白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控

目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节。方法分别用1mg/LLPS或25mmol/LRes+1mg/LLPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005)。结论LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

NF-Kappa B p65与CD68在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)中核转录因子κb p65 (NF-κB p65)蛋白、CD68阳性细胞的表达,探讨它们在肺癌发生发展中的作用以及两者的关系.方法 免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌组织、癌旁组织、正常组织)中NF-κB p65和CD68的表达,多组间比较运用单因素方差分析,并采用Pearson相关分析NF-κB p65蛋白表达与CD68阳性细胞数量的相关性.结果 肺癌组织、癌旁组织、正常组织中NF-κB p65的平均光密度值分别为0.174±0.034,0.139±0.016,0.090±0.01;CD68阳性细胞数分别为11.779±1.368,97.486±2.538,52.140±1.853,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CD68的表达与TNM分期、淋巴节转移、是否侵及胸膜有关(P＜0.05).NF-κB p65蛋白在NSCLC中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴节转移及是否侵及胸膜有关(P＜0.05).CD68阳性细胞数量和NF-κB p65蛋白的表达呈正相关(r=0.416,P＜ 0.05).结论 NF-κB p65蛋白的表达和CD68+巨噬细胞的浸润与NSCLC的发生发展转移相关,提示CD68+巨噬细胞可能通过激活NF-κB促进非小细胞肺癌的发生发展.     

曲古抑菌素A与5-氟尿嘧啶协同对肝癌细胞HepG2的抑制作用

[目的]研究5-氟尿嘧啶(5-FU)与曲古抑菌素A(TSA)单独及联合应用对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用,并初步探讨其与NF-κBp65和AKT表达的关系。[方法]以MTT法观察5-FU或(和)TSA对HepG2细胞生长的影响,Hoechst染色法分析细胞凋亡情况,Westernblot检测NF-κBp65和AKT蛋白表达水平的变化。[结果]与对照组相比,5-FU与TSA均可导致处理的细胞增殖速度减慢,且抑制效应随药物剂量的增加而增强,两药联合应用可明显增强其抑制作用,促进HepG2细胞凋亡,并降低NF-κBp65和AKT蛋白的表达(P﹤0.01)。[结论]TSA和5-FU联合应用可能通过协同调控下调NF-κBp65与AKT蛋白表达而抑制HepG2细胞的增殖。     

矽肺患者肺泡灌洗液中巨噬细胞游走抑制因子和活化因子的观察

目的 探讨矽肺患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中的巨噬细胞活化及巨噬细胞游走抑制冈子(MMIF)的表达.方法 对47例矽肺患者及20例正常对照,利用细胞块切片作免疫组化染色,观察矽肺患者BALF中巨噬细胞数目、MMIF、巨噬细胞炎症蛋白lα(MIP-1α)、核闪子KBP65(NF-κBP65)蛋门表达.结果 各期矽肺患者BALF中巨噬细胞数量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期矽肺患者BALF细胞块中MMIF、MIP-1α、NF-κBP65蛋白染色阳性细胞数明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),各期矽肺患者BALF中MMIF、MIP-1α、NF-κBP65染色阳性细胞数,差异有统计学意义(P<0.01).结论 矽肺患者BALF中巨噬细胞数目增多,MMIF、MIP-1α、NF-κBP65蛋白表达升高.     

NF-κB、PI3K和STAT1在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达变化及临床意义

目的通过检测及分组对比研究,分析NF-κB、PI3K和STAT1在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中的表达变化,探讨其在支气管哮喘中的临床意义。方法选择2015年1月-2017年10月在该院住院治疗的82例支气管哮喘急性发作期患儿为研究对象,设为观察组;选取同期健康儿童60例作为对照组,采用RT-PCR法检测PBMC中NF-κB、PI3K和STAT1mRNA水平,采用Western blot法检测PBMC中NF-κB、PI3K和STAT1蛋白水平,采用肺功能仪检测两组肺功能,并分析支气管哮喘患儿PI3K、NF-κB和STAT1的mRNA水平与肺功能的相关性。结果观察组的PI3K、NF-κB和STAT1的mRNA和蛋白水平均高于对照组(P0. 05)。与对照组相比,观察组FEV1%、FEV1/FVC、PEF%等肺功能指标均下降(均P0. 05)。哮喘患儿的PI3K、NF-κB和STAT1的mRNA表达水平与FEV1%、FEV1/FVC、PEF%均呈负相关关系(均P0. 05)。结论支气管哮喘患儿的NF-κB、PI3K和STAT1表达出现显著上调,且与肺功能呈负相关关系。NF-κB、PI3K和STAT1可能共同参与小儿支气管哮喘的发生发展,且发挥着重要作用。而干扰或阻断NF-κB、PI3K和STAT1的表达,可以阻止哮喘的进一步发生发展。     

云锡矿粉离体诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化

目的 建立本实验云锡矿粉(无氡)诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化模型,观察在诱导过程中不同阶段的细胞形态、超微结构和某些相关蛋白改变.方法 高、低2个剂量(200和50 mg/L)矿粉对RLE-6TN细胞进行72 h染毒,隔代染毒至第10代,常规传代直至软琼脂克隆形成实验阳性;通过透射电镜、流式细胞术、免疫印迹技术及免疫细胞化学观察实验细胞的改变.结果 染毒24 h细胞内见大量矿粉,板层小体变性减少,出现细胞凋亡;第25代高剂量组及第30代高低剂量组的细胞均可在软琼脂上形成细胞集落,空白对照组克隆形成实验阴性(P<0.01);第30代高剂量组细胞增殖指数(PI)高于空白对照组;高剂量组转化细胞p53(+)、MDM2(+)、FHIT(-);空白对照组p53(-)、MDM2(+)、FHIT(+).结论 云锡矿粉可引起离体培养的RLE-6TN细胞发生恶性转化.p53阳性表达及FHIT失表达可作为RLE-6TN细胞转化的参考指标.     

NRDS患儿外周血单核细胞NF-κB活性及血浆TNF-α变化及其意义

[目的] 探讨新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)患儿外周血单核细胞核因子-κB(NF-κB)及血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及其临床意义. [方法] 分别采用免疫组织化学染色法和酶联免疫吸附法测定54例NRDS患儿及35例正常对照组的外周血单核细胞NF-κB活性和血浆TNF-α水平,并分析NF-κB活性与TNF-α浓度相关性. [结果] NRDS组NF-κB活性和TNF-α水平显著高于正常对照组(P<0.01),而且NRDS外周血单核细胞NF-κB活性与TNF-α水平显著正相关. [结论] 新生儿呼吸窘迫综合征外周血单核细胞核因子-κB活性明显升高,NF-κB是NRDS患儿不稳定的标志,并可能通过上调TNF-α水平而促发NRDS.     

白藜芦醇对LPS刺激下NF-κB核转位影响

[目的]观察白藜芦醇对脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞的NF-κB核转位影响。[方法]体外培养小鼠RAW264.7细胞,脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞,用不同浓度白藜芦醇进行干预,免疫荧光法结合激光共聚焦显微镜检测NF-κB核转位情况。[结果]共聚焦显微镜下观察到正常组细胞NF-κB荧光标记主要分布于胞浆区,核区很少,LPS刺激后NF-κB荧光标记浓集于核区,胞浆区少见;白藜芦醇预处理后再给予LPS刺激的荧光标记主要位于胞浆区,以100、50μmol.L-1组较明显。[结论]白藜芦醇能抑制脂多糖刺激下小鼠RAW264.7细胞的NF-κB核转位。     

单核巨噬细胞在煤焦沥青烟提取物诱导永生化人支气管上皮细胞恶变中的作用

目的 探讨单核巨噬细胞(THP-1)在煤焦沥青烟提取物(coal tar pitch,CTP)致永生化人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,BEAS-2B)恶变过程中的作用及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)在该过程中的表达.方法 以THP-1和BEAS-2B为研究对象,设立CTP组、苯并(a)芘[B(a)P]组(阳性对照组)、二甲亚砜对照组(溶剂对照组)、BEAS-2B与THP-1共培养组,建立细胞恶性变模型.应用软琼脂集落形成实验、染色体数目畸变分析、流式细胞仪测定细胞周期中不同培养时期(10、20、30代)细胞的恶变情况,利用ELISA方法测定CTP组及共培养组细胞培养上清中TNF-α的含量.结果 染色体数目异常在实验的早期(10代)已经显现,表现为非整倍体和多倍体比例增加,二倍体数目减少.在第20代:共培养组克隆形成率(17.63‰±0.97‰)明显高于CTP组(13.94‰±0.84‰)和阳性对照组组(12.96‰± 1.62‰),差异有统计学意义(P＜0.05);共培养组S期细胞比例(44.49％±0.68％)明显高于CTP组(38.19％±1.26％)和阳性对照组(36.41％±1.19％),差异有统计学意义(P＜0.05).共培养组细胞培养上清中TNF-α含量明显高于CTP组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 THP-1能够加速CTP诱导的BEAS-2B恶变,增加TNF-α的表达水平.     

亚甲蓝对LPS诱导巨噬细胞炎性反应的影响

目的观察亚甲蓝对脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW246.7巨噬细胞炎性反应因子表达和细胞NF-κB活性的影响,以初步探讨亚甲蓝在LPS诱导巨噬细胞炎性反应中的作用。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,利用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立体外内毒素炎性反应模型。进行实验分组:Ⅰ组(对照组):完全无血清培养基孵育;Ⅱ组(模型组):在无血清培养基中加入浓度为1 g/m L的LPS进行孵育;Ⅲ组(亚甲蓝组):完全无血清培养基中加入亚甲蓝20μmol/L,2 h后加入1 g/m L的LPS孵育,细胞培养24 h后:1实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)观察IL-6、IL-8、MCP-1 m RNA的表达;2酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-6、IL-8、MCP-1蛋白水平;3荧光素酶报告实验(luciferase activity assay)检测细胞中NF-κB的活性。结果LPS刺激巨噬细胞后,细胞中炎性反应因子m RNA和蛋白表达增高,而亚甲蓝预处理能够减弱LPS对炎性反应因子的诱导作用;LPS可以诱导巨噬细胞NF-κB活化,亚甲蓝能够抑制NF-κB的激活。结论亚甲蓝可以通过抑制NF-κB的激活调控LPS诱导的炎性反应。     

人早孕蜕膜基质细胞对育龄期女性外周血Treg的影响

目的:探讨人早孕蜕膜基质细胞(DSCs)对育龄女性外周血Treg细胞的影响。方法:分离培养育龄期女性外周血淋巴细胞(PBLC);分离培养正常人早孕DSCs并传至第3代或第4代,后分为4组。1对照组:单纯培养PBLC;2共培养组:PBLC+DSCs培养组;3脂多糖(LPS)刺激组:PBLC+DSCs+LPS培养组;4吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)阻断组:PBLC+DSCs+LPS+PDTC培养组。蛋白质印迹法(Western blotting)检测核因子κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Fox P3 m RNA表达水平;流式细胞仪检测Treg细胞亚群比例。结果:分离培养的人原代DSCs的纯度大于95%。Western blotting和RT-PCR结果显示,共培养组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达明显高于其余3组(P<0.05);与共培养组相比,LPS刺激组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达降低(P<0.05),与LPS刺激组相比,PDTC阻断组IκBα蛋白、Fox P3 m RNA表达升高,但仍低于共培养组(P<0.05)。流式细胞术检测显示,共培养组Treg细胞亚群比例高于其余3组(P<0.05);与共培养组相比,LPS刺激组Treg细胞亚群比例下降;PDTC阻断组Treg细胞亚群比例高于LPS刺激组,但仍低于共培养组(P<0.05)。结论:人早孕DSCs能上调育龄期女性外周血淋巴细胞中Treg细胞亚群比例,加入LPS刺激后Treg细胞亚群比例下降,可能与级联活化IκB激酶,降解IκBα,活化NF-κB信号通路,从而抑制Fox P3表达增高有关。     

青蒿琥酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞保护作用

目的 探讨中药青蒿琥酯(artesunate,AR)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞损伤状态下的保护作用及其机制.方法 采用体外培养的巨噬细胞系RAW264.7细胞,待细胞生长至融合状态后分别加入LPS和不同浓度的AR(2.5,5,10,20μg/ml),于37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,设立空白对照组.采用反转录PCR(RT-PCR)技术检测细胞核因子κB(NF-κB)mRNA表达的变化,硝酸还原酶法检测细胞上清液中炎性介质一氧化氮(NO)的含量.结果 1μg/ml的LPS刺激后,巨噬细胞信号转导通路上NF-κB的表达及炎症介质NO的含量均较对照组明显增加(P<0.05),加入AR后,随AR浓度的增加逐渐下调LPS升高的(NF-κB)mRNA表达及N0含量,且与LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 青蒿琥酯可明显降低内毒素诱导的巨噬细胞NF-κB的表达,减少NO的分泌可能是其抗损伤的保护作用机制之一.     

抑制TLR4/NF-κB通路逆转SiO2诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应及M1促炎表型转化

[背景]二氧化硅(SiO2)粉尘可引起肺泡巨噬细胞中的炎症事件和细胞损伤,但具体作用机制不明.[目的]探究抑制TLR4/NF-κB信号通路在SiO2诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应及巨噬细胞表型改变中的作用.[方法]16只6～8周龄的C57BL/6小鼠(雌雄各半)经50μL生理盐水或50μL 50 mg·mL?1的SiO2肺...     

阿司匹林干预脑胶质细胞瘤相关巨噬细胞表达VEGF、bFGF和YKL-40成血管生长因子

目的 阐明阿司匹林对脑胶质细胞瘤相关巨噬细胞表达VEGF、bFGF和YKL-40蛋白的影响和意义。方法 诱导人白血病THP-1单核细胞为M2型巨噬细胞。单独培养U-87MG细胞为U-87M组;单独培养M2型巨噬细胞为M2组;U-87MG细胞与M2型巨噬细胞非接触共同培养为共培养M2组;共培养细胞用2mmol/L、4mmol/L、8mmol/L阿司匹林进行干预分别为2mM、4mM、8mM阿司匹林组。免疫组化、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞VEGF、bFGF和YKL-40蛋白表达。结果 与对照组相比,共培养组巨噬细胞表达VEGF、bFGF和YKL-40蛋白明显升高(P<0.01)相对于共培养组,2mM、4mM、8mM阿司匹林组巨噬细胞表达的VEGF、bFGF和YKL-40蛋白含量均降低(P<0.01),2mM、4mM、8mM阿司匹林组间相比,随着阿司匹林浓度增高,VEGF、bFGF和YKL-40蛋白含量逐渐降低。结论 阿司匹林能够抑制人脑胶质细胞瘤相关巨噬细胞表达VEGF、bFGF和YKL-40等血管活性相关蛋白。     

CTRP9抑制幼年哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖和炎性反应的研究

目的 研究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对哮喘幼鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖和气道炎症的作用。方法 ELISA检测正常、哮喘儿童和小鼠血清中CTRP9含量;原代培养哮喘小鼠ASMCs,经pcDNA3.1-CTRP9转染后,MTT检测ASMCs增殖,ELISA测定TNF-α和IL-6含量,Western 印记检测TLR4和NF-κB p65蛋白表达以及NF-κB p65磷酸化水平;pcDNA3.1-CTRP9转染哮喘小鼠,HE染色观察肺组织炎性细胞的浸润程度;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),光镜下检测嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和中性粒细胞数目;检测小鼠肺部TNF-α、IL-6、TLR4和NF-κB的表达。结果 哮喘儿童和小鼠血清中CTRP9含量低于正常组;CTRP9能抑制ASMCs增殖、炎症因子分泌和TLR4/NF-κB通路活化;CTRP9也能抑制哮喘小鼠肺部炎性细胞浸润、各炎性反应细胞数目、炎症因子分泌和TLR4/NF-κB通路活化。结论 CTRP9能抑制幼年哮喘小鼠ASMCs增殖和炎性反应。     

恶性梗阻性黄疸经内镜胆道内置管引流术后胆道感染 TLRs/MyD88/NF-κB信号通路表达

目的 分析恶性梗阻性黄疸经内镜胆道内置管引流术(ERBD)后胆道感染状况，并探讨Toll样受体(TLRs)/髓样分化蛋白88(Myd88)/核因子κB(NF-κB)信号通路表达变化及意义。方法 选取2020年4月-2021年6月于河北北方学院附属第一医院行ERBD术的低位恶性梗阻性黄疸患者120例为研究对象，根据患者术后是否发生胆道感染分为感染组和非感染组，采集患者术后空腹静脉血，检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、降钙素原(PCT),分离外周血单个核细胞(PBMCs)并检测TLR2、TLR4、Myd88和NF-κB(p65)mRNA相对表达水平。结果 120例行ERBD术的低位恶性梗阻性黄疸患者中，术后胆道感染率为15.00%(18/120),共培养分离病原菌23株，其中革兰阴性菌18株占78.28%;感染组患者PMBCs中TLR2、TLR4、Myd88、NF-κB(p65)mRNA相对表达水平均高于非感染组(P<0.05);感染组患者血清PCT、IL-1β及IL-6水平均高于非感染组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示，IL-1β、IL-6诊断...     

糖皮质激素抑制激素敏感型单纯性肾病病毒基因反式激活途径中NF-κB活性的研究

[目的]为核因子-κB（NF-κB）介导病毒基因反式激活触发激素敏感型单纯性肾病（SRSNS）提供反面证据,并探讨糖皮质激素对NF-κB活性的抑制作用。[方法]采用电泳迁移率改变实验、RT-PCR和ELISA分别测定SRSNS、肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞（PBMCs）中NF-κB活性、呼吸道病毒基因和血浆病毒抗体;同时采用Westernblot和实时定量RT-PCR分别检测SRSNS和正常儿童IκBα蛋白质、IκBαmRNA表达水平。[结果]与SRSNS缓解期和其他组比较,SRSNS活动期组NF-κB活性明显增加。SRSNS活动期NF-κB活性与IκBα蛋白质水平呈直线负相关（r=-0.884,P﹤0.05）。SRSNS活动期复发和SRSNS缓解期患儿NF-κB活性低于SRSNS初发患儿,而IκBαmRNA和IκBα蛋白质高于后者。[结论]IκBα在SRSNS病毒基因反式激活中发挥重要作用,糖皮质激素通过诱导IκBα合成来抑制NF-κB活性。     

子痫前期脐血清对脐动脉平滑肌细胞功能影响的体外研究

目的:探讨子痫前期(PE)患者脐静脉血清对脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)前胶原I、ⅢmRNA表达及核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法:采用组织块培养法培养正常妊娠HUASMC,传代后待细胞长满至70%~80%分别加入正常妊娠及子痫前期脐静脉血清,培养2h,Western Blot测定细胞胞浆核因子-κB抑制因子(I-κB)及胞核NF-κB蛋白表达;培养48h,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞凋亡,RT-PCR测定细胞前胶原I及ⅢmRNA的表达。结果:子痫前期重度患者脐静脉血清培养的HUASMC胞浆I-κB表达及细胞凋亡率明显低于正常妊娠组(P<0.01);胞核NF-κB表达、细胞活力、前胶原ImRNA的表达明显高于正常妊娠组(P<0.01)。结论:子痫前期重度患者脐静脉血清可促进HUASMC增生及I型胶原的表达,NF-κB的激活在子痫前期患者脐静脉血清促HUASMC增生及I型胶原表达过程中起桥梁作用。     

云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化和成纤维细胞活化过程中的相互作用

目的 探讨云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化及成纤维细胞活化过程中的相互作用.方法 常规培养永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及人胚肺成纤维细胞(WI-38),每6天传代1次;100μg/ml的云锡矿粉隔代诱导BEAS-2B及WI-38至第9代,共诱导5次,自第11代分组共培养至第40代.刀豆凝集素A及锚着独立性生长实验检测细胞恶性转化,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫细胞化学法检测成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 (1)与正常BEAS-2B细胞相比,矿粉诱导的BEAS-2B细胞单独培养至第28代细胞形态开始出现改变;与WI-38细胞共培养后,细胞形态改变提早至第20代;与矿粉诱导的WI-38细胞共培养后,细胞形态改变进一步提早至第16代.矿粉诱导的BEAS-2B细胞培养至第26代时凝集实验出现阳性;与WI-38细胞及矿粉诱导的WI-38细胞共培养后,细胞凝集时间缩短.与WI-38细胞共培养的矿粉诱导BEAS-2B及与矿粉诱导WI-38细胞共培养的矿粉诱导的BEAS-2B细胞分别在第26及第36代锚着独立性生长实验出现阳性,第36代的克隆形成率分别为6.00‰±1.00‰和15.33‰±2.52‰,且差异有统计学意义(P<0.05).矿粉诱导的各组上皮细胞S期细胞所占比例随培养代数增加逐渐升高,细胞发生恶性转化.(2)100 μg/ml矿粉诱导的成纤维细胞培养至第26代出现α-SMA表达;与上皮细胞共培养后,成纤维细胞α-SMA表达增强,且随培养代数的增加,阳性表达细胞数明显增多,着色程度增强.结论 个旧矿粉能诱导支气管上皮细胞恶性转化及成纤维细胞活化;肺上皮细胞是矿粉诱癌的主要靶细胞;肺上皮细胞的转化和成纤维细胞的活化相互影响,相互促进.     

氟对原代培养大鼠海马细胞周期及细胞凋亡和核因子-κB表达的影响

目的 探讨氟对原代大鼠海马细胞存活、细胞周期、凋亡和核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 原代培养大鼠海马细胞分别暴露于20、40和80μg/ml氟化钠24 h后,采用噻唑蓝(MTT)、流式细胞术(FCM)、逆转录PCR(RT-PCR)分别检测大鼠海马细胞存活情况、细胞周期分布、凋亡率、NF-κB表达水平.结果 与对照组比较,80 μg/ml剂量组海马细胞存活率下降(P＜0.05);40、80 μg/ml剂量组凋亡率和S期细胞百分率皆显著高于对照组(P＜0.05),各剂量组NF-κB mRNA显著高于对照组(P＜0.05).结论 一定剂量氟可抑制海马细胞存活,诱导NF-κB mRNA表达和凋亡发生.氟对发育中海马细胞NF-κB表达水平的影响可能是氟神经毒性的机制之一.