肾综合征出血热病毒PS-6株和JR-C-1株抗原性的比较研究

目的 比较肾综合征出血热（HFRS）汉坦病毒（HV）PS-6株和JR-C-1株的抗原性，选择制备疫苗的毒种，方法 应用空斑减少中和试验（PRNT）和McAb间接免疫荧光试验（IFAT），检测PS-6株和JR-C-1株HFRSHV的抗原性。结果 PS-6和JR-C-1均为Ⅰ型HV。两株病毒的免疫血清对17株国内外不同来源的HV的中和反应和76-118株汉滩病毒（HTHV的免疫血清基本相似。但对一些病毒的中和反应效价两有差异。与多株McAb反应结果显示，两株病毒间存在抗原决定簇的差异。结论 PS-6和JR-C-1的抗原性与76-118株HTHV基本相同，PS-6和JR-C-1之间存在抗原性和抗原决定簇的差异。两合用抗原性会有互补作用。     

汉中地区病人血清分离出流行性出血热病毒

用Vero—E_6细胞直接从陕西汉中地区EHF 患者急性期血清中分离到89-L 株病毒。分离的病毒能在Vero-E_6细胞连续稳定传代,检测10份EHF 病人双份血清抗体滴度均有4倍以上升高,兔抗KHFV-76-118株免疫血清能阻断89-L 株抗原同EHF McAb 4E_7的免疫反应,抗呼肠弧病毒Ⅰ～Ⅲ型免疫血清、抗类环状病毒免疫血清、抗CMV 免疫血清和抗HSV 免疫血清均无此阻断作用;McAb 型别鉴定试验证实为EHF 野鼠型毒株。从陕西汉中地区EHF 患者急性期血清中分离出EHF 病毒,表明该地区是EHF 的又一流行区。     

流行性出血热的某些新进展——“国际流行性出血热讨论会(1988.10.31～11.2中国武汉)”部分国外学者报告综述

1 汉坦病毒的血清型及形态结构等新认识李镐汪指出,汉坦病毒(Hantaan virus,HV)是布尼亚病毒科的一个新属—Haniavirus属,代表株是汉坦76/118株。来自世界各地分离到的HV属病毒可分为6个血清型,即:Ⅰ姬鼠型(汉坦76/118株);Ⅱ大鼠型(Seoul株,包括实验大白鼠及褐家鼠型等);Ⅲ.棕背     

淄博市6株流行性出血热病毒地方株抗原与毒力分析

选择流行性出血热疫区IFAT试验阳性褐家鼠肺组织,流行性出血热病人外周静脉血及尿液(IFAT试验阳性),接种Vero—E_6细胞,分离出6株EHF病毒株.应用McAb对这6株EHF毒株进行了抗原分析及毒力研究.报告如下.1 材料与方法     

日本和南朝鲜分离的两株肾综合征出血热病毒之间的抗原差异

作者检测了由朝鲜黑线姬鼠分离的汉坦病毒(HV)76-118株和日本大鼠分离的肾综合征出血热(HFRS)B-1株的多肽组成,以及对大鼠免疫反应的差异性。应用(~(35)S)蛋氨酸或(~(3)H)甘露糖标记病毒,经免疫沉淀试验,对 HFRS 病毒B-1株感染的 VeroE-6细胞提取物用 HV76-118株抗血清检查,只测到一种主要多肽,分子量约50K。而用 HFRS 病毒 B-1株抗血清测定,则有74K(糖基化)、57K(糖基化)和50K 三种主要的多肽。另外,在 HV76-118株感染的细胞提取物中,用两者抗血清可测     

家鼠汉坦样病毒的抗原特性及其全球分布

对伴随城市鼠类汉坦样病毒(Hantaan-like Viruses)的全球分布及其几个地理位置不同捕获的鼠类携带的代表性病毒的抗原性鉴别进行了研究。通过协作研究和我们的部份现场调查,取得了世界许多地区的鼠血清和组织,以Vero—E6细胞感染汉坦病毒76—118株怍为抗原用间接荧光抗体法     

肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原分群

从不同来源分离的6株肾综合征出血热病毒或相关病毒,分别为A.Hantaan 76—118,从朝鲜出血热(KHF)流行地区黑线姬鼠中分得;B.SR—11,从日本实验室肾综合征出血热暴发中的大白鼠分得。C.TR—352,从日本无临床症状地区家鼠中分得;D.Choupitoulas和E.Girard Point均从美国非病区的家鼠中分得;F.Prospect Hill,从美国非病地区的田鼠中分得,用受染Vero E6细胞培养物中的抗原和高价家兔或大鼠免疫血清对     

一株汉坦病毒的分离及基因鉴定

目的分离汉坦病毒并采用分子生物学方法进行基因鉴定.方法组织细胞培养法和RT-PCR法.结果在黑线姬鼠体内分离出一株汉坦病毒,分别用HTN型和SEO型的特异引物对其进行基因扩增,同时以76-118株和L99株作对照,结果分离株经HTN型引物扩增出一条明亮带并同76-118株结果一致.结论分离株经基因鉴定为HTN型病毒.     

中和性单克隆抗体检测陕西省70株脊髓灰质炎病毒抗原结果分析

我们应用中和性McAb对陕西省1979～1988年从病人分离的70株Polio病毒进行型内抗原分析,将32株Ⅰ型病毒分为PI—2(28株)、P1—3(3株)和P1—5(1株)3个类型。27株Ⅱ型病毒分为P2—1(19株)和P2—2(8株)2个类型,11株Ⅲ型病毒分为P3—1(5株)、P3—2(3株)、P3—3(1株)和具有新抗原特征的陕P3—1(2株)4个类型。结果反映了陕西省近10年Polio病毒型内抗原特征类型的分布、变迁及其与疾病流行的关系。     

汉坦病毒的生化特征

汉坦病毒(Hantaan Virus)76—118株作为一群病毒的代表,为了证实它既类似而又独立于布尼雅病毒科的其他病毒属,我们比较了汉坦病毒和其他血清学相关病毒的RNAs,并在病毒蛋白质的基础上,进一步描述了汉坦病毒的生化特征。     

山东省流行性出血热(EHF)病毒分型及病毒抗原分析的研究

收集山东省不同地区分离的EHF病毒11株和标准病毒株76—118、陈株、R_(22)共14株病毒,用13种不同的EHFMcAb进行分型及抗原分析,证实山东省存在家鼠型和野鼠型两种病毒。有的地区属家鼠型疫区,有的为家、野鼠型混合疫区。在抗原分析中发现各毒株之间有抗原差异。有意义的是有些EHF病毒属家鼠型,但尚有野鼠抗原标志;和少数的野鼠型病毒     

汉坦病毒76—118株与R22株基因重排的实验研究

目的；研究汉坦病毒汉滩型与汉城型之间能否发生基因重排，以及发生重排的频率和特点。方法：用汉坦病毒汉滩型（HTNV）76－118株与汉城型（SEOV）R22株混合感染Vero-E6细胞，空斑形成实验挑取子代克隆株24株，传供培养后用PCR方法鉴定。结果：发现24株子代病毒（70.83%)的基因组来自76－118株或R22株；1株（4.17%)HTNV型与SEOV型引物扩增均为阳性；1株（4.17%)两型病毒引物扩增均为阴性；4株（16.67%)发生了基因片段重排。结论：证实了汉坦病毒HTNV与SEOV之间可以发生重排。     

甲型肝炎病毒H2株单克隆抗体的制备及鉴定

目的 为甲型肝炎病毒(HAV)的诊断和相关研究提供高效价的抗体来源. 方法 用细胞培养获得的H_2株HAV免疫BALB/C小鼠,经细胞融合技术,ELISA筛选和有限稀释克隆化培养. 结果 获得3株能稳定分泌抗HAV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,命名为6-A8、6-F2和1-H3.经鉴定,其上清和腹水的抗体效价分别为1∶(2048～16 824)和1∶(65 536～524 288).6-A8和6-F2属IgG2a亚型,1-H3属IgG1亚型.染色体数分布在92～98之间.3株细胞株McAb分别能与HAV不同抗原位点结合. 结论 3株能稳定分泌抗HAV McAb的杂交瘤细胞株成功建立,并获得高效价的抗HAV McAb.     

单克隆抗体在生殖医学及计划生育中的应用

单克隆抗体(McAb)是针对某一抗原决定簇的抗体,McAb技术在生殖医学、计划生育基础理论研究和临床诊治方面已显示出巨大的威力。迄今为止,McAb已应用于生殖免疫、妊娠生理和病理、性激素测定和纯化、甾体和一些蛋白激素受体、妇科肿瘤诊治、避孕机理和节育措施等方面。McAb技术的兴起及在上述领域中的应用,是生殖医学和计划生育学科中的一个巨大进步,它将使人类生殖之谜,避孕机理和妇产科疾病发生机理得以进一步揭示。     

肾综合征出血热病毒引起细胞融合及其在病毒感染性和中和抗体滴定中的应用

本文报道肾综合征出血热(HFRS)病毒在pH4.9～6.3条件下可使细胞与细胞融合,通过细胞融合灶计数法测定其病毒感染性和中和抗体。此法较蚀斑形成法、间接免疫荧光法和免疫酶法简便、快速。作者用HFRS病毒76-118株(来自黑线姬鼠)、SR-11(实验鼠)和TB-314(家鼠)分别接种于Vero-E6细胞,10～14天     

用免疫粘附血凝法测定引起肾综合征出血热的家鼠源和姬鼠源病毒间的抗原关系

免疫粘附血凝法(IAHA)是检测肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原及其抗体的有效方法,可用以区分两种不同型 HFRS 病毒抗体间的差异。本研究采用交叉 IAHA 法检测褐家鼠毒株(SR-11,TR-352和 Tchoupi-toulas 株)和黑线姬鼠朝鲜亚种毒株(汉坦76—118株)间的抗原关系,所用抗体为上述相应毒株免疫的鼠血清。SR-11株是从一实验室大白鼠中分离到的,该鼠与日本一次实验室型 HFRS 爆发有联系。TR-352株和 Tc-houpitoulas 株分别自东京湾新垦地和新奥     

肾综合征出血热病毒对人胚肾原代细胞感染作用的研究

近年来对该病进行了广泛研究 ,但其发病机理尚不清楚。为了搞清肾综合征出血热病毒 (ＨＦＲＳＶ)对肾组织的损伤机理 ,本文首次选用易饲养、敏感、高效的人胚肾原代细胞直接攻击ＨＦＲＳＶ。为确保结果的准确性 ,改用了胶原酶温和消化法 ,取得令人满意的结果。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　材料　 (1)ＨＦＲＳ病毒株 :Ｈａｎｔａａｎ病毒 76 / 118株 ,Ｌｅｅ Ｈ .等分离自南朝鲜黑线姬鼠 ,从第四军医大学汪美先教授处引进。昆明种小白鼠乳鼠脑内接种 (0 0 2 /只 )传代 ,取鼠脑研制成 2 0 %病毒悬液。ＬＤ50 =ｌｏｇ6 5 / 0 .0 2ｍ…     

中国宿主动物中Amur汉坦病毒M片段全基因序列分析

目的 测定中国宿主动物中Amur病毒M片段全基因序列,以了解其分子特征.方法 设计特异的PCR引物,用RT-PCR法分段扩增JilinAP06株M片段全长,PCR产物经克隆后进行序列测定,然后进行系统发育分析和重组分析.结果 JilinAP06株M片段全基因序列共3615个核苷酸,A+T含量为59.3%,G+C含量为40.7%,包含1个单一的开放读码框架,其最大读码框架从41～3448,由3408个核苷酸组成,共编码1135个氨基酸.序列同源分析表明,JilinAP06株与中国的人源Amur HV株同源性为96.0%～97.8%,与韩国大林姬鼠来源的Soochong HV同源性为85.6%～86.7%,与HTNV原型株76-118同源性仅为79.5%,而与其他各型病毒间的同源性均低于79.0%.氨基酸同源分析,其氨基酸序列与中国的人源株Amur HV同源性为98.1%～98.4%,与韩国大林姬鼠来源的Soochong HV同源性为96.4%～97.0%,与HTNV原型株76-118同源性为91.7%,而与其他各型病毒间的同源性均低于92.0%.系统发育分析结果显示,JilinAP06与Amur病毒构成一个相对独立的分支.结论 从中国宿主动物中获得了AmurHV的M片段全基因序列.     

中国宿主动物中Amur汉坦病毒M片段全基因序列分析

目的 测定中国宿主动物中Amur病毒M片段全基因序列,以了解其分子特征.方法 设计特异的PCR引物,用RT-PCR法分段扩增JilinAP06株M片段全长,PCR产物经克隆后进行序列测定,然后进行系统发育分析和重组分析.结果 JilinAP06株M片段全基因序列共3615个核苷酸,A+T含量为59.3%,G+C含量为40.7%,包含1个单一的开放读码框架,其最大读码框架从41～3448,由3408个核苷酸组成,共编码1135个氨基酸.序列同源分析表明,JilinAP06株与中国的人源Amur HV株同源性为96.0%～97.8%,与韩国大林姬鼠来源的Soochong HV同源性为85.6%～86.7%,与HTNV原型株76-118同源性仅为79.5%,而与其他各型病毒间的同源性均低于79.0%.氨基酸同源分析,其氨基酸序列与中国的人源株Amur HV同源性为98.1%～98.4%,与韩国大林姬鼠来源的Soochong HV同源性为96.4%～97.0%,与HTNV原型株76-118同源性为91.7%,而与其他各型病毒间的同源性均低于92.0%.系统发育分析结果显示,JilinAP06与Amur病毒构成一个相对独立的分支.结论 从中国宿主动物中获得了AmurHV的M片段全基因序列.     

分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

为提高弓形虫感染的特异性免疫诊断水平，作者用杂交瘤技术制备抗弓形虫单克隆抗体（McAb）。经有限稀释法克隆3次和2个月的连续传代及液氮保存试验，获得6株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株。其培养上清SPA—ELISA效价高者达1:6250，能被特异性抗弓形虫血清所阻断，证明该McAb具有抗弓形虫的特异性。