耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的传播和分子特征

目的 分析多个患者多种标本中分离的耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的传播及分子特征.方法 用wHONET 5.4软件分析耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌菌株的一般情况,结合患者病历复习,了解所分离菌株的传播和致病作用;利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析基因型,采用多重PCR检测碳青霉烯酶基因,确定菌株的分子流行特征以及相互之间的亲缘关系.结果 从13例患者的2种或2种以上来源的标本中共获得耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌29株.PFGE分型显示共有两种不同基因型,其中A型22株,来自11名患者;B型7株,来自4名患者.PCR扩增结果显示,除1株菌外,所有菌株均含有碳青霉烯酶基因0XA-23;除3株菌外,均含有Ⅰ类整合子基因.结论 所检测的耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌有2个基因型,以A型为主.绝大多数鲍曼不动杆菌含OXA-23型碳青霉烯酶基因和Ⅰ类整合子基因.该菌很容易通过患者自身传播及相互传播,引起医院内耐药菌感染流行.     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究

目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4．7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。     

耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药机制及同源性分析

目的 调查医院ICU流行的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药机制及其同源性,为临床有效防治提供依据.方法 收集北京市海淀医院2011年11月ICU住院患者痰标本分离出的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌4株,按《全国检验技术操作规程》操作,用全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,PCR扩增检测碳青霉烯酶基因,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型,分析其同源性.结果 4株鲍氏不动杆菌中除对头孢哌酮/舒巴坦(2株敏感、2株中度敏感)、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶(2株敏感、2株耐药)、阿米卡星(1株敏感、3株耐药)稍敏感外,对其他各种抗菌药物均耐药;4株菌株均携带blaOXA-23-like和blaOXA-51-like基因;PFGE电泳结果显示,4株鲍氏不动杆菌分为A(A1、A2、A3)和B型,其中A型为主要的流行株.结论 鲍氏不动杆菌为多药耐药菌株;产碳青霉烯酶OXA-23是该菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制;同一克隆株在同一病房内传播致交叉感染.     

广泛耐药鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶基因型和表型分析

目的分析临床分离的鲍曼不动杆菌耐药谱和产碳青霉烯酶表型和基因型。方法应用全自动细菌鉴定仪对从本地三级医院收集的93株鲍曼不动杆菌进行菌株鉴定和药敏试验,用碳青霉烯酶抑制法(carbapenem inactivation method,CIM)检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌耐药表型;PCR法确定产碳青霉烯酶菌株耐药基因型。结果93株鲍曼不动杆菌,广泛耐药株47株(耐药率为50.5%),耐碳青霉烯类56株(耐药率为60.2%)。以亚胺培南为底物的碳青霉烯酶抑制法检出产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌55株,检出率为98.1%(55/56)。在56株碳青霉烯类耐药株中,TEM-1基因、PER-1基因、OXA-23基因、Ⅰ型整合子基因、adeB基因阳性率分别为75.0%、42.9%、80.4%、73.2%、64.3%,其余耐药基因均未检出。结论碳青霉烯酶抑制法快速、简便,可以作为常规检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌的表型检测方法;目前本地OXA-23和TEM-1型碳青霉烯酶以及Ⅰ型整合子是导致鲍曼不动杆菌广泛耐药和对碳青霉烯酶类耐药的主要原因。     

125株耐碳青霉烯类抗菌药物鲍氏不动杆菌多位点序列分型

目的了解医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的遗传特征。方法选取耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌分离株,进行多位点序列分型(MLST)。结果选取的125株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌,7个看家基因中6个等位基因数为1,gpi的等位基因数为3,可变位点数为3;125株菌MLST分析,3个ST型,其中ST 75型有82株,ST92型有20株,ST138型有23株,ST75、ST92与ST138属于同一克隆群。结论医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌相对进化较慢,对多种抗菌药物耐药,应严格消毒措施及无菌操作,减少由耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌引起的医院感染;减少抗菌药物的使用,减缓泛耐药菌的产生。     

多重耐药鲍曼不动杆菌ERIC—PCR的分子流行病学研究

目的监测医院不同病区分离的多重耐药鲍曼不动杆菌属耐药性变迁及基因同源性,为临床治疗和医院感染控制提供依据。方法收集2006—2008年医院临床分离非重复多重耐药鲍曼不动杆菌株23株,采用Kirby—Bauer（K—B）法进行药敏试验,应用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应（ERIC—PCR）对菌株进行DNA分型及同源性分析。结果23株鲍曼不动杆菌中,对3种或以上抗茵药耐药有22株;ERIC—PCR谱型表现为7种基因型,其中来源于不同的2个克隆株A型和B型,共占79．3％,且2个克隆株的相似度为72．7％。结论来自多个病区的多重鲍曼不动杆菌对抗生素耐药率高,且具有基因同源性,存在院内克隆传播。     

ICU耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌医院感染监测与控制

目的了解医院ICU耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌医院感染状况,查找传染源及传播途径,为及时采取有效的预防控制措施提供依据。方法对ICU 2008年7-12月发生的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌医院感染进行流行病学回顾性调查;对其环境进行大面积卫生学监测,并用肠杆菌属基因间保守重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌同源性分析。结果 2008年7-12月,在ICU共23例患者发生了耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌医院感染;环境卫生学监测共采得标本86份,其中在门把手、监护仪、听诊器、医护人员手、呼吸机及患者床头用品等54处检出耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌,污染率达62.8%;DNA图谱显示23株菌均为同一克隆菌株。结论医院ICU有耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌同一克隆株的暴发流行,环境污染严重可能是暴发流行的主要原因;大力加强ICU耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌医院感染管理工作已刻不容缓。     

医院环境中物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染及同源性分析

目的调查某院重点部门物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染情况及其同源性。方法对该院重症监护室(ICU)、急诊重症监护室(EICU)、血液透析室、手术室进行环境卫生学监测,采用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对ICU、EICU环境中污染的条件致病菌鲍曼不动杆菌进行扩增分型。结果除EICU医务人员手卫生结果达标外,ICU及EICU各检测项目细菌计数均不达标;血液透析室及手术室采样标本均合格。ICU、EICU物体表面共采集标本53份,检出鲍曼不动杆菌7株,检出率为13.21%;此7株菌均为碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌,其中6株基因型相同,与患者痰中分离的鲍曼不动杆菌基因型相同。结论该院重点部门环境中物体表面分离的碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌具有同源性,应加强其环境物体表面清洁与消毒,降低医院感染的发生。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药表型及同源性分析

目的了解医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株的耐药表型、携带blaKPC基因的型别及菌株同源性,为控制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌传播及临床治疗提供科学依据。方法收集35株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床分离株,用K-B纸片法进行药敏试验;应用PCR方法检测blaKPC基因,并通过测序进行分型;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分子分型,建立医院PFGE指纹图谱库,运用BioNumeries7.0生物分析软件对菌株之间的亲缘关系及同源性进行分析。结果 35株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对18种临床常用抗菌药物呈广泛耐药,耐药机制主要是携带blaKPC-2类耐药基因,携带率达82.86%;PFGE分子分型共分为10个谱型,优势型别为KPN01.002型(11株);各菌株间相似性系数达93.00%以上。结论产KPC-2型碳青霉烯酶为医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯细菌的主要耐药机制;不同病区菌株呈高度同源性分布;且可能存在院内的同源暴发,应加强细菌耐药性监测和医院感染的监控。     

中山市两家医院鲍曼不动杆菌耐药性及同源性分析

目的 了解中山市两家医院临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性及耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)耐药基因的携带情况,并分析其同源性,为医院感染控制提供实验室依据。方法 收集2018年3—8月中山市两家医院临床分离的35株鲍曼不动杆菌,采用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)法进行16种抗菌药物敏感试验,并筛选出CRAB菌株,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增CRAB中的耐药基因并测序确认;应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)技术对35株鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果 35株鲍曼不动杆菌中有33株为CRAB,其余2株对16种抗菌药物全敏感。33株CRAB对替加环素和多粘菌素B均敏感,对米诺环素的敏感率为45.45%,而对其他抗菌药物的耐药率均高达80%以上。33株CRAB均携带OXA-51基因,未检测到IMP和VIM基因。35株鲍曼不动杆菌共分为18个PFGE带型;分为A-F 6个聚类型别,A型(9/35,25.7%)和B型(22/35,62.9%)为主要流行克隆株。结论 鲍曼不动杆菌耐药现象严重,携带多种耐药基因可能是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类等多种抗菌药物耐药的重要原因。医院内存在不同克隆株播散以及同一克隆株在医院间流行播散。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者鲍氏不动杆菌的分子流行特征

目的 揭示医院老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中鲍氏不动杆菌分子流行的主要特征.方法 筛选2009-2011年老年COPD患者中分离的57株鲍氏不动杆菌为试验菌株;使用Whonet5.6软件分析其药敏结果;应用基于序列分型的多重PCR方法鉴定鲍氏不动杆菌的主要流行克隆谱系;利用限制性内切酶ApaI对试验菌株基因组DNA进行酶切和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析;应用PCR及测序方法检测10种耐药相关基因,分析并命名相应的耐药基因谱.结果 鲍氏不动杆菌除了对多黏菌素B的耐药率为8.8％外,对其他15种抗菌药物均具有较高的耐药率,为70.2％～98.2％;主要克隆谱系以RGP1序列型为主,所占的比例高达59.6％;在87.0％的相似性水平上,可大致分为18种PFGE图谱,其中主要型别为A型;共发现存在有15种耐药基因谱,其中多药耐药谱RGP1所占的比例高达52.63％.结论 在老年COPD患者中分离的鲍氏不动杆菌主要的流行克降谱系与欧洲克隆谱系Ⅱ具有高度的同源性;多药耐药相关基因的携带率较高,在具有不同遗传背景的鲍氏不动杆菌中存在有水平转移.     

Concurrent outbreak of multidrug-resistant and susceptible subclones of Acinetobacter baumannii affecting different wards of a single hospital.

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Acinetobacter baumannii has emerged as an opportunistic pathogen among acutely ill patients, especially those with thermal injury. A prospective 8-month study was conducted to describe the clinical and molecular epidemiology of multidrug-resistant A. baumannii affecting a single hospital. METHODS: Univariate analysis comparing SmaI macrorestriction patterns of A. baumannii generated by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) versus clinical and demographic risk factors. RESULTS: A total of 200 isolates from 76 patients were collected, of which 185 isolates from 76 patients were analyzed by PFGE. A total of 17 distinct PFGE clonal types were identified. One clonal type (strain A) represented 129 isolates from 49 patients. A group of related clonal types (strain A variants) were identified as 40 isolates from 20 patients. The only risk factor other than geographic location associated with the presence of strain A was prior treatment with antibiotics active against gram-negative bacteria (P = .0015). The two clonal types differed in antibiotic resistance profiles: 25% of strain A isolates, the dominant strain in the burn unit, were susceptible to at least one antibiotic tested. In contrast, approximately 80% of the other strain types were susceptible to at least one antibiotic and were cultured from patients admitted elsewhere in the hospital. No combination of antibiotics was observed to yield additive or synergistic activity. CONCLUSION: Clonally related strains of Acinetobacter that differ in susceptibility patterns may coexist within a single hospital, dependent on the selective pressure related to antibiotic exposure.     

医院感染鲍曼不动杆菌的耐药性和分子流行病学研究

目的：分析医院内鲍曼不动杆菌的耐药性和分子流行病学特征。方法对2014年3—4月浙江大学金华医院细菌室分离的39株鲍曼不动杆菌进行耐药性分析,同时应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型并应用聚类分析软件分析其同源性。结果39株鲍曼不动杆菌中37株为临床菌株,主要分离自ICU患者的痰液样本。39株鲍曼不动杆菌中碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）、多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB）和泛耐药鲍曼不动杆菌（XDRAB）的检出率分别为74.4%、56.4%和25.6%,未检到全耐药鲍曼不动杆菌;未检到替加环素耐药菌株,检出中介菌株9株（中介率23.1%）。耐药率在70%以上的其他抗菌药物依次为环丙沙星（82.1%）、头孢曲松（79.5%）、庆大霉素（76.9%）、头孢吡肟（74.4%）、亚胺培南（74.4%）、哌拉西林/他唑巴坦（71.8%）。头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为13.5%。PFGE电泳图谱聚类分析结果表明,39株鲍曼不动杆菌共分为17型,其中以外科ICU流行性最为广泛,主要包括A型、C型、J型、M型等鲍曼不动杆菌克隆株;其次为内科ICU和新生儿ICU,流行菌株以O型、P型为主。部分病区之间、吸引器开关与患者之间分离的鲍曼不动杆菌存在一致的同源性。结论浙江大学金华医院的CRAB、MDRAB、XDRAB菌株检出率较高,在部分ICU病区呈暴发流行,以A型、C型、J型菌株流行最广,吸引器开关可能为鲍曼不动杆菌院内交叉感染的重要媒介。     

Comparison of pulsed-field gel electrophoresis and amplified fragment-length polymorphism for epidemiological investigations of common nosocomial pathogens.

OBJECTIVE: To compare molecular typing by amplified fragment-length polymorphism (AFLP) analysis with pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) with respect to the ability to differentiate between epidemiologically related and unrelated isolates of common nosocomial pathogens recovered during a period of endemicity. DESIGN: Retrospective laboratory analysis. SETTING: Tertiary-care institution. METHODS: 17 isolates of Acinetobacter baumannii, 22 isolates of Pseudomonas aeruginosa, and 22 vancomycin-resistant Enterococcusfaecium (VRE) were typed by both methods. RESULTS: AFLP generated comparable results to PFGE for A baumannii and P aeruginosa isolates; both methods identified epidemiologically related and unrelated isolates. However, strain typing of VRE isolates produced discordant results between the two methods. PFGE identified 10 different strain types and differentiated between all epidemiologically related and unrelated isolates. In contrast, AFLP generated only five different strain types, three of which contained both epidemiologically related and unrelated isolates. CONCLUSION: Molecular typing by AFLP is comparable to PFGE for A baumannii and P aeruginosa isolates. For VRE isolates, however, PFGE remains the method of choice.     

多药耐药鲍氏不动杆菌基因同源性分析及流行病学调查

目的 了解重症监护病房(ICU)流行的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-AB)耐药谱特征及其同源性,为临床防治提供依据.方法 MDR-AB分离自2007年5月,4株系住ICU肺部感染患者的痰标本,4株系病房物体表面;按<全国检验技术操作规程>要求操作,用全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对8株鲍氏不动杆菌进行基因分型,明确其是否为同一菌株的克隆.结果 4株痰标本的鲍氏不动杆菌对包括碳青酶烯类在内的多种抗菌药物耐药,经DNA分型同为A型,另4株物体表面的鲍氏不动杆菌经DNA分型亦同为A型,8株有高度同源性,证实为同一克隆株.结论 鲍氏不动杆菌为多药耐药株,同一克隆株在不同感染个体间的相互传播导致了ICU内感染的流行;1号株可能是交叉感染的源头,医护人员标准预防未到位,尤其是手卫生问题是可能的传播途径.     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌感染的临床特征和同源性分析

目的对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(CRAB)临床分离株进行同源性研究,结合病史资料综合分析其临床流行特点,为加强医院感染控制工作提供依据。方法收集2015年1月-2018年6月临床分离到的75株CRAB,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析;并对患者病史资料进行回顾性调查。结果 75例患者主要集中在ICU、神经外科和呼吸内科。最常见的并发症为COPD和糖尿病。68例患者(90. 67%)曾接受侵入性操作。59例(78. 67%)患者病程中使用过2种以上的抗生素。63例(84. 00%)患者接受机械通气。75株CRAB共获7种PFGE型别,主要为A型(29株)、C型(20株)、D型(21株),B型、E型、F型、G型为散在株。结论 CRAB感染患者的临床特征为高龄、住院时间长、合并基础疾病、接受侵入性操作、接受机械通气及使用多种抗生素。CRAB存在院内传播的现象,以ICU最为严重,并有向外扩散的趋势。应及时采取有效的控制措施,杜绝其院内交叉感染的发生。     

重症监护病房鲍氏不动杆菌5年耐药监测及同源性分析

目的了解重症监护病房鲍氏不动杆菌的临床分布和耐药变迁,旨在为制定预防和控制其医院感染的措施提供依据。方法采用全自动微生物分析系统VITEK-AMS60对566株鲍氏不动杆菌进行鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)对临床分离株作药敏试验,参照CLSI为判断标准,耐药数据分析采用WHONET5.4软件,同时以脉冲场凝胶电泳进行其同源性分析,PCR检测相关耐药性基因。结果 2004年1月～2008年12月共分离出鲍氏不动杆菌566株,主要来源于呼吸道标本,分离率为86.9%,分离株和耐药率有逐年增加的趋势;连续5年监测了18种抗菌药物,12种抗菌药物耐药率均90.0%,亚胺培南95.6%、美罗培南91.4%、头孢他啶76.7%、阿米卡星75.1%、庆大霉素70.3%、头孢哌酮/舒巴坦57.3%、多黏菌素E20.0%;脉冲场凝胶电泳研究发现34株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌为同一耐药克隆株,在重症监护病房呈暴发流行;PCR明确产OXA-23型碳青酶烯酶,未检出OXA-24、IMP、VIM基因型。结论多药耐药和泛耐鲍氏不动杆菌逐年增多,头孢哌酮/舒巴坦和多黏菌素E是治疗多药耐药鲍氏不动杆菌的首选药物,连续动态监测重症监护病房鲍氏不动杆菌的耐药变迁,对临床治疗其引起的感染具有十分重要的意义。