犬用口服狂犬病减毒活疫苗猴体安全性试验研究

目的:进一步研究犬用口服狂犬病减毒活疫苗CTN-22毒株的安全性。方法:用高于现场用量4倍浓度疫苗肌肉注射猴体后,采血进行中和抗体检测。结果:猴体肌肉注射疫苗后,均健康存活,中和抗体1个月为1∶13.8～19.5,2个月上升为1∶33.5～1∶37.6。结论:迸一步证实了CTN-22毒株制备的犬用口服狂犬病减毒活疫苗是安全的、可靠的。     

犬用口服狂犬病减毒疫苗返祖试验和猴体安全性试验研究

目的:研究犬用口服狂犬病减毒活疫苗的安全性。方法:10只犬分为5组,用犬脑传代,每代2只进行返祖试验;猴体安全性试验,用高于现场用量4倍浓度疫苗肌肉注射后,采血进行中和抗体检测。结果:传代的1～5代犬剖取脑检查均未发现内基氏小体,各代犬脑组织经11～12g小白鼠脑内注射,亦未分离出病毒;传代保留的5只犬,从第1代开始至第5代观察期最长100天,亦健存,而且无任何不良现象。猴体肌肉注射疫苗后,均健康存活,中和抗体1个月为1:13.8～1:19.5,2个月上升为1:33.5～1:37.6。结论:证实本疫苗对家犬口服免疫后,无致病性,毒力未返祖,亦可刺激机体产生中和抗体,达到免疫效果。     

基于斑马鱼模型的鳗弧菌减毒活疫苗的生物安全性评价

利用疫苗对养殖鱼类进行疾病预防正得到逐步应用,而减毒活疫苗通过浸泡方式也能使鱼体获得较高的免疫保护力。利用模式动物斑马鱼对鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203的生物安全性进行了评价。首先进行了疫苗对斑马鱼毒性实验,每条鱼注射免疫的半致死量为9.26×104 CFU;其次分析了鳗弧菌在水体中的存活情况,菌体浓度在1.0×106 CFU/mL条件下,10 d后水体基本检测不到鳗弧菌;最后考察了其在鱼体内的存活情况,注射或浸泡免疫3 d后,鱼体组织匀浆物未检测到该菌,表明鳗弧菌减毒活疫苗具有较好的生物安全性。     

滕州市犬致伤特点及狂犬疫苗免疫后效果观察

滕州市自1992年起已无狂犬病病例发生,但在近几年居民犬致伤者呈增多趋势。2004年周围县市又出现狂犬病病例。为了解狂犬疫苗免疫方案对预防犬咬伤者狂犬病的发生及对区域性狂犬病控制的作用,根据2003年9月～2004年8月犬致伤登记和狂犬疫苗免疫后抗体观察资料结果分析如下。 1 材料与方法 1．1 观察对象对2003年9月～2004年8月被犬、猫、鼠等动物咬(抓)伤而在门诊就诊的滕州市居民,按统一表格统计,并接受伤口处理及狂犬疫苗注射。 1．2 疫苗为常州药业延申生物技术有限公司生产的Vero细胞人用狂犬病纯化疫苗,有效期内使用。 1．3 免疫方案按照动物咬(抓)伤部位和程度实施不同的免疫程序：①一般抓(咬)伤者注射狂犬疫苗5针,程序为0、3、7、14和28d各注射1ml(2．5IU)。②抓(咬)伤头、面、颈、多部位≥3处伤者,按上述方法注射外还在0和3d加倍量注射疫苗；在0d注射疫苗的同时应用抗狂犬病免疫球蛋白(20IU／kg)；应     

两种国产狂犬病疫苗免疫后血清学效果评价

目的观察被犬、猫、鼠等动物咬、抓伤者接种不同种类狂犬病疫苗免疫后的效果。方法将被犬、猫、鼠等动物咬、抓伤者随机分为接种冻干人用狂犬病纯化疫苗（A1）组和接种国产人用液体狂犬病纯化疫苗（A2）组。均按五针法（0、3、7、14、28d）程序进行。五针疫苗接种后7-10d采血检测抗狂犬病毒抗体。对检测抗体阴性者，再增加二针于0、7d各接种一针，即七针接种后再检测抗体。结果第一次检测狂犬病毒抗体结果显示，A1、A2组抗体阳性分别为95．25％（703／738）。89．0％（438／492）。A1组明显高于A2组（P〈0．01）。第一次检测抗体阴性者再接种二针后狂犬病毒抗体均达到阳性。结论两种狂犬病疫苗的免疫效果均良好，冻干人用狂犬病纯化疫苗优于人用液体狂犬病纯化疫苗。     

麻疹减毒活疫苗糖块口服免疫效果初步观察

用麻疹减毒活疫苗预防麻疹的发生与流行已有明显效果。鉴于目前使用的注射方法尚存一定缺点,为探索新的疫苗途径,我站于1980年11月12日进行了一次口服麻疹减毒活疫苗糖块的免疫实验效果与观察,结果如下。     

174例动物致伤人群免疫后抗体观察

目的观察我单位就诊的动物致伤人群,采用两种不同疫苗全程足量免疫后进行效果评价,以寻求一种安全有效的暴露后预防狂犬病的方法。方法174例被动物致伤人群,按免疫接种程序0、3、7、14、28在上臂三角肌肌肉注射,对严重致伤者,于0、3d加倍接种Vero细胞疫苗。接种后48d于静脉采血4.0ml,采用酶联免疫法检测血清中人狂犬病病毒IgG抗体。结果观察使用液体无佐剂型Vero细胞狂犬病疫苗免疫的137例接种者中抗体总阳性率为91.24%,包括24例阴性者于48d和55d各加强1针同型疫苗,注射后7d再次检测抗体有19例阳性;使用冻干高纯化Vero细胞狂犬病疫苗免疫的37例,抗体总阳性率为83.78%,包括2例阴性者加强2针同型疫苗,再次检测抗体全部阳性;在致伤人群中,年龄以21~40岁组为主,占47.13%,最小2岁,最大86岁。结论Vero细胞狂犬病疫苗都具有良好的免疫原性,为尽可能有效地预防狂犬病的发生,动物致伤人群除及时、规范、全程接种优质狂犬病疫苗外,还要强调伤口处理、疫苗及人用狂犬病免疫球蛋白的联合应用以及免疫后48d进行抗体检测,及时对结果为阴性的接种者加强免疫,才能达到预防狂犬病的目的。     

百白破和麻疹疫苗同时或单独免疫小鼠的体液免疫效果及不良反应评价

目的：观察百白破疫苗和麻疹减毒活疫苗同时免疫小鼠后的抗体应答和不良反应。方法用百白破疫苗和麻疹减毒活疫苗皮下注射免疫小鼠,于末次免疫后10 d取血清,用ELISA间接法检测特异性IgG抗体水平,比较上述两种疫苗同时免疫与单独免疫小鼠后特异性IgG的产生水平,并观察其发生不良反应的差异。结果同时免疫两种疫苗的实验组白喉抗体效价显著低于单独免疫的实验组,而前者不良反应发生率显著高于后者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种疫苗同时接种与单独接种比较,抗体应答水平较低,安全性较差,最好不要同时接种。     

1981～2010年昆明市狂犬病流行因素分析

目的分析昆明市1981～2010年狂犬病流行特点,探讨昆明市狂犬病发病相关因素。方法收集1981～2010年昆明市狂犬病疫情资料进行总结和分析。结果 1981～2010年共报告狂犬病89例,49.44%的病例伤后未进行处理,仅3例病例注射了狂犬病疫苗,但均未完成免疫程序。潜伏期最短7d,最长12年,潜伏期中位数为46d。96.63%病例致伤动物为犬,犬密度最高为42条/100人,目前为7条/100人,但农村地区远远不止于此;犬免疫率不足10%。结论犬密度高而犬免疫率低,疾病危害认识不足、暴露后治疗率低,犬伤门诊设置不合理、处置不规范,是造成昆明市狂犬病流行的主要原因。     

SARS病原体的检测及其在动物模型鉴定及疫苗评价中的应用

目的:通过RT-PCR及病毒分离等方法，鉴定SARS感染性动物模型是否成立，并对疫苗效果进行评估。方法:选用3周岁的健康SPF级恒河猴8只，分为SARS实验感染动物模型组及疫苗组(Sino 3 SARS灭活疫苗20030904批肌内注射，免疫2次)。经鼻吸入Sino 1 SARS毒株，病毒攻击后7d动物进行安乐死。自病毒攻击后的第一天起每日连续采集动物咽拭子标本，病毒攻击后的第二天、第五天、第七天采集血浆标本。将标本进行病毒分离及RT-PCR检测．结果：模型组动物病毒攻击后第一天至第七天咽拭子RT-PCR检测均为阳性。注射疫苗组动物仅在病毒攻击后第一天咽拭子RT-PCR检测呈阳性。模型组动物血浆RB-PCR检测呈现阳性，疫苗组动物血浆RT-PCR检测均为阴性。病毒分离结果显示仅在模型动物咽拭子标本中分离到病毒，未在疫苗组动物的咽拭子标本分离到病毒．血浆标本中均未分离到病毒．结论：RT-PCR及病毒分离可以及时有效地检测出病毒在体内的复制情况，可作为模型鉴定、疫苗评估及药物筛选的重要手段。     

水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的实验研究

目的观察水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的免疫效果及其目的蛋白在免疫部位的表达。方法 20只新西兰大白兔随机分为5组,每组4只。A组：pVAX1-gtfB/CAT口服组,B组：pVAX1-gtfB/CAT鼻腔黏膜滴注组,C组：空载体pVAX1质粒口服组,D组：空载体pVAX1＋水凝胶口服组,E组：生理盐水鼻腔黏膜滴注组。每间隔1周免疫1次,共免疫3次。每次免疫剂量为200μg/只。于免疫前和免疫后第1、2、3、4、6、8、10、12、14、16周采集血液及唾液标本,ELISA法检测血清及唾液中特异性抗体水平。第3次免疫后每组处死1只动物,取免疫部位组织,免疫组织化学检测目的蛋白表达。结果 1水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT免疫兔后,诱导了特异性IgG和SIgA抗体产生,在第6和第8周口服免疫诱导的特异性IgG抗体水平高于鼻腔黏膜滴注,其余时间点两种黏膜途径诱导的SIgA和IgG抗体水平差异无统计学意义;2在小肠黏膜和鼻黏膜均检查到了目的蛋白的表达。结论水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫后,目的蛋白能够在免疫部位表达,均能有效诱导兔的系统免疫和黏膜免疫应答。     

狂犬病疫苗和狂犬病免疫球蛋白联用免疫效果观察

目的 了解暴露人群使用人狂犬病免疫球蛋白的作用效果和不良反应情况,进一步推广人狂犬病免疫球蛋白的应用.方法 将狂犬病暴露人群根据其暴露程度分别采用联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白和仅注射狂犬病疫苗.对这两组人群在首针免疫后3d及全程免疫15d后的体内抗狂犬病病毒IgG抗体水平进行检测,观察其抗体阳性率及不良反应情况.结果 联合使用狂犬病疫苗与人狂犬痛免疫球蛋白进行狂犬病预防的人群,其首针疫苗注射3d后的抗体阳性率为91.1%,全程接种15d后的抗体阳性率为98.8%,全身不良反应发生率为3.5%,局部反应发生率为1.3%;单纯使用狂犬病疫苗,相应时间的抗体阳性率分别为0和95.2%,全身不良反应发生率为3.1%,局部反应发生率为1.1%.两者抗体阳性率的差别均具有统计学意义,而不良反应的差别无统计学意义（P＞0.05）.结论 狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白联合使用,可使体内更早出现抗狂犬病病毒抗体,全程接种后抗体阳性率也高于单纯注射狂犬病疫苗的人群.注射人狂犬病免疫球蛋白后无明显不良反应.     

The ERA strain of rabies vaccine

An antigenic extinction trial in cats showed that the ERA rabies vaccine had superior antigenic properties over Flury H.E.P. C.E.O. and killed tissue culture rabies vaccine.Dogs and cats on a duration of immunity study of ERA rabies vaccine were challenged with fox salivary gland "street" rabies virus. The results of this challenge show a duration of immunity of five years in dogs and four years in cats.Vaccination of dams in late pregnancy with ERA rabies vaccine resulted in transference of maternal antibody to the newborn, in both cattle and dogs. This maternally derived antibody interfered with the successful active immunization of the young calf. Calves free of antibodies for rabies could be successfully vaccinated as early as 17 days of age and were able to withstand a challenge with virulent "street" rabies virus two years later.     

麻疹疫苗及加佐剂经滴鼻免疫小鼠的抗体应答

目的：观察麻疹减毒活疫苗和灭活疫苗经滴鼻免疫小鼠后的抗体应答。方法：用活的或灭活麻疹疫苗及分别加明胶、植物血凝素(PHA)的疫苗滴鼻免疫小鼠，于末次免疫后10d取血清、唾液、呼吸道分泌物，用间接ELISA法检测特异性IgG，IgA抗体水平，并与皮下注射组及对照组进行比较。结果：各滴鼻组小鼠血清及呼吸道分泌物中均产生一定水平的特异性IgG及In抗体，皮下注射组小鼠呼吸道分泌物中未产生特异性IgA抗体；加明胶后的免疫效果优于加PHA的。结论：麻疹疫苗滴鼻免疫小鼠后可诱导全身及局部抗体应答，明胶可增强其免疫效果，而麻疹疫苗皮下注射免疫小鼠未能诱导局部抗体应答。     

2091例因动物伤病例狂犬疫苗接种效果分析

目的分析本地区动物伤人的发病情况及观察狂犬疫苗接种的效果。方法依据《广东省2005年狂犬病暴露人群监测方案》和《广东省狂犬病暴露后医学处理工作指引（2001年版）》的规定对2091例动物伤病人进行医学处理,分类统计和发病追踪。结果2091例病人中犬伤1563例占74．8％,年龄以15．44岁为主,占71．6％。伤口部位以上肢为主占55．4％,1951人接种维尔博,140人接种瑞必补尔,接种后观察8个月以上无一例发生狂犬病。结论犬伤病例中81％为宠物犬所伤,是狂犬病暴露的最危险动物,喂狗和主动亲近狗是被宠物犬咬伤的最主要原因,暴露后接种维尔博效果安全可靠。     

不同疫区家犬携带狂犬病毒的比较研究

目的比较河南和陕西两省外观健康的家犬狂犬病毒携带率，为加强当前犬只管理、控制我国狂犬病不断上升的疫情提供参考依据。方法调查河南和陕西两省近年来人间狂犬病疫情；分别采集河南和陕西两省外观健康的家犬脑组织样品121份和645份，以免疫荧光实验（IFA）、小鼠颅内接种试验（MIT）以及逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测样品带毒情况；以MEGA及DNAStar等生物信息学软件对病毒核蛋白基因进行分析。结果从河南省121份犬脑样品中栓出阳性结果9份，陕西省645份样品无阳性；9株狂犬病毒与我国人用精制狂犬病疫苗CTN株系统发育关系较近。结论外观健康的家犬能够携带狂犬病毒；犬养殖量大、免疫率低以及狂犬病毒携带率高仍是当前我国狂犬病流行的主要原因。     

甲型肝炎减毒活疫苗与灭活疫苗免疫效果的比较

目的 观察甲型肝炎（甲肝）减毒活疫苗Ｈ２株与ＬＡ－１株的不同剂量、不同免疫程序的免疫原性及抗体动脉变化。方法 在河北、广西两地５选择３１８名经甲肝抗体检测为阴性的易感儿童,按不同剂量程序及不同甲肝疫苗,分为６组,并在首剂接种后１、６、７、１２、１３月份分别采集血清标本,检测甲肝总抗体。结果 各组抗体水平均于再免疫后１个月达高峰,以后开始下降,再免半年后抗体水平仍明显高于初免抗体水平;灭活于再免疫后     

Construction and identification of recombinant attenuated Salmonella typhimurium vaccine strain expressing Helicobacter pylori urease subunit B

Objective To construct a recombinant live attenuated Salmonella typhimurium vaccine strain expressing Helicobacter pylori urease subunit B (ureB).Methods ureB gene was amplified by PCR and cloned into a prokaryotic expression plasmid pTrc99a, and the identified recombinant plasmid was then used to transform an attenuated Salmonella typhimurium vaccine strain SL3261. The ureB expressed in the recombinant vaccine strain was analyzed by SDS-PAGE and optical density scanning. Two and 10 days after recombinant strain intragastric immunization, the C57BL/6 mice were sacrificed, and the spleens and terminal ileums were cultured.Results The ureB gene could be amplified from the recombinant prokaryotic expression plasmid pTrc99A-ureB and the plasmids extracted from transformed SL3261 strain. SDS-PAGE and optical density scanning indicated that ureB was expressed in the recombinant vaccine strain SL3261 (pTrc99A-ureB) as a protein with 66*!kD of molecular weight. Recombinant strain was found in both spleen an terminal ileum of each mouse two and ten days after intragastric immunization.Conclusions A recombinant liver attenuated Salmonella typhimurium vaccine strain expressing Helicobacter pylori ureB was constructed and identified, and this study will help to develop an oral recombinant live vaccine against Helicobacter pylori infection.