细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用

目的：探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化（EMT）过程的相关性。 方法：采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织（研究组）与13例正常胰腺组织（对照组）中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。 结果：研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中Snail、Slug均不表达,E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.225,P=0.025）,与vimentin表达呈正相关（r=0.493,P<0.01）;Slug表达与vimentin表达呈正相关（r=0.358,P=0.001）。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关（均P<0.01）。 结论：Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用,是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。     

Snail在胰腺癌中的表达及其与上皮-间叶转化的关系

目的 观察上皮-间叶转化（EMT）的标记分子在胰腺癌组织中的表达情况以及与胰腺癌恶性生物学行为的相关性。方法 采用免疫组织化学的方法检测56例胰腺癌组织中Snail、上皮源性标记物E-cadherin、间叶源性标记物Vimentin蛋白的表达，并与临床病理资料作对照分析。结果 56例胰腺癌组织中Snail阳性表达率为3696（20／56），26例中观察到E-cadherin表达的降低，同时6例观察到Vimentin表达上调。Snail的表达和淋巴结转移（P〈0．05）、远处转移（P〈0．0i）、E-cadherin的表达降低（P〈0．05）、Vimentin的高表达（P〈0．05）都存在着相关性。而E-cadherin表达的降低和Vimentin的高表达都与胰腺癌的转移存在着明显的相关性。结论 Snail在胰腺癌组织中存在着重新表达的现象，Snail可能通过调控上皮-间叶转化从而在胰腺癌的侵袭过程中发挥重要作用。     

丙型肝炎病毒核心蛋白通过活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化的研究

目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白（HCVc）对肝癌细胞信号转导子和转录激活子3（stat3）通路及上皮间质转化（EMT）的影响。 方法将含HCVc基因序列的重组质粒pEGFP-N3-HCVc转染人肝癌细胞HepG2,Real-Time PCR和Western blotting检测HCVc、总stat3、磷酸化stat3（p-stat3）及EMT指标蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail的表达,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。 结果划痕实验及Transwell实验结果显示,过表达HCVc可增强HepG2细胞的迁移和侵袭能力;stat3通路抑制剂AG490处理可抑制HepG2细胞的侵袭能力。RT-PCR和Western blotting结果显示,过表达HCVc后,HepG2细胞中p-stat3、Vimentin及Snail在表达升高,E-cadherin表达下降;AG490处理可下调p-stat3、Vimentin及Snail表达,增强E-cadherin表达。 结论HCVc可活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化,增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。     

卵巢上皮性肿瘤微血管密度及VEGF表达的病理意义

目的：探讨血管生成与卵巢上皮性肿瘤的发展关系。方法：应用免疫组化法研究了卵巢上皮性肿瘤石蜡包埋的病理组织，其中良性腺瘤17例，交界性腺瘤15例，卵巢癌29例。结果：良性腺瘤、交界性腺瘤、卵巢癌MVD值递增，交界性肿瘤及卵巢癌组织中VEGF表达率均明显高于良性肿瘤，有淋巴结转移的VEGF表达率，MVD值较无淋巴结转移者明显增高，但两者与卵巢癌的病理分级及临床分期无关，VEGF阴性组MVD值低于VEGF阳性组。结论；VEGF表达率，MVD值在卵巢上皮性肿瘤的生长及转移中可能起着重要作用。     

上皮性卵巢肿瘤患者血管内皮生长因子水平的检测

目的检测卵巢上皮性肿瘤患者血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化,探讨其临床价值。方法采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法(ELISA)检测20例上皮性卵巢肿瘤、12例交界性上皮性卵巢肿瘤和48例上皮性卵巢癌患者血中VEGF水平。结果良性、交界性及恶性卵巢上皮肿瘤患者血VEGF水平依次升高分别为(686±150)、(750±90)和(1183±293)ng/L,P<0.01;血VEGF在浆液性卵巢腺癌、低分化卵巢腺癌中水平明显升高(P=0.046和P=0.029),而与临床分期无关。结论检测血VEGF水平有助于恶性卵巢上皮性肿瘤的术前诊断及估计预后。     

卵巢上皮性肿瘤中p16抑癌基因的表达及意义

目的 探讨抑癌基因p16在卵巢上皮癌的发生及发展的关系。方法 应用标记抗生蛋白链菌素生物素法（LSAB）检测正常卵巢、良性卵巢瘤、交界性卵巢上皮瘤以及卵巢上皮癌的组织中抑癌基因p16的表达情况。结果 p16基因的蛋白表达在恶性卵巢肿瘤中检出率为18．4％，明显低于良性卵巢肿瘤（85％）、交界性卵巢上皮瘤（90％）、正常卵巢组织（100％），P＜0．001。结论 提示p16基因广泛存在于卵巢组织中，其突变或缺失与卵巢上皮癌发生发展及预后有关。     

波形蛋白、E-钙黏蛋白在原发性肝癌上皮间质转化过程中的表达及其意义

目的 探讨波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)在原发性肝癌(HCC)的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学的方法(SP法)分别检测55例HCC癌组织、癌旁组织和20例非肿瘤性正常肝组织中Vimentin及E-cadherin的表达情况,分析它们与HCC临床病理学特征的关系及对患者预后的影响.结果 Vimentin在癌组织中阳性表达率为69.1％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).E-cadherin在癌组织中阳性表达率为27.3％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).Vimentin、E-cadherin二者表达呈负相关关系(r=-0.653,P＜0.05).Vimentin在TNMⅢ～Ⅳ期组、低分化组、肿瘤结节多个组、转移复发组的表达分别高于TNM Ⅰ～Ⅱ期组(x2=7.267,P＜0.05)、中高分化组(x2=4.045,P＜0.05)、肿瘤结节单个组(x2=12.143,P＜0.05)、无转移复发组(x2=7.267,P＜0.05).E-cadherin的表达在肿瘤结节单个组高于肿瘤结节多个组,差异具有统计学意义(x2=6.878,P＜0.05).随访患者表明,Vimenfin阳性表达组患者无病生存率明显低于Vimentin阴性表达组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 Vimentin、E-cadherin参与HCC上皮间质转化过程,Vimentin的高表达、E-cadherin的低表达与HCC的发生、发展密切相关.检测HCC患者Vimentin及E-cadherin的表达水平可协助HCC的诊断及判断预后.     

胃癌原发灶中上皮间质转化相关因子和CD133的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的研究上皮间质转化（EMT）相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白的定位及定量表达,分析EMT相关因子及CD133蛋白表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系,Spearman等级相关分析EMT相关因子和CD133表达的关系,Kaplan-Meier方法分析EMT相关因子及CD133表达与胃癌患者生存的关系。结果①胃癌组织中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表达相对灰度值明显高于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（Snail：0.599±0.114比0.259±0.108,P=0.020;N-cadherin：0.754±0.154比0.329±0.134,P=0.001;CD133：0.635±0.119比0.485±0.116,P=0.029）,E-cadherin蛋白表达相对灰度值明显低于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（0.378±0.123比0.752±0.156,P=0.003）。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达明显高于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,而E-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著低于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,CD133蛋白表达平均相对灰度值在有淋巴管浸润、N3淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著高于无淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移、肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）。③Snail、N-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达分别均呈正相关（rs=0.278,P=0.048;rs=0.406,P=0.003）,而E-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达呈负相关（rs=-0.504,P=0.000）。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者（P〈0.05）,联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。结论EMT与胃癌肿瘤起始细胞特性之间存在明显相关,并且两者与胃癌的高侵袭的临床病理特征相关,联合EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与CD133能够最有效预测胃癌患者的预后。     

来那度胺通过抑制VEGF蛋白表达抑制人肝癌细胞LM3的迁移和侵袭

目的 研究来那度胺对人肝癌细胞LM3细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 采用不同浓度的来那度胺（0、5、10、20、40、80 μmol/L）处理人肝癌细胞LM3,通过检测对LM3细胞活性变化和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达量变化筛选最适实验药物浓度。通过划痕实验以及Transwell侵袭实验检测来那度胺对LM3细胞迁移率及侵袭数量的影响。采用蛋白印迹法（Western blotting）检测上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白标志物E-cadherin、Vimentin、Snail、VEGF的表达情况。结果 确定40 μmol/L来那度胺为最佳浓度。40 μmol/L来那度胺处理LM3细胞48 h后迁移率为（40.75±4.17）%,侵袭数为（43.67±9.03）,与对照组[迁移率（66.80±3.49）%,侵袭数（135.77±13.67）]比较具有统计学差异（P＜0.05）。在VEGF作用下LM3细胞发生EMT,迁移率（84.66±5.09）%和侵袭数（229.73±15.16）明显增加（均P＜0.05）;同时VEGF表达量也升高（P＜0.05）。而来那度胺作用于VEGF预处理细胞后,VEGF表达量下降（P＜0.05）,EMT受到抑制,随之迁移率（57.69±4.63）%和侵袭数（108.63±13.27）降低（P＜0.05）。结论 本研究表明,来那度胺可能通过抑制VEGF蛋白表达从而抑制人肝癌细胞LM3的迁移和侵袭。     

去甲斑蝥素对TGF-β_1诱导的人近端肾小管细胞上皮间质转分化以及转录因子Snail1表达的影响

目的：探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株（HK-2）上皮间质转分化以及转录因子Snail1的影响。方法：常规培养HK-2细胞,分为对照组、TGF-β1组、去甲斑蝥素组（NCTD组）。对照组为无血清DMEM培养,TGF-β1组为TGF-β15ng/ml诱导,NCTD组为不同浓度NCTD（0.5、1.0、2.5μg/ml）与TGF-β1（5ng/ml）共同作用,各组作用时间48h。采用RT-PCR、Western blot分别检测α-SMA、E-cadherin与Snail1表达水平的变化。结果：与对照组相比,TGF-β1组α-SMA mRNA和蛋白表达上调（P〈0.05）,E-cadherin mRNA和蛋白表达下调（P〈0.05）;与TGF-β1组相比,NCTD干预组α-SMA mRNA和蛋白表达下调（P〈0.05）,而E-cadherin mRNA和蛋白表达上调（P〈0.05）,且均呈剂量依赖性。与对照组相比,TGF-β1组Snail1 mRNA和蛋白表达上调（P〈0.05）;与TGF-β1组比较,NCTD干预组Snail1 mRNA和蛋白表达下调（P〈0.05）,具有一定的剂量依赖关系。结论：去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与下调转录因子Snail1的表达有关。     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

转录抑制因子Snail表达与胃癌Lauren分型的关系研究

目的探讨转录抑制因子Snail表达与胃癌Lauren分型的关系。方法Western印迹检测肠型胃癌细胞系（N87）和弥漫型胃癌细胞系（AGS）中Snail和上皮型E钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。将糖原合酶激酶．3B（GSK-3B）质粒转染胃癌细胞系,检测Snail和E-cadherin的表达变化。收集2000年2月至2005年12月间在复旦大学附属中山医院行胃癌根治术的77例术后组织标本．采用免疫组织化学染色检测Snail在胃癌组织中表达．并分析其与胃癌Lauren分型之间的关系。结果Snail在N87中低表达,在AGS中高表达;E-cadherin表达与Snail相反。转染GSK-3B后,胃癌细胞Snail表达显著下调,E-cadherin表达显著上调（P〈0．01）。使用不同浓度的GSK-3B抑制剂氯化锂处理后．胃癌细胞Snail表达显著上调,且具有明显浓度依赖性（P〈0．01）。21例肠型胃癌中Snail低表达16例,高表达5例;56例弥漫型胃癌中Snail低表达21例,高表达35例;肠型胃癌中Snail表达明显弱于弥漫型,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Snail的表达与胃癌Lauren分型有关．是一种潜在的确定胃癌分型的分子标志物。     

STAT3及其磷酸化STAT3和E钙黏蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨结直肠癌组织中STAT3及其磷酸化STAT3（P-STAT3）和E钙黏蛋白（E—cadherin）表达的相关性及其与肿瘤浸润转移的关系。方法用免疫组织化学Elivision^TM plus法检测江西赣南医学院第一附属医院病理科存档的50例结直肠癌组织及相应癌旁组织中STAT3、P-STAT3及上皮细胞间质化（EMT）相关蛋白E—cadherin的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果50例结直肠癌组织中STAT3和p-STAT3及E—cadherin的阳性表达率分别为72％（36／50）、76％（38／50）和26％（13／50）,相应癌旁组织中的表达则分别为24％（12／50）和26％（13／50）及68％（34／50）,结直肠癌组织STAT3和p-STAT3的表达明显高于相应癌旁组织,而E—cadherin的表达则明显低于癌旁组织（均P〈0．05）。STAT3、P-STAT3及E．cadherin表达与肿瘤浸润深度、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关（均P〈0．05）。STAT3和P—STAT3蛋白在结直肠癌中的表达与E-cadherin呈显著负相关（均P〈0．05）。结论STAT3和p-STAT3可能通过对E—cadherin的抑制作用进而引起EMT现象,从而导致结直肠肿瘤的发生和进展。     

Twist、E-cadherin在原发性乳腺癌组织中的表达及相关性研究

目的 观察Twist蛋白和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达情况,探讨二者在乳腺癌浸润转移过程中的作用及关系.方法 应用免疫组织化学方法（SP法）检测60例乳腺浸润性导管癌组织和30例乳腺癌旁正常组织中Twist蛋白和E-cadherin蛋白的表达情况,分析二者与乳腺癌临床病理因素的关系.结果 Twist蛋白与E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为63.3％、71.6％,在癌旁正常组织中的阳性表达率分别为16.7％、90.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）.Twist蛋白及E-cadherin蛋白的表达与患者年龄、肿块大小均无明显相关性（P＞0.05）,与临床分期、组织学分级和淋巴结转移具有显著相关性（P＜0.05）.Spearman相关性检验示二者之间呈负相关（P＜0.05）.结论 在原发性乳腺癌组织中,Twist蛋白呈高表达,E-cadherin蛋白呈低表达,均与乳腺癌临床分期、组织学分级和腋窝淋巴结转移情况有相关性,且二者表达呈显著负相关.提示Twist蛋白可能通过调控E-cadherin的表达,进而调控肿瘤细胞的EMT过程,促进乳腺癌的发生及转移.     

EMT标记蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的 通过检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、a-SMA在前列腺癌组织中的表达及其与病理分级、临床分期的关系,初步判断体内EMT现象与前列腺癌进展是否存在确切的关联.方法 采用免疫组织化学方法检测35例正常前列腺组织和43例前列腺癌组织中的上皮标记蛋白E-cadherin与间质标记蛋白Vimentin和a-SMA的表达情况,并与病理分级和临床分期之间的关联作统计学分析.结果 E-cadherin、Vimentin、a-SMA在前列腺癌组织中的表达率分别为48.8%,72.1%,36.5%.这些蛋白的表达与前列腺癌的分化程度,病理分期密切相关(P<0.05),E-cadherin与Vimentin、a-SMA蛋白表达负相关.结论 EMT转化现象是人体内前列腺癌恶性进展的重要原因.这种细胞属性的变化现象与肿瘤的侵袭和预后密切相关.     

前列腺癌肿瘤组织中E-cadherin和N-cadherin的表达及意义

目的:探讨上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin和N-cadherin在中低危前列腺癌和高危前列腺癌中的表达差异,以及E-cadherin和N-cadherin的表达与患者年龄、血清PSA水平、肿瘤组织Gleason评分的关系。方法:回顾性分析42例前列腺癌患者临床资料,将前列腺癌分为高危组27例和中低危组15例。免疫组化法检测两组E-cadherin和N-cadherin的表达,并比较两组有无差异;同时分析E-cadherin和N-cadherin的表达阳性率与血清PSA值、肿瘤Gleason评分及患者年龄的关系。结果:E-cadherin在中低危组的表达水平高于高危组(6.1±0.51 vs 4.2±0.37,P0.01),并且在中低危组中表达阳性率显著高于高危组(73.3%vs 25.9%,P0.01),E-cadherin在PSA20μg/L的患者中表达阳性率高于PSA≥20μg/L的患者(66.7%vs 29.6%,P0.05),在Gleason评分5~7分的患者中,其表达阳性率明显高于Gleason评分8~10分的患者(60.9%vs 21.1%,P0.05)。N-cadherin在中低危组的表达水平低于高危组(3.7±0.32 vs 7.5±0.58,P0.01),并且在中低危组中的表达阳性率低于高危组中(13.3%vs 59.3%,P0.05),在Gleason评分5~7分的患者中,其表达阳性率明显低于Gleason评分8~10分的患者(26.1%vs 63.2%,P0.05),N-cadherin在PSA20μg/L和PSA≥20μg/L的患者中表达阳性率没有差异(P0.05)。E-cadherin和N-cadherin在年龄≥70岁和70岁的患者中表达阳性率均没有明显差异(P0.05)。结论:E-cadherin和N-cadherin在高危前列腺癌和中低危前列腺癌表达阳性率及表达水平存在差异,即两者与前列腺癌的侵袭转移有关,并且E-cadherin和N-cadherin的表达可能与前列腺癌Glesaon评分、血清PSA水平有关。     

结直肠癌组织中Ezrin和E-cadherin蛋白的表达特点及意义

目的:探讨结直肠癌组织中Ezrin和钙黏素E(E-cadherin)蛋白的表达及其与临床病理因素的关系.方法:应用免疫组织化学光/微波(LW/MW)-EliVisionTM法,检测100例结直肠癌组织中Ezrin和E-cadherin的表达情况,并分析其与结直肠癌浸润转移等的关系.结果:Ezrin和蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达明显高于正常黏膜,而E-cadherin蛋白在正常黏膜中的阳性表达高于结直肠癌组织(P＜0.05).Ezrin的高表达与结直肠癌浸润深度、淋巴结是否转移有关(P＜0.05);而与TNM分期、分化程度无关(P＞0.05).E-cadherin的表达与结直肠癌分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结是否转移有关(P＜0.05).二者在结直肠癌组织中的表达呈显著负相关(r=-0.673,P＜0.01).结论:Ezrin和E-cadherin蛋白在结直肠癌的发生、发展中起着重要作用,联合检测可为结直肠癌浸润转移和预后的判断提供理论依据.     

缺氧微环境对胰腺癌细胞发生上皮向间叶转化的诱导作用

目的 探讨胰腺癌细胞在缺氧微环境中通过发生上皮向间叶转化(EMT)从而获得侵袭性表型的可能机制.方法 在缺氧微环境下培养胰腺癌细胞Pane-1、Transwell侵袭小室对比检测细胞在缺氧微环境下侵袭能力的变化情况.Western blot、免疫荧光检测缺氧对Panc-1细胞上皮细胞标记分子E-cadherin、间叶细胞标记分子vimentin表达的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测缺氧对EMT诱导因子Snail表达的影响.将编码HIF-1α cDNA的真核表达载体pCD-NA 3.1-HIF-1α瞬时转染Panc-1细胞,Western blot检测HIF-1α对E-cadherin、vimentin表达的影响.结果 常氧组细胞每高倍镜视野穿透数为(84±3)个,缺氧组为(121±5)个,差异有统计学意义(P<0.01).Panc-1细胞在常氧、缺氧12 h、缺氧24 h、缺氧48 h条件下E-cadherin蛋白的相对值分别为(0.59±0.04、54.00±0.05、0.45±0.10、0.36±0.03);vimentin蛋白的相对值分别为:(0.36±0.05、0.41±0.04、0.48±0.06、0.58±0.05),缺氧同常氧组比较差异有统计学意义(P<0.05).缺氧微环境下Panc-1细胞Snail mRNA的表达量升高,在缺氧第3天后差异具有统计学意义(P<0.05).Panc-1细胞转染HIF-1α前后,E-cadherin蛋白的相对值分别为0.63±0.05、0.47±0.07;Vvi-mentin蛋白的相对值分别为0.47±0.07、0.32±0.04,转染前后差异有统计学意义(P<0.05).结论 缺氧微环境可能通过活化HIF-lα、Snail等转录因子,促进胰腺癌细胞发生上皮向间叶转化,产生侵袭性表型.     

RhoA和Snail的表达与胃癌生物学行为的关系

目的检测RhoA和Snail在胃癌组织中的表达,以探讨它们与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学方法检测189例胃癌患者术后石蜡标本中RhoA和Snail蛋白的表达,分析它们的相关性以及与胃癌临床病理学特征和生存的关系。结果①RhoA和Snail在胃癌组织中的表达阳性率均分别明显高于其在癌旁组织（RhoA：P=0.008;Snail：P=0.000）和正常胃黏膜组织（RhoA：P=0.010;Snail：P=0.000）中的表达阳性率;RhoA在癌旁组织中的表达与其在正常胃黏膜组织中的表达差异无统计学意义（P=0.782）,而Snail在癌旁组织中的表达明显高于其在正常胃黏膜组织中的表达,差异有统计学意义（P=0.001）。②RhoA在胃癌组织中的阳性表达与胃癌的TNM分期和Lauren分型有关（P〈0.05）,而与胃癌的肿瘤直径、有无淋巴结转移及分化程度无关（P〉0.05）。Snail在胃癌组织中的阳性表达与胃癌肿瘤直径、有无淋巴结转移、分化程度、TNM分期及Lauren分型均有关（P〈0.05）。RhoA和Snail在胃癌组织中的阳性表达均与患者的性别和年龄无关（P〉0.05）。③胃癌组织中RhoA蛋白和Snail蛋白的表达呈显著正相关（rs=0.203,P=0.005）。④肿瘤TNM分期、RhoA及Snail表达和淋巴结转移均为胃癌术后患者的独立预后因素（P〈0.05）。结论 RhoA和Snail在胃癌组织中表达上调,它们可能共同参与了胃癌的发生、发展过程,且RhoA/Snail信号途径可能在胃癌的浸润和转移过程中发挥着重要作用。