制何首乌对大鼠肝损伤的实验研究

目的 研究不同剂量的野生制何首乌对大鼠的肝损伤.方法本实验给药组每天按不同剂量(分别相当于成人每日12 g临床用量的20,50,100,200 倍)灌胃大鼠一次,前3 个月为给药期, 第4个月为停药恢复期, 分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH - ST)检测及进行大鼠肝脏组织病理学检测.结果与对照组相比, 大剂量和较大剂量给药组对大鼠肝脏转氨酶AST在3个月时有一定的影响(P<0.05),MDA有显著性升高(P<0.05).肝脏组织病理切片显示光镜下大剂量给药组可见散在炎细胞浸润, 肝血窦充血, 枯否氏细胞增生活跃并可见吞噬色素颗粒.结论制何首乌大剂量长期灌胃对大鼠肝脏有轻度的肝损害,常用剂量各阶段应用则未见毒副作用.停药后可恢复正常.     

何首乌、制何首乌对大鼠免疫球蛋白影响的实验研究

[目的]研究何首乌、制何首乌对SD大鼠免疫球蛋白的影响.[方法]将大鼠分为7组,每日灌胃主药30g/kg,连续给药90d,测定大鼠血清中免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgA的含量和胸腺质量.[结果]给药组与对照组比较,给药60d时大鼠血清中IgM含量,何首乌组、何首乌配大剂量茯苓组、何首乌配小剂量茯苓组、制首乌组、制何首乌配小剂量茯苓组均呈显著性升高(P<0.05).给药90 d时何首乌配大剂量茯苓组、何首乌配小剂量茯苓组、制何首乌配大剂量茯苓组呈显著性升高(P<0.05).lgG含量仅给药90 d的何首乌配小剂量茯苓组降低,以上各组均具有统计学意义.[结论]给药60d、90d何首乌、制何首乌各给药组可以显著增加大鼠血清中IgM的含量,有可能对肝脏的损伤造成有一定意义的影响.     

制何首乌致肝损害的实验研究

目的:观察制何首乌对大鼠的长期毒性作用。方法:每天按不同剂量40,20,10g/kg(分别相当于成人每日临床用量的100、50、25倍)灌服大鼠1次,连续14周(6周时处死1/3动物,12周时1/3动物停药进行恢复,1/3继续给药2周),检测大鼠血液生化学指标及凝血时间,称量脏器重量并计算大鼠脏器指数。结果:与对照组相比,给药组对大鼠肝脏转氨酶AST,ALT,ALP在不同阶段有一定的影响(P<0.05),TBIL、CHO等其他各项生化指标检测结果给药组与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);凝血时间对照组与给药组比无显著性差异;个别脏器的脏器指数与对照组比有所变化(P<0.05)。结论:制何首乌对大鼠肝脏有一定的毒副作用,但属可逆性损伤。     

何首乌、制何首乌与茯苓配伍对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的:研究何首乌、制何首乌以及分别配伍不同剂量茯苓对大鼠肝脏微粒体细胞色素P450酶(CYP450)的影响。方法:将大鼠分为7组,每日灌胃主药30g·kg-1,连续给药90d,测定大鼠CYP450的含量。结果:给药组与对照组比较,何首乌A组、何首乌B量组对大鼠肝微粒体CYP450有显著性升高作用(P<0.05);何首乌C组对其有升高作用,但不具统计学意义。制何首乌A、B、C各组对大鼠肝微粒体CYP450均无显著性影响。结论:何首乌、何首乌配伍大剂量茯苓能够增加大鼠肝微粒体CYP450含量,制何首乌各给药组对其影响不显著。     

桑胶颗粒的长期毒性研究

目的:观察桑胶颗粒对大鼠所产生的长期毒性反应.方法:SD大鼠分别经口灌胃77.0g生药/kg、38.5g生药/kg、19.3g生药/kg3个剂量的桑胶颗粒连续6个月,观察SD大鼠在给药中期、停药次日、恢复期的一般情况、体重、血液学、血液生化学、脏器系数及病理形态学和组织学的变化.结果:桑胶颗粒3个剂量组雄性大鼠给药、恢复期间体重增长慢于对照组,高剂量组大鼠给药后表现轻度流涎,个别血液生化学指标(AST、CK、K+)轻微下降,无其它明显毒副反应出现.结论:桑胶颗粒长期给药无明显毒性,安全剂量大于77.0g生药/kg·d-1.     

何首乌中二苯乙烯苷对大鼠肝酶及蛋白的影响

目的:观察何首乌中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷(二苯乙烯苷)对于大鼠肝脏酶及蛋白等生化指标的影响,以期探求何首乌"肝损伤"的物质基础。方法:大鼠分别按剂量150、300、600mg/kg灌胃给药,连续90d,恢复15天;分别于第60天、90天、105天时,全自动生化分析仪检测大鼠血清中肝酶及蛋白的含量。结果:与空白组比较,给药第60天,各剂量组球蛋白(GLB)显著升高,白球比(A/G)显著降低;给药第90天,中剂量与大剂量组的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)显著升高,中剂量组白蛋白(ALB)显著降低;停药第15天,乳酸脱氢酶(LDH)显著降低,其他指标无统计学意义。结论:二苯乙烯苷大剂量长期使用时,会对肝脏造成一定的损伤,停药后可恢复肝功正常。     

何首乌不同成分与肝细胞凋亡的相关性研究

目的:研究何首乌不同成分对大鼠肝脏细胞凋亡的影响。方法:将何首乌中不同成分提取物大黄素、大黄酸、大黄酚,以及制首乌分别按不同剂量给予大鼠每天灌胃一次,连续3个月,检测大鼠肝脏细胞凋亡情况,用AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒给予凋亡细胞染色,利用荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。结果:大鼠肝脏细胞凋亡的测定结果制首乌组及大黄酚组与空白对照组比较有显著差异(P<0.05)。     

何首乌中鞣质与二苯乙烯苷不同配比对大鼠肝功能指标的影响

目的研究何首乌提取物鞣质与二苯乙烯苷不同配比对大鼠肝脏生化指标的影响,探讨何首乌肝毒性的可能物质基础。方法 SD大鼠120只,随机分为4组,每组30只。空白对照组（A组）给予1ml/100g的蒸馏水,B组给予鞣质4.4g.ml-1.kg-1,C组给予鞣质（4.4g/kg）与二苯乙烯苷（1.0g/kg）1∶1配比的药物,D组给予鞣质（4.4g/kg）与二苯乙烯苷（1.0g/kg）2∶1配比的药物。各组连续给药90d,恢复15d。分别于给药60d、90d及恢复期15d时颈总动脉取血,生化法检测肝功能相关指标。结果与A组比较,给药60d,各给药组ALT升高,差异具有统计学意义（P〈0.01）,B组CHE升高及TBIL降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）,B组和C组TP升高,差异具有统计学意义（P〈0.01）。与A组比较,给药90d,B组CHE、TP升高和LDH降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）,C组和D组CHE、LDH、ALB降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）。与A组比较,恢复期15d,B组TP和ALB升高、C组CHE和ALP降低、D组CHE和LDH降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论长期大剂量灌胃何首乌中提取的鞣质与二苯乙烯苷不同配比、对大鼠肝脏有损害,但鞣质对肝脏的损害在停药后可以恢复。     

"有故无殒"理论指导下基于肝细胞Bax/Bcl-2凋亡通路的何首乌"毒-证"机制研究

目的:在"有故无殒"理论的指导下通过研究何首乌对肝细胞凋亡及Bax/Bcl-2通路的影响以探讨何首乌肝毒性是否与中医证候存在关联性。方法:大鼠注射氢化可的松,建立大鼠肾阳虚模型和肾阴虚模型,分为空白对照组、肾阳虚模型组、肾阳虚制首乌6 g/kg、12 g/kg、24 g/kg组、肾阳虚生首乌6 g/kg组、肾阴虚模型组、肾阴虚制首乌6 g/kg、12 g/kg、24 g/kg剂量组、肾阴虚生首乌6 g/kg组。给药3个月后,检测血清AST、ALT、ALP的变化;采用TUNEL法测定肝组织细胞凋亡指数;实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Bcl-2和Bax mRNA的表达情况。结果:与模型组比较,制首乌12 g/kg的肾阴虚和肾阳虚组体现出了明显差异,其中肾阳虚证候制首乌组大鼠血清ALT、肝细胞凋亡指数以及Bax/Bcl-2比值均显著升高,而肾阴虚证制首乌组大鼠无明显升高。肾阴虚组与肾阳虚组相比较,制首乌12 g/kg组和制首乌24 g/kg组肾阳虚大鼠的血清ALT、肝细胞凋亡指数以及Bax/Bcl-2比值升高均明显高于肾阴虚证。结论:何首乌肝毒性与中医不同证候存在一定关联性,对证使用时较为安全,而药不对证时,导致肝损伤的风险增高。     

何首乌配伍黑豆对大鼠肝脏的影响

目的研究何首乌及其配伍不同剂量黑豆对大鼠肝脏的影响。方法将大鼠分为4组,A组(空白)、B组(何首乌2g/ml)、C组(何首乌2g/ml配伍低剂量黑豆0.2g/ml)、D组(何首乌2g/ml配伍高剂量黑豆0.4g/ml)。雌雄各半,每日灌胃主药20g/kg,连续给药30d。测定TG、TP、ALB、PAB、STB、TBA、ALT、AST、ALP、GGT、LDH等肝功能生化指标,并进行肝脏病理切片检查。结果 PAB值B组与A组比较极显著升高(P<0.01),D组与B组比较显著降低(P<0.05);STB值B组与A组比较极显著升高(P<0.01),C组与B组比较极显著降低(P<0.01),D组与B组比较显著降低(P<0.05);ALT值C组与B组比较极显著降低(P<0.01);AST值B组与A组比较显著降低(P<0.05);ALP值B组与A组比较极显著升高(P<0.01);GGT值D组与B组比较显著降低(P<0.05);LDH值B组与A组比较显著降低(P<0.05)。各组肝脏病理切片光镜下未见异常。结论何首乌可导致大鼠出现肝内胆汁淤积型药物性肝损伤(主要影响胆红素、碱性磷酸酶等的代谢或排泄),而配伍黑豆对其有一定的减轻作用。     

基于内毒素特异质模型的生首乌与制首乌肝毒性比较研究

目的基于内毒素特异质模型,比较何首乌炮制前后对大鼠肝脏损伤作用的差异。方法采用无毒剂量的脂多糖(LPS,尾iv 2.8 mg/kg)制备内毒素特异质模型大鼠,模型大鼠和正常大鼠均ig给予生首乌和制首乌50%乙醇提取物(生首乌剂量分别为生药1.08和2.16 g/kg:制首乌剂量分别为生药1.08、2.16、4.32、8.64、17.28 g/kg),各给药1次,检测大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,HE染色观察肝脏病理学改变。结果在正常SD大鼠上,生首乌及制首乌单次给药8.64g/kg以下,未见有明显肝损伤作用:在内毒素特异质模型上,生首乌1.08 g/kg剂量(相当于生首乌6 g/d临床剂量的2倍等效剂量)可造成实验大鼠肝功能损伤,制首乌8.64g/kg剂量(相当于制首乌12g/d临床剂量的8倍等效剂量)对实验大鼠肝功能造成损伤。炮制后首乌中二苯乙烯苷的量下降明显。结论在内毒素特异质模型上,生首乌在接近临床等效剂量的情况下即可表现出肝损伤作用,而制首乌表现出肝损伤的剂量扩大4倍,提示炮制可降低何首乌的特异质肝毒性。     

栀子厚朴汤的毒性研究

目的:研究栀子厚朴汤对SD大鼠灌胃给药的毒性情况。方法:急性毒性试验:采用SD大鼠1天2次灌胃不同剂量的栀子厚朴汤,观察动物的一般状况、体重、摄食量等情况,14天后取血检测血液学、血液生化学指标,并进行系统尸解;长期毒性试验:采用SD大鼠经口灌胃不同剂量的栀子厚朴汤1个月,停药恢复15天,观察大鼠一般状况、体重、摄食量等情况,于给药结束及恢复期结束取血检测血液学、血液生化学指标,并进行脏器重量测定、系统尸解及组织病理学检查。结果:急性毒性试验显示112 g生药/kg剂量可引起大鼠死亡,肾脏、肝脏及胃肠道组织病理学损害;长期毒性试验显示各剂量组大鼠体重降低、RET%升高、RBC降低,TBIL升高,尸解肾脏呈墨绿色,肝脏呈棕黑色;肝脏、肾脏及脾脏的绝对重量与脏器系数明显升高,肝脏、肾脏、脾脏、结肠、盲肠及肠系膜淋巴结出现病理组织学损害。停药恢复15天,上述毒性反应未见明显减轻。结论:SD大鼠1天2次灌胃栀子厚朴汤的致死剂量为112 g生药/kg,最大耐受量为56 g生药/kg;SD大鼠连续1个月灌胃栀子厚朴汤的无毒性作用剂量(NOAEL)低于8.5g生药/kg。栀子厚朴汤可能存在较大的安全性风险。     

制何首乌对大鼠肝脏P450酶5种亚型mRNA表达的影响

考察制何首乌水提物作用后大鼠肝脏P450酶5种亚型的mRNA表达变化。SD大鼠随机分为正常对照组、制何首乌高、低剂量组(5.40,1.08 g·kg~(-1)),连续灌胃给药7 d。给药结束后,检测大鼠血清生化指标,并采用实时荧光定量PCR测定各实验组大鼠肝脏P450酶5种亚型mRNA表达。实验结果显示AST在高、低剂量组都显著下降;ALT在低剂量组显著降低,在高剂量组显著升高。高、低剂量组的大鼠肝组织P450酶5种亚型mRNA的表达均下调,且下调程度与给药剂量成一定的剂量性依赖。特别是高剂量制何首乌水提物能够显著抑制大鼠的CYP1A2和CYP2E1的mRNA表达。该研究发现大剂量制何首乌水提物具有肝毒性,且随着剂量增加其肝损伤程度增加。其中制何首乌水提物5.40 g·kg~(-1)对大鼠肝CYP1A2和CYP2 E1的mRNA的表达有明显抑制作用。     

关格通颗粒对大鼠的长期毒性试验

目的:考察对大鼠连续3个月给予关格通颗粒所产生毒性反应及程度。方法:88只SD大鼠随机分为4组,低、中、高剂量组分别给予关格通颗粒43·2g生药/kg、74·8g生药/kg、129·2g生药/kg,对照组给予相同体积的蒸馏水,各组连续灌胃给药3个月,进行血液学、血液生化、尿常规、脏器重量系数、组织病理学检查及常规观察。结果:关格通颗粒各剂量组的部分生化指标与对照组比较有显著性差异,但停药后恢复正常;各组大鼠的尿常规检验未见差异;给药组的部分脏器系数高于对照组,但停药后恢复正常;各脏器的病理组织学检查未见药物引起的病理损伤。结论:关格通颗粒大剂量129·2g生药/kg、中剂量74·8g生药/kg、小剂量43·2g生药/kg连续灌胃给药3个月对大鼠无明显毒性作用。     

基于内毒素特异质模型的何首乌毒性与炮制工艺研究

目的基于内毒素特异质肝损伤模型,考察不同炮制程度的何首乌对大鼠肝脏的损伤作用,以优选何首乌最为安全的炮制工艺。方法采用无毒剂量的脂多糖(LPS,尾静脉注射2.8 mg/kg)制备内毒素特异质模型大鼠,模型大鼠和正常大鼠均灌胃给予12.96 g/kg不同炮制程度(0、8、16、24、32 h)的何首乌50%乙醇提取物,各给药1次,检测大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及HE染色观察肝脏病理学改变。结果在灌胃给予不同炮制程度的何首乌50%乙醇提取物后,正常SD大鼠上,未见明显肝损伤作用,炮制24 h,32 h组ALT,AST值低于正常组;在内毒素特异质模型上,生首乌的ALT,AST值显著升高,炮制8 h,炮制16 h的ALT,AST值均高于正常组。结论何首乌以常压炮制32 h最为安全。     

肾康汤对大鼠长期毒性试验研究

目的:考察肾康汤长期应用的安全性。方法:将SD大鼠随机分成4组,即对照组、肾康汤高剂量组6.9g/kg(30倍于临床用药)、中剂量组3.45g/kg(15倍于临床用药),低剂量组1.15g/kg(5倍于临床用药),每组按剂量连续灌胃3个月,每天观察给药后大鼠的饮食、活动、体质量、摄食量。于给药3个月和停药2周(恢复期)后处死大鼠进行血液学、血清生化学指标检测,并进行剖检和组织病理学检查。结果:肾康汤高中低剂量组大鼠一般情况、血液学、血清生化学指标及脏器系数与对照组比较无明显差异(P≤0.05),也未见异常组织学病理改变,肾康汤长期服用不会产生积蓄性中毒反应。结论:肾康汤在临床剂量下服用安全可靠。     

抗疏健骨颗粒的长期毒性实验研究

目的:观察抗疏健骨颗粒长期应用的安全性,为临床用药提供实验依据。方法:将SD大鼠160只随机分为高剂量组(40 g/kg)、中剂量组(20 g/kg)、低剂量组(10 g/kg)及空白对照组,连续灌胃给药6个月。分别于实验中期(给药3个月)、实验结束(给药6个月)及停药后4周恢复期测量大鼠体质量,计算脏器系数,测定血液学和血液生化学指标,作组织病理学检查。结果:抗疏健骨颗粒高、中、低剂量组大鼠的外观体征,行为活动,体质量,脏器系数,血液学和血液生化学指标与空白对照组比较,均无统计学差异(P0.05);病理检查未见与药物毒性相关的明显病变,停药后也未见药物延迟性毒性反应。结论:抗疏健骨颗粒在规定剂量下口服是安全的,无明显毒性反应。     

通痹舒筋丸的毒理学安全性研究

目的:探讨通痹舒筋丸的安全性,为通痹舒筋丸的安全用药提供参考。方法:通过大鼠经口给予通痹舒筋丸6个月毒性试验,对试验动物进行大体解剖学观察和脏器病理切片观察,并测血液学及血液生化学指标。结果:1.大体观察结果显示,动物各脏器肉眼观察未见外形异常,表面未见充血、瘀血、肿胀、渗出、粘连等变化,胸腔、腹腔、盆腔等未见渗液、充血、出血、粘连等变化。2.病理切片显微检查结果显示,(1)连续给药6个月,对照组动物肝小叶结构正常;高剂量组可见肝细胞轻度肿胀,伴轻度炎症反应;中剂量组和低剂量组未见异常。恢复期高剂量组均未见肝细胞损伤和炎症反应。(2)连续给药6个月,对照组肾脏结构正常;高剂量组部分动物肾皮质近曲小管上皮细胞轻度水样变性,雌雄动物间无明显差异;中剂量组和低剂量组未见异常。恢复期高剂量组的肾脏均未见损伤。(3)连续给药6个月,高剂量组的个别动物肺间质可见轻度炎症,与对照组相比未见明显差异,属动物偶发的组织形态学改变,与药物毒性无关。(4)连续给药6个月,恢复期对照组、高剂量组的其余脏器未见与受试药毒性有关的病变。3.实验室检查结果显示:(1)连续给药6个月,高剂量组有2只大鼠WBC偏高,无异常高值,PLT总体明显高于正常值高限;停药恢复2周后高剂量组2只大鼠WBC趋于正常;PLT总体仍明显高于正常值高限,但所有大鼠血液生化检测值与对照组检测值无明显异常。(2)连续给药6个月,高剂量组有1只大鼠BUN明显高于正常值高限;停药恢复2周后所有大鼠血液生化检测值与对照组检测值无明显异常。结论:高剂量组(12.0g生药/kg/d)给药量相当于成人(60kg体重)临床用药量(0.1667g生药/kg/d)的71.98倍;中剂量组(7.2g生药/kg/d)给药量相当于成人临床用药量的43.19倍;低剂量组(4.2g生药/kg/d)给药量相当于成人临床用药量的25.19倍。通痹舒筋丸的临床使用剂量无明显毒副作用,具有可靠的安全性。     

阿魏胶囊长期毒性试验对大鼠骨髓功能和病理学的影响

目的:观察阿魏胶囊长期毒性试验对大鼠骨髓功能和病理学的影响。方法:SD大鼠200只,随机分为4组(对照组、阿魏胶囊低、中、高剂量组),每组各50只。给药组阿魏胶囊10.0g、68.5g、111.2g生药/kg剂量灌胃;对照组给予等体积0.5%CMC-Na。于给药1月、给药3月、给药6月和停药后1月(恢复期)进行骨髓病理学检查,给药3个月检测发现阿魏胶囊高剂量组大鼠红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)均低于对照组(P<0.05),在给药6月和恢复期结束时,对大鼠胸骨骨髓进行涂片分析。结果:给药1月、3月、6月及恢复期结束时,骨髓功能和病理学检查均未见明显异常。结论:阿魏胶囊长期给药对大鼠骨髓功能及病理学无不良影响。     

双乌镇痛胶囊对大鼠脏器系数的影响

目的观察双乌镇痛胶囊对大鼠脏器系数的影响。方法取SD大鼠80只,按体质量分层随机分为4组,即正常对照组,双乌镇痛胶囊大、中、小剂量组,每组各20只。双乌镇痛胶囊大、中、小剂量(剂量分别为3.0、0.9、0.24 g/kg体质量,分别相当于生药17.4、5.2、1.4 g/kg体质量)组予相应药液10 m L/kg体质量灌胃给药,正常对照组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃给药,均每日1次,每周给药6 d,连续3个月。给药3个月后、停药2周后各组大鼠分期处死,观察各脏器系数变化。结果给药3个月后、停药2周后双乌镇痛胶囊大、中、小剂量组大鼠各脏器系数与正常对照组比较差异均无统计学意义(P0.05),组织学检查也均未发现异常。结论双乌镇痛胶囊对大鼠未见明显蓄积毒性,在临床剂量下应用是安全的。