β-胡萝卜素拮抗促癌剂抑制细胞间隙连接通讯的机理探讨

运用荧光探针标记方法和放射免疫分析方法分别研究了细胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）和ｃＡＭＰ的变化与促癌剂ＴＰＡ抑制细胞间隙连接通讯（ＧａｐＪｕｎｃ－ｔｉｏｎａｌＩｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，ＧＪＩＣ）功能的关系，以及β－胡萝卜素对这些变化的影响。结果表明：ＴＰＡ使［Ｃａ２＋］ｉ显著升高，ｃＡＭＰ水平显著降低，与对照组均有显著差异；β－胡萝卜素对［Ｃａ２＋］ｉ和ｃＡＭＰ的作用分别表现为降低和升高趋势，并对ＴＰＡ升高［Ｃａ２＋］ｉ、降低ｃＡＭＰ有一定的拮抗作用。提示：ＴＰＡ升高〔Ｃａ２＋〕ｉ、降低ｃＡＭＰ，影响间隙连接通道蛋白质磷酸化，这可能是其抑制细胞ＧＪＩＣ功能的重要原因之一，而β－胡萝卜素对［Ｃａ２＋］ｉ和ｃＡＭＰ的影响可能是其拮抗促癌剂抑制ＧＪＩＣ的部分作用机制。     

Ca^＋依赖性磷脂酶A2有效表达系统的构建

为了构建Ｃａ＾２＋依赖性磷脂酶Ａ２（Ｃａｌｃｉｕｍ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２，ｃＰＬＡ２）的有效表达系统，本实验应用Ｓａｌ Ⅰ消化ｃＰＬＡ２－ＰＭＴ２重组体，电洗脱法回收ｃＰＬＡ２片段并使期平末端化。应用ＮｏｔⅠ消化ＰＲＣ／ＣＭＶ载体使其线性化，之后脱磷酸以防止自身环化。ｃＰＬＡ２与线性化且脱磷酸载体ＰＲＣ／ＣＭＶ进行平末端连接，转染鼠巨噬细胞，扩增培养，收集细胞，提     

缺锌对大鼠胸腺发育影响及机理探讨

目的：研究缺锌对胸腺发育及Ｔ淋巴细胞活化与增殖功能的影响。方法：建立大鼠缺锌（ＺＤ）模型，测定胸腺肽、胸腺激素活性、胸腺Ｔ淋巴细胞转化、活化Ｔ淋巴细胞钙离子和活性钙调蛋白等。结果：１．ＺＤ组的血清、毛、胸腺细胞锌含量低于对照（ＡＬ）组（Ｐ＜０．０１）。２．ＺＤ组的胸腺重量、指数和细胞大小低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。３．ＺＤ组胸腺的胸腺肽含量、胸腺素活性低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）。４．ＺＤ组胸腺细胞的ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质含量低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）。５．ＺＤ组胸腺细胞中增殖期细胞（Ｓ＋Ｇ２／Ｍ）、增殖指数（ＰＩ）低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）。６．ＺＤ组胸腺细胞内ｃＡＭＰ含量与ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值高于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）。７．ＺＤ组胸腺细胞内的Ｃａ２＋、ＣａＭ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒα及Ｔ细胞增殖率低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）。８．ＺＤ组胸腺Ｔ淋巴细胞内的锌离子与Ｃａ２＋、ＣａＭ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒα、Ｔ淋巴细胞增殖率呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｃａ２＋与ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒα呈正相关（Ｐ＜０．０１）；ＣａＭ与ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒα呈正相关（Ｐ＜０．０１）。结论：适量锌有促进胸腺发育、胸腺激素活?     

磷脂酶A2活性对高糖或（和）高胰岛素环境下培养的大鼠血管平滑？…

目的 观察磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２,ＰＬＡ２）活性变化对高糖或（和）高胰岛素（Ｉｎｓ）环境下培养大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 在含２２ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１Ｇｌｕ或（和）１００Ｍｕ·Ｌ＾－１Ｉｎｓ的ＤＭＥＭ培养液中加入２￣２０μｍｏｌ·Ｌ＾－１（终浓度）的ＰＬＡ２抑制剂ＡＡＣＯＣＦ３与ＶＳＭＣ共同孵育７２ｈ后     

蛋白激酶抑制剂对青石棉诱导肺成纤维细胞的细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨青石棉致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖的细胞周期变化的机制。方法 用流式细胞技术检测青石棉诱导ＨＥＰＦ的细胞周期调控蛋白表达的改变,观察酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的抑制剂对其表达的影响。结果 青石棉可诱导ＨＥＰＦ的Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１、Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ、ＰＣＮＡ、Ｃｙｃｌｉｎ Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶等蛋白的阳性表达率发生改变。在青石棉组,ＰＫＣ抑制剂使表达的阳性率较未加入ＰＫＣ抑制剂组明显降低,对Ｐ３４ｃｄｃ２激酶影响不大（Ｐ〉０．０５）;而ＴＰＫ抑制剂使ＰＣＮＡ表达的阳性率增高;Ｐ３４ｃｄｃ２激酶表达的阳性率降低（Ｐ〈０．０１）。结论 这几种蛋白可能均了青石棉致ＨＥＰＦ增殖,ＰＣＮＡ（和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶）表达的改变可能与上游的ＰＫＣ（和ＴＰＫ）信号通路有关。     

微波辐照对离体淋巴细胞Ca^2＋浓度及Ca^2＋,Mg^2＋—ATP酶活力…

以２４５０ＭＨｚ连续微波辐照ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠离体淋巴细胞１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ。结果发现０．５ｍＷ．ｃｍ＾－２组细胞内Ｃａ浓度明显下降；５和５０ｍＷ．ｃｍ＾－２组辐照３０ｍｉｎ后，细胞内Ｃａ＾２＋明显超载，并且现质膜Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性变化明显相关。ＤＮＡ合成结果提示，细胞内高Ｃａ＾２＋可抑制细胞ＤＮＡ合成。     

非有机溶剂高聚物萃取法分离测定Al3+、Ca2+、Co2+、Cu2+、Mg2+、Pb2+、Zn2+混合样品中Al3+的研究

「目的」多组分混合物中铝的测定。「方法」在ＫＨ２ＰＯ４－Ｋ２ＨＰＯ４缓冲溶液，聚乙二醇－铬黑Ｔ－硫酸铵体系中，水溶性高聚物对Ａｌ＾３＋、Ｃａ＾２＋、Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｐｂ＾２＋、Ｚｎ＾２＋萃取研究。「结果」在ｐＨ＝８时，Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｚｎ＾２＋被聚乙二醇相完全萃取，Ｃａ＾２＋、Ｐｂ＾２＋被ＨＰＯ４＾２－掩蔽，而Ａｌ＾３＋几乎不被萃取，从而实现了对上述混合离子     

氯氰菊酯对大鼠肝脏磷酸化酶a,Ca^2＋—ATP酶活力的影响

采用整体和离体相结合方法，观察了氯氰菊酯对大鼠肝脏磷化酶ａ，Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活力的影响。整体实验表明，氯氰菊酯染毒后可使大鼠肝脏磷酸化酶ａ明显升高，Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶含量明显下降，与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且存在明显的剂量－效应关系。而离体实验表明，氯氰菊酯也可引起大鼠肝线粒体、微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶显著下降，也存在明显的剂量－效应关系。     

亚硒酸钠与细胞的作用

通过测定巨噬细胞的存活率、脂质过氧化、细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的浓度和红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，研究了亚硒酸钠与细胞的作用。结果表明高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）有明显的细胞毒性；Ｎａ２ＳｅＯ３对巨噬细胞的毒性作用引起细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋浓度升高；但Ｍｇ２＋浓度升高比Ｃａ２＋慢；较高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）能抑制红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，但对Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用要低于对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用。     

乌贼墨对H22癌细胞内Ca2+浓度、核膜Ca2+/Mg2+-ATP 酶活性及c-jun表达的影响

利用荧光探针和免疫组织化学方法,研究了乌贼墨对Ｈ２２癌细胞内ＣＡ＾２＋浓度,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及ｃ－ｊｕｎ表达的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋浓度分别降低了６９％和７９％,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低了２１％和３７％,ｃ－ｊｕｎ表达明显减少。     

细胞中钙离子的电场效应

超低频电磁场生物效应的机理涉及到原生质膜离子通道Ｃａ＾２＋传输的变化情况。研讨了在Ｖｉ＝３０ｓｉｎ１００πｔ（ｍＶ）作用下ＨＬ－６０细胞中Ｃａ＾２＋的感应流量。在信号激励或假激励后，细胞内钙水平的响应不仅随活化剂浓度而异，并且还与细胞的活化状态有关。     

血清25羟基维生素D3对佝偻病早期诊断的研究

对８２例佝偻患儿与３０例健康儿童用竞争蛋白结合法测定血清２５羟基维生素Ｄ３（２５ＯＨＤ３）同时测定了血清钙（Ｃａ＾２＋），磷（Ｐ＾３＋），碱性磷酸酶（ＡＬＰ），结果表明，佝偻病患儿血Ｃａ＾２＋，Ｐ＾３＋，２５（ＯＨ）Ｄ３值降低，血ＡＬＰ增高。佝偻病激期，血２５（ＯＨ）Ｄ３水平明显低于初期水平，恢复期上升，且初期，激期，恢复期三组间比较显著，相关分析显示，血２５（ＯＨ）Ｄ３与Ｃａ＾２＋，Ｐ＾３＋无相     

高原红细胞增多症患者红细胞膜ATP酶活性及离子转运功能

目的：了解高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）患者红细胞膜ＡＴＰ酶活性及红细胞内离子水平,探讨离子转运变化。方法：选择２６例ＨＡＰＣ患者,采用Ｓｈａｌｅｖ方法测定红细胞膜ＡＴＰ酶活性及细胞内相关离子浓度。结果患者红细胞膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性均明显低于正常人（Ｐ〈０．０１）;而红细胞内Ｎａ＾＋、Ｃａ＾２＋浓度却明显高于正常人（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）     

热暴露大鼠心肌细胞钙稳态的变化

本文观察了急慢性热暴露后培养乳鼠心肌细胞钙内流，钙调素（ＣａＭ）及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性的变化。结果表明：热暴露后ＣａＹ＾２＋跨民细胞肌膜内流增加，细胞匀浆Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活人有下降趋势，活性ＣａＭ含量下降，致心肌细胞内游离钙浓度升高。提示：热暴露后心肌细胞钙稳态发生改变，并可能是心肌细胞损伤的重要原因之一。慢性热暴露后心肌细胞对热损害的反庆性有所降低、适应性有所增强。     

常见镰刀菌素与细胞凋亡的研究进展

某些常见镰刀菌素如伏马菌素Ｂ１、Ｔ－２毒素、胶氧雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮－Ｘ可以诱导多种细胞发生凋亡，如肝细胞、肾细胞、胃肠细胞、免疫细胞和传代细胞。这些镰刀菌素诱导细胞凋亡的机制较为复杂，可能与神经鞘氨醇、某些基因如Ｐ２１、蛋白激酶、ＣＡＭＰ信号系统、细胞内Ｃａ＾２＋水平等许多因素有关。     

拟除虫菊酯类农药对大鼠肝线粒体,微粒体Ca^2＋—ATP酶活力…

采用离体实验方法，观察了拟除虫菊酯类农药溴氰菊酯、氯氰菊酯对大鼠肝线粒体、微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活力的影响。结果表明，加入溴氰菊酯、氯氰菊酯１５ｍｉｎ后，各剂量组线粒体、微粒体Ｃａ＾２＋ＡＴＰ酶均有明显的抑制作用，与对照组相比均具有显著性差异，（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且存在明显的剂量－效应关系。作用３０ｍｉｎ后各剂量组线粒体、微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶仍继续下降，未见有恢复的趋势。     

高锌饲料对大鼠胸腺发育及其作用机理的探讨

通过建立大鼠高锌（ＺＨ）模型，研究高锌对胸腺发育的影响及其作用机理。结果表明：（１）ＺＨ组的体重、体重增长值、饲料效价均非常显著低于配对（ＰＦ）组；（２）ＺＨ组的血清、毛发、股骨及胸腺细胞锌含量均非常显著地高于ＰＦ组；（３）ＺＨ组的胸腺重量、胸腺指数、胸腺细胞大小、胸腺肽含量和胸腺素活性，均非常显著地低于ＰＦ组；（４）ＺＨ组的胸腺细胞内ＤＮＡ、蛋白质含量低于，而Ｇ１／Ｇ０期细胞（％）数高于ＰＦ组；（５）ＺＨ组胸腺细胞内ｃＡＭＰ、ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值非常显著高于ＰＦ组，增殖指数（ＰＩ）与ｃＡＭＰ、ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值呈负相关；与ｃＧＭＰ呈正相关，均Ｐ＜０．０１；（６）ＺＨ组血清钙低于ＰＦ组，而胸腺细胞内Ｃａ２＋高于ＰＦ组，Ｐ＜０．０５。结果提示，适量锌有促进胸腺发育、增殖的作用，而高锌则反之。其机理可能是高锌影响细胞内腺苷酸环化酶系统，并与胞浆内游离钙和钙调蛋白的调节活性有关。     

HCV体外感染多种细胞株的观察

目的 寻找ＨＣＶ体外感染的细胞培养系统。方法 选用ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染人单核细胞株（Ｕ９３７）、人Ｔ淋巴细胞株（Ｍｏｌｔ－４）、人胆囊细胞株（Ｋｉｒｌｉｃｈ）、猪肾细胞株（ＰＫ１５）、鼠睾丸细胞株（ＳＴＥ）、人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２、Ｈｅｐ３Ｂ）等７种细胞。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ在这种７种细胞中的感染和复制情况。结果 ７种细胞中均能检测到ＨＣＶ ＲＮＡ正链，并且在Ｕ９３７、Ｍｌ     

支链氨基酸对大鼠心肌缺血损伤的防护作用

目的：观察支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠心肌缺血损伤的预防作用。方法：选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只，随机分成三个组，每组１０只。Ａ组：正常对照组；Ｂ组：异丙肾上腺素（ＩＳＯ）对照组；Ｃ组：ＩＳＯ＋ＢＣＡＡ组，其中Ｂ、Ｃ组用ＩＳＯ造成大鼠心肌缺血性损伤。用酶试剂盒和原子吸收法测定了血清、心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力及心肌中Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋离子的含量。结果：Ｂ组大鼠血清和心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力均明显升高，心肌中Ｃａ２＋的含量也显著升高，而Ｍｇ２＋的含量明显降低，Ｋ＋含量也有下降的趋势，但变化不显著。Ｃ组大鼠血清中ＬＤＨ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力明显低于Ｂ组，而且ＣＫ的活力接近正常水平；心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ的活力均低于Ｂ组并达到正常水平。补充ＢＣＡＡ后能有效地拮抗心肌细胞内钙的增加，使心肌内Ｃａ２＋含量明显低于Ｂ组，与正常对照组无显著差异，但ＢＣＡＡ不能升高受损心肌中Ｍｇ２＋的含量。结论：给予ＢＣＡＡ对心脏缺血性损伤具有一定的防护效果     

缺氧条件下梭曼对PC12细胞的毒性作用

目的：为研究有机磷化合物的细胞毒性及其在缺氧或低氧环境中毒性升高的机理，为高原有机磷中毒的预防和治疗用药提供依据。方法：利用ＭＴＴ比色法、放免技术及荧光分析法测定缺氧条件下梭曼中毒ＰＣ１２细胞存活率、ｃＡＭＰ含量和细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ＾２＋〕）ｉ的变化。结果：单纯梭曼中毒组ＰＣ１２细胞存活率无明显改变，缺氧及缺氧中毒细胞胞存活率显著下降；缺氧组、梭曼中毒组及缺氧梭曼中毒组的细胞ｃＡＭＰ含量〔Ｃ