药用植物莪术的组织培养快速繁殖与植株再生的研究

通过茎尖培养实现了中药莪术试管苗的快速繁殖并从试管苗基部诱导出了愈伤组织。实验表明：以ＭＳ培养基为基本培养基。附加ＺＴ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５～１．０ｍｇ／Ｌ适于丛生芽的诱导与增殖;附加２,４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ４．０～６．０ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的诱导;附加２,４－Ｄ１．０～２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２～０．５ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的继代培养;附加ＫＴ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的分化。     

南方红豆杉的组织培养和紫杉醇的含量测定

在Ｂ５培养基上从南方红豆杉茎段和叶片外植体诱导形成愈伤组织。经过比较，确定Ｂ５＋ＮＡＡ３ｍｇ／ｌ＋ＢＡ０．１ｍｇ／ｌ增减基适合红豆杉愈伤组织的诱导和生长。ＨＰＬＣ测定结果表明，南方红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量为提取后干重的０．００８％。     

浙贝母种胚的离体培养

本文报道了浙贝母Ｆｒｉｔｉｌｌａｒｉａ ｔｈｕｎｂｅｇｉｉ种胚，经ＭＳ＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋水解蛋白３００ｍｇ／Ｌ和ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ等培养基分化和脱分化后，形成小鳞茎和正常植株。     

茶树（Camellia Sisensis O． Ktze）叶片培养的器官发生

以叶片为外植体，采用ＭＳ基本培养基，附加１～５ｍｇ／Ｌ的６－苄基嘌呤（６－ＢＡ）、２ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）、３ｍｇ／Ｌ赤霉素（ＧＡ３），０．２～０．３％活性炭诱导愈伤组织。并用ＭＳ或ＥＲ为基本培养基，附加０．５～５ｍｇ／Ｌ６－苄基嘌呤（６－ＢＡ），０．５ｍｇ／Ｌ吲哚丁酸（ＩＢＡ）诱导胚状体和器官，进一步形成小植株。采取ＭＳ加５～８ｍｇ／Ｌ细胞分裂素和０．５～１ｍｇ／Ｌ的细胞生长素，每天光照１０小时便形成“丛生叶”，植株矮小；若上列激素的配比接近时，每天光照１２～１４ｈ，即打破丛生叶形态，节间抽长形成正常的互生叶小植株。     

黑节草茎段直接诱导丛生芽

介绍利用黑节草茎节外殖体获得丛生苗的方法：黑节草茎节段在１／２ｍｓ＋６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基上,先诱导形成愈伤组织,然后出许多绿色小芽。进一步移至１／２ｍｓ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基上产生大量的丛生芽。丛生芽培养于１／２ｍｓ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基上,可诱导生根形成完整植株。     

木立芦荟的试管苗快速繁殖

以木立芦荟茎尖、腑芽、叶片、吸芽为外植体的离体培养和快速繁殖研究结果表明：所有外植体在合适培养基上均能产生愈伤组织与丛生芽,初代培养的最适培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ;继代培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ;生根壮苗的最适培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ。式管苗移栽的成活率可达到１００％。商品化生产中以白糖、片糖代替蔗糖,以卡拉胶代替琼     

黑草茎段直接诱导丛生芽

黑节草茎节段在１／２ｍｓ＋６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡＯ．２ｍｇ／Ｌ的培养基上,先诱导形成愈伤组织,然后出现许多绿色小芽。进一步移至１／２ｍｓ＋ＮＡＡＯ．５ｍｇ／Ｌ培养基上产生大量的丛生芽。丛生芽培养于１／２ｍｓ＋ＩＳＡ１ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡＯ．５ｍｇ／Ｌ培养基上,可诱导生根形成完整植株。     

抗癌植物蔓生长春花的组织培养研究

首次成功地从不同培养基上诱导出蔓生长春花的愈伤组织。实验证明基本培养基ＭＳ比６，７Ｖ为佳。植物激素组合效应表明附加１．２ｍｇ／ＬＫＴ，１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ以及１．０ｍｇ／Ｌ，２，４－Ｄ的ＭＳ培养基最有利于愈伤组织的诱导和生长。不同的外植体对愈伤组织的诱导和生长均有影响。愈伤组织再分化成完整植株亦获得成功。在含０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ和２．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡＭＳ分化培养基上诱导出芽和完整植株，诱导率高达９     

三裂叶野葛茎段和叶柄培养成再生植株

三裂叶野葛的叶柄和茎段外植体在含有６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上产生愈伤组织,愈伤诱导率分别为１００％和９４％,为进一步分化出芽,芽再生率分别为１００％和３３．３％,而在添加６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中叶柄和茎段外植体的愈伤诱导率分别为１００％和６４．３％,芽再生率分别为５７．１％和２１．４％,茎长成嫩枝后转移至增加０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的     

南方红豆杉组织培养研究Ⅰ.愈伤组织诱导和培养条件优化

介绍了南方红豆杉植物愈伤组织诱导和继代培养条件,在ＭＳ－培养基上,附加不同种类和浓度配经的激素,在光照条件下对植物愈伤组织的诱导率和生长量等进行了比较。其中当２,４－Ｄ１．２ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ２．８ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ３ｍｇ／Ｌ或４ｍｇ／Ｌ时,愈伤组织诱导率和生长量最高,结果表明,不同激素组合对愈伤组织诱导率,生长量和发生的性状有明显的影响,为南方红豆杉植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决红豆杉的资源贫     

老瓜头愈伤组织诱导培养技术的研究

目的为老瓜头Cynanchum komarovii资源利用提供前期的生物技术实验参考。方法以老瓜头的根段、茎段和叶片为外植体,采用正交试验方法,筛选诱导愈伤组织产生的最适培养基;进行愈伤组织增殖培养过程中,测定了不同时间愈伤组织的鲜、干质量,绘制愈伤生长曲线;同时进行了愈伤组织分化培养基的实验筛选。结果不同外植体诱导愈伤产生,其根诱导效果最好,各处理诱导率达90%~100%,茎段和叶片愈伤组织诱导最佳配方分别为MS 2,4-D1.0mg/L 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L和MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L,茎段比叶片较容易诱导,各处理诱导出的愈伤组织质地松散,颜色鲜黄,几乎无褐化现象。愈伤组织继代生长在第10天进入对数生长期,愈伤鲜生长量最大达4.961g,干质量0.496g。愈伤组织的分化率很低,很难生芽,易分化出钉状根。结论对于诱导愈伤形成,根段是最佳的外植体,筛选出了茎段和叶片诱导愈伤的最适配方,愈伤组织生长量较大,但分化困难。     

菊三七组织培养的研究

目的　探讨菊三七诱导愈伤组织的过程 ,为快速繁殖幼苗奠定基础。方法　以菊三七的根、茎、叶为外植体 ,采用 MS培养基 ,附加不同的植物激素进行实验。结果　以菊三七的叶片为外植体 ,在培养基 MS 1.0 mg/ LNAA 4 .0 m g/ L 6- BA上 ,愈伤组织诱导率可达 64%。愈伤组织在适宜的分化培养基上 ,成苗率可达 86.7%。结论　通过诱导愈伤组织的途径 ,可以达到快速繁殖菊三七的目的     

栀子叶片愈伤组织诱导优化研究

目的:对栀子(Gardenia jasminoides Ellis)叶片愈伤组织诱导进行优化研究。方法:通过以叶片为外植体,MS和WPM为基本培养基,添加不同激素组合(6-BA、NAA和IBA)进行愈伤组织诱导研究。结果:栀子叶片在WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L以及6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1(或0.5)mg/L中均有100%的诱导率;在MS培养基上,MS+6-BA 1.0(或1.5)mg/L+NAA 0.5 mg/L的诱导率最好,分别为70%和74%。栀子叶片愈伤组织在再分化培养基上均未诱导出丛生芽。结论:WPM培养基比MS培养基更易诱导栀子叶片愈伤组织,且栀子愈伤组织的再分化较困难。     

半夏愈伤组织的诱导及增殖效应

以半夏Pinellia ternata (Thunb ) Breit 的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加 NAA、2,4- D、KT、6-BA及其组合的MS培养基上,均能产生愈伤组织。研究结果表明,MS+ 1. 5 mg/L KT + 2. 0 mg/L 2,4- D 对半夏愈伤组织的诱导效果最好。MS+ 0 2 mg/L 6- BA+0 .5 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS+0 5 mg/L 6 -BA +1 0 mg/L 2,4 D增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。     

南方红豆杉愈伤组织生长动力学及紫杉醇代谢动力学研究

目的通过愈伤组织细胞生长及其紫杉醇代谢动力学的研究,筛选确定南方红豆杉愈伤组织培养生产紫杉醇的最佳培养基配方与最佳收获期。方法以改良MS为基本培养基添加不同质量浓度的IBA、6-BA、GA3组合诱导培养南方红豆杉愈伤组织,通过测定愈伤组织鲜质量进行生长动力学研究,采用HPLC法检测不同生长阶段愈伤组织中紫杉醇的积累量,进行紫杉醇代谢动力学研究。结果改良MS+0.2 mg/L IBA+0.05 mg/L 6-BA+0.3 mg/L GA3、MS+0.2 mg/L IBA+0.01mg/L 6-BA+0.7 mg/L GA3及MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3培养条件均较有利于南方红豆杉愈伤组织的诱导培养,且紫杉醇的积累量也较高,最高可达0.037 76%。结论在添加IBA及6-BA的基础上适当增补GA3可使南方红豆杉愈伤组织诱导提前启动,缩短出愈时间,促进生长,降低褐变程度,增加愈伤组织中紫杉醇的积累量。愈伤组织的生长曲线呈S型,紫杉醇的积累呈线型增加,是一个逐渐积累的过程,但积累到一定程度就不再增加,且伴随着愈伤组织不断褐变。     

天门冬组培快繁体系研究

目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源.方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究.结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L LAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8.结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

檀香体胚发生及影响因素的研究

目的　探讨檀香胚性细胞发生体胚的技术。方法　以檀香实生苗的下胚轴为材料 ,MT为基本培养基 ,附加不同种类的植物激素。结果　基本培养基以 MT或 MS为好 ;IAA与 BA结合有利于胚性愈伤组织的形成 ,诱导率可达 36 .7% ;体胚发生 ,以 MT+IAA(NAA) 0 .2 mg/ L+BA1mg/ L 培养基较好 ,能诱导体胚发育 ,长出正常茎叶 ;BA浓度为 0 .5～ 1.0 mg/ L 时 ,既有利于体胚发生 ,又能保证一定的增殖速度。结论　成功地诱导出檀香胚性愈伤组织 ,通过体细胞胚胎发生长出正常茎叶 ,为利用生物技术的手段进行檀香人工种子的研究奠定基础     

Effect of different plant growth regulators on callus and adventitious shoots induction, polysaccharides accumulation and antioxidant activity of Rhodiola dumulosa

ObjectiveAs a medicinal plant, the resource of Rhodiola dumulosa is deficient along with the large collection. For the protection and utilization of R. dumulosa, the influence of plant growth regulators (PGRs) on callus induction and adventitious shoots differentiation, polysaccharide production and the antioxidant activity were tested.MethodsInternodes of R. dumulosa were used as explants and cultured on MS medium plus different plant growth regulators (PGRs). The anti-oxidative activities of polysaccharides were evaluated using radical scavenging assays.ResultsBy response surface plot, 0.85 mg/L N6-benzyladenine (BA), 0.34 mg/L naphthaleneacetic acid (NAA) and 0.33 mg/L 2,4-dicholorophenoxyacetic acid (2,4-D) were the optimal factors for callus induction (90.03%) from internodes explants on MS medium. The fresh weight of green callus increased 47.26 fold, when callus was inoculated on MS + thidiazuron (TDZ) 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L. Adventitious buds regenerated from callus on the media of MS were fortified with BA 1.0 mg/L plus NAA 0.5 mg/L, and the induction rate was 40.00%. MS plus indole-3-butyric acid (IBA) 1.0 mg/L produced the highest rooting rate with 10 to 15 roots in a length of 2–3 cm per shoot. The content of total polysaccharides in callus developed on MS + TDZ 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L and MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L was as high as 1.72%−2.15%. At the dose of 0.5 mg/mL polysaccharides extracted from different callus induced on MS + NAA 2.0 mg/L + TDZ 0.5 mg/L or MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L or MS + BA 0.5 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L, the ABTS radical eliminating percentages were 82.78%, 80.18% and 68.59%, respectively, much higher than that of wild plant.ConclusionA rapid micropropagation system for R. dumulosa has been developed. The combination of TDZ and NAA or BA and NAA can increase the yield of the total polysaccharides. The polysaccharides isolated from callus and whole wild plants had stronger free radicals scavenging activities, indicating that polysaccharides from R. dumulosa are the potential pharmaceutical supplements.     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

Factors Affecting Embryogenic Callus Production and Plant Regeneration in Anther Culture of Bupleurum chinense

Objective To evaluate the influences of the genotypes,anther developmental stages,and cultural conditions on the efficiency of embryogenic callus induction and plant regeneration in the anthers culture of Bupleurum chinense.Methods The different effects such as four genotypes,plant growth regulators,and temperature condition were compared in the experiments.The histological study was performed with the process of the anther culture.Results The highest inducing rate of embryogenic calli were achieved for the genotypes Zhongcaiyihao(ZCYH),Z4,and Z5 at the early-to middle-uninucleate stages,except for genotype ZPM1 at the tetrad stage.Cold pretreatment increased the production of the embryogenic callus,in which 4-day cold pretreatment improved the production of embryogenic callus from 0% to 2.2% and 5.0% for genotypes ZPM1 and ZCYH,respectively.No embryogenic callus was induced in the medium containing less than 0.75 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D) .The highest regeneration rate(34.6%) was obtained in 1/2 MS salts regeneration medium supplemented with 0.1 mg/L 6-benzylmaminopurine(BA) .The low concentration of BA was able to promote the embryogenic callus formation and subsequent plantlet regeneration via somatic embryogenesis.Chromosome counting of regenerated plantlets showed mostly diploid plant(2n = 12) with only one haploid plant(n = 6) .Because of the low rate of microspore embryo formation,we only tracked the process of embryogenesis from the connective tissue,instead of microspore by histological observations.Conclusion This study establishes an efficient system for embryogenic callus induction and plant regeneration system.This is the first report on the haploid plantlet through the anther culture of B.chinense.