mg/kg给予3-AB灌胃,正常对照组和糖尿病组则给予等体积9g/L生理盐水(NS)灌胃。观察并记录各组大鼠晶状体混浊进展情况,分别于给药后2,4,8wk处死各组大鼠,取出晶状体检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)和糖基化终末产物(AGE)的含量,并检测晶状体上皮细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况。结果:灌胃3wk时糖尿病组和3-AB组大鼠均开始出现不同程度的晶状体混浊,4wk和8wk时糖尿病组晶状体混浊程度比3-AB组重(P<0.01)。3-AB组大鼠晶状体中GSH-Px和SOD活性在2,4,8wk时均高于糖尿病组(均P<0.05),但均低于正常对照组(P<0.01)。3-AB组大鼠晶状体中MDA的含量在2,4,8wk时均低于糖尿病组(P<0.05),但均高于正常对照组(P<0.01)。糖尿病组和3-AB组大鼠晶状体中AGE含量在2,4,8wk时高于正常对照组(均P<0.05),而糖尿病组在2wk和4wk时高于3-AB组(P<0.05),但在8wk时无差异。MMP-2在正常对照组大鼠晶状体上皮细胞几乎无表达,在2,4,8wk时糖尿病组均强于3-AB组(P<0.05)。bFGF在三组大鼠晶状体上皮细胞均呈阳性表达;在2,4,8wk时,糖尿病组和3-AB组均强于正常对照组(均P<0.05),但糖尿病组与3-AB组之间无差异。结论:3-AB对STZ诱导的糖尿病大鼠晶状体混浊具有一定抑制作用,其机制可能是通过减轻STZ诱导的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞氧化损伤,降低非酶糖基化水平,抑制晶状体上皮细胞中MMP-2的表达,减轻晶状体上皮细胞外基质降解,从而抑制晶状体混浊。     

Quercetin对晶状体上皮细胞HSP70、HSP27表达的调节作用

目的研究大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞(LECs)热休克蛋白(HSP)70、HSP27的表达,并给予喂饲Quercetin(HSP阻滞剂),观察Quercetin对LECsHSP70及HSP27表达的调节。方法SD大鼠48只,随机分成拍打组和Quercetin组,每组各24只24眼,右眼为实验眼。拍打组:20g铁球20cm高度拍打眼球100次。Quercetin组:给大鼠喂饲Quercetin(100mg/kg),2-3h后再拍打眼球。RT-PCR检测LECsHSP70、HSP27基因表达。结果钝挫性眼外伤可造成LECsHSP70基因表达的增强,拍打眼球后1hHSP70表达开始升高,3h后达到高峰,24h后降至正常。Quercetin组HSP70基因表达随时间亦出现相应的提高,但与拍打组相比其峰值下降,差异有非常显著性意义。两组HSP27基因表达均无明显改变。结论钝挫性眼外伤中LECsHSP70表达的增强提示HSP70可能在钝挫性外伤性白内障形成过程中对晶状体变性蛋白起保护作用,预先喂饲Quercetin可抑制LECsHSP70基因的表达,其作用机制可能发生于HSP转录水平。     

Upregulation of heat shock protein expression by proteasome inhibition: an antiapoptotic mechanism in the lens

PURPOSE: Studies have shown that proteasome inhibition protects lens epithelial cells (LECs) against interferon (IFN)-gamma-induced apoptosis. The present study was conducted to test the hypothesis that proteasome inhibition can protect lens cells against apoptosis by upregulating heat shock protein (HSP) expression. METHODS: Murine lens epithelial alphaTN4-1 cells were treated with combinations of 100 U/mL IFN-gamma, 10 muM MG132 (proteasome inhibitor), and 100 muM quercetin (HSP inhibitor). mRNA and protein expression were observed by RT-PCR and Western blot analysis, respectively. Caspase activities were measured by using cleavage of colorimetric substrate. Apoptosis was measured by phase-contrast microscopy and flow cytometry. RESULTS: At the mRNA level, the proteasome inhibitor, MG132, caused a >10-fold increase in HSP27 and a small increase (1.2- to 1.6-fold) in alphaB-crystallin but no change in HSP70 or -90. At the protein level, a more than twofold increase in HSP27 and -90, a marked increase in HSP70, but no significant change in alphaB-crystallin, was observed. Downregulation of alphaA-crystallin by MG132 was observed at both the mRNA and protein levels. MG132 caused no significant change in heat shock factor (HSF)-1, but a more than twofold increase in HSF2 and -4 protein expression. MG132 prevented the IFN-gamma-induced increase in caspase-1, -6, and -8 activities. Quercetin decreased MG132-induced expression of HSP27, -70, and -90 by more than 70%, and heat shock factors HSF2 and -4 by more than 65%. Quercetin pretreatment significantly reversed the decrease in caspase-1, -6, and -8 activities and the antiapoptotic effect of MG132 on IFN-gamma-treated LECs. CONCLUSIONS: The antiapoptotic effect of proteasome inhibition of IFN-gamma-induced apoptosis in LECs correlates with increased expression of HSPs and inhibition of caspase activities. Inhibition of HSP expression restores caspase activities and abolishes the antiapoptotic effect of proteasome inhibition, implicating HSPs as mediators of the protective effect of proteasome inhibition.     

丝裂素蛋白激活激酶信号途径介导水杨酸钠诱导的人晶状体上皮细胞中HSP27表达

背景热休克蛋白（HSPs）是生物体在各种应激情况下产生的高度保守蛋白,HSP27与人晶状体中α-晶状体蛋白在氨基酸和基因水平上高度同源,其结构和表达的异常与白内障的形成密切相关。此研究先前的研究证实水杨酸钠对H2O2造成的人品状体上皮细胞（LECs）损伤具有保护作用。目的探讨水杨酸钠诱导的人LECs中HSP27的表达及与丝裂素蛋白激活激酶（MAPK）信号途径的关系。方法人LECs—B3系在含质量分数15％胎牛血清的DMEM中进行培养,将不同浓度的水杨酸钠（0～55mmol／L）加入培养基中刺激人LECs不同时间,然后去除刺激再分别培养。在阻断实验中,分别给予P38MAPK、ERK1／2及JNK／SAPK信号通路特异性阻断剂SB20350（10μmol／L）、PD98059（20μmol／L）及SP600125（10μmol／L）预孵育细胞1h,在给予水杨酸钠刺激后检测相关指标,采用Westernblot法检测各种处理情况下人LECs中HSP27的表达,用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测HSP27mRNA的表达;免疫组织化学法检测HSP27蛋白在人LECs中的表达。结果正常人LECs仅有微弱的HSP27表达,35～55mmol／L水杨酸钠刺激人LECs1h去除刺激再培养6h后可使HSP27表达显著增加,与正常对照组比较差异有统计学意义（F=509．953,P〈0．01）;55mmol／L水杨酸钠刺激人LECsI～5h不能诱导HSP27的表达（F=2．119,P〉0．05）,而去除刺激再分别培养6h后可诱导HSP27表达,差异有统计学意义（F：452．534,P〈0．01）;55mmol／L水杨酸钠刺激人LECs1h后去除刺激再培养3h后HSP27表达明显增加,6h达到高峰,直至24h恢复到基础水平,差异有统计学意义（F=419．234,P〈0．01）。水杨酸钠刺激30min时磷酸化p38MAPK表达增加,1h表达显著,各组总体差异有统计学意义（F=865．680,P〈0．01）;磷酸化ERK1／2在水杨酸钠刺激时间内未见升高;去除水杨酸钠刺激再培养1h后开始增加,6h达到高峰,各时间点总体差异有统计学意义（F=388．840,P〈0．01）;水杨酸钠刺激1h及去除刺激再培养过程中未见到磷酸化JNK的表达;加入P38MAPK、ERK1／2特异性阻断剂预处理人LECs1h后可使水杨酸钠诱导的HSP27表达受到显著抑制,加入JNK特异性阻断剂未见对水杨酸钠诱导的HSP27表达产生影响。结论水杨酸钠可诱导人LECs中HSP27的表达,P38MAPK和ERK1／2信号途径促进水杨酸钠诱导的HSP27在人LECs中的表达。     

热处理对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞生物学特性的影响

目的 研究热处理对链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)诱导的大鼠糖尿病性白内障的晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)生物学特性的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为3组A组为空白对照组,B组为STZ组,C组为热处理STZ组.每周用裂隙灯观察晶状体的变化,在实验6周后分别摘取眼球,取出晶状体.采用免疫组化技术检测热休克蛋白(heat shock protein,HSP)在各组LEC中的表达;运用考马斯亮兰与呈色法测定各组可溶性蛋白的浓度;呈色法测OD值,检测各组MDA、SOD及GSH的含量.结果 B、C组晶状体的混浊情况差异具有统计学意义(P＜0.05),B组混浊程度明显高于C组,A、C组差异不显著.C组HSP70的表达高于B组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组HSP70的表达高于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05).B组可溶性蛋白含量明显低于A、C组,差异有统计学意义(P＜0.05),而A、C组差异不显著.A、B组晶状体MDA、SOD、GSH的含量均低于C组,差异具有统计学意义(P＜0.05);A、B组之间差异不显著.结论 热处理可以提高HSP70的表达,并可能对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠的晶状体上皮细胞具有保护作用.     

热处理对STZ诱导鼠晶状体上皮细胞HSP27表达的影响

目的研究在高温的应激条件下,热休克蛋白27（HSP27）在链尿佐菌素（STZ）诱导的大鼠糖尿病性白内障晶状体上皮细胞（LEC）中的表达情况。方法将60只SD大鼠随机分为3组：A组为空白对照组,B组为STZ组,C组为热处理STZ组。每周用裂隙灯观察各组大鼠晶状体的变化,于试验8周后分别摘取眼球,取出晶状体,采用免疫组化技术检测HSP27在各组LEC中的表达情况。结果A组晶状体一直保持透明,B组混浊程度高于C组,差异有统计学意义（P〈0．05）。B组HSP27的表达高于A组,差异有统计学意义（P〈0．05）,C组HSP27的表达高于B组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论热处理能促进晶状体上皮HSP27的表达,从而可能对晶状体上皮具有保护作用。     

糖尿病性白内障晶状体上皮细胞凋亡与增殖特性的实验研究

目的观察糖尿病性白内障晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)凋亡、增殖特性的变化,探讨糖尿病性白内障发生的相关机制.方法采用四氧嘧啶诱发兔糖尿病性白内障模型,定期监测血糖和观察晶状体的变化.TUNEL技术标记凋亡的LECs,测定凋亡百分率和晶状体上皮细胞密度,并用免疫组化SABC法检测LECs中增殖细胞核抗原的表达及积分光密度(A)值.结果TUNEL染色显示模型组兔晶状体上皮细胞中有凋亡阳性细胞,糖尿病性白内障模型组与同期正常对照组比较,其LECs凋亡百分率显著升高(P＜0.01),且随观察期内时间推移和晶状体混浊程度的加重呈明显上升趋势;早期2组晶状体上皮细胞密度和增殖细胞核抗原积分光密度(A)值的变化无显著性,但随着观察期内高血糖持续时间的延长(8周后),2组间差异日趋显著(P＜0.01).结论糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮细胞凋亡及增殖特性的改变有关.     

儿茶素对糖尿病性白内障大鼠晶状体热休克蛋白27表达的影响

目的　检测糖尿病性白内障大鼠晶状体中热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７, ＨＳＰ２７）的表达,探讨儿茶素在糖尿病性白内障大鼠病程发生发展过程中的作用。方法　取６０只雄性ＳＤ大鼠,随机分为３组,每组２０只。正常组大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液;糖尿病对照组、儿茶素治疗组大鼠先行造模,大鼠腹腔注射链脲佐菌素溶液（６５ｍｇ·ｋｇ－１体质量）诱发糖尿病性白内障,造模成功后,治疗组大鼠给予儿茶素２００ｍｇ·ｋｇ－１（用蒸馏水配制）灌胃。正常组及对照组大鼠给予等量蒸馏水灌胃。于造模成功后２周、４周、８周３个时间点用免疫组织化学法检测ＨＳＰ２７表达,计算平均ＩＨＳ评分值。结果正常组晶状体中ＨＳＰ２７阳性上皮细胞及纤维细胞较少,染色较浅,在造模成功后２周、４周、８周无明显变化。对照组造模成功后２周时晶状体ＨＳＰ２７阳性细胞增多,染色加深,４周时表现最明显,８周时下降,但仍然高于正常组。治疗组在造模成功后２周、４周、８周ＨＳＰ２７阳性细胞较对照组明显增多、染色加深。正常组ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在实验各时间点无明显变化。对照组ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在造模成功后２周、４周及８周时均高于正常组,差异均有统计学意义（Ｆ２周＝９．２９４,Ｐ＜０．０５;Ｆ４周＝３８．４００及Ｆ８周＝１６．０００,均为Ｐ＜０．０１）。治疗组在相应时间点ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在相应时间点高于对照组,在２周及４周时差异均有统计学意义（Ｆ２周＝９．２９４,Ｐ＜０．０５,Ｆ４周＝３８．４００,Ｐ＜０．０１）。结论　大鼠糖尿病性白内障晶状体组织中ＨＳＰ２７的表达增强,全身应用儿茶素可提高晶状体组织中ＨＳＰ２７表达。     

Downregulated expression of ADAM9 in anterior polar cataracts

PURPOSE: To determine whether ADAM (a disintegrin and metalloproteinase) is regulated in lens epithelial cells (LECs) of patients with anterior polar cataracts and by transforming growth factor (TGF)-beta 1 in cultured LECs. SETTING: Department of Ophthalmology and Visual Science, College of Medicine, The Catholic University of Korea, Seoul, Korea. METHODS: Lens epithelial cells attached to the anterior capsules of human cataractous lenses with nuclear and anterior subcapsular cataracts and noncataractous lenses were analyzed by reverse transcribed-polymerase chain reaction for the expression of ADAMs. The effect of TGF-beta 1 on ADAM gene expression was also tested in mouse lens epithelial explants and cultured LEC lines (alpha TN-4 and HLE B-3). RESULTS: Significantly reduced expression of mRNA for ADAM9 was observed in LECs from patients with anterior polar cataracts. The expression of mRNA for ADAM9 was downregulated by TGF-beta 1 in cultured human LECs. Treatment of cultured mouse LECs with TGF-beta 1 led to a reduction in ADAM1 mRNA. CONCLUSIONS: ADAMs are expressed and regulated in LECs. The downregulated expression of ADAM9 may serve as a marker for anterior polar cataracts in addition to previously known proteins, fibronectin, alpha-SMA, and beta ig-h3. The functions of this protein in lens pathology require further investigation.