大肠癌及癌旁内分泌细胞的表达意义

目的探讨内分泌细胞（ＥＣ）在大肠癌及癌旁的表达意义．方法应用ＬＳＡＢ免疫组化法，对１１７例大肠癌及８５例癌旁粘膜中嗜铬蛋白Ａ（ＣＧＡ）及几种激素进行检测，１３例大肠癌行电镜观察．结果ＥＣ阳性大肠癌４６例（３９３％），检测到一种以上激素６９２％（２７／３９），癌旁粘膜ＥＣ数高于正常肠粘膜．电镜观察８例有含内分泌颗粒的癌性ＥＣ．在中低分化癌中ＥＣ（＋＋）的表达（２５５％）高于高分化癌（６９％）（χ２＝７５４，Ｐ＜００５），含有ＥＣ的大肠癌淋巴结转移的发生率（６８０％）高于不含ＥＣ者（４３７％）（χ２＝６２３，Ｐ＜００５），且预后不良；５ＨＴ，βＨＣＧ，Ｇｌｕ，Ｇａｓ阳性癌分化及预后较差（Ｐ＞００５）．结论含ＥＣ的大肠癌具有更恶性的生物学行为，可能与ＥＣ中某些激素，通过旁分泌等途径促进肿瘤的生长转移有关，癌旁ＥＣ增生与周围肿瘤生长有关．     

胃癌胎盘型GST－π表达的意义

目的研究胃癌组织新标志酶ＧＳＴ＿π的表达和它的临床意义。方法胃癌组织６２例用抗ＧＳＴ＿π抗体，按ＡＢＣ法进行免疫组织化学检测癌组织中ＧＳＴ＿π活性，并与正常胃粘膜，异型增生及肠上皮化生进行比较。结果胃癌组织６２例中ＧＳＴ＿π阳性率８７１％；２７例正常胃粘膜ＧＳＴ＿π阳性率只１１１％（Ｐ＜０００１）；异型增生和肠上皮化生各２３例，其ＧＳＴ＿π阳性率分别为８２６％和８６９％，与正常胃粘膜比较Ｐ＜０００１。结论ＧＳＴ＿π在胃癌组织中的胎儿型表达为研究消化道肿瘤早期诊断和发病机理提供了新的酶学标志。具有中等度异型增生和不全结肠型上皮化生的慢性萎缩性胃炎阳性率也较高，可列为胃切除手术的相对适应证。     

大肠癌EGF受体和增殖细胞核抗原表达的预后意义

目的研究大肠癌表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达和评价对大肠癌预后的意义。方法应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ对有随访资料的大肠癌的表达。结果正常大肠粘膜未发现ＥＧＦＲ阳性表达，而大肠癌有较高表达（７７０％）。ＰＣＮＡ阳性表达中，大肠癌（４６４±２６５％）明显高于正常粘膜（１５１±５４％，Ｐ＜００５）。ＥＧＦＲ表达与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜００５）。ＰＣＮＡ表达与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜００５）。大肠癌４年生存率ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ表达＞６５％组均明显低于＜２５％组（Ｐ＜００５），ＥＧＦＲ＿ＬＩ和ＰＣＮＡ＿ＬＩ与生存期均有明显负相关。结论ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ表达与大肠癌的进展程度有关，对大肠癌预后的评估有重要价值。     

大肠癌EGF受体表达对细胞增殖的影响

目的研究ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）在大肠癌中表达的意义，并探讨其对细胞增殖的影响．方法用免疫组化ＬＳＡＢ法检测８６例大肠癌组织ＥＧＦＲ，ＰＣＮＡ的表达．结果在８６例被检组织中，ＥＧＦＲ阳性表达４４例（５１２％），低分化癌（８００％，４０／５０）、淋巴结转移癌（６８８％，２２／３２）较高分化（３８９％，１４／３６）、淋巴结未受累大肠癌（４０７％，２２／５４）有更高的ＥＧＦＲ表达（Ｐ＜００５）．ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ，Ｃ期大肠癌的ＥＧＦＲ表达率分别为３２０％，４８３％，６８８％，Ｃ期与Ａ期比较差异显著；ＥＧＦＲ阳性大肠癌较阴性癌有更高的ＰＣＮＡ标记（两者ＰＣＮＡⅠ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ级的例数分别为４，８，１７，１５；１４，１６，７，５；Ｐ＜００５）．结论ＥＧＦＲ过表达与大肠癌恶性程度、转移趋势密切相关，并可促使癌细胞过度增生．     

P^53蛋白,增殖细胞核抗原及胎盘型谷胱甘肽S—转移酶在胃癌 …

目的：研究胃癌中Ｐ＾５３，ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ表达及意义，方法：应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ方法检测５例正常胃组织和５４例胃癌组织中的Ｐ＾５３蛋白，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴπ）的表达水平。结果：５例正常组织中未见Ｐ＾５３ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ表达。５４例胃癌组织中Ｐ＾５３，ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ阳性检出率分别为６１．１１％，７０．３７％和６８．５２％，表达阳性Ｐ＾５３和ＰＣＮＡ     

P~(53)蛋白、增殖细胞核抗原及胎盘型谷胱甘肽S—转移酶在胃癌中的表达及其意义

目的：研究胃癌中Ｐ５３、ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ表达及意及。方法：应用免疫组织化学ＳＰ方法检测５例正常胃组织和５４例胃癌组织中Ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴπ）的表达水平。结果：５例正常组织中未见Ｐ５３ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ表达。５４例胃癌组织中Ｐ５３，ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ阳性检出率分别为６１１１％，７０３７％和６８５２％。表达阳性Ｐ５３和ＰＣＮＡ均定位于肿瘤细胞核内，ＧＳＴπ定位于胞浆。Ｐ５３、ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ表达率与胃癌组织类型和淋巴转移关系密切。结论：检测Ｐ５３、ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ有助于评价胃癌预后     

慢性糜烂性胃炎的临床病理学及免疫组织化学研究

目的观察慢性糜烂性胃炎（ＣＥＧ）的临床病理特征及粘膜上皮的ｐ２１，ＣＥＡ表达和上皮细胞增生活性．结合粘膜Ｇ细胞数，探讨胃粘膜泌酸状态与病变的关系．方法ＣＥＧ４０例粘膜活检材料经光镜观察其组织病理学特征及Ｈｐ的感染．对其中３１例采用免疫组化ＬＳＡＢ法标记ｐ２１，ＰＣＮＡ，ＣＥＡ及胃泌素．结果ＣＥＧ病变８７５％（３５／４０）见于胃窦粘膜，７５％伴有不同程度的萎缩改变．粘膜上皮轻中度不典型增生率为２００％（８／４０），肠化率为２７５％，２５０％伴活动性炎；４００％病例可见Ｈｐ感染．ＣＥＧ粘膜上皮ｐ２１表达阳性率为６７７％，ＣＥＡ表达为２９０％；明显高于对照的慢性浅表性胃炎组．ＰＣＮＡ表达以及Ｇ细胞数目，ＣＥＧ组与对照组无显著差异（Ｐ＞００５）．结论ＣＥＧ具有一定恶性转化趋势，胃窦Ｇ细胞数、泌酸状态与ＣＥＧ的发病无明显关联．     

大肠癌P53蛋白PCNA和CEA的表达与淋巴结转移的关系

目的研究大肠癌Ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和ＣＥＡ的表达与淋巴结转移的关系．方法应用链霉菌素生物素（ＳＰ）免疫组化法，观察４４例大肠癌Ｐ５３，ＰＣＮＡ的阳性率和ＣＥＡ的表达型式．结果大肠癌Ｐ５３阳性率为５２３％；大肠癌Ｐ５３阳性表达与性别、年龄及肿瘤的部位、分化程度和浸润深度无关（Ｐ＞００５）；大肠癌Ｐ５３阳性者其淋巴结转移率较阴性者高（１４／２３，６０９％ｖｓ６／２１，２８６％，Ｐ＜００５）；Ｐ５３阳性表达及有淋巴结转移者其细胞增殖活性分别较Ｐ５３阴性表达及无淋巴结转移者高（５５９±１７ｖｓ３７９±１４，Ｐ＜００５；５６２±１５ｖｓ３９６±１７，Ｐ＜００５）；Ｐ５３阳性表达及有淋巴结转移者其ＣＥＡ表型均以胞质型和间质型为主（２１／２３，９１３％ｖｓ１３／２１，６１９％，Ｐ＜００５；１９／２０，９５０％ｖｓ１５／２４，６２５％，Ｐ＜００５）．结论检测Ｐ５３和ＰＣＮＡ表达及ＣＥＡ表型对判断大肠癌的恶性程度，预测其淋巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值．     

食管癌患者谷胱甘肽—S转移酶的表达及临床意义

用人体胎盘型ＧＳＴ－π抗体，按ＡＢＣ免疫组织化学技术，检测了５０例食管癌、６８例癌旁组织和５１例正常对照组。并对其中３０例食管癌和２０例正常组进行了组织和血清ＧＳＴ活性检测。结果表明：正常食管组织ＧＳＴ－π阳性率为３．９２％，不典型增生组为７７．９４％，食管癌组为８６％。３０例食管癌组织和血清ＧＳＴ活性均值分别为：２．３９３±１．２１８和１６．６２０±４．４５０，而２０例正常组织和血清ＧＳＴ均值分别为：１．０６４±０．４９４和１３．４４０±４．００４，两组间差异显著（Ｐ＜０．０１）。ＧＳＴ－π在食管癌患者的表达为研究其发病机理和早期诊断提供了新的酶学指标。     

多巴酚丁胺和潘生丁负荷试验诊断冠心病的临床研究

为了寻找阳性率高的药物负荷试验，作者对冠心病（ＣＡＤ）组和可疑ＣＡＤ组共５１例患者，进行多巴酚丁胺（ＤＯＢ）和潘生丁（ＰＥＲ）负荷试验各１次，比较ＤＯＢ和ＰＥＲ负荷试验的阳性率。结果:ＤＯＢ与ＰＥＲ负荷试验对血压的影响无显著差异，但在心率、心律、心电图ＳＴ－Ｔ改变及主诉不适等有显著差异。ＤＯＢ和ＰＥＲ负荷试验的阳性率在ＣＡＤ组分别为７６．９％和５３．８％，可疑ＣＡＤ组分别为２６．３％和１５．８％。ＤＯＢ试验的阳性率显著优于ＰＥＲ试验，更接近运动试验。     

MAGE-1基因在肝细胞性肝癌中的表达

目的探讨ＭＡＧＥ－１基因编码的肿瘤相关抗原作为肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）主动免疫治疗攻击靶点的可能性。方法用ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测了３９例ＨＣＣ及癌旁组织、３种人肝癌细胞株和５例非ＨＣＣ病例肝组织中ＭＡＧＥ－１基因的表达。结果ＨＣＣ癌组织中ＭＡＧＥ－１基因表达率明显高于癌分组织中的表达率,５８．９％（２／３９）对１０．３％（４／３９）,Ｐ＜００１。３种细胞株均为阳性表达。结论ＭＡＧＥ－１基因可作为主动免疫治疗的攻击靶点,以进一步研究设计新的ＨＣＣ免疫治疗策略。     

8种肿瘤相关抗原在活检胃粘膜病变组织中的表达

应用免疫组织化学方法观察了８种肿瘤相关抗原（ＭＧ７、ＭＧｄ１、ＭＣ３、ＣＥＡ、涎酸化糖蛋白、ＣＡ１９─９、ＰＳ─４和ＴＡＧ─７２）在１１０例胃癌、３２例异型增生，１７３例萎缩性胃炎和２０例大致正常胃粘膜活检组织中的表达，发现胃癌组８种肿瘤相关抗原染色的阳性率显著高于良性病变和正常对照组（Ｐ＜０．０１～０．００１）。异型增生组和萎缩性胃炎组８种肿瘤相关抗原阳性率均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。除ＭＣ３外，各抗原在胎儿胃或肠粘膜均有部分阳性。以上结果说明，检测胃粘膜组织中的上述８种抗原，对胃癌的诊断和高危人群的筛选可能有重要意义。     

多巴酚丁胺和潘生丁负荷试验诊断冠心病的临床研究

为了寻找阳性率高的药物负荷试验，作者对冠心病（ＣＡＤ）组和可疑ＣＡＤ组共５１例患者，进行多巴酚丁胺（ＤＯＢ）和潘生丁（ＰＥＲ）负荷试验各１次，比较ＤＯＢ和ＰＥＲ负荷试验的阳性率。结果：ＤＯＢ与ＰＥＲ负荷试验对血压的影响无显著差异，但在心率、心律、心电图ＳＴ－Ｔ改变及主诉不适等有显著差异。ＤＯＢ和ＰＥＲ负荷试验的阳性率在ＣＡＤ组分别为７６．９％和５３．８％，可疑ＣＡＤ组分别为２６．３％和１５．８％。     

含CD44 cDNA片段细胞系的构建及在肝癌中的应用

目的构建含ＣＤ４４ｃＤＮＡ质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ的单克隆细胞系．并利用此细胞系合成特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针，原位检测肝癌中ＣＤ４４ｍＲＮＡ的表达．方法应用常规的质粒转化方法将质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ转入ＤＨ５菌株中得到单克隆细胞系．并以从此细胞系中提取的质粒为模板，应用ＰＣＲ法合成ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．应用原位杂交法检测肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达．结果从ＤＨ５１菌株中提取的质粒含ＣＤ４４（２ｖ－１０ｖ）ｃＤＮＡ（１１ｋｂ），从ＤＨ５２菌株中提取的质粒含全长的ＣＤ４４ｃＤＮＡ（１８ｋｂ），ＰＣＲ合成的ＣＤ４４ｖ６ｃＤＮＡ探针长１４０ｂｐ．ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的阳性检出率：转移高危组为８００％（８／１０），转移低危组为２１７％（５／２３），两者相差非常显著（Ｐ＜００１）．结论从单克隆细胞系ＤＨ５１和ＤＨ５２中提取的质粒，经ＰＣＲ扩增可得到特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达与肿瘤的转移倾向呈正相关．     

慢性糜烂性胃炎与胃癌的免疫组织化学比较研究——P^21ras,P^53,P…

本研究对３１例慢性糜烂性胃炎粘膜活检组织及１４例手术切除的胃癌组织的Ｐ＾２１ｒａｓ、Ｐ＾５３蛋白、细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）的表达采用ＬＳＡＢ免疫组织化学标记。结果发现Ｐ２１ｒａｓ在慢性糜烂性胃炎粘膜上皮和胃癌肿瘤细胞中表达阳性率分别为６７．７％和６５．０％（Ｐ〉０．０５）；Ｐ＾５３表达阳性率分别为０和２１．４％（０．０１〈Ｐ〈０．０５）；ＰＣＮＡ表达阳性率分别为６７．７％和９     

western blot 法诊断囊虫病的应用研究

目的：探讨四种猪囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｃｅｌｕｌｏｓａｅ）特异性抗原ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１、ｃＨ１（分子量分别为２８ｋＤａ、１８ｋＤａ、１４ｋＤａ、３４ｋＤａ）混合应用诊断人囊虫病的价值。方法：以猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷酶－猪囊虫特异性抗原ｃＤＮＡ编码的融合蛋白（ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＦＰ）为抗原，作简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ（ｉｍｐｒｏｖｅｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＩＷＢ）分析，检测１０７例囊虫病、４０例华支睾吸虫病、２４例包虫病和３４例健康人血清对融合蛋白的反应。同时应用粗制抗原（ｃｒｕｄｅａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＣＡ）进行ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ对比检测。结果：在简化Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测中，ＦＰ被１０７例囊虫病患者血清中９４例（８７．９％）血清所识别，与华支睾吸虫病、包虫病患者及健康人血清无交叉反应，特异性为１００％。以粗制抗原作ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ检测囊虫病人血清中的ＩｇＧ抗体阳性率分别为８４．１％和７４．８％，与华支睾吸虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为２．５％、１２．５％；与包虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为８．３％、１６．７％；与健康人血清也存在交叉反应, 假阳性率分别为8. 8%、11. 8% 。结论: β－半乳糖苷酶2猪囊尾蚴FP 诊断囊虫病具有较高敏感性和高度的特异性。     

上皮生长因子家族在老年人肠型胃癌发生中的变化

目的　探讨上皮生长因子（ＥＧＦ）家族在老年人胃癌发生中的作用。　方法　采用免疫组化ＬＳＡＢ法观察ＥＧＦ、转化生长因子－α（ＴＧＦ－α）、上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在老年人肠型胃癌发生不同阶段的表达情况。　结果　ＥＧＦ在正常组织无表达,在胃癌表达最高（７０．８％ ）。ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ在不典型增生组织的表达（分别为７２．２％ 及８３．３％ ）最高;ＴＧＦ－α／ＥＧＦ＋ ＥＧＦＲ共同表达亦以不典型增生组织为最高。ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ在癌周正常组织的表达（分别为５５．６％ 及６１．１％ ）明显高于非癌正常组织（Ｐ＜ ０．０１）;且ＥＧＦ与胃癌的淋巴结转移、浆膜外侵呈正相关（Ｐ＜ ０．０５）。ＥＧＦ家族阳性胃癌粘膜的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数明显高于阴性组（Ｐ＜ ０．０１）,共同表达ＴＧＦ－α／ＥＧＦ＋ＥＧＦＲ胃粘膜的ＰＣＮＡ标记指数也明显高于单独表达ＥＧＦ、ＴＧＦ－α或ＥＧＦＲ组（Ｐ＜ ０．０５）。　结论　ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ与胃癌发生的早期事件关系密切,二者共同表达是癌前病变有意义的标志。ＥＧＦ与进展期癌有关,是判断预后的指标     

膀胱移行细胞癌与P^53基因表达及突变人乳头状瘤病毒感染的关系

用流式免疫荧光，聚合酶链反应（ＰＣＲ）及单链构象多态（ＳＳＣＰ）技术对３３例膀胱移行细胞癌患者的Ｐ＾５３基因表达及突变，人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染进行了研究，结果Ｐ＾５３基因表达阳性１７例（５１．５％）Ｇ１＋Ｇ２级的阳性率显著低于Ｇ３级，并倾向分布于浸润型（Ｉ）膀胱癌；Ｐ＾５３基因突变９例（皆为Ｐ＾５３阳性表达）倾向分布于Ｇ３级和浸润型膀胱癌，ＨＰＶ阳性１３例（３９．４％），Ｇ１＋Ｇ２级的阳性率     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

检测血吸虫循环抗原的多价单克隆抗体诊断试剂盒的研制和应用

用杂交瘤技术生产抗血吸虫肠相关循环阳极抗原（ＣＡＡ）单克隆抗体与血吸虫卵糖蛋白单克隆抗体经混合后标记辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），制成Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清中循环抗原，阳性率分别为８４．３％、８７．２％和９１．５％。累计阳性率为８９．２％（６１９／６９４）。对健康人、肝吸虫、肺吸虫病人血清均未出现阳性反应，显示有较高的敏感性和特异性。ＥＰＧ＞８０的病人循环抗原检出率高干ＥＰＧ／８０的病人。说明循环抗原检出率与感染度有关。血吸虫病人经吡喹酮治疗后半年和１年循环抗原转阴率分别为７１．４％和８８．６％。结果表明．该试剂盒可用于确诊病人和考核疗效。试剂盒质量稳定，操作简便快速，整个试验可在１小时内完成，且不需特殊仪器，适于现场大规模查病应用。