雌激素及其受体对低氧性肺血管重建的作用

 目的：探讨雌激素及其受体对低氧性肺血管重建的作用。 方法:采用间断常压低氧法建立大鼠低氧性肺动脉高压模型。将30只雄性SD大鼠随机分成：对照组、雌激素预防组、低氧组、雌激素治疗组、治疗对照组。以右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)；测定右心室肥厚指数［RV/(LV+S)］；图像分析技术测定肺小血管管壁厚度；用放射免疫法测定血清17-β雌二醇浓度。用RT-PCR方法检测肺组织中ERβ mRNA的表达，用免疫组化染色法检测肺小血管壁的ERβ蛋白表达。 结果:①低氧组、治疗对照组大鼠mPAP、RV/(LV+S)、WT%和WA%均高于对照组；雌激素预防组、雌激素治疗组大鼠mPAP、RV/(LV+S)、WT%和WA%均低于低氧组、治疗对照组。②低氧组、治疗对照组大鼠ERβ mRNA表达量和ERβ蛋白表达与正常对照组无差异。经雌激素干预后，雌激素预防组、雌激素治疗组的ERβ mRNA表达和ERβ蛋白表达显著高于低氧组、治疗对照组。 结论:17-β雌二醇能有效降低低氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉压力、阻抑右心室肥厚,对低氧性肺动脉高压血管重建具有一定的预防和治疗作用，其作用可能是通过雌激素受体β实现的。     

CX3CL1/fractalkine在肺动脉高压过程中的表达变化及葛根素的干预作用

目的: 观察趋化因子CX₃CL1/fractalkine(FKN)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型中的变化并探讨葛根素的干预效应。方法: 复制大鼠肺动脉高压模型,随机分为溶剂对照组(C组)、野百合碱造模组(M组)和葛根素干预组(M+P组)。测量并比较各组肺动脉平均压(mPAP)、右心室平均压(mRVP)、颈动脉平均压(mCAP)、右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV＋S)重量比。观察肺细小动脉显微结构变化,测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT),测定血浆可溶性fractalkine(sFKN)浓度,肺细小动脉FKN蛋白,肺组织FKN mRNA的表达。结果: M组mPAP、mRVP、RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT显著高于C组(P<0.01),M+P组RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT较M组显著降低(P<0.01),M组血浆sFKN、肺组织FKN mRNA和肺动脉壁FKN含量显著大于C组(P<0.01),M+P组显著降低(P<0.05),sFKN与PAMT呈正相关(r＝0.719,P<0.01),与RV/(LV+S)呈正相关(r＝0.685,P<0.01)。结论: 葛根素具有抑制FKN表达、肺动脉高压发展和肺血管结构重建的作用。     

三七总皂苷对低氧大鼠肺动脉压和肺组织p38 MAPK表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对低氧大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表达的影响,及预防低氧性肺动脉高压(HPH)的作用和机制。方法:将30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、低氧组和低氧+PNS组。观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP)和右心室/(左心室+室间隔重量)比[RV/(LV+S)],免疫组化法和RT-PCR法分别检测肺小血管壁磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白和肺组织中mRNA的含量。结果:与对照组相比,低氧组大鼠mPAP、RV/(LV+S)明显升高,肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量显著升高(P0.05)。低氧+PNS组mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量明显低于低氧组(P0.05)。结论:PNS具有显著预防HPH的作用,其机制可能与其降低p38 MAPK mRNA的表达有关。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的：探讨慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建时肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）的变化。方法:将18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧组，每组各9只。常压低氧2周后，以右心导管法测定肺动脉平均压（mPAP），检测右心室与左心室加室间隔比值 ［RV/(LV+S)］，观测肺血管显微和超微结构的变化。并且以放免法测定血浆中PAMP含量，以免疫组化法检测肺组织中PAMP表达，以原位杂交检测肺组织中肾上腺髓质素（ADM） mRNA的表达。结果: 低氧组大鼠mPAP及RV/（LV+S）均明显高于对照组（均P<0.01）。光镜下，肺小血管肌化程度明显增强，肺中、小型肌型动脉相对中膜厚度明显增加。电镜下，肺腺泡内动脉内皮细胞增生、肿胀，内弹力层粗细不均，平滑肌细胞肥厚、向合成表型转化。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显高于对照组（P<0.01），肺动脉PAMP表达和ADM mRNA表达均明显增强。结论：低氧后肺动脉PAMP表达和血浆PAMP含量的上调可能参与了慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建的形成。     

Losartan对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响

目的：探讨氯沙坦（losartan）对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响。方法：将二级SD大鼠分为：对照组（A）、低氧组（B）、低氧+losartan组（C），低氧时间为4周。采用透射电镜、免疫组化、原位杂交等方法观察losartan对慢性低氧大鼠肺动脉平均压（mPAP）、右心室重量比（RV/LV+S）、肺细小动脉超微结构、肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ胶原和Ⅰ、Ⅲ前胶原基因的影响。结果：①B组mPAP、RV/LV+S显著高于A组（P<0.01），C组mPAP、RV/LV+S显著低于B组（P<0.01）。②电镜检查显示B组肺动脉胶原纤维较A组明显为多，C组较B组明显为少。③免疫组化、原位杂交显示B组肺细小动脉(直径约100-200μm)Ⅰ型胶原及Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值显著高于A组（均P<0.01），C组肺细小动脉Ⅰ型胶原及Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值明显低于B组（均P<0.01），Ⅲ型胶原及Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组间无明显差异（均P>0.05）。结论：losartan可预防慢性低氧肺动脉高压的形成和肺动脉管壁胶原的生成、沉积。     

N-乙酰半胱氨酸对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压作用机制的基础研究

目的:观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对野百合碱(Monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension,PAH)大鼠右心室重构的影响及其机制。方法:Wistar雄性大鼠适应性喂1周,随机分为正常对照组、MCT组、MCT+NAC组。MCT(60 mg/kg)皮下注射诱导PAH大鼠模型,实验组给予NAC[500 mg/(kg·d)],连续6周,第4周末测定大鼠平均肺动脉压(m PAP)、右心室收缩压(RVSP);分离大鼠左心室+室间隔(LV+S)、右心室(RV)并称重,计算RV/(LV+S)的比值。HE染色观察右心室病理学变化,天狼星红染色观察右心室胶原沉积的变化。RT-PCR和Western blot检测右心室collagenⅠ、collagenⅢ、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)、核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)mRNA和蛋白表达。结果:NAC连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PAH大鼠RVSP及m PAP,减轻RV/(LV+S)的比值,改善右心室心肌细胞的病理变化,降低右心室胶原的沉积,抑制NOX4的表达和NF-κB的活化。结论:NAC能缓解野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠右心室重建,其机制可能是通过抑制NOX4介导的氧化应激损伤,和NF-κB所介导的胶原沉积有关。     

慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸

目的:探讨慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响。方法:采用慢性低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺血管孵育,测定慢性HPH对大鼠肺动脉L-Arg转运,一氧化氮合酶(NOS)活性和NO生成释放的影响。结果:(1)低氧4周大鼠肺动脉平均压(mPAP)比对照组高33.7%(P＜0.01),右心室(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量比值(RV/LV+S)高44.2%(P＜0.01)。(2)低氧对血浆L-Arg含量无明显影响。(3)低氧大鼠离体孵育的肺动脉摄取低浓度(0.2mmol/L)和高浓度(5.0mmol/L)[³H]-L-Arg分别低于对照组15.8%(P＜0.05)和27.2%(P＜0.01)。(4)低氧大鼠肺动脉tNOS、iNOS和cNOS活性较对照组高38.0%、32.8%和53.0%(P＜0.01)。(5)低氧大鼠血浆NO含量低于对照组,与mPAP和RV/LV+S呈负相关(P＜0.01)。结论:慢性HPH时NOS活性代偿性增强,但L-Arg转运受损使血浆NO生成仍减少,说明L-Arg转运是NO生成的重要限速步骤。     

血管紧张素-（1-7）对野百合碱诱导的肺动脉高压和肺血管重构的影响

目的： 探讨血管紧张素-（1-7）［Ang-(1-7)］对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PAH)模型中肺动脉压力和肺小动脉重构的影响。方法: 雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为:对照组、PAH组、PAH +Ang-(1-7)组。PAH 组和PAH+Ang-(1-7)组一次性颈部注射MCT60 mg/kg,24 h后经微泵持续泵入生理盐水或Ang-(1-7)(24 μg·kg-1·h-1)共4周。对照组一次性颈部注射相同体积的生理盐水,24 h后泵入生理盐水。4周后,测定大鼠的右室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),并运用图像分析软件,测定肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT %)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%)。通过放射免疫方法检测肺组织中一氧化氮(NO)浓度。 Western blotting分析肺组织内皮一氧化氮合酶(eNOS)和eNOS Ser1177-phosphorylation 的表达。 结果: PAH组与对照组相比,RVSP、RVHI、WT%、WA%明显升高（P<0.01）,肺组织中NO浓度、eNOS、eNOS Ser1177-phosphorylation 的表达水平显著降低（P<0.01）;Ang-(1-7)干预后RVSP、RVHI、WT%、WA %明显降低（P<0.01）,肺组织NO浓度、eNOS、eNOS Ser1177-phosphorylation 的表达明显升高（P<0.01）。结论: 在MCT诱导的肺动脉高压模型中,Ang-(1-7)可预防肺动脉高压的发生,同时抑制肺血管的重构,其机制可能与Ang-(1-7)升高肺组织NO浓度,上调eNOS的表达以及eNOS Ser1177-phosphorylation 水平有关。     

硫化氢对肺动脉高压大鼠肺血管重塑及其抑制因子的影响

目的 探讨硫化氢（H2S）对肺动脉高压（PH）大鼠肺血管重塑及其抑制因子的影响。方法 30只雄性SD大鼠,通过随机数字表方式分为对照组10只、模型组10只及H2S干预组10只,其中模型组通过野百合碱诱导建立PH模型,H2S干预组在模型组基础上,对大鼠腹腔注射NaHS（56 μmol/kg）,对照组注射等剂量的生理盐水。制作模型4周后,测定各组大鼠血流动力学指标,计算右心室肥厚指数(RVHI),通过HE染色检测肺血管病理形态学变化,应用Western blotting及Real-time PCR检测丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族中p38、c-Jun氨基末端激酶（JNK）蛋白的表达及表达含量。结果 各组血流动力学、RVHI、管壁厚度占血管直径百分比（WT%）、肺血管壁面积占血管截面积百分比（WA%）、p38 mRNA和JNK mRNA差异比较,具有统计学意义（P＜0.05）。其中模型组及H2S干预组平均体循环动脉压(MSAP)、平均肺动脉压(MPAP)、RVHI、WT%、WA%、p38mRNA和JNK mRNA表达水平均显著高于对照组（P＜0.05）,而H2S干预组MSAP、MPAP、RVHI、WT%、WA%、p38mRNA和JNK mRNA水平均显著低于模型组（P＜0.05）。肺动脉形态图显示,与对照组相比,模型组及H2S干预组的血管管壁厚度均增加,管腔变狭窄,但H2S干预组管厚度及管腔狭窄度均较模型组明显减轻;Western blotting显示,模型组及H2S干预组p38、JNK蛋白表达量均高于对照组,而H2S干预组p38、JNK蛋白表达量均低于模型组。结论 H2S可改善PH大鼠血流动力学、右心室肥厚指数;减轻肺动脉血管管壁增厚及管腔狭窄,抑制大鼠肺血管重构,其作用机制可能与H2S下调MAPK信号通路上JNK及p38蛋白的表达有关。     

高碳酸血症通过赖氨酰氧化酶依赖的胶原蛋白交联影响大鼠缺氧性肺动脉高压

目的:通过研究缺氧和/或高碳酸血症时赖氨酰氧化酶(LOX)以及细胞外基质胶原蛋白的交联变化,探讨高碳酸血症对缺氧性肺动脉高压的影响机制。方法:SD大鼠随机均分为4组,分别为常氧对照组、缺氧组、高碳酸血症组以及缺氧+高碳酸血症组。比色法测定胶原蛋白含量,荧光光谱法分析LOX酶活性,免疫组织化学和Western blot法检测肺动脉LOX蛋白含量,实时荧光定量PCR检测肺动脉LOX的mRNA水平。结果:缺氧组大鼠平均肺动脉压(m PAP)、右心室/(左心室+室间隔)重量比值[RV/(LV+S)]及血管壁面积(WA)/血管总面积(TA)均明显高于常氧对照组;高碳酸血症组与常氧对照组的m PAP、RV/(LV+S)差异无统计学显著性;缺氧+高碳酸血症组大鼠的m PAP及RV/(LV+S)显著低于单纯缺氧组。缺氧组大鼠肺组织的胶原交联程度则明显高于常氧组及高碳酸血症组;高碳酸血症组大鼠肺组织的胶原交联程度与常氧组比较无显著差异;缺氧+高碳酸血症组大鼠肺组织的胶原交联程度显著低于缺氧组。缺氧组大鼠肺动脉LOX的mRNA、蛋白表达量及其酶活性均高于常氧组(P0.01);缺氧+高碳酸血症组大鼠肺动脉LOX mRNA、蛋白表达以及酶活性均明显低于缺氧组(P0.01)。结论:缺氧能诱导肺动脉LOX高表达,通过促进胶原合成及交联,参与肺动脉高压的形成。高碳酸血症通过抑制缺氧诱导的LOX表达和胶原交联,延缓缺氧性肺动脉高压的进展。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺内5-HT_(1B)受体的分布和表达变化

目的:观察低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠体内5-羟色胺(5-HT)水平及其肺内5-羟色胺1B(5-HT1B)受体的分布和表达变化,探讨低氧性肺动脉高压的形成机制。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(control)、低氧3周组、低氧4周组和低氧5周组。除正常组外,其余3组大鼠分别在低氧环境中饲养3周、4周和5周。测定各组大鼠的平均肺动脉压力(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室肥厚度[RV/(LV+S)%]、血浆和肺组织中5-HT含量。应用免疫组织化学法观察大鼠肺组织中5-HT1B受体的分布和表达,Western blotting法测定大鼠肺组织中5-HT1B受体的蛋白含量。结果:和正常组相比,低氧3周组大鼠的mPAP、RVSP和右心室肥厚度均显著升高(均P0.05),并且随着低氧时间的延长而持续升高(均P0.05)。低氧大鼠血浆和肺组织中5-HT的含量均显著高于正常组大鼠(均P0.05),并随着低氧时间的延长而持续升高(均P0.05)。免疫组织化学结果显示:5-HT1B受体主要分布在正常大鼠肺动脉的内膜层,而平滑肌层中仅有少量表达;和正常组相比,低氧3周组大鼠肺动脉平滑肌层中5-HT1B受体的表达显著增多;随着低氧时间的延长,大鼠肺动脉平滑肌层中5-HT1B受体表达持续增多。Western blotting结果表明,大鼠肺组织中5-HT1B受体的蛋白含量变化和免疫组织化学结果相一致。结论:低氧性肺动脉高压大鼠体内5-HT水平显著升高,其肺动脉中5-HT1B受体呈过度表达,这可能是低氧性肺动脉高压形成的分子机制之一。     

Ang-(1-7)与肺高压状态下肺血管平滑肌细胞的增生

背景：Ang-(1-7)虽然具有抗血管平滑肌细胞增殖作用,但在不同的血管床中其作用可能存在差异。直接给予外源性Ang-(1-7)是否可抑制肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖尚不清楚。 目的：探讨Ang-(1-7)对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞增殖的影响。 方法：雄性SD大鼠颈部一次性注射60 mg/kg野百合碱制备肺动脉高压模型。24 h后,分别经微泵持续泵入Ang-(1-7)(治疗组)或生理盐水(模型组),并设立未造模的对照组。给药2,4周,测定大鼠的右心室收缩压、心室质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比及管壁面积占血管总面积的百分比。免疫组织化学方法检测肺血管平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白及增殖细胞核抗原的表达。 结果与结论：野百合碱诱导2周,与对照组比较,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量无明显变化,肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低;野百合碱诱导4周,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率均显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低。而治疗组上述指标与对照组比较差异无显著性意义   (P > 0.05)。说明在野百合碱诱导的肺动脉高压模型中,在肺动脉压增高之前已有肺血管形态学的变化,Ang-(1-7)可通过减轻肺血管平滑肌细胞的增生抑制大鼠肺动脉压的升高。     

红景天苷通过抑制氧化应激防治大鼠低氧性肺动脉高压

目的:观察低氧性肺动脉高压大鼠肺组织及血清中氧化/抗氧化相关指标的变化,研究红景天苷(Sal)能否通过恢复氧化/抗氧化系统平衡防治低氧性肺动脉高压。方法:将32只SD大鼠随机分为4组:常氧(normoxia,N)组、低氧4周(hypoxia for 4 weeks,H_4)组、Sal低剂量(hypoxia for 4 weeks and treatment with Sal at 16mg/kg,H_4S16)组和Sal高剂量(hypoxia for 4 weeks and treatment with Sal at 32 mg/kg,H_4S32)组。造模完成后测定平均肺动脉压(m PAP)、右心室/(左心室+室间隔)[RV/(LV+S)]和血管壁面积/血管总面积(WA/TA);测量肺组织和血清中丙二醛(MDA)和8-异构前列腺素F_(2α)(8-iso-PGF_(2α))含量,并测量血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及肺组织中NADPH氧化酶(NOX4)和SOD1的相对表达量。结果:与N组相比,H_4组的NOX4相对表达量及MDA和8-iso-PGF_(2α)含量均显著升高(P0.05);而与H4组相比,Sal低、高剂量组除m PAP、RV/(LV+S)和WA/TA明显减低外,NOX4的相对表达量及MDA和8-iso-PGF_(2α)含量亦明显减低(P0.05)。与N组相比,H_4组的SOD1相对表达量和SOD活性显著下降,而Sal低、高剂量组的SOD1相对表达量和SOD活性均显著升高并呈剂量依赖性。结论:红景天苷可能通过减轻低氧引起的肺组织氧化应激损伤、恢复氧化/抗氧化系统平衡而起到改善肺动脉高压的作用。     

肾上腺髓质素m RNA在慢性缺氧大鼠右心室中的表达

目的:探讨肾上腺髓质素(AM)在慢性低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法:16只大鼠随机分为低氧组和对照组,间断常压低氧14d复制肺动脉高压模型,静脉右心导管测定右室收缩压(RVSP)的变化,分离心室检测右室/(左室+室间隔)(RV/LV+SP)比值,原位杂交法检测AMmRNA在右心室中的表达。结果:低氧组大鼠右室压为(63.63±3.42)mmHg,显著高于对照组的(34.13±3.40)mmHg(P<0.01)。低氧组大鼠(RV/LV+SP)比值为0.439±0.039,显著高于对照组的0.23±0.025(P<0.01)。AMmRNA在对照组大鼠的右室心肌细胞也有少量表达,低氧组大鼠其表达显著多于对照组。图像分析表明,低氧组的平均吸光度、平均表达面积分别为0.1061±0.0188,0.1421±0.0165,均显著高于对照组的0.0872±0.0171,0.0967±0.0135。结论:低氧时右心室AMmRNA表达增加,提示可能在肺动脉高压的发病中起保护作用。     

L-精氨酸对缺氧性肺动脉高压大鼠内皮素释放的影响

目的：探讨Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）对缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）大鼠血浆内皮素－１（ＥＴ－１）释放的影响。方法：将Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只分为：对照组,缺氧组,缺氧＋Ｎ＾ω－硝基－Ｌ－精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）组和缺氧Ｌ－Ａｒｇ组。结果：缺氧组的肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,缺氧组＋Ｌ－Ａｒｇ组的ｍＰＡＰ显著低于缺氧组（Ｐ〈０．０５）及缺氧＋Ｌ－ＮＡＭＥ组（Ｐ〈０．０１）,缺     

肾上腺髓质素对高肺血流大鼠肺组织氧化应激的调节作用

目的:研究肾上腺髓质素(ADM)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺组织氧化应激的调节作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为对照组、分流组和分流+ADM组。对后2组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术。8周后,对分流+ADM组大鼠皮下埋微量渗透泵持续予ADM 1.5μg·kg~(-1)·h~(-1)。继续饲养2周后,右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室/(左心室+室间隔)重量比值,检测肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT),比色法测定肺组织匀浆丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Western blot法检测肺组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)的表达。结果:与对照组相比,分流组大鼠的mPAP、右心室肥厚程度以及肺中、小肌型动脉RMT均明显增加,肺组织MDA含量明显升高,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性均明显降低,肺组织NOX4表达明显升高。ADM使肺动脉压力明显回降,右心室肥厚程度减轻,肺血管结构改变缓解,肺组织MDA含量明显下降,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性明显升高,肺组织NOX4表达明显降低。结论:ADM能够抑制大鼠高肺血流性肺动脉高压和肺血管结构重构形成中的氧化应激反应,作用机制可能与其下调肺组织NOX4表达以及增强抗氧化活性有关。     

Regulatory B cells protect against chronic hypoxia-induced pulmonary hypertension by modulating the Tfh/Tfr immune balance

Hypoxia-induced pulmonary hypertension (HPH) is a progressive and lethal disease characterized by the uncontrolled proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) and obstructive vascular remodelling. Previous research demonstrated that Breg cells were involved in the pathogenesis of pulmonary hypertension. This work aimed to evaluate the regulatory function of Breg cells in HPH. HPH mice model were established and induced by exposing to chronic hypoxia for 21 days. Mice with HPH were treated with anti-CD22 or adoptive transferred of Breg cells. The coculture systems of Breg cells with CD4⁺ T cells and Breg cells with PASMCs in vitro were constructed. Lung pathology was evaluated by HE staining and immunofluorescence staining. The frequencies of Breg cells, Tfh cells and Tfr cells were analysed by flow cytometry. Serum IL-21 and IL-10 levels were determined by ELISA. Protein levels of Blimp-1, Bcl-6 and CTLA-4 were determined by western blot and RT-PCR. Proliferation rate of PASMCs was measured by EdU. Compared to the control group, mean PAP, RV/(LV + S) ratio, WA% and WT% were significantly increased in the model group. Anti-CD22 exacerbated abnormal hemodynamics, pulmonary vascular remodelling and right ventricle hypertrophy in HPH, which ameliorated by adoptive transfer of Breg cells into HPH mice. The proportion of Breg cells on day 7 induced by chronic hypoxia was significantly higher than control group, which significantly decreased on day 14 and day 21. The percentage of Tfh cells was significantly increased, while percentage of Tfr cells was significantly decreased in HPH than those of control group. Anti-CD22 treatment increased the percentage of Tfh cells and decreased the percentage of Tfr cells in HPH mice. However, Breg cells restrained the Tfh cells differentiation and expanded Tfr cells differentiation in vivo and in vitro. Additionally, Breg cells inhibited the proliferation of PASMCs under hypoxic condition in vitro. Collectively, these findings suggested that Breg cells may be a new therapeutic target for modulating the Tfh/Tfr immune balance in HPH.