胃癌细胞色素氧化酶CYP3A4基因多态性与含紫杉醇方案化疗敏感性的研究

目的 探讨胃癌细胞色素氧化酶CYP3A4基因多态性与含紫杉醇方案化疗敏感性的关系。方法 采用变性高效液相色谱技术（DHPLC）和基因测序技术检测53例晚期胃癌患者外周血中CYP3A4基因的突变情况,观察并评价含紫杉醇化疗方案的疗效与CYP3A4基因多态性的关系。结果 DHPLC检测显示,53例胃癌患者中CYP3A4基因单峰者（野生型）32例,双峰者（突变型）21例;测序结果显示,CYP3A4基因第10号外显子第27位C缺失突变。野生型组有效率（RR）为40.6％,疾病控制率（DCR）为84.4％;突变型组RR为33.3％,DCR为85.7％,两组RR和DCR的差异均无统计学意义（P＞0.05）。53例胃癌患者的中位无进展生存时间（PFS）为6.5个月（95％CI：3.576～9.424个月）,中位总生存时间（OS）为11.0个月（95％CI：6.955～15.045个月）。CYP3A4野生型与突变型患者中位PFS（7.0个月vs.7.0个月）和OS（10.0个月 vs.14.0个月）的差异均无统计学意义（P＞0.05）。使用含铂方案患者CYP3A4基因野生型和突变型中位PFS的差异无统计学意义（P＞0.05）,使用非含铂方案中位PFS的差异有统计学意义（P=0.024）,含铂与非含铂方案中位OS的差异均无统计学意义（P＞0.05）。采用3药联合与两药联合方案患者的中位PFS和OS均与CYP3A4基因多态性无关。野生型与突变型患者不良反应均较轻,以1～2级为主,常见不良反应包括食欲减退、恶心呕吐和白细胞减少。结论 CYP3A4基因第10号外显子第27位C缺失突变,CYP3A4基因突变型晚期胃癌患者使用含紫杉醇方案有延长OS的趋势。     

散发性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因突变分析

目的探讨散发性乳腺癌患者BRCA1及BRCA2基因突变与健康人的差异。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析方法,对83例散发性乳腺癌患者（乳腺癌组）与86例健康人（健康对照组）的血液标本,针对BRCA1和BRCA2基因,选择4个突变发生率较高的外显子[BRCA1中的第5、11（11A、11B）、18外显子,BRCA2中的第11外显子]共5对引物进行突变检测,并应用限制性片段长度多态性（RFLP）方法对具有单核苷酸多态的碱基位点作单核苷酸多态性定性分析。成组设计的定性资料比较采用χ^2检验。结果部分散发性乳腺癌患者和健康人BRCA1基因第5外显子的cDNA 273和287（C→G和A→T）,第11外显子的2430、2532、2630、2685、3191、3232和3667、3876（T→C、T→C、T→G、T→C→G、A→G、A→G和C→A）以及第18外显子的5206和5214（T→A和C→T）碱基位点处存在单个碱基的变化,散发性乳腺癌患者的BRCA1基因突变率高于健康人（14．5％比2．3％,P〈0．05）;应用RFLP方法证实cDNA 2430、2630（T→C、T→G）碱基位点的变化为单核苷酸多态（SNP）;散发性乳腺癌患者与健康人2430（T→C）碱基位点等位基因频数分布不相同,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变较常见,而BRCA2的突变十分罕见。     

CYP1A1和GSTM1与胃癌、萎缩性胃炎和胃溃疡等易感性的研究

目的：探讨细胞色素氧化酶基因（CYP1A1）和谷胱甘肽转硫酶基因（GSTM1）多态性与胃癌和萎缩性胃炎等胃部疾病易感性的关系。方法：对病理诊断的胃癌（GC）102例，慢性萎缩性胃炎（CAG）110例，胃溃疡（GU）62例，慢性浅表性胃炎（CSG）103例，十二指肠溃疡（DU）62例，正常人62例的CYP1A1和GSTM1基因型采用序列特异性引物的聚合酶链反应（PCR－SSP）方法进行测定，关联度分析采用病例对照研究方法，结果：非条件Logistic回归在调整年龄，性别，文化程度和职业4个因素后，GG，CAG和GU与CYP1A1 G／G，GSTM10／0基因型，幽门螺杆菌（Hp)感染及吸烟有关联，同时基因型间存在明显的交互作用，没有发现DU和CSG与CYP1A1和GSTM1基因型有关联，但DU与幽门螺杆菌（Hp)感染有关联，而且Hp感染，吸烟与CYP1A1 G／G型之间存在交作用。结论：CYP1A1 G／G，GSTM10／0基因型与GC，CAG，GU的易感性有磁联，两个基因型之间及它们各自与Hp感染与吸烟之间有交互作用。     

广西崇左HBsAg阳性人群CYP3A5的基因多态性

目的:探讨HBsAg阳性人群中CYP3A5基因多态性与肝癌遗传易感性的关系。方法:通过癌症筛查发现广西崇左市HBsAg阳性人群,选取肝癌家族HBsAg阳性成员109例（研究组）及与之相对应的无肿瘤家族HBsAg阳性成员109例（对照组）作为研究对象,用PCR-RFLP法检测CYP3A5基因。结果:研究组AA基因型的分布与对照组有显著性差异（P＜0.05）。研究组A等位基因的分布与对照组有显著性差异（P＜0.05）。结论:CYP3A5基因多态性与肝癌的遗传易感性密切相关。     

肝硬化及肝癌p53基因突变的实验研究

目的 :研究肝硬化及肝癌p53基因的突变情况。方法 :选择 80例肝硬化、肝癌标本 ,分别以PCR SSCP法 ,双链DNA序列测定法研究其p53基因外显子的突变情况及突变位点。结果 :62例肝癌标本p53总突变率为 19 4 % ,其中 ,早、中、晚期突变率分别为 10 5%、15 0 %、35 0 % ;18例肝硬化标本p53总突变率为 5 6% ;第 7外显子的突变发生在 2 4 9位密码子第 3号碱基上 ,为G :C→T :A的颠换突变 ;第 8外显子的突变发生在 2 73位密码子第 1号碱基上 ,为C :G→T :A的转换突变。结论 :p53基因突变发生在肝细胞发生形态学改变之初 ,随着肝癌的进展逐渐积累 ,突变率呈上升趋势 ,故p53基因突变很可能是启动癌变过程的重要因素之一。     

O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与肿瘤易感性的关系

目的:探讨中国南方汉族人群O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因5个外显子的多态性与肿瘤易感性的关系.方法:采用聚合酶链式反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)-DNA直接测序法对100例正常人和88例肿瘤患者外周血白细胞进行MGMT基因多态性研究.结果:正常人群和肿瘤患者第3外显子第84位密码子的第1个碱基C被T所取代,导致错义突变(CTT→TTT),氨基酸由亮氨酸(Leu)变成了苯丙氨酸(Phe);第4外显子第94位密码子的第3个碱基C被T所取代,导致同义突变(TTC→TTT,均编码Phe).这2个位点的多态性在2组人群中的检出率差异不存在统计学意义(P＞0.05).同时在肿瘤患者中还检测到MGMT基因第5外显子第200位密码子的第2个碱基G被C取代,即GGC→GCC,所编码的氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸,这一多态不存在于正常对照中.结论:MGMT基因第3、4、5外显子上存在着多态性,其中第3、4外显子的多态改变与肿瘤形成的关系较弱,而第5外显子的多态仅见于肿瘤患者,可能与肿瘤的形成有关.     

GYP17基因多态性与天津汉族女性散发乳腺癌风险关系的研究

目的：探讨CYP17基因多态性与乳腺癌发生危险性的关系。方法：用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析法，对299例乳腺癌患者和242例正常人的CYP17基因MspA1I多态住点进行检测，确定出CYP17基因的3种基因型，即野生型A1／A1、杂合型A1／A2、突变型A2／A2。非条件logistic：回归分析计算各种基因型的乳腺癌发病风险（OR及调整OR值）及其95％可信区间（95％CI）。结果：CYP17A1A1、A1A2和A2A2三种基因型分布频率，乳腺癌患者组中分别为15.7％、56.3％和28.1％，对照组中分别为18.2％、51.7％和30.2％；乳腺癌患者组A1、A2等位基因频率分别为43.8％，56.2％，对照组为44％，56％。CYP17基因型及等位基因型在两组间分布频率的差别均无统计学意义（P〉0.05）。基因型A1／A2与A1／A1比较、A2／A2与A1／A1比较OR值分别为0.80（95％CI 0.50-1.27）、0.93（95％CI 0.55-1.56）。分层分析显示携带等位基因A2的绝经后妇女如果初孕年龄≥25岁，可增加乳腺癌的发病风险（OR 2.41，95％CI 1.04-5.62）。多因素分析显示：初潮年龄早（〈13岁），初孕年龄晚（≥25岁），末孕年龄晚（≥30岁），良性乳腺疾病史均是乳腺癌的发病危险因素。结论：整体上CYP17MspA1I多态位点3种基因型的分布与乳腺癌发病风险无关，但发现初孕年龄≥25岁的携带CYP17A2等位基因型的绝经后妇女易患乳腺癌。     

细胞色素P4502D6基因多态与肝癌易感性研究

本文应用 PCR- RFLP方法对 84例肝癌患者和 144例健康对照的引起 CYP2D6酶活性完全缺乏的 A型和 B型突变 , 以及 3种引起 CYP2D6酶活性降低的多态性 ( C188→ T、 C2938→ T和 G4268→ C)进行了检测 , 旨在探讨 CYP2D6基因的多态性与肝癌的关系 .     

鼻咽癌组织中DNA 聚合酶β基因的突变

 目的 研究鼻咽癌中是否存在DNA聚合酶β（DNA polymerasβ，polβ）的突变及变异情况。方法 采用RT-PCR法（逆转录-DNA聚合酶链反应）、PCR-SSCP（聚合酶链-单链构象多态性分析）、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织进行polβ基因突变研究。结果 鼻咽癌组织中存在polβ基因突变，且基因突变率与癌组织的病理分级有关，高分化（G1）、中度分化（G2）、低分化及未分化（G3）鼻咽癌组织中polβ基因突变率分别为12.5％（2／16）、21．4％（3／14）、80％（8／10）。G1与G2比较，差异无统计学意义（P〉0．01），G1与G3、G2与G3比较，差异均有统计学意义（P〈0．005）。测序结果表明，polβ基因的第454位核苷酸由T变为C，其氨基酸变异为第114位氨基酸由Phe变为Ser；第466位核苷酸由G变为A，其氨基酸变异为第118位氨基酸由Gly变为Glu；第148位核苷酸由A变为G，其氨基酸变异为第28位氨基酸由Asn变为Ser。结论 发现在鼻咽癌组织中存在多种形式的polβ突变，导致氨基酸序列、空间结构的改变，可能与鼻咽癌的发生、发展相关。     

雌激素代谢基因COMT和CYP17单核苷酸多态与女性乳腺癌风险的关系

目的：研究参与雌激素合成的细胞色素P450c17(CYP17)和雌激素代谢解毒的儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因多态与乳腺癌发生的关系。方法：以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法,对250例乳腺癌患者和250例正常对照者的COMT基因第4外显子第158位密码子G／A(Val／Met)多态和CYP17基因启动子区-1931T／C多态进行分析。以logistic回归模型计算各种基因型的乳腺癌风险(DR)及其95％可信区限(95％CI)。结果：乳腺癌患者的COMT Met／Met基因型频率为10．4％,显著高于对照组的5．2％(P=0．03)。多因素分析显示,COMT Met／Met基因型患乳腺癌的风险比Val／Val或Val／Met基因型高2．1倍(95％a为1．1～4．5)。分层分析显示,COMT Met／Met基因型主要增加绝经前女性患乳腺癌的风险(OR4．1,95％CI为1．2～17.3),而不增加绝经后女性患乳腺癌的风险(OR 1．3,95％CI为0．5～3．5),提示该基因多态对乳腺癌风险的影响与雌激素水平有关。CYP17基因型频率在病例和对照组中的分布差异无显著性(P=O．83)。结论：COMT基因单核苷酸多态与乳腺癌易感性相关,Met／Met基因型增加乳腺癌风险,而CYP17基因多态与中国女性乳腺癌风险无相关性。     

Cascade genetic testing for mismatch repair gene mutations

Mismatch repair gene mutation carriers have a high risk of developing colorectal cancer, and can benefit from appropriate surveillance. A combined population based ascertainment cascade genetic testing approach provides a systematic and potentially effective strategy for identifying such carriers. We have developed a Markov Chain computer model system which simulates various factors influencing cascade genetic testing; including demographics, uptake, genetic epidemiology and family size. This was used to evaluate cascade genetic testing for mismatch repair gene mutations in theory and practice. Simulations focussed on the population of Scotland by way of illustration, and were based on a 20-year programme in which index cases were ascertained from colorectal cancer cases aged <55 years at onset. Results indicated that without practical barriers to cascade genetic testing, 545 (95% CI = 522, 568) carriers could be identified; 42% of the population total. This comprised approximately 140 index cases, 302 asymptomatic relatives and 104 previously affected relatives. However, when realistic ascertainment and acceptance rates were used to inform simulations, only 257 (95% CI = 246, 268) carriers, about 20% of the carrier population, were identifiable. Of these approximately 112 were index cases, 108 were asymptomatic relatives, and 37 were previously affected relatives. This contrast emphasises the importance of ascertainment and acceptance rates. Likewise the low number of index cases shows that case identification is a limiting factor. In the absence of robust data from epidemiological studies, these findings can inform decisions about the use of cascade genetic testing for mismatch repair gene mutations.     

DNA修复基因ERCC1多态性与肺癌易感性的关系

背景与目的最近研究发现DNA修复基因多态性可以影响到肿瘤的易感性,因此通过不同的DNA修复基因可筛选出肿瘤的易感人群,从而有望达到肿瘤的早期预防、诊断和治疗。本研究旨在分析DNA修复基因ERCC1多态性及其与肺癌易感性的关系。方法采用病例-对照研究,收集上海肺科医院原发性肺癌患者291例为病例组,同期住院的非肿瘤患者273例作为对照组,并进行流行病学调查。应用Taqman探针结合实时荧光PCR方法分析病例组和对照组的ERCC1基因T118C的多态性分布,比较不同基因型与肺癌易感性的关系,以及基因多态性与吸烟对肺癌的交互作用。结果在不吸烟人群中,ERCC1基因118位点3种基因型在病例组和对照组人群中分布差异有统计学意义(χ2=11.19,P<0.01)。在不吸烟人群中,与携带野生纯合基因型(C/C)相比,携带突变纯合基因型(T/T)者患肺癌的风险会增加,其校正OR值为3.16(95%CI:1.29-7.73,P<0.01)。以携带野生纯合基因型(C/C)且不吸烟者作为参照,吸烟>25包-年且携带野生纯合基因型(C/C)或杂合基因型(C/T)者患肺癌的风险均会提高,其校正OR值分别为2.62(95%CI:1.54-4.44)、2.41(95%CI:1.36-4.26,P<0.01)。以携带野生基因型者作为参照,携带突变纯合基因型者患腺癌的风险度会增加,其OR值为2.29(95%CI:1.05-4.78,P=0.03)。结论DNA修复基因ERCC1118C/T多态性可能对肺癌易感性产生影响,并可能与吸烟有一定的协同作用。     

髓过氧化物酶基因-463G/A多态与中国人肺癌遗传易感性

目的 研究髓过氧化物酶（MPO）基因－463G→A单核苷酸多态与肺癌易感性的关系。方法 以PCR－单链构像多态（SSCP）技术,分析了314例肺癌患者和320例正常对照者MPO基因启动子区第－463位核苷酸多态基因型分布,及其与肺癌风险的关系。结果 正常对照组中G和A等位基因频率分别为85.0%和15.0%,而肺癌患者分别为89.0%和11.0%。携带MPO－463GG基因型的个体患肺癌风险比携带GA和AA基因型个体高1.7倍（校正的OR为1.7;95%CI为1.2-2.5）,且此种风险增高只限于肺鳞癌（OR为2.4;95%CI为1.4-3.9）,而与肺腺癌无关（OR为1.3;95%CI为0.8-2.1）。分层分析结果表明,与GA和AA基因型比较,GG基因型并不增加非吸烟者和累积吸烟量＜26包年者患肺癌的风险,但在累积吸烟量≥26包年的吸烟者中,GG基因型发生肺鳞癌的风险比GA和AA基因型高3.3倍。结论 MPO－463 A等位基因显著降低中国人发生吸烟相关性肺鳞癌的风险。     

Strain-dependency of Chromosomal Abnormalities in Lymphomas Developed in Eμ-myc Transgenic Mice

We previously showed that B and T cell lymphoma development in E μ (immunoglobulin heavy chain enhancer)- mye transgenic mice is dependent on the mouse strain. To determine whether any non-random chromosomal abnormality that was present was caused by variations in the lymphoma cell type or by a different genetic background, we crossed C3H transgenic mice with other inbred strains of mice, C57BL/6 or BALB/c. Cytogenetic analysis showed a high frequency of non-random chromosomal aberrations, namely, duplication or amplification of part of chromosome 5 containing the transgene and trisomy of chromosome 1, 6, or 12 in the genetic background of C3HXC57BL/6 mouse and C3HxBALB/c mouse, respectively, regardless of cell type of lymphoma. These results suggest that non-random chromosomal abnormalities in lymphoma cells are dependent on the genetic background of mouse, not on the tumor cell type in E μ-myc transgenic     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因单核苷酸多态与乳腺癌风险

目的 内研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因单核苷酸多态与女性乳腺癌风险的关系。方法 以聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLF)分析方法,检测了217例乳腺癌患者和218例配对的正常对照者MTHFR因C677T和A1298C基因型,并比较不同基因型与乳腺癌风险的关系。结果 677TT基因型频率在乳腺癌患者和正常对照中的分布差异有显著性(32．7％比24．8％,P=0．02)。携带MTHFR 677TT基因犁者与携带MTHFR 677CC基因型者比较,前者罹患乳腺癌的风险增加1,84倍(95％ C：1．09～3．14)。MTHFR 677CT基因型以及MTHFR A1298C多态与乳腺癌风险不相关。结论 MTHFR基因677C→T突变是女性乳腺癌的遗传易感因素。     

细胞色素P450 2E1基因多态与肝癌遗传易感性研究

目的：探讨细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因多态与肝癌的关系。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对８４例肝癌患者和１４４例健康对照的细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因ＲｓａⅠ多态进行检测。结果：病例组基因型Ａ频率为７１．４３％,等位基因ｃ１频率为８４．５２％,对照组则分别为５５．５６％和７５．３５％,两组差别均有统计学意义（Ｐ〈０．０５）。其比值比分别为２．００和１．７９,提示具有基因型Ａ或等位基因ｃ１的个体患肝