正交设计法优选土茯苓中落新妇苷及总黄酮的提取工艺

目的:研究超声法提取土茯苓中落新妇苷及总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用正交试验法研究落新妇苷和总黄酮的提取工艺,其中落新妇苷含量用HPLC法测定,总黄酮含量用紫外分光光度法测定。结果:土茯苓中落新妇苷最佳提取工艺为加入甲醇30mL,超声提取15min,超声3次。总黄酮的最佳提取工艺为料液比1∶50,加入50%乙醇,超声提取60min。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于土茯苓药材中落新妇苷及总黄酮的含量测定及其质量控制。     

28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷分析及抗炎作用的比较

目的:采用HPLC分析测定28个不同采集地土茯苓(断面红色、白色)中落新妇苷的含量,并通过对土茯苓(断面红色、白色)渗透型炎症的研究,拟对该品种进行药效与成分的评价.方法:RP-HPLC测定落新妇苷含量,采用依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％冰醋酸溶液(21∶ 79),流速1.0 mL·min-1,检测波长291 nm,柱温25℃,理论塔板数以落新妇苷计不得低于5 000.用毛细血管通透性试验比较不同断面颜色药的抗炎作用.结果:在选定的色谱条件下,落新妇苷在0.003 379 ～4.004 μg呈良好线性关系.加样回收实验加样80％,100％,120％,平均回收率分别为100.1％,101.9％,99.3％.断面白色土茯苓中落新妇苷质量分数为0.19％ ～2.46％,断面红色土茯苓中落新妇苷质量分数为2.10％ ～ 5.92％.药效学实验结果表明,断面白色土茯苓抗炎抑制率为32％,断面红色土茯苓抗炎抑制率仅为21％.结论:红、白2种断面土茯苓中落新妇苷的含量及抗炎作用均存在较大差异,土茯苓中落新妇苷的含量高低与其抗炎作用的强弱不呈正相关.     

土茯苓抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础研究

目的:研究土茯苓抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础。方法:系统分离土茯苓氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水层4个溶剂萃取部位,分光光度法测定土茯苓及4个溶剂萃取部位对黄嘌呤氧化酶活性的影响,建立亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定土茯苓及各溶剂部位黄酮含量,超高效液相-质谱仪联用技术(UPLC-MS)分析有效部位色谱峰成分,高效液相色谱法(HPLC)比对有效部位色谱峰与对照品,分光光度法测定有效部位中成分对黄嘌呤氧化酶活性的影响。结果:土茯苓中乙酸乙酯部位为抑制黄嘌呤氧化酶活性的有效部位,主要为黄酮类成分,质量分数为92.13%,鉴定出的成分有表儿茶素、落新妇苷、新落新妇苷、异落新妇苷、新异落新妇苷、槲皮素、柚皮素,其中表儿茶素、落新妇苷、槲皮苷、柚皮素均具有较强的抑制黄嘌呤氧化酶活性作用。结论:土茯苓黄酮类成分是抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础。     

感冒宁冲剂质量标准研究

目的：制定感冒宁冲剂的治疗标准。方法：采用TLC对感冒宁冲剂中大青叶、金银花、防风进行定性鉴别，利用紫外分光光度法对制剂中的黄芩甙进行含量测定。结果：在TLC色谱中均能检出大青叶、金银花、防风，含量限度黄芩甙不少于6.68mg/g。结论：所建立的方法简便可行、重复性好、结果稳定、准确，可作为控制感冒宁冲剂质量的方法。     

感冒宁冲剂质量标准研究

目的 :制定感冒宁冲剂的治疗标准。方法 :采用TLC对感冒宁冲剂中大青叶、金银花、防风进行定性鉴别 ,利用紫外分光光度法对制剂中的黄芩甙进行含量测定。结果 :在TLC色谱中均能检出大青叶、金银花、防风 ,含量限度黄芩甙不少于 6 .6 8mg/g。结论 :所建立的方法简便可行、重复性好、结果稳定、准确 ,可作为控制感冒宁冲剂质量的方法     

银屑灵与土茯苓中落新妇苷大鼠体内的 药代动力学比较

目的:建立大鼠体内落新妇苷的SPE-HPLC分析方法,通过复方银屑灵与单味土茯苓中落新妇苷药代动力学参数的比较,探讨配伍对落新妇苷大鼠体内药代动力学行为的影响。方法:雄性SD大鼠分别灌胃银屑灵、土茯苓提取物后,于不同时间眼眶静脉丛采血,固相萃取(SPE)法处理。采用反相高效液相色谱法,以甲醇-乙腈-0.05%甲酸为流动相梯度洗脱;Phenomenex C18色谱柱,柱温24℃,流速0.8 mL.min-1。结果:落新妇苷在0.266～53.1 mg.L-1线性关系良好(r=0.996);提取回收率为79.0%～89.1%;用非隔室模型估算药物动力学参数t1/2,Cmax,AUC0-t,AUC0-∞,MRT,各参数具有统计学意义。结论:该法可用于落新妇苷的药代动力学研究;配伍可提高落新妇苷在大鼠体内的生物利用度。     

辛芩冲剂中黄芩甙的含量测定

辛芩冲剂由细辛、黄芩、荆芥等十味中药组成，具有益气固表、祛风通窍等效用，用于肺气虚证之鼻鼽（过敏性鼻炎）、鼻窦炎等症。黄芩是辛芩冲剂中主药之一，故选择黄芩中主要有效成分黄芩甙作为测定指标，以期控制该制剂的质量。本文参考罗集鹏等的方法（《中药材》1990年10期第31页），并研究了辛芩冲剂中黄芩甙的提取方法及层析条件等，采用聚酰胺薄膜色谱—紫外分光光度法测定黄岑甙含量，取得满意效果。一、仪器与试剂751G分光光度计（上海分析仪器厂）；岛津UV260紫外分光光度仪；微量进样器（上海医用激光仪器厂）。辛芩冲剂及去黄…     

黄疸茵陈冲剂的质量标准探讨

黄疸茵陈冲剂为复方中成药,已收入1980年版《上海市药品标准》。为了进一步提高产品质量,确保治疗效果,本文采用薄层层析——紫外分光光度法测定其主要成分绿原酸和黄芩甙的含量,并拟定了产品质量控制标准。     

薄层—紫外法测定塞北红景天中红景天甙含量

塞北红景天经甲醇提取,用硅胶ＧＦ２５４ 薄层板,分离出红景天甙后,以紫外分光光度法测定红景天甙含量。     

斑蝥体中斑螯素的紫外分光光度测定法

斑蝥;;斑蝥素;;紫外分光光度法     

土茯苓二氢黄酮醇类成分研究

目的 :研究土茯苓的化学成分。方法 :用硅胶、大孔树脂、ODS柱色谱及HPLC方法进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 :分离鉴定了 5个二氢黄酮醇苷类化合物 ,分别为落新妇苷 (1) ,新落新妇苷 (2 ) ,异落新妇苷 (3) ,新异落新妇苷 (4 ) ,(2R ,3R) 花旗松素-3′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (5 )。 结论 :化合物 2 ,4 ,5为首次从该植物中分离得到。     

甘草总黄酮的微波提取及含量测定

目的：从甘草中提取总黄酮，并测定其含量。方法：运用微波技术提取甘草总黄酮，用比色法测定总黄酮含量。结果：测得甘草中总黄酮含量为1．721％，平均回收率为98．26％，RSD＝0．62％(n＝6)。结论：首次运用微波技术从甘草中提取出总黄酮，反应速度加快，实验结果令人满意。     

HPLC法测定复方菝葜颗粒中落新妇苷的含量

目的：建立高效液相法测定复方菝葜颗粒中落新妇苷含量的测定方法。方法：采用Waters SymmetryC18（150×4.6mm,5μm）为色谱柱,流动相为甲醇-0.3%冰醋酸（32∶68）,流速为1.0m L/min;检测波长为291nm。结果：落新妇苷的线性范围为0.12~1.2μg,平均回收率为98.19%,RSD为0.82%。结论：所建立方法操作简便、准确、可靠、重复性好,可用于复方菝葜颗粒中落新妇苷的含量测定。     

一测多评法对黔产侗药"钻更"中落新妇苷及

该实验以落新妇苷为内参物,研究一测多评法同时测定黔产侗药"钻更"药材中落新妇苷、黄杞苷的含量。在HPLC和UPLC的2个平台上,通过不同型号仪器相对校正因子的考察,探讨不同色谱体系之间所建立的相对校正因子的互用性,再根据建立的相对校正因子计算黄杞苷的含量,并与外标一点法、外标工作曲线法进行比较,以验证一测多评法的准确性。结果表明,在不同色谱体系中,落新妇苷与黄杞苷的相对校正因子及保留时间比值的重复性良好,RSD分别为2.0%,1.8%,均小于3.0%,侗药"钻更"药材中黄杞苷的一测多评法计算值与外标一点法、外标工作曲线法的相对偏差为1.6%~3.9%,RSD 2.0%~0.80%,符合相关要求,Pearson相关系数为0.999 8(P<0.01)。研究表明,采用一测多评法分析黔产侗药"钻更"药材中落新妇苷、黄杞苷的含量信息,该方法准确、可靠、重复性良好,可较好地控制该药材的内在质量。     

一测多评法测定贵州产切面红色土茯苓中3种活性成分的含量

目的:建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷及落新妇苷的一测多评分析方法,并验证该方法的可靠性和准确性。方法:以落新妇苷为内参物,通过方法学考察,建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷对落新妇苷的相对校正因子,根据建立的相对校正因子计算22批药材中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷的含量,并比较外标工作曲线法、外标一点法与一测多评法的结果,验证一测多评法的准确性和科学性。结果:建立的5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷相对于落新妇苷的相对校正因子重复性和耐用性良好;一测多评法计算的22批贵州产切面红色土茯苓药材样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷含量与外标工作曲线法、外标一点法的含量测定结果无明显差异(RSD4.0%);样品含量分析结果表明样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷和落新妇苷的含量差异较大,分别为0.106 3%~2.692%,0.031 29%~0.677 1%,0.581 2%~4.897%。结论:建立的一测多评法准确可靠,可用于贵州产切面红色土茯苓的多成分质量评价。     

Nuciferine stimulates insulin secretion from beta cells-an in vitro comparison with glibenclamide

Ethnopharmacological relevance

Several Asian plants are known for their anti-diabetic properties and produce alkaloids and flavonoids that may stimulate insulin secretion.

Materials and methods

Using Vietnamese plants (Nelumbo nucifera, Gynostemma pentaphyllum, Smilax glabra, and Stemona tuberosa), we extracted two alkaloids (neotuberostemonine, nuciferine) and four flavonoids (astilbin, engeletin, smitilbin, and 3,5,3′-trihydroxy-7,4′-dimethoxyflavone), and studied their insulin stimulatory effects.

Results

Nuciferine, extracted from Nelumbo nucifera, stimulated both phases of insulin secretion in isolated islets, whereas the other compounds had no effect. The effect of nuciferine was totally abolished by diazoxide and nimodipine, and diminished by protein kinase A and protein kinase C inhibition. Nuciferine and potassium had additive effects on insulin secretion. Nuciferine also stimulated insulin secretion in INS-1E cells at both 3.3 and 16.7 mM glucose concentrations. Compared with glibenclamide, nuciferine had a stronger effect on insulin secretion and less beta-cell toxicity. However, nuciferine did not compete with glibenclamide for binding to the sulfonylurea receptor.

Conclusions

Among several compounds extracted from anti-diabetic plants, nuciferine was found to stimulate insulin secretion by closing potassium-adenosine triphosphate channels, explaining anti-diabetic effects of Nelumbo nucifera.     

广西草珊瑚种质资源遗传多样性的AFLP分析

目的探索广西草珊瑚Sarcandra glabra种质资源的遗传多样性,为草珊瑚及其他中药种质资源保护、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子生物学依据。方法利用AFLP标记对来自广西不同产地的18份草珊瑚开展遗传多样性分析,采用NTSYS软件进行聚类和主坐标分析。结果从64对AFLP引物组合中筛选出8对用于扩增,共获得319条清晰可辨条带,其中多态性条带251条,多态性位点百分率为78.68%。聚类和主坐标分析表明广西草珊瑚种质资源的遗传基础存在一定的多样性,但遗传相似性系数(0.630 3～0.836 6)较大,遗传距离较近。结论广西草珊瑚种质资源的遗传多样性偏低,应该尽快采取相应措施,对草珊瑚资源进行合理保护。     

肿节风提取物对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的影响

目的:探讨肿节风提取物对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2裸鼠移植瘤的抑瘤作用及与瘤细胞凋亡的关系。方法:采用CNE1、CNE2细胞接种于裸鼠腋下,1周后成瘤,建立肿瘤模型,灌胃给药30 d;TUNEL法检测细胞凋亡;流式细胞仪进行细胞凋亡的分析;透射电镜观察瘤组织细胞超微结构的改变;免疫组化法检测瘤组织Bc l-2,Bax的表达。结果:肿节风治疗组的裸鼠瘤重、肿瘤相对体积明显低于对照组(P<0.01);TUNEL法检测肿节风组凋亡指数高于对照组(P<0.01);流式细胞技术显示肿节风组凋亡率分别为58.34%和63.76%,与对照组相比有统计学意义(P<0.01);电镜下用药组瘤组织中可见较多典型的细胞凋亡的形态学表现;免疫组化结果显示Bc l-2蛋白的表达明显低于对照组(P<0.01),而Bax蛋白的表达明显高于对照组(P<0.01)。结论:肿节风在体内具有抑制CNE1、CNE2移植瘤生长的作用,其机制与下调Bc l-2蛋白、上调Bax蛋白的表达进而促进肿瘤细胞的凋亡有关。