厚朴道地性的遗传学证据

目的 :利用RAPD技术探讨厚朴的道地性问题。方法 :选择代表厚朴主要分布区的 1 1个产地 33个个体的材料作为样本 ,经DNA提取 ,用 74个随机引物进行PCR扩增。结果 :筛选到 1 7个合适的引物 ,得到 1 1 6条带 ,其中多态性带1 0 5条 ,计算样本间相似性系数 ,又进行了聚类分析 ,得到聚类图。结论 :结果支持厚朴不应分为两个亚 (变 )种 ,而应分为三个地理宗 ;“川朴”及“温朴”有明显的遗传分化 ,且与有效成分相关 ,故而其道地性主要由遗传因素决定。     

鹿鞭线粒体DNA指纹鉴定

目的探讨鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b基因部分序列片段特征,建立中药材鹿鞭敏感、特异的DNA分子标记学鉴定方法。方法碱变性法提取新鲜鹿鞭及牛鞭,采用引物设计软件PrimerPremier5.0对鹿鞭及牛鞭的细胞色素b基因序列分析,用于鉴定正品鹿鞭的特异性引物,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,对鹿鞭进行DNA指纹鉴定。结果对鹿鞭进行mtDNA鉴定图谱显示,真品鹿鞭有306bp条带,伪品没有。结论用此方法对鹿鞭进行鉴定,可准确辨别正品与伪品。重现性、稳定性好,简便准确而可行。鹿鞭mtDNA具有特异性指纹特征,所得鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于鹿鞭的鉴定。     

甘肃产秦艽的DNA指纹图谱鉴别

目的 对产于我国甘肃省的中药秦艽的3种基源植物秦艽、麻花秦艽与小秦艽进行RAPD分析,建立具有鉴别意义的DNA指纹图谱.方法 采用RAPD分子标记对秦艽的基因组DNA进行PCR扩增,利用NTSYSpc 2.1和Popgene 3.2软件分析3种秦艽间的亲缘关系,构建树系图.结果 从80条RAPD引物中筛选出4条具有鉴别意义的多态性引物,在3种秦艽中共得到39个DNA条带,其中共有条带2条,多态条带37条.据此获得了能有效区别3种秦艽的多态性RAPD指纹谱.结论 甘肃产秦艽的3种基源植物遗传分化明显,RAPD方法能有效地将它们区分鉴别.     

鱼腥草种质资源的RAPD分析

目的分析鱼腥草种质资源在分子水平上的遗传多样性。方法应用RAPD技术对92份鱼腥草种质资源进行检测。结果34个随机引物中有32个引物(94.1%)扩增产物具多态性。34个引物共得到200条扩增DNA片段,其中93.5%的片段具多态性。每个多态性引物平均可扩增出5.8个多态性片段。峨眉蕺菜和蕺菜种内平均遗传相似系数(genetic similarity,GS)分别为0.521和0.572,二者种间GS值为0.517。峨眉蕺菜与蕺菜中染色体数目为36的细胞型间相似程度最高,其平均GS值达0.530。栽培蕺菜类群比其野生类群遗传多样性相对较高。聚类分析表明,利用RAPD技术可将全部供试材料区分开,所有材料共划分为14类。其中,绝大多数(62个)聚为一类,且根据RAPD遗传相似系数划分的类群同地理分布有一定关系。结论(1) 鱼腥草种质资源在分子水平上确实存在较大遗传差异。(2) RAPD标记可作为构建鱼腥草DNA指纹图谱的有效工具。(3) 鱼腥草药材道地性与环境因素有关,但更大程度上由其遗传因素所决定。     

厚朴原植物现行分类法的商榷

系统生物学和种源试验结果表明 ,厚朴种内叶片先端从凹缺成 2裂到圆钝小凸尖状存在连续变异 ,树叶和芽鳞的毛被、以及厚朴酚类含量、同功酶酶谱种内变异也均存在连续变异 ,这些性状之间存在密切的相关性 ,趋势一致。综合这些性状聚类分析结果与居群的地理分布 ,笔者在全国第四届天然药物资源学术研讨会上提出了厚朴种内按叶形和地理区域划分为小凸尖型、中间型和凹叶型 3个地理宗。本文根据专家建议首次发表了厚朴种内叶片先端从凹缺成 2裂到圆钝小凸尖的连续变异图 ,以及闽浙等中间型厚朴居群内的树叶形态的变异。闽浙等中间型居群厚朴 ,不仅不同植株上叶片先端凹缺 2裂与圆钝小凸尖状并存 ,而且在同一植株上、甚至同一植株同一枝条上叶片先端也有凹缺2裂与圆钝小凸尖状并存现象 ,根据现行分类学难以确定是厚朴还是凹叶厚朴 ,从而进一步证明现行分类学存在的缺陷和中间型厚朴的存在。RAPD技术得到的DNA指纹给出了遗传学上的支持。     

市售鹿鞭的DNA指纹鉴定研究

目的探讨鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b基因(Cytb)部分序列片段特征,建立中药材鹿鞭敏感、特异的DNA分子标记学鉴定方法。方法对市售鹿鞭进行样本处理,模板制备,采用鹿鞭特异性引物进行PCR反应,对市售鹿鞭样本采取DNA指纹鉴定。结果对市售鹿鞭中药材进行mtDNA鉴定,有三个样本为正品。结论此方法对市售鹿鞭鉴定,可准确辨别正品与伪品。重现性、稳定性好,简便准确而可行,说明鹿鞭mtDNA具有特异性指纹特征,所得鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于市售鹿鞭的鉴定。     

RAPD标记在药用菊花种质鉴定中的应用

目的：探讨药用菊花类型间的遗传关系,为药用菊花资源合理保护利用和新品种选育提供理论依据,也为药用菊花DNA指纹图谱的构建奠定基础。方法：利用改良SDS方法提取药用菊花的基因组DNA,以RAPD分子标记技术,对6种药用菊花进行了遗传多样性和亲缘关系分析。结果：从8个随机引物中筛选出多态性频率高的2个引物。2个引物共扩增出17个DNA条带,其中多态性条带16个,多态性达94%,显示菊花品种内丰富的遗传多样性。扩增的多态性片段在300~1300bp之间。结论：聚类分析结果表明,利用RAPD标记可将全部供试材料区分开,得出了药用菊花种质资源在分子水平上确实存在较大差异。     

市售鹿鞭的DNA指纹鉴定研究

目的：探讨鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b基因（Cytb）部分序列片段特征,建立中药材鹿鞭敏感、特异的DNA分子标记学鉴定方法。方法对市售鹿鞭进行样本处理,模板制备,采用鹿鞭特异性引物进行PCR反应,对市售鹿鞭样本采取DNA指纹鉴定。结果对市售鹿鞭中药材进行mtDNA鉴定,有三个样本为正品。结论此方法对市售鹿鞭鉴定,可准确辨别正品与伪品。重现性、稳定性好,简便准确而可行,说明鹿鞭mtDNA具有特异性指纹特征,所得鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于市售鹿鞭的鉴定。     

厚朴炮制前后指纹图谱及主要成分含量变化的研究

摘要：目的:建立厚朴及其炮制品的HPLC指纹图谱,并对其所含的6个有效成分进行定量分析。方法:采用HPLC,Inertsil ODS-3 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长:250 nm,流速:1.0 ml·min-1,建立生厚朴和姜厚朴的HPLC指纹图谱,通过相似度评价、聚类分析对厚朴炮制前后指纹图谱进行分析,并对紫丁香苷、木兰花碱、木兰苷B、木兰苷A、和厚朴酚与厚朴酚进行含量测定。结果:建立了厚朴及其炮制品的指纹图谱,以木兰苷B为参照峰,生厚朴标定了14个共有峰,姜厚朴标定了16个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均>0.950。紫丁香苷、木兰花碱、木兰苷B、木兰苷A、和厚朴酚和厚朴酚在炮制前的质量分数分别为0.042 3%,0.061 4%,0.081 5%,0.088 1%,1.190 0%,0.969 0%;经炮制后,上述6种成分在姜厚朴中的含量分别为0.034 6%,0.033 1%,0.065 7%,0.070 5%,1.330 0%,1.090 0%。结论:厚朴的HPLC指纹图谱在炮制前后发生了显著变化,通过对比共有峰的保留时间和色谱图,指认出部分成分;并发现峰4和峰5为姜厚朴的特有峰,因此峰4和峰5可用于区别生厚朴和姜厚朴; 6个有效成分含量在炮制前后均发生了一定程度的变化,样品中紫丁香苷、木兰花碱、木兰苷B和木兰苷A含量排序为厚朴>姜厚朴,样品中和厚朴酚和厚朴酚含量排序则为姜厚朴>厚朴。     

AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱

目的　采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术,分析人参、西洋参基因组DNA多态性。方法　人参、西洋参干燥根基因组DNA,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增。结果　经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱。结论　AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用。     

湖北道地药材厚朴的高效液相对照图谱研究

目的：对湖北道地药材厚朴及不同产地来源的厚朴进行高效液相对照图谱(HPLC-Reference Chromatrogram)的比较研究。方法：应用HPLC建立厚朴的对照图谱。结果：厚朴的HPLC-Reference Chromatrogram具有相似性、特征性，且易于区别。结论：建立厚朴HPLC-Reference Chromatrogram能为厚朴质量与植物来源的评估提供有用的信息。     

聚酰胺色谱法鉴别不同产地的厚朴药材

目的:对湖北道地药材厚朴及不同产地来源的厚朴的酚类成分进行聚酰胺色谱(PC)的比较研究,以期解决厚朴专属性鉴别特征.方法:应用聚酰胺色谱(PC)建立厚朴的特征图谱.结果:厚朴的PC具有相似性、特征性,且易于区别.结论:该方法可作为鉴别厚朴,并评价其质量的方法之一.     

生姜与干姜炮制厚朴的比较研究

目的比较研究生姜与干姜制厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量,为姜制厚朴时辅料的选择提供科学依据。方法采用高效液相色谱法测定两种选用不同辅料的炮制品中厚朴酚与和厚朴酚的含量。结果以厚村·酚与和厚朴酚的总含量计,生姜制厚朴比干姜制厚朴高1l％左右。结论在姜制厚朴中应以药典法炮制厚朴为佳。     

川、浙厚朴缓解小鼠便秘作用的药效比较

目的在已经测定了四川和浙产厚朴中厚朴酚类含量的基础上,进一步比较四川厚朴与浙产厚朴缓解便秘作用的药效,为厚朴临床应用提供参考。方法通过小鼠小肠墨汁推进实验,观察川、浙厚朴对小鼠小肠运动的影响;应用燥结致便秘模型,观察两种厚朴对小鼠首次排黑便时间、6 h排便粒数及排便量的影响;应用复方地芬诺酯致便秘模型,观察两种厚朴对小鼠首次排黑便时间、6 h排便粒数及排便量的影响。结果四川厚朴(15 g·kg-1)能明显提高小鼠墨汁的推进率(P0.05);四川厚朴(5 g·kg-1)和浙产厚朴(15 g·kg-1)均能缩短燥结便秘模型小鼠首次排黑便时间。四川厚朴(15 g·kg-1)增加6 h排便粒数和排便量;四川厚朴(15 g.kg-1)能缩短复方地芬诺酯致便秘小鼠首次排黑便时间,增加6 h排便粒数和排便量。四川厚朴(10 g·kg-1)和浙产厚朴(15 g·kg-1)均增加6 h排便粒数。浙产厚朴(10 g·kg-1)缩短便秘模型小鼠首次排黑便时间。浙产厚朴(5 g·kg-1)增加6 h排便量。结论四川厚朴能促进小鼠小肠推进运动,两种厚朴能缓解复方地芬诺酯致便秘小鼠的便秘。浙产厚朴与四川厚朴在该方面药效未见明显差异。     

中药厚朴气相色谱指纹图谱的建立

目的建立厚朴药材指纹图谱分析方法，为厚朴的鉴定提供依据。方法采用水蒸汽蒸馏法提取不同来源厚朴药材的挥发油成分，用毛细管气相色谱进行分析，并用聚类法分析比较。结果10个不同来源的厚朴样品被分为两类；9个厚朴样品的相似度均在0.9～1.0之间，1个样品的相似度＜0.9。结论该方法灵敏度高，重现性好，聚类分析法使谱图分析更为快速、准确，适用于厚朴的真伪鉴定及质量控制。     

对耐药金黄色葡萄球菌敏感的18种中草药初步研究

目的 筛选对耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）敏感的中草药,供临床治疗参考。方法 选取18种中草药,制备成相当于原生药0.5 g/mL的药液,采用管碟法作MRSA的敏感试验。结果 抑菌环直径大于盐酸去甲万古霉素的中草药依次为诃子、丹皮、黄连、白芍、九节茶、夏枯草、厚朴、黄芩、大青叶。结论 18种具有抑制金黄色葡萄球菌作用的中草药中,有9种对MRSA敏感。     

厚朴及其伪品的鉴别

目的对正品厚朴及伪品厚朴进行鉴别比较.方法采用性状、显微结构、薄层色谱等方法进行鉴别.结果正品与伪品厚朴两者内在鉴别特征差异较大.结论为正品及伪品厚朴的鉴别,为安全用药提供试验依据.     

红黄合剂的质量标准研究

摘 要 目的:建立红黄合剂的质量标准。方法: 采用TLC法对红黄合剂中的大血藤、大黄、厚朴进行定性鉴别;用HPLC法测定大黄中大黄素的含量。结果:TLC特征明显,阴性对照无干扰,专属性强;大黄素在22.5～1 446.0 μg范围内,线性关系良好（r=0.999 7）,平均加样回收率97.02%,RSD=2.16%。结论:所建立的方法能控制该药品质量。     

芍药野生与栽培群体的遗传变异研究

目的探讨芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的野生群体和栽培群体之间的遗传分化与中药材赤芍和白芍道地性形成的关系。方法应用RAPD技术,使用21条随机引物对来自11个产地的43株有代表性的芍药样品进行PCR扩增。结果(1)芍药在物种水平上的多态位点比率为85.26%,基因多样度为0.166;其中野生群体(77.61%)高于药用栽培群体(54.96%)及观赏栽培群体(61.76%);(2)芍药群体间的遗传变异占总变异的29.50%,基因分化系数为0.254;野生与药用群体之间遗传距离最远(0.3632),药用与观赏群体之间遗传距离最近(0.0973),群体间遗传分化显著(P<0.001);(3)从聚类图看,芍药种内大致分为野生与栽培两大类群。在野生群体中来自多伦的芍药单独聚为一类;在药用栽培群体中产于安徽亳州的与产于浙江磐安、缙云的芍药各聚为一类。结论首次揭示了芍药种群的遗传分化,在分子水平上为赤芍和白芍道地性的形成找到依据。鉴于多伦产芍药(赤芍道地药材的主要来源)的种质资源面临灭绝的危险,建议列为濒危种质加以保护。     

火焰原子吸收光谱法测定厚朴中微量元素含量

目的:建立以火焰原子吸收光谱法直接测定厚朴中Fe、Cu、Zn、Mn、Ca、Mg6种微量元素含量的方法。方法:用浓硝酸微波消解样品,采用标准曲线法测定6种元素的含量。结果:6种微量元素的回收率在99.40%～108.00%之间,RSD≤1.86%。结论:厚朴中含有丰富的人体必需微量元素。本方法简单、准确,结果令人满意。