多囊卵巢综合征患者卵泡液中6种miRNAs表达的检测

目的:分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液外泌体中miRNA-9、miRNA-18b、miRNA-19、miRNA-24、miRNA-199和miRNA-320水平,初步探讨其在PCOS发生、发展中的潜在意义。方法:48例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者,分为PCOS组(23例)和对照组(25例),留取其卵泡液。采用超速离心法提取卵泡液外泌体,分别用外泌体粒径分析(NTA)、蛋白质印迹(Western blotting)和透射电镜验证外泌体。通过实时荧光聚合酶链式反应(PCR)法检测卵泡液和外泌体miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19,miRNA-24,miRNA-199,miRNA-320的表达情况。结果:卵泡液中PCOS组miRNA-199的表达水平高于对照组(5.42±0.80 vs.1.02±0.94,P0.01),miRNA-320的表达水平低于对照组(0.47±0.06 vs.1.23±0.09,P0.01);2组间miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19和miRNA-24的表达水平差异无统计学意义(P0.05)。在外泌体中,PCOS组miRNA-9和miRNA-18b的表达水平高于对照组(8.94±0.54 vs.1.01±0.97,2.66±0.19 vs.1.12±0.06,均P0.01),miRNA-199和miRNA-320的表达水平则低于对照组(0.43±0.11 vs.1.22±0.07,0.53±0.09 vs.1.18±0.15,均P0.01)。结论:PCOS患者卵泡液和外泌体存在miRNA-9,miRNA-18b和miRNA-199的表达,可能与PCOS发生、发展相关。     

外泌体miR-1246在绝经后骨质疏松症中的表达及临床意义

目的 研究绝经后骨质疏松症(PMOP)患者血清外泌体中miR-1246的表达情况及其与患者临床资料之间的关系。方法 收集2021年1月—2022年7月本院门诊与住院PMOP患者55例，同期45例健康绝经后妇女作为对照组，通过外泌体提取试剂盒分离PMOP组和对照组血清中的外泌体，采用蛋白免疫印迹检测外泌体标记的蛋白分子，透射电子显微镜鉴定血清外泌体形态；通过实时荧光定量PCR测量2组血清外泌体miR-1246的表达水平；并采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清外泌体miRNA-1246在PMOP中的诊断效能。结果 2组血清来源的外泌体直径为40 nm～200 nm囊泡体，均表达蛋白CD9、CD63和CD81。患者血清外泌体miRNA-1246表达水平明显高于对照组(P<0.01)。外泌体miR-1246在PMOP患者中的表达与年龄、身体质量指数、骨代谢标志物、钙、镁磷、肌酐、甲状旁腺激素、白细胞介素-6和中性粒细胞计数都无关，然而与腰1至腰4椎体和股骨颈骨密度的T值成负相关关系(r=-0.36)。ROC曲线分析显示，血清外泌体miRNA-1246在PMOP中的诊断效能较大(AUC...     

MicroRNA 在多囊卵巢综合征中的表达及作用

非编码微小RNAs（microRNAs,miRNAs）主要在转录后水平上调控基因表达,异常miRNA表达与胰岛素抵抗、糖尿病、炎症及各种癌症形成有关。多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）患者血清及卵泡液中miRNAs表达谱存在差异,其异常的miRNAs表达能够通过影响基因转录后水平,参与PCOS的发生发展。综述miR-93、miR-222、miR-92a/b、miR-224、miR-320、miR-9、miR-483-5p、miR-513a-3p、miR-24、miR-133b、miR-26b和miR-378在PCOS患者的胰岛素抵抗、性激素合成和分泌、颗粒细胞增生、卵泡发育异常及排卵障碍中的作用,探讨miRNA在PCOS发病机制中的作用。     

PCOS患者卵泡液维生素D水平与IVF周期结局相关性分析

摘要:目的　探讨多囊卵巢综合征（Polycystic Ovary Syndrome,PCOS）患者卵泡液中维生素D水平变化与体外受精-胚胎移植（In Vitro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET）周期临床妊娠的相关性。方法　选取首次接受IVF-ET治疗的PCOS患者61例,根据治疗结局分为临床妊娠组（A组）和临床未妊娠组（B组）,采用ELISA法测定血浆及卵泡液25（OH）D水平,分析卵泡液中25（OH）D水平与IVF临床妊娠是否相关。结果　血浆25（OH）D与卵泡液25（OH）D水平直线相关（R方为0.914,调整R方为0.913;P＜0.05）;A组与B组相比,血浆25（OH）D分别为（31.9±4.67）ng/ml和（21.11±3.31）ng/ml、卵泡液25（OH）D分别为（32.02±3.68）ng/ml和（19.76±3.37）ng/ml,差异均有统计学意义（P＜0.05）;卵泡液25（OH）D水平与临床妊娠密切相关［OR值（95%CI）为1.60（1.3～2.24）;P＜0.05］。结论　PCOS患者卵泡液25（OH）D水平可反映体内25（OH）D水平,卵泡液25（OH）D水平可作为监测PCOS患者IVF成功的独立因素。     

BDNF基因的Val66Met多态性与子宫内膜异位症性不孕的相关性及对IVF-ET助孕结局的影响

目的：观察脑源性神经营养因子（BDNF）基因的Val66Met多态性与子宫内膜异位症（EMs）性不孕的相关性，探讨BDNF基因变异对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的影响。方法：收集2015年9月-2016年9月于山东中医药大学第二附属医院生殖医学科就诊，且因Ⅲ～Ⅳ期EMs行IVF-ET的患者112例为观察组，并选取同期因单纯输卵管因素行IVF-ET患者109例为对照组，探讨2组间BDNF基因的Val66Met多态性分型比例，进一步分析2组中不同基因型患者的IVF-ET妊娠结局。结果：①2组患者的年龄、不孕年限、体质量指数（BMI）、基础卵泡刺激素（FSH）和基础雌二醇（E2）水平比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）。②观察组Met/Met基因型所占比例和Met等位基因频率较对照组显著增高（33.0% vs. 23.9%，P=0.043；58.9% vs. 47.7%，P=0.018）；2组中携带Met/Met基因型的患者较携带其他2种基因型患者使用的Gn剂量更高（P＜0.05），但成熟卵数（4.5±3.2 vs. 5.2±2.3）、受精率（59.0% vs. 67.0%）却更低（均P＜0.05）。③2组患者中Met/Met基因型者相比于另外2种基因型者卵泡液中的BDNF蛋白水平明显下降（P＜0.05），但月经期和人绒毛膜促性腺激素（hCG）日血浆中BDNF含量差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：BDNF基因Val66Met多态性与EMs性不孕的发生密切相关，且可能导致患者对IVF-ET治疗的反应性降低。     

血清降钙素原与内毒素对医院获得性肺炎病原诊断和疗效的判断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)与内毒素(LPS)在医院获得性肺炎（HAP）病原类型鉴别和疗效判断价值的意义。方法对某院110例HAP患者进行前瞻性研究,分为革兰阴性（G-）菌感染肺炎组（50例）,革兰阳性（G+）菌感染肺炎组（30例）,对照组(非典型病原体或病毒感染组,30例）。动态监测患者血清PCT、LPS、C反应蛋白（CRP）,并采用受试者工作特征曲线（ROC）及曲线下面积（AUC）,评估PCT与LPS对预测HAP病原菌感染类型的效能。结果G- 菌感染肺炎组PCT、LPS水平分别为（3.43±1.15）ng/mL、（0.20±0.08）EU/mL,高于G+ 菌感染肺炎组［分别为（0.42±0.12）ng/mL、（0.05±0.02）EU/mL］和对照组（0.14±0.08）ng/mL、（0.02±0.01）EU/mL］,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）。G- 菌感染肺炎组治疗前后PCT［(3.43±1.15)ng/mL vs(0.63±0.22)ng/mL］、CRP［(47.26±30.35) mg/L vs(9.21±6.54) mg/L］水平比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01)。中重度组较轻度组血清PCT［(5.43±1.05)ng/mL vs(0.72±0.32)ng/mL］、LPS ［(0.33±0.07) EU/mL vs(0.09±0.04) EU/mL］和CRP［(57.46±20.15) mg/L vs(8.25±5.24) mg/L］水平均明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。PCT和LPS联合检测区分G- 菌和G+ 菌感染HAP的敏感度为95.83％,特异度为96.15％,AUC为0.95。结论PCT和LPS在HAP患者病原类型鉴别中具有一定价值,PCT和LPS联合检测可提高鉴别HAP感染类型的特异度,并可根据其动态变化评估抗菌药物疗效。     

多囊卵巢综合征患者卵泡液瘦素水平变化及对卵细胞受精率、卵裂率的影响

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液瘦素水平变化及对卵细胞受精率、卵裂率的影响。方法:留取行IVF-ET治疗的PCOS患者(PCOS组,n=32例)和因输卵管因素不孕妇女(对照组,n=32例)的卵泡液,利用ELISA法和RIA法分别测定卵泡液瘦素浓度和内分泌指标,观察并记录两组卵细胞受精率、卵裂率。结果:①两组卵泡液瘦素与睾酮水平呈正相关(r=0.444,P<0.01);②PCOS组卵泡液瘦素水平明显高于对照组(P<0.01);③PCOS组卵细胞受精率、卵裂率明显低于对照组(P<0.01)。结论:PCOS患者卵泡液瘦素水平增高对卵细胞受精率、卵裂率有影响,可能是其IVF-ET妊娠成功率低的原因之一。     

高龄卵巢功能低下女性采取改良的自然周期体外受精-胚胎移植的临床结局

目的：高龄卵巢功能低下女性采用微刺激方案行体外受精/胞浆内单精子注射-胚胎移植（IVF/ICSI-ET）未获成功，改用改良的自然周期促排卵方案，观察其临床结局，探讨高龄卵巢功能低下女性的助孕方案。方法：2016年1月-2017年6月在我中心第1周期应用微刺激促排助孕治疗未获成功的高龄卵巢功能低下女性25例，第2周期改为改良的自然周期促排卵助孕方案。采取自身对照，比较2种促排卵方案中性激素水平、卵泡大小、获卵数、胚胎情况和妊娠结局。结果：改良的自然周期方案中卵泡平均直径及扳机日雌二醇（E2）水平与微刺激方案比较差异有统计学意义[（19.8±1.3）mm vs.（17.8±1.0）mm，（582.1±165.9）pmol/L vs.（681.4±99.1）pmol/L，均P＜0.05]，获卵数低于微刺激方案[（1.0±0.0）个 vs.（2.7±1.4）个]，但是卵母细胞成熟率（100%）、正常受精率（100%）及优质胚胎率（80%）高于微刺激方案（分别为80.6%，81.5%，36.4%），差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论：高龄卵巢功能低下女性采用改良的自然周期，虽然获卵数不及微刺激周期，但提高了胚胎质量，妊娠结局与微刺激周期一致。     

多囊卵巢综合征与相关微小RNA的研究进展

微小RNA(mi RNAs)是一组小分子非编码RNA,在转录后水平调控基因的表达。mi RNAs水平与糖尿病、胰岛素抵抗相关;多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血以及卵泡液中存在某些mi RNAs,提示mi RNAs可能作为PCOS相关的潜在生物标志物。研究发现,PCOS肥胖患者血清mi R-21、mi R-27b、mi R-103和mi R-155这4种mi RNAs的表达明显增加;而mi R-222、mi R-146a和mi R-30c这3种mi RNAs具有作为PCOS的血清生物标志物的某种可能性。卵泡液表达丰富的成熟mi RNAs,PCOS患者卵泡液中mi R-132和mi R-320表达显著低水平;mi R-224、mi R-376a和mi R-143这3种mi RNAs也可能作为PCOS病理生理机制研究的靶标。由于PCOS的异质性,不同研究得到的mi RNAs表达谱也不完全相同,所以对与PCOS相关的mi RNAs尚需进一步研究。     

高危型HPV阳性宫颈癌患者miRNA-34a-5p的表达及临床意义

目的　探讨高危型人乳头状瘤病毒（high risk-human papilloma virus, HR-HPV）阳性宫颈癌患者组织及血清中微小RNA（microRNA, miRNA）-34a-5p的表达及其对宫颈癌的诊断价值。方法　将100例HR-HPV阳性宫颈癌患者（宫颈癌组）、70例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）患者（CIN组）、70例HR-HPV阳性子宫良性病变或者HPV单纯阳性的健康体检者（对照组）作为研究对象。采集上述研究对象的血清标本及70例行手术治疗的宫颈癌组患者癌组织及癌旁组织。使用实时荧光定量PCR技术测定组织及血清中miRNA-34a-5p水平，并分析miRNA-34a-5p与宫颈癌临床、病理指标的关联及血清miRNA-34a-5p对宫颈癌的诊断价值。结果　①对照组血清中miRNA-34a-5p的相对表达量高于CIN组和宫颈癌组：（0.933±0.097）vs.（0.554±0.099）vs.（0.369±0.099），差异有统计学意义（F=741.401，P=0.000）；宫颈癌组患者术前血清中miRNA-34a-5p相对表达量低于术后1周，差异有统计学意义（t=8.305，P=0.000）。有无淋巴结转移和有无远处转移的宫颈癌患者血清中miRNA-34a-5p相对表达量的差异有统计学意义（P均＜0.05）。②宫颈癌组患者癌旁组织中miRNA-34a-5p的相对表达量高于癌组织，差异具有统计学意义（t=40.313，P=0.000）。③宫颈癌组患者癌组织中的miRNA-34a-5p表达水平与血清中的表达水平呈正相关（r=0.908，P=0.000）。④以0.508为miRNA-34a-5p相对表达量的最佳临界值诊断宫颈癌，其灵敏度为83.6%，特异度为79.4%，AUC为0.860，95%置信区间为0.803～0.917。结论　HR-HPV阳性宫颈癌患者癌组织和血清中miRNA-34a-5p表达下调，对宫颈癌诊断及预后监测具有一定的参考价值。     

微小RNAs与多囊卵巢综合征发病机制的研究进展

微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)参与基因转录后表达调控。多囊卵巢综合征(PCOS)为一种异质性疾病,其发病机制尚不明确。多种mi RNAs在PCOS患者血清、颗粒细胞以及卵泡液中表达异常,提示mi RNAs参与PCOS的病理过程。mi RNAs与多种卵巢甾体激素的合成与分泌关系密切;参与卵泡的发育和闭锁,从而影响PCOS患者的排卵过程;还在胰岛素抵抗中发挥重要作用。mi R-125b、mi R-483和mi R-320通过调控多种靶基因而影响多条信号通路。综述mi RNAs在PCOS发病机制中的作用,一些功能比较明确的mi RNAs有望成为PCOS疾病诊断和预后评估的生物学标志物,为PCOS的治疗提供新思路。     

同型半胱氨酸对多囊卵巢综合征患者卵子质量及发育潜能的影响

目的:探讨同型半胱氨酸对行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵子质量和发育潜能的影响。方法:选择首次行IVF-ET治疗的PCOS患者9例(PCOS组)及输卵管因素不孕患者13例(对照组),比较两组患者取卵日空腹血浆及卵泡液总同型半胱氨酸(tHcy)浓度以及卵子发育情况。结果:PCOS患者取卵日血浆及卵泡液tHcy浓度均较对照组显著升高(均P<0·01);PCOS患者卵子回收率、成熟率、受精率、卵裂率、优质胚胎率均显著低于对照组(均P<0·05);卵泡液tHcy浓度与受精率、卵裂率、优质胚胎率负相关(均P<0·01);卵泡液tHcy浓度与血浆tHcy浓度正相关(P<0·0001)。结论:PCOS患者血浆及卵泡液总同型半胱氨酸浓度显著升高;血浆及卵泡液高浓度同型半胱氨酸是影响PCOS患者卵子质量、发育潜能及妊娠结局的一个重要因素。     

高孕激素状态下促排卵治疗的卵泡晚期应用低剂量人绒毛膜促性腺激素对多囊卵巢综合征患者体外受精结局的影响

目的探讨在高孕激素状态下促排卵治疗(progestin-primed ovarian stimulation,PPOS)的卵泡晚期应用低剂量的人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)替代人绝经期促性腺激素(human menopausal gonadotropin,hMG)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者体外受精(in vitro fertilization,IVF)/卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)结局的影响。方法回顾性队列研究分析2015年3月至2017年12月期间在上海交通大学医学院附属第九人民医院辅助生殖科行IVF/ICSI治疗的PCOS患者的临床资料。促排卵方案均采用PPOS,根据PPOS的卵泡晚期是否应用低剂量的hCG替代hMG分组:A组,PPOS常规方案组(hMG+孕酮),完全应用hMG(141个周期);B组,PPOS卵泡晚期hCG替代hMG组(hMG/hCG+孕酮),即在PPOS促排卵治疗的卵泡晚期应用低剂量的hCG(200 IU/d)完全替代hMG(80个周期)。比较两组患者的临床资料和妊娠相关指标。本研究的主要监测指标包括获卵数、可用胚胎数和临床妊娠率。结果两组的促排卵治疗时间[A组(9.7±2.6)d比B组(10.3±3.4)d]差异无统计学意义(P=0.16);B组hMG用药时间[(7.8±3.5)d]及hMG用药量[(1592.8±840.5)IU]均显著低于A组[(9.7±2.6)d,P=0.01;(1825.2±795.3)IU,P=0.04];两组的获卵数和可用胚胎数差异均无统计学意义(P>0.05)。在随后的冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)周期中,A组与B组间患者的临床妊娠率[52.8%(105/199)比49.2%(60/122)]、胚胎种植率[37.1%(139/375)比37.1%(86/232)]、早期流产率[4.8%(5/105)比5.0%(3/60)]及持续妊娠率[47.7%(95/199)比44.3%(54/122)]差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PCOS患者在PPOS的卵泡晚期应用低剂量的hCG替代hMG,能安全、有效地维持卵泡生长发育,且不影响PCOS患者的IVF/ICSI-FET治疗的结局。     

肠外瘘患者消化液中细菌与酶含量在体外变化的观察

目的 探讨肠外瘘患者消化液中细菌与酶含量在体外的变化.方法 收集1998年7月至2008年1月我院16例高位肠外瘘患者瘘出的新鲜消化液,分别在0、2、4h测定引流液中细菌数量、淀粉酶和脂肪酶的含量.将瘘出的消化液及时回输入远端肠道,同时在肠液回输的0、7、14 d测定患者血清中白蛋白、纤维连接蛋白、转铁蛋白、前白蛋白水平.结果 消化液中细菌数量4h内无增加(F(0,2)=18 812.50,P＞0.05;F(0,4)=387 625.00,P＞0.05).消化液中淀粉酶含量(F(0,2)=190.60,P＞0.05;F(0,4) =631.75,P＞0.05)和脂肪酶含量(F(0,2)=204.10,P＞0.05;F(0,4)=1080.05,P＞0.05) 4h内无变化.肠液回输后患者血清中纤维连接蛋白[0、7、14 d分别为(152.80±16.50)、(167.27±20.54)、(227.05 ±45.36) mg/L; F(0,14) =74.24,P＜0.01; F(7,14)=59.78,P＜0.01]、转铁蛋白[0、7、14 d分别为(2.16 ±0.52)、(2.23 ±0.48)、(2.62±0.41) g/L; F(0,14) =0.46,P＜0.01; F(7,14) =0.39,P＜0.05]、前白蛋白[0、7、14 d分别为(177.74±45.14)、(194.04±49.33)、(232.11±79.57) mg/L;F(0,14) =54.37,P＜0.05]水平显著增加.结论 肠外瘘患者消化液中细菌和酶含量在体外4h内无变化,肠液回输是安全有效的.     

微小RNA在多囊卵巢综合征病因学研究中的新进展

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的生殖内分泌疾病,其主要特征是高雄激素血症、稀发排卵或无排卵、卵巢多囊样改变及胰岛素抵抗。微小RNA（miRNA）是一类小分子非编码RNA,在转录后水平对靶基因进行调控。miRNA可以通过调节卵巢颗粒细胞增殖和凋亡影响卵泡发育、排卵与闭锁;通过影响雄激素的合成和释放,导致内分泌紊乱;通过调节糖代谢及胰岛素敏感性,诱导胰岛素抵抗的产生,从而参与PCOS的发病过程。现就miRNA在PCOS病因学研究中的进展进行综述。     

万级层流病房对初发急性白血病患者诱导化疗期间医院感染发病率的影响

目的探讨万级层流病房对初发急性白血病患者诱导化疗期间医院感染发病率的影响。方法回顾性调查2013年10月—2014年6月某院血液科病房收治的初发急性白血病患者,万级层流病房收治的患者为试验组,普通病房收治的患者为对照组。所有患者均接受标准诱导化疗,接受相同的护理措施,比较两组患者医院感染发病率及病房空气洁净度。结果共收治初发急性白血病患者79例,试验组39例,对照组40例。层流病房房间、走廊空气洁净度（分别为3.57×106/m3、24.46×106/m3）与普通病房（分别为149.36×106/m3、15 854.38×106/m3）比较,差异均有统计学意义（t值分别为45.80、108.70,均P＜0.001）。医院感染发病率试验组为23.08%（9/39）,对照组为45.00%（18/40）,两组比较,差异有统计学意义（χ2=4.219,P=0.040）。医院感染部位试验组主要为胃肠道（5例）,对照组主要为下呼吸道（8例）。患者发热持续时间、抗菌药物使用时间及费用,试验组分别为（6.20±2.10）d、（9.35±2.12）d、（27 113.79±1 559.03）元;对照组分别为（10.20±2.90）d,（14.15±3.14）d、（58 566.29±2 217.54）元;两组患者发热持续时间、抗菌药物使用费用比较,差异均有统计学意义（t值分别为1.021、1 377.45,均P＜0.05）。结论初发急性白血病患者使用层流病房,可降低其医院感染发病率,减少抗菌药物使用费用。