冠脉内多普勒导丝评价山莨菪碱保护缺血/再灌注微循环功能的实验研究

目的探讨山莨菪碱对小型猪缺血/再灌注相关冠状动脉微循环功能的保护作用。方法将建立缺血/再灌注模型的14头小型猪随机分为2组:生理盐水组(7头),先予冠脉内生理盐水,球囊闭塞左前降支(LAD)60 min造成心肌缺血,撤除球囊恢复冠脉再灌注;山莨菪碱组(7头),制备模型前冠脉内分次给予山莨菪碱。应用冠脉内多普勒导丝观察模型相关冠脉平均峰值流速(APV)、舒张收缩流速比值(DSVR)、冠脉血流储备(APV)的变化情况。结果两组制模后,APV、DSVR、CFR较基础状态明显下降(P<0.05),但生理盐水组较山莨菪碱组下降更为显著,两组APV、DSVR、CFR在缺血/再灌注后有显著性差异(P<0.05)。结论缺血/再灌注后相关冠状动脉发生微循环功能障碍,山莨菪碱对冠脉微循环具有保护作用。     

山莨菪碱对小型猪缺血-再灌注血管内皮相关因子的影响

目的:探讨冠状动脉内注射山莨菪碱对小型猪缺血-再灌注血管内皮功能相关因子的影响。方法:12头小型猪,随机分为0.9%氯化钠组(6头)和山莨菪碱组(6头),球囊闭塞冠状动脉前降支(LAD)造成心肌缺血,撤除球囊恢复冠状动脉灌注,同时冠状动脉内注射药物,分别在冠状动脉闭塞前、冠状动脉再灌注5、30、60、120、180min抽取血标本,测定血管内皮相关因子[一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)]等的变化。结果:小型猪缺血再灌注后,0.9%氯化钠组:NO降低,ET-1、丙二醛(MDA)、血小板聚集率(PagT)及血管性假性血友病因子(vWF)抗原升高(P<0.05),且在120min变化最大;山莨菪碱组:NO降低,ET-1、MDA、PagT及vWF抗原等升高(P<0.05),但升高的峰值变化与0.9%氯化钠组相比,幅度均明显减小,2组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小型猪在缺血-再灌注开始即出现血管内皮相关因子变化,在灌注开始后90~120min达高峰;冠状动脉内注射山莨菪碱可抑制NO降低、ET-1等升高的幅度,从而减轻血管内皮的缺血-再灌注损伤。     

促红细胞生成素抑制caspase-3蛋白表达对缺血再灌注大鼠的心脏保护作用

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌缺血及梗死面积、心肌细胞凋亡和caspase-3蛋白表达的影响.方法 采用在体大鼠心肌I/R模型,将24只健康SD大鼠按随机数字表法随机分成3组:(1) 假手术组,以6-0号丝线在冠状动脉左前降支下穿过,不予以结扎;(2) I/R组,以6-0号丝线在冠状动脉左前降支下穿过,并结扎,在结扎线中埋置松解线,45 min后,松解结扎线,实现再灌注24 h;(3) EPO组,手术过程同I/R组,在再灌注开始即刻,给大鼠腹腔内注射重组人EPO(rhEPO),5 000 U/kg.再灌注24 h后用伊文蓝和氯化四唑(TTC)进行心肌染色,测量心肌缺血范围和梗死范围;采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;采用Western印迹法检测心肌caspase-3蛋白p17亚基的表达.结果 经过45 min缺血和24 h再灌注:心肌染色显示:假手术组心肌无缺血区和梗死区;与假手术组比较,I/R组和EPO组心肌有明显缺血区和梗死区,其缺血范围和梗死范围均显著增大(P<0.01);与I/R组比较,EPO组缺血范围略为缩小,其差异没有显著性(P>0.05),但梗死范围显著缩小(P<0.01).TUNEL结果显示:与假手术组比较,I/R组和EPO组心肌细胞凋亡显著增加(P<0.01);与I/R组比较,EPO组心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01);Western印迹法结果显示:与假手术组比较,I/R组和EPO组caspase-3蛋白p17亚基表达水平显著升高(P<0.01);与I/R组比较,EPO组caspase-3蛋白p17亚基表达水平显著下降(P<0.01).结论 EPO显著缩小I/R大鼠心肌缺血和梗死范围,减少心肌细胞凋亡,对I/R心肌具有明显的保护作用,其机制可能与下调caspase-3蛋白表达相关.     

姜黄素后处理通过JAK2/STAT3信号通路拮抗心肌缺血/再灌注损伤

目的:观察姜黄素（curcumin,Cur）后处理对离体心肌缺血/再灌注损伤(ischemia and reperfusion injury,I/RI)的拮抗作用及其可能的机制。方法: 40只SD大鼠随机分为5组(n=8),即空白对照(Ctl组)、缺血/再灌注组(I/R组)、I/R+姜黄素后处理组(I/R+Cur组)、I/R+姜黄素后处理+AG490组(I/R+Cur+AG组)及AG490组（AG组）,AG490为JAK2/STAT3信号通路特异性阻断剂。采用离体大鼠心脏Langendoff逆行灌注模型,缺血60 min,再灌注60 min。分别于缺血前及再灌注后15 min、30 min、45 min和60 min,测定血流动力学各项指标,包括:心率（HR）、左心室发展压（LVDP）、左心室内压力上升的最大速率(+dp/dtmax)、冠脉流量（CF）、计算出心率压力指数（DP,LVDP×HR/1000）。用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积,用Western blot检测各组JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3以及磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达。结果: 与Ctl组比较,I/R组各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),磷酸化JAK2和STAT3的表达明显升高(P<0.01)。与I/R组比较,I/R+Cur组各时间点的心肌收缩及舒张功能下降程度明显减轻(P<0.01),MI的面积明显减少(P<0.01),p-JAK2和STAT3的表达更高(P<0.01)。与I/R+Cur组相比,I/R+Cur+AG组各时间点的收缩及舒张功能显著降低(P<0.01),MI的面积显著增加(P<0.01),p-JAK2和STAT3的表达显著下降(P<0.01);和Ctl组相比,AG组血流动力学和MI的面积无统计学差异。结论: Cur后处理对I/R大鼠心肌具有保护作用,其作用机制与JAK2/STAT3信号通路的活化有关。     

瑞苏伐他汀不同给药方式对猪心肌缺血再灌注后无再流及血管内皮结构和功能的影响

目的对比瑞苏伐他汀单次及多次给药对猪心肌缺血再灌注后无再流及血管内皮结构和功能的影响。方法19只中华小型猪分为安慰剂组、瑞苏伐他汀单次及多次给药组。开胸冠状动脉结扎1．5h,松解3h制备急性心肌梗死再灌注模型。术中监测动脉血压、心室压、心率及冠脉血流量。手术结束前经左房、室分别注射硫磺素s、伊文思蓝染料鉴别无再流、缺血区域。心肌组织以红四氮唑染色,用面积求积法测定心肌的缺血、梗死及无再流面积。以比色法测定再流区及无再流区心肌组织中的固有型一氧化氮合酶（cNOS）活性,并以免疫印迹法测定血管内皮钙黏附分子（VE—cadherin）含量。结果各组缺血前血压和心率的乘积无统计学差异;再灌注180min时瑞苏伐他汀多次给药组冠脉血流量明显高于安慰剂组和单次给药组（P〈0．05）;瑞苏伐他汀多次给药组梗死区面积与心肌缺血面积的百分比值、无再流面积与心肌缺血面积的百分比值、心肌再流区、无再流区cNOS活性与安慰剂组比较均有统计学差异（P〈0．05）。瑞苏伐他汀多次给药组无再流区VE-cadherin含量明显高于安慰剂和单次给药组。结论在急性心肌梗死急性期,瑞苏伐他汀可以减轻心肌缺血再灌注损伤,但给药方式会影响其疗效。     

辛伐他汀对缺血再灌注损伤心肌保护机制的实验研究

目的　研究辛伐他汀对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法　将健康雄性 SD大鼠随机分为假手术组、对照组和辛伐他汀组 ,辛伐他汀组于结扎冠脉前 12小时腹腔注射给药 ,假手术组、对照组注射等量生理盐水 ,八导生理记录仪记录缺血 1、30分钟及再灌注后 1、30分钟心功能 ,以图像分析软件计算缺血和坏死心肌面积。同时对缺血心肌行浸润 PMNs(多形核细胞 )计数。结果　缺血再灌注后与对照组比较 ,辛伐他汀组坏死区面积与缺血区面积之比减少 2 1% ,坏死区面积与左室面积之比减少 2 2 % (P均 <0 .0 5 ) ;左室内压上升段最大变化速率(+dp/ dtm ax)、左室内压下降段最大变化速率 (- dp/ dtmax)、心率 (HR)、心肌纤维缩短速率最大值 (Vmax)分别在再灌注 1分钟和 30分钟明显改善 (P均 <0 .0 5 ) ,缺血心肌 PMNs浸润明显减少。结论　辛伐他汀对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

黄连解毒汤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察黄连解毒汤对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用SD大鼠心肌缺血再灌注模型(I/R),将56只SD大鼠随机等分为7组:假手术组、心肌缺血再灌注组、溶剂(%CMC-Na)对照组、黄连解毒汤(HLJDT)低剂量组、HLJDT中剂量组、HLJDT高剂量组,复方丹参组.连续给药7 d,末次给药24 h后,复制大鼠心肌I/R损伤模型.测定血清肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β水平,测量心肌梗死范围,取心肌组织检测 NF-κB.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组血清TNF-α、IL-1β、CK水平明显增高(P<0.05),梗死范围明显增加(P<0.05),且NF-κB表达明显增高(P<0.05);实验组较缺血再灌注对照组的TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB水平明显降低,梗死范围明显降低(P<0.05).结论 黄连解毒汤显著缩小心肌梗死面积,降低心肌酶,减少心肌细胞内TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB蛋白的表达,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用.     

红景天苷对心肌缺血-再灌注大鼠心肌梗死面积及细胞凋亡的影响

目的观察红景天苷对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌梗死面积及心肌细胞凋亡的影响,探讨大株红景天抗MIRI的作用。方法将SD大鼠按照随机数字表法分为6组,每组6只:假手术组(Sham)、心肌缺血-再灌注模型组(I/R)、红景天苷预防组(红景天苷+缺血再灌注,S+I/R)、红景天苷治疗组(缺血再灌注+红景天苷,I/R+S)、红景天苷预防组+磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002组(S+I/R+LY组)、红景天苷治疗组+PI3K特异性抑制剂LY294002组(I/R+S+LY组)。红景天苷预防组和预防组+LY组造模前连续给药3 d;红景天苷治疗组和治疗组+LY组再灌注即刻加予红景天苷;Sham组和I/R组均给予等量生理盐水腹腔注射;预防+LY组和治疗+LY组于冠脉左前降支(LAD)结扎前30 min腹腔注射PI3K特异性抑制剂LY294002。心肌缺血30 min再灌注24 h后,迅速摘取大鼠心脏留取心室,运用Evans’blue及TTC法双重染色,确定心肌梗死区和缺血区面积;运用末端标记法(TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡并计算心肌细胞凋亡指数。结果与I/R组比较,红景天苷预防组和治疗组均能显著缩小MIRI大鼠的心肌梗死面积(P0.05),TUNEL法检测阳性细胞核显著减少,差异有统计学意义(P0.05);与预防组和治疗组比较,预防+LY组及治疗+LY组心肌梗死面积显著扩大,细胞凋亡指数显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论红景天苷能有效减少MIRI大鼠心肌梗死面积和心肌细胞凋亡指数。     

梗死心肌血管微环境对经冠状动脉内移植骨髓干细胞疗效的影响

目的观察梗死区侧支循环对冠状动脉(冠脉)内骨髓干细胞移植术心肌修复疗效的影响。方法结扎猪左前降支建立心肌梗死模型,2周后行冠状动脉造影进行梗死区侧支循环Rentrop评分,取分值为0(R0)或1(R1)的动物各10头,经冠脉内注射骨髓单个核细胞(BMMNCs)或等体积磷酸盐缓冲液(PBS,对照组),随机分为R0 BMT,R0 PBS,R1 单个核细胞移植(BMT)和R1 PBS4组(n=5)。结果梗死后6周,R1 BMT组Rentrop积分显著升高;R0 BMT与R1 BMT两组心功能均明显提高,以R1 BMT组最显著;血管新生和移植细胞数量在R1 BMT组最明显。结论冠脉内移植BMMNCs对梗死心肌有修复作用,而梗死区侧支循环的存在放大其疗效。     

冠状动脉内给予乙酰半胱氨酸对缺血再灌注心肌梗死面积的影响

目的:观察冠状动脉内给予小剂量N-乙酰半胱氨酸(NAC)对家兔心肌缺血再灌注(I/R)后心肌梗死面积的影响。方法:36只家兔随机分为假手术组(S组,12只)、(I/R组,12只)和NAC治疗组(NAC组,12只)。NAC组在结扎前降支1h后恢复血流灌注,然后用无损伤血管钳夹闭主动脉和肺动脉10s,同时于心尖部注入200g/L的NAC溶液0.5ml,S组和I/R组给予0.5ml0.9%氯化钠溶液。再灌注3h后从颈动脉采血,测定血清肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)活性。蛋白印迹法检测缺血区心肌组织中I-κB的表达,并分别用双重染色测定心肌梗死面积。结果:与I/R组比较,NAC组CK和LDH明显降低(P<0.01),而GPH-Px活性则明显增高(P<0.01),缺血区心肌组织中I-κB的表达明显减少,心肌梗死面积也显著减少(P<0.01)。结论:冠状动脉内给予小剂量NAC能明显减少心肌I/R后的心肌梗死面积。