献血员中TTV感染的检测及部分基因序列分析

目的　探讨湛江地区献血员中输血传播病毒 (TTV)的感染状况及部分TTV的基因序列。方法　采用SDS和蛋白酶K法提取 4 80份正常献血员、6 0份血清丙氨酸转氨酶 (ALT)异常献血员的血清标本DNA ,应用套式PCR方法检测TTV的感染状况 ,并对部分扩增出的阳性片段进行克隆测序 ,与国内外报道的序列进行同源性比较。结果　在 4 80份正常献血员血清标本中 ,5 2份 (10 83% )TTVDNA阳性 ;在ALT异常的 6 0份献血员血清标本中 ,15份TTVDNA阳性 ,阳性检出率为 2 5 % ,明显高于正常献血员人群 (χ2 =9 84 7,P <0 0 1)。序列分析结果显示 ,从献血员中随机选出的 5例TTVDNA阳性片段 ,其序列与日本株 (AB0 0 8394 )和中国株 (TTVCH1)相应位置核苷酸序列的同源性大于97% ,可能属同一基因型。结论　湛江地区献血员中存在TTV感染 ,输血可能成为TTV感染的传播途径之一。     

上海地区部分人群输血传播病毒（TTV）感染的研究

目的调查上海地区输血传播病毒(TTV)在不同人群中的感染情况,探索TTV的高危人群和传播途径.方法应用半巢式PCR方法检测TTVDNA,并抽取部分阳性标本的PCR产物(249bp)测定核苷酸序列.结果检测有关人群8组计473例,其中非甲～非庚型肝炎病人60例,甲～庚型肝炎病人102例,血液透析病人55例,血液病儿童38例,健康人群68例,以及性病病人、静脉吸毒人群、肝癌病人各50例.TTVDNA总阳性率28.33%(134/473).阳性率波动在17.64%～50%.8组人群中静脉吸毒人群阳性率高达50%(25/50),性病组阳性率36%(18/50),该2组人群TTV感染率与健康人群(17.64%)相比均有显著性差异(x2=14.01P＜0.001,x2=5.12P＜0.05).其余各组群阳性率差异比较无统计学意义.将肠道传播途径的组群(甲、戊肝)与血液传播途径的组群(静脉吸毒者、血液病疾患、血液病人及乙、丙肝病人)比较分析,其阳性率分别为25.49%、32.17%.二者无显著性差异(x2=0.46,P＞0.05).20份阳性标本扩增产物测序结果,核苷酸序列与日本株(N22)同源性在85%以上的有15例,在＜85%的有5例.结论研究证实上海地区存在较广泛的TTV感染,其中静脉毒瘾者与性病患者为高危人群,传播途径除经血感染外,可能存在性接触传播及其他非血源性传播途径.TTV在人群中存在携带状态,可能是致病性不强的病毒.上海地区存在TTV毒株的变异.     

TTV母婴传播途径随访研究

目的 :了解输血传播病毒 (TTV)在孕产妇血清、乳汁及新生儿脐血中的感染情况 ,探讨其在母婴间的传播途径及生后 1年期间的带菌情况。方法 :应用套式 PCR对 40 0例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行 TTV DNA检测 ,对阳性的母亲及其新生儿进行 6个月、 12个月随访 ,对 TTV DNA成对阳性的母血、母乳及其婴儿的血进行克隆和序列测定 ,比较分析母婴 TTV感染株之间核苷酸的序列同源性。结果 :62例孕妇血清、 4例新生儿脐血清、 2 0例母乳检测出 TTV DNA,孕母 TTV感染率 15.5% (62 / 4 0 0 ) ,出生时母婴 TTV传播率 6.5% (4/ 62 ) ,阳性母亲乳汁 TTV DNA检出率 3 2 .2 % (2 0 / 62 ) ,经 6个月、 12个月随访孕母血 TTV DNA阳性的 42对母乳喂养的母婴 ,母血清 TTV DNA阳性率分别为2 1.3 % (9/ 4 2 )、 82 .1% (2 3 / 2 8) ,婴儿血清 TTV DNA阳性率分别为 40 .5% (17/ 4 2 )、 2 8.5% (8/ 2 8)。配对比较母婴间 TTV感染株序列同源性为 97.4%～ 99.8%。结论 :TTV可经非血液途径传播 ,TTV感染可自然转阴 ,并存在健康携带者     

山东泰安地区人群中TTV感染调查及TTV山东株基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎TTV感染及基因变异的状况。方法 应用RT－PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲－庚型肝炎患者血清中TTVDNA，并对阳性血清扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆法测充，分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血清中TTVDNA阳性检出率为19.5%(8/41)，而16例非甲－庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3%(5/16)。TTV山东第一析序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本 株和中国第一株相比较分别为94%和91％；山东TTV的两株序列间同源性均为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎患者中存在较高TTV感染，输血可能为会传播TTV感染途径之一，是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

TTV母婴传播途径随访研究

目的了解输血传播病毒(TTV)在孕产妇血清、乳汁及新生儿脐血中的感染情况,探讨其在母婴间的传播途径及生后1年期间的带菌情况.方法应用套式PCR对400例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行TTV DNA检测,对阳性的母亲及其新生儿进行6个月、12个月随访,对TTV DNA成对阳性的母血、母乳及其婴儿的血进行克隆和序列测定,比较分析母婴TTV感染株之间核苷酸的序列同源性.结果62例孕妇血清、4例新生儿脐血清、20例母乳检测出TTV DNA,孕母TTV感染率15.5%(62/400),出生时母婴TTV传播率6.5%(4/62),阳性母亲乳汁TTV DNA检出率32.2%(20/62),经6个月、12个月随访孕母血TTV DNA阳性的42对母乳喂养的母婴,母血清TTV DNA阳性率分别为21.3%(9/42)、82.1%(23/28),婴儿血清TTV DNA阳性率分别为40.5%(17/42)、28.5%(8/28).配对比较母婴间TTV感染株序列同源性为97.4%～99.8%.结论TTV可经非血液途径传播,TTV感染可自然转阴,并存在健康携带者.     

江西省九江市健康婴儿中TTV感染的调查

目的 了解九江市健康婴儿血清中输血传播病毒(TTV)感染状况及传播途径。方法用改良非编码区聚合酶链反应(UTR PCR)和N22 PCR法,分别检测婴儿和献血员血清中TTVDNA。结果 用改良UTR PCR检测86例婴儿中51例(53.5％)TTV DNA为阳性,59例献血员中TTV DNA全部阳性。而N22 PCR在这两类人群中阳性检出例数分别为14例(16.3％)和22例(37.3％)。在<30天龄、1～6月龄和7～12月龄婴儿中,TTV DNA检出率分别为0、33.3％、95.0％(UTR PCR)和O、7.4％、30.0％(N22 PCR)。结论 用UTR PCR检测表明,九江市95％的半岁以上婴儿及100％成人都感染有TTV,而用N22 PCR在相同人群中检测的结果明显偏低,两种方法的检出率差异有显著性;婴儿中TTV的原发感染可能是出生后从环境中获得,并且随其年龄增长感染逐渐增多,半岁后可接近同一地区健康成人的感染水平。     

健康献血员中TTV感染情况的检测

目的检测邢台和北京2城市健康献血员血清中TT病毒(TTV)感染情况,并结合北京市慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人TTV感染情况进行比较,以阐明TTV在健康人群中的感染情况及其存在的意义.方法用改良非编码区(UTR)PCR和N22 PCR法,分别检测健康献血员、慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人血清中TTV DNA.结果 UTR PCR检测表明,健康献血员TTV DNA检出率为98.3%,而60例慢性乙型肝炎和80例慢性丙型肝炎患者血清中TTV DNA检出率均为100%;N22 PCR在上述人群中TTV DNA检出率分别为32.6%,35.0%和42.5%.结论 TT病毒在人群中有很高的感染率,但N22 PCR检测的结果与UTR PCR相比明显偏低,二者间有显著性差异.在健康人群和慢性肝炎病人中,采用相同PCR方法的TTV DNA检出率无显著性差异.     

山东地区输血传播病毒（TTV）检测和部分基因克隆及序列测定

目的 了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测26例山东地区非甲－庚型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中TTVDNA,并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序,分析其基因变异的情况。结果 26例非甲－庚型肝炎中11例TTV－DAN阳性（42．3％）。对其中两株（TTVSD4、TTVSD5）部分基因克隆测序,并与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性（25．0％）,对其中一株（TTVSD6）部分基因克隆与测序,与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99％;TTV山东株三株间核苷酸同源性均为99％。结论 本项研究证实山东地区非甲－庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染,TTV感染可能具有嗜肝性,而且可能与肝功能损害有关,是引起非甲－庚型肝炎重要病原。     

青岛地区部分人群输血传播病毒感染情况调查

[目的 ]了解青岛地区不同人群中输血传播病毒 (TTV)感染情况。 [方法 ] 1 998～ 1 999年应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测青岛市部分不同人群血清抗 TTVIgG ,以巢式PCR反应测定抗 TTVIgG阳性血清和部分阴性血清的TTVDNA。 [结果 ]血清抗 TTVIgG阳性率 ,健康体检者、献血员、卖淫女、各类肝病患者分别为 9 9% (66/ 665)、7 0 %(1 3/ 1 85)、1 2 5 % (3/ 2 4 )、1 5 3 % (2 1 / 1 37) ;血清TTVDNA阳性率、抗 TTVIgG阳性与阴性者分别是 96 1 % (99/ 1 0 3)、7 9% (3/ 38)。 [结论 ]青岛地区不同人群TTV感染较常见。应对献血员进行TTV感染指标的检测。     

输血传播病毒（TTV）感染的研究

目的: 了解输血传播病毒 (TTV) 在广西人群中感染情况, 探讨TTV 在肝炎发病中的作用与地位。方法: 用套式聚合酶链反应检测血清中TTVDNA,用ELISA或RT—PCR法排除非甲—庚型肝炎病毒。结果:正常献血员TTVDNA阳性率为16.4% (12/73), HBV感染者TTV DNA阳性率为4.3% (2/46), 显著低于正常献血员(χ2 = 3.97, P< 0.05), 非甲—庚肝炎患者TTV DNA阳性率为35.4% (6/17), 与正常献血员无显著性差异(χ2 = 3.0, P> 0.05), TTV感染在男女性别中无显著性差异, 但在30～50岁人群中感染率(17/78) 显著高于其他年龄段(4/58) (χ2 = 4.92, P< 0.05)。结论: 广西存在TTV 感染,且中年人群高于其他年龄段人群,TTV与HBV可有存在互相抑制或干扰作用, 但TTV可能不致病或具轻微致病性     

山东省部分人群庚型肝炎病毒核酸检测与基因型分析

[目的 ]了解山东地区庚型肝炎病毒 (HGV)的感染状况及基因型分布特点。 [方法 ]采用逆转录 套式聚合酶链反应 (RT nPCR)方法检测 1 996～ 1 998年济南市传染病医院收治的病毒性肝炎患者及职业献血员血清中的HGVRNA ,并对检出的 3株HGV分离株的核苷酸序列经PCR扩增克隆后进行基因型分析。 [结果 ]血清HGVRNA ,2 0例甲型肝炎和 2 0例戊型肝炎患者均为阴性 ,乙型肝炎患者阳性率为 4 9% (5/ 1 0 3) ,慢性丙型肝炎患者阳性率为 2 8 6 % (6/ 2 1 ) ,非甲～戊型肝炎患者阳性率为 2 1 2 % (7/ 33) ,职业献血员阳性率为 2 3 % (1 / 4 4 )。本次分离的 3株HGV株的核苷酸序列同源性为 97 3 %～ 97 9% ,与非洲株GBV C的同源性为 88 0 %～ 89 9% ,与美国株HGV的同源性为 88 0 %～90 3 % ,与亚洲株 3 #的同源性为 94 7%～ 95 2 %。 [结论 ]山东地区肝炎患者及职业献血员中存在HGV感染 ,3株HGV分离株均属同一个基因型 ,即 3型     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。     

山东省部分地区不同人群输血传播病毒感染状况调查

目的：了解山东省不同人群输血传播病毒（TTV）的感染状况。方法：1999年12月至2000年11月,在泰安、济宁、枣庄、聊城和济南等地采集不同人群血清,用套氏聚合酶链反就检测TTV DNA。结果：合计检测血清257份,TTV和DNA阳性68份,阳性率为26．46％。献血员、血液病患者、丙型肝炎患者和非甲－非庚型肝炎患者的阳性率均高于体检的饮食服务人员（P＜0．01或P＜0．05）。结论：山东省部分地区不同人群均有较高的TTV感染率。     

深圳地区HBsAg阳性人群TTV核酸序列分析

目的 分析HBsAg阳性和阴性人群输血传播肝炎病毒（TTV）感染率的差异及TTV病毒核酸序列。方法应用套式PCR扩增TTV病毒核酸序列，将扩增的TTV核酸片段进行核酸测序，构建进化树分析TTV核酸序列的同源性。结果 HBsAg阳性和阴性人群TTV感染率比较，差异无统计学意义，深圳TTV病毒株与日本TTV病毒株的核酸序列同源性较大。结论人群中TTV病毒株携带率与HBsAg的携带率无相关性。     

青岛地区部分人群输血传播病毒感染情况调查

[目的]了解青岛地区不同人群中输血传播病毒（TTV）感染情况。[方法]1998-1999年应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测青岛市部分不同人群血清抗-TTVIgG，以巢式PCR反应测定抗-TTVIgG阳性血清和部分阴性血清的TTVDNA。[结果]血清抗-TTVIgG阳性率，健康体检者，献血员，卖淫女，各类肝病患者分别为9.9%(66/665），7.0%(13/185),12.5%(3/24),15.3%(21/137)；血清TTVDNA阳性率，抗-TTVIgG阳性与阴性者分别是96.1%(99/103),7.9%(3/38)。[结论]青岛地区不同人群TTV感染较常见。应对献血员进行TTV感染指标的检测。     

不孕女性中人巨细胞病毒包膜糖蛋白B基因的分型

目的:探讨不孕女性中人巨细胞病毒(HCMV)感染流行株的包膜糖蛋白B(gB)基因型分布及其与不孕的相关性。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测300例女性不孕患者血清中HCMV-IgM抗体,ELISA阳性的患者采集晨尿接种于人胚肺成纤维细胞(HELF),提取细胞病变(CPE)阳性培养液中的病毒DNA,以巢式PCR(nest PCR)法扩增HCMVgB基因,利用限制性核酸内切酶HinfΙ、RsaΙ对HCMV gB基因进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析判断基因型别;随机抽取11例送检测序,测序结果使用Clustal X软件与GenBank标准病毒株进行序列比对,用MEGA4.1构建核苷酸序列的基因树。结果:300例女性不孕患者中HCMV-IgM抗体阳性45例,阳性率为15.0%。45例患者晨尿接种HELF细胞,观察1月后检测到的病毒阳性37例,阳性率为12.3%。37例病毒阳性患者中最常见的基因型为gB 1型25例(67.6%),其次为gB 3型7例(18.9%)和gB 2型5例(13.5%),没有检测到gB4基因型。测序结果与GenBank标准病毒株HCMVADl69和Towne进行序列比对后,用MEGA4.1成功构建基因树。结论:女性不孕症的发生与HCMV感染有明显相关性,HCMV感染导致的不孕中最常见的gB基因型为gB 1型,其次是gB 3、gB 2型,未检测到gB 4型。     

常州地区不同人群TTV感染情况的调查

目的 调查常州地区正常人群、献血员及不同肝炎患者TTV（transfusion transmittcd virus)感染情况。方法 运用巢式聚合酶链反应（巢式PCR）对常州地区152例健康体检人员,121例正常献血员,301例不同肝炎患者进行TTV DNA的检测。结果 常州地区不同人群TTV DNA阳性分别为：正常人群10．53％、献血员11．57％、甲型肝炎12％、乙型肝炎27．16％丙型肝炎0、戊型肝炎0、庚型肝炎0、非甲－庚型肝炎34．72％。正常人群、献血员中阳性率与乙型肝炎、非甲－庚型肝炎中的阳性率相比差异有显著性（P＜0．05）。且正常人群、献血员中TTV DNA阳性者内氨酸转氨酶（ALT）均正常。结论 常州地区正常人群与献血员中TTV携带者较常见;部分非甲－庚型肝炎可能与TTV相关。     

山东省部分地区不同人群输血传播病毒感染状况调查

[目的]了解山东省不同人群输血传播病毒(TTV)的感染状况.[方法]1999年12月至2000年11月,在泰安、济宁、枣庄、聊城和济南等地采集不同人群血清,用套氏聚合酶链反应检测TTVDNA.[结果]合计检测血清257份,TTVDNA阳性68份,阳性率为26.46%.献血员、血液病患者、丙型肝炎患者和非甲～非庚型肝炎患者的阳性率均高于体检的饮食服务人员(P＜0.01或P＜0.05).[结论]山东省部分地区不同人群均有较高的TTV感染率.     

山东省部分人群庚型肝炎病毒核酸检测与基因型分析

[目的]了解山东地区庚型肝炎病毒（HGV）的感染状况及基因型分布特点；[方法]采用逆转录-套式聚合酶链反应（RT-nPCR)方法检测1996-1998年济南市传染病医院收治的病毒性肝炎患者及职业献血员血清中的HGVRNA，并对检出的3株HGV分离株的核苷酸序列经PCR扩增克隆后进行基因型分析。[结果]血清HGVRNA，20例甲型肝炎和20例戊型肝炎患者均为阴性。乙型肝炎患者阳性率为4.9%(5/103)，慢性丙型肝炎患者阳性率为28.6%(6/21)。非甲-戊型肝炎患者阳性率为21.2%(7/33)。职业献血员阳性率为2.3%(1/44)。本次分离的3株HGV株的核苷酸序列同源性为97.3%-97.9%，与非洲株GBV-C的同源性为88.0%-89.9%，与美国株HGV的同源性为88.0%-90.3%，与亚洲株3#的同源性为94.7%-95.2%。[结论]山东地区肝炎患者及职业献血员中存在HGV感染，3株HGV分离株均属同一个基因型，即3型。     

输血感染TT病毒的检测及致病性的研究

目的 探讨受血者接受TTV－DVA阳性血后引起感染的情况。方法 采用套式PCR和PCR产物测序，对献血者和受血者进行TTV感染率的调查和基因序列分析。结果 223份献血者血清检出TTV感染96份（43.1%），22名受血者输注TTV－DNA阳性血后，有14名（63.6%）转为阳性，其中两名与供血者TTV－DNA序列同源性达100％。仅1例血清转氨酶轻度升高。结论 本组献血者中TTV感染率较高，TTV可经血传播感染，但其致病性较弱，4周后，少数受血者TTV－DNA可转为阴性。