类风湿关节炎患者Th17细胞相关细胞因子的表达及临床意义

目的分析类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血和关节液中T辅助细胞17（Thelp cell 17,Th17）相关细胞因子白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-17（interleukin-17,IL-17）水平,探讨其在RA中的变化特点及与实验室指标的相关性。方法用ELISA检测RA患者血清和关节液和正常人血清IL-6、IL-17水平。结果RA患者外周血血清IL-6、IL-17水平明显高于健康对照组[IL-6：（54.1±12.7）pg/mlvs（37.0±13.0）pg/ml,P〈0.05;IL-17：（57.8±15.6）pg/mlvs（47.6±8.5）pg/ml,P〈0.05],RA患者关节液中IL-6、IL-17水平明显高于RA外周血血清组[IL-6：（360.4±54.7）pg/mlvs（54.1±12.7）pg/ml,P〈0.01;IL-17：（82.1±12.5）pg/mlvs（57.8±15.6）pg/ml,P〈0.01]。IL-6水平与红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C-反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP）、类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）呈显著正相关。结论Th17相关细胞因子在RA外周血及关节局部过度表达,提示Th17型细胞因子在RA的免疫致病机制中可能起重要作用。     

类风湿关节炎患者Th17细胞膜上RANKL的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平与RA病情活动程度指标CRP、ESR、RF及DAS28评分的关系。方法用流式细胞术及RT-PCR方法检测RA患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平。结果 RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达明显高于健康对照组（P〈0.05）,RA患者关节液中Th17细胞膜上RANKL表达高于RA外周血（P〈0.05）,RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达与DAS28评分呈正相关性（r=0.36,P〈0.05）。RTPCR结果提示RA患者CD4~＋T上RANKL表达较健康对照组升高（P〈0.05）。CD4~＋T细胞RANKL mRNA水平与IL-17mRNA水平呈显著正相关（r=0.63,P〈0.001）。结论 Th17细胞膜上RANKL表达明显升高,且与病情活动程度显著相关,提示Th17细胞可能参与RA骨破坏过程,在RA的破骨免疫致病机制中可能起重要作用。     

幼年特发性关节炎患儿外周血清及关节液中IL-6、IP-10及IL-17的表达

目的：观察白介素6（IL-6）、白细胞介素17（IL-17）、γ-干扰素诱导蛋白10（IP-10）在幼年特发性关节炎（JIA）患儿血清及关节液中的表达.方法：38例JIA（JIA组）患儿为研究对象,全身型JIA（sJIA组）20例,多关节型JIA（pJIA组）18例,以38例常规检查正常儿童为对照组,观察分析JIA组临床资料性别、年龄、病程、症状特征及用药情况,采用酶联免疫法测定两组儿童血清及关节液中IL-6、IP-10及IL-17表达水平.结果：sJIA组患儿发热、皮疹、肝肿大及浆膜炎发生率明显高于pJIA组,sJIA组患儿应用糖皮质激素比例显著高于pJIA组,用依那西普的比例显著低于pJIA组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;血清中,JIA组IL-6、IP-10及IL-17水平显著高于对照组（P＜0.05）,sJIA组IP-10较pJIA组高（P＜0.05）;关节液中,JIA组IL-6、IP-10及IL-17水平显著高于对照组,sJIA组IL-17较pJIA组低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;血清中IL-6、IP-10及IL-17与DAS28分值呈正相关（r=0.452,0.396,0.428）,而关节液中仅IL-17与DAS28呈正相关（r=0.428）,IL-6、IP-10与DAS28分值无相关性（r=0.112,0.123）.结论：IL-6可能参与sJIA发病,可作为幼年sJIA的早期生物标志物.     

关节液Th17细胞变化在类风湿关节炎免疫炎症中的作用

目的 检测类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液Th17细胞的变化,探讨该细胞亚群在RA免疫炎症机制中的作用。方法 采用流式细胞术检测15例RA患者外周血、关节液及15例健康对照外周血Th17细胞比例;分析RA患者关节液Th17细胞比例与临床炎症指标的相关性;通过real-time PCR检测外周血和关节液淋巴细胞维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）、白细胞介素（IL）-17基因表达。结果 ①活动期RA患者关节液Th17细胞比例〔（1.89±0.88）%〕高于配对外周血〔（1.03±0.57）%〕和健康对照组〔（0.35±0.18）%〕,差异有统计学意义（Pr=0.519,P=0.047）;③活动期RA患者关节液淋巴细胞RORγt、IL-17基因表达水平均高于配对外周血和健康对照组（P<0. 01）。结论 RA患者关节液中Th17细胞的变化反映了RA关节炎症和系统炎症的差异,揭示了关节损伤的机制。     

SDF-1α及其受体CXCR4在类风湿关节炎患者外周血中的表达

目的 探讨基质细胞衍生因子SDF 1α及其受体CXCR4在类风湿关节炎（RA）发生、发展中的作用及意义。方法 用流式细胞术对50例RA患者和25例健康志愿者外周血CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞表面CXCR4的表达水平进行检测,用ELISA法检测SDF 1α、IL 6在上述两组外周血中的表达情况。结果 RA患者组外周血中CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞表面CXCR4表达水平和SDF 1α、IL-6的表达均明显高于健康对照组（P＜0.05）。直线相关性分析显示,外周血CXCR4及SDF-1α表达水平与IL-6均存在正相关性（P＜0.05）。结论 SDF-1α/CXCR4轴及IL-6在RA患者的发病过程中可能起到了重要作用,并且二者有协同作用。     

类风湿性关节炎患者CTL和NK细胞颗粒酶素B和穿孔素的表达及临床意义

目的:检测类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血T杀伤细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)和自然杀伤细胞(NK)中颗粒酶素B和穿孔素的表达,探讨其可能的临床意义.方法:取25例健康者、43例RA患者(31例活动期、12例稳定期;初发16例、复发27例)外周血及其中15例患者(初发8例、复发7例)关节液标本.采用三色流式细胞术胞内检测外周血及关节液标本中CTL、NK细胞颗粒酶素B和穿孔素的表达.结果:RA患者关节滑膜液中CTL和NK细胞颗粒酶素B及穿孔素的表达显著高于RA患者健康者外周血(P＜0.01或P＜0.05).活动期RA患者外周血CTL和NK细胞表达颗粒酶素B、穿孔素明显高于稳定期RA患者(P＜0.01或P＜0.05).初发和复发患者关节液及外周血中二者表达无显著差异.结论:RA患者外周血及关节液中CTL和NK细胞颗粒酶素B及穿孔素的表达显著高于正常人外周血,对其水平的检测利于判断疾病活动程度,但对判断疾病初发、复发的意义不大.     

临床缓解期类风湿关节炎患者外周血Th17检测的意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血Th17表达的水平对早期发现缓解期患者关节侵蚀的意义.方法 选择无关节破坏的活动性RA患者41例,分别在基线及系统治疗24个月时,采用流式细胞术检测外周血Th17表达,同步用ELISA法测定血清白细胞介素(IL)-17A水平,并与患者的病情活动性评价指标(DAS28)进行相关性分析.设30名健康体检者为健康对照组.系统治疗24个月时,将所有患者根据Sharp/van der Heijde评分(SHS)分为关节侵蚀组(P组,10例)(SHS ＞0.5)和无关节侵蚀组(NP组,26例)(SHS≤0.5),比较两者外周血Th17及IL-17A水平.结果 活动期RA患者的Th17表达明显高于健康对照组[(1.63±0.45)％比(0.91±0.26)％,P＜0.01],Th17表达水平与DAS28评分呈正相关(r=0.87,P＜0.叭);RA患者IL-17A水平亦明显高于健康对照组[1510±280)ng/L比(320±31) ng/L,P＜0.05].进入观察终点的36例患者系统治疗24个月时按DAS28缓解标准均已达到临床缓解(DAS28 ＜2.6),P组的Th17表达高于NP组,两组的外周血IL-17A水平差异无统计学意义.结论 部分RA患者在达到临床缓解后仍可持续出现结构破坏,外周血Th17高水平对缓解期患者的关节侵蚀有提示意义.     

活动期类风湿性关节炎患者IL-17和IL-27水平变化及其临床意义

目的分析活动期类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）患者血清和关节液中白细胞介素-17（Interleukin-17,IL-17）和白细胞介素-27（Interleukin-25,IL-25）水平,探讨IL-17和IL-27在活动期RA患者中的临床意义及其与相关实验指标的相关性。方法选择56例活动期RA患者为实验组,30例健康体检者为对照组,采用免疫散射比浊法测定血清C反应蛋白（CRP）和类风湿因子（RF）的浓度,用魏氏法测定红细胞沉降率（ESR）,用化学发光微粒子免疫检测法检测抗环胍氨酸多肽抗体（CCP）浓度,用ELISA法测定健康体检者血清和RA患者血清及关节液中的IL-17、IL-27水平。结果 RA患者血清和关节液中IL-17和IL-27水平明显高于对照组;RA患者血清IL-17水平与ESR、CRP、CCP呈正相关性,关节液中IL-17水平与ESR、CRP呈正相关性,与RF无相关性;RA患者血清及关节液中IL-27水平与ESR、CRP、RF和CCP无明显相关性;RA患者血清及关节液中IL-17与IL-27水平呈正相关性。结论 IL-17和IL-27在RA患者的血清和关节液中过度表达,提示IL-17和IL-27参与了RA的免疫性致病机制,其具体作用尚待进一步研究。     

血小板微粒及其表面标记物CD62P、CD154与 类风湿关节炎的相关性研究

目的观察血小板微粒（platelets microparticles, PMPs）在类风湿关节炎（RA）患者关节液和外周血中的表达及其与健康人外周血对照之间的差异,探讨PMPs水平与RA活动指标之间的关系。方法采用流式细胞术检测26例活动期〔疾病活动指数（DAS）28≥3.2〕RA患者外周血和15例健康对照组外周血PMPs含量、PMPs的CD62P 、CD154阳性比率,检测RA患者和15例健康对照组外周血C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（ACPA）指标,分析PMPs含量与各指标相关性。其中16例有膝关节积液RA患者同时检测配对外周血和关节液PMPs含量及CD62P+PMPs和CD154+PMPs比率。结果①RA患者外周血PMPs含量高于健康对照组（P<0.01）,RA患者外周血PMPs含量高于配对关节液（P<0.01）; ②RA患者外周血CD62P+PMPs比率高于健康对照组（P<0.05）和配对关节液（P<0.05）;③RA患者外周血CD154+PMPs比率高于健康对照组（P<0.01）和配对关节液（P<0.05）;④RA患者外周血PMPs含量与疾病活动性评分DAS28 ( r=0.462, P=0.018)呈正相关,与ESR、CRP、RF、ACPA不存在相关性;而关节液PMPs含量与CRP、ESR、RF、ACPA、DAS28均无相关性。结论RA患者外周血PMPs表达异常,且与疾病活动性有关,提示PMPs在RA疾病活动和关节损害中发挥重要作用。     

Tregs细胞CCR4、CCR6表达异常在类风湿关节炎患者发病时的意义

目的探讨Tregs细胞CCR4、CCR6受体在类风湿关节炎（RA）患者发病时的意义。方法选择45例活动期RA患者（RA组）及30例健康体检者（对照组）,从外周血分离单个核细胞（PBMC）,采用流式细胞分析法检测RA患者外周血中CD4+Foxp3+细胞（Tregs）占比及其该类细胞上CCR4、CCR6的表达水平,并对Tregs上CCR4、CCR6水平与RA临床活动指标进行相关性分析。结果与对照组比较,RA活动期患者外周血Tregs细胞数量明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;RA活动期患者外周血Tregs细胞表面趋化因子受体CCR4、CCR6表达水平与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）;RA活动期患者外周血Tregs细胞CCR4、CCR6表达水平与DAS28评分呈正相关（P＜0.05）。结论 RA患者外周血中Tregs细胞上趋化因子受体CCR4、CCR6表达增加,可能是Tregs细胞获得定向迁徙至病变关节能力的表现,也是机体炎症反应时反馈性调节的一种现象。     

血清IL-17和IL-23水平在类风湿关节炎患者中的变化及其临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清白细胞介素(IL)17、IL-23的变化及其临床意义。方法选取2010年9月至2012年8月在内江第一人民医院风湿免疫科住院治疗的RA患者123例作为观察组,选择同期60例健康体检者作为对照组,检测两组受试者的血清IL-17及IL-23水平并进行对比分析,同时分析RA患者血清IL-17及IL-23与病情的关系、治疗前后变化及与其他临床指标的关系。结果观察组IL-17、IL-23水平均显著高于对照组(P<0.01);RA患者血清IL-17、IL-23水平随着病情活动的加重而显著增高(P<0.01);治疗组患者IL-17、IL-23水平显著低于未治疗组(P<0.01);IL-17与疼痛视觉模糊评分(VAS)、生活质量评分(HAQ)、关节压痛数(TJC)、关节肿胀数(SJC)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)及骨质破坏(Sharp)评分均呈显著正相关(P<0.05或P<0.01);IL-23与晨僵时间、VAS、HAQ、TJC、SJC、ESR、血小板计数、抗环瓜氨酸抗体、RF及Sharp评分呈显著正相关(P<0.05或P<0.01)。结论血清IL-17、IL-23水平可在一定程度上反映RA病情,对疾病的治疗效果评估也具有重要作用。     

类风湿关节炎患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1、白介素-17水平研究

目的：对类风湿关节炎（RA）患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1、白介素-17水平进行研究。方法：选取本院2010年1月-2012年12月住院部和门诊收治的类风湿关节炎患者50例（观察组）,将50例患者按照DSA28的评分大小分为活动组和非活动组,并另选取同一时间在本院进行体检的健康者50例为对照组,应用酶联免疫吸附试验法（ELISA）对所有患者的TREM-1和IL-17进行检验,并同时检测观察组患者的RHF、CRP、CCP以及C3水平。结果：观察组的TREM-1和IL-17水平明显大于对照组（P〈0.05）;活动组的TREM-1水平明显大于非活动组（P〈0.05）,活动组和非活动组IL-17水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）。对RA患者活动组和非活动组各项血清指标的比较：CCP和RHF指标组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）;而CRP、C3指标比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：TREM-1指标在RA患者中呈高表达,TREM-1可以作为反映RA患者病情活动的重要指标,且IL-17和TREM-1之间可协同作用。     

类风湿关节炎患者IL-17水平的变化

目的探讨稳定期和活动期类风湿关节炎（RA）患者白细胞介素-17（IL-17）水平的变化。方法应用酶联免疫吸附技术（ELSIA）检测40例健康体检者和120例稳定期和活动期RA患者的IL-17水平，同时检测白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）等实验室指标。结果IL-17，PLT，ESR，RF，CRP等指标RA患者组均高于健康对照组（P〈0．05）。RA患者活动期PLT，ESR，RF，CRP，IL-17水平均显著高于稳定期（P〈0．05）。结论IL-17与RA免疫炎症有关，其水平高低可反映痛惜活动变化。     

类风湿关节炎患者细胞因子的检测及其意义

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血TH1／TH2的平衡状态与IL-2、IFN-γ、IL-12、TNF-β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、TNF-α和IL-8的表达。方法用流式细胞仪对30名RA患者和30名健康对照组外周血分别进行TH1／TH2和IL-2、IFN-γ、IL-12、TNF—β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、TNF-α和IL-8检测。结果IFN-γ（120．69±39．66）pg/ml和TNF-β（22．59±13．99）pg/ml高于正常对照组,而IL-5（336．42±255．54）pg/ml低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;而其他几个因子差异无统计学意义（P〉0．05）。结论IFN-γ、TNF—β和IL-5对揭示类风湿关节炎的发病机理有一定的帮助,但有待于进一步的研究。     

circ-AFF2表达水平与类风湿关节炎疾病活动度的相关性研究

目的 探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者外周血及关节滑液中的circ-AFF2表达水平与疾病活动度的关系。方法 选取2019年12月至2022年4月浙江中医药大学附属湖州中医院治疗的90例RA患者纳入RA组，记录其临床资料与实验室指标，根据RA疾病活动度评分（disease activity score-28，DAS28）将纳入患者分为低活动度组（n=32）、中活动度组（n=34）和高活动度组（n=24）；收集同期87例关节损伤患者纳入对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）测定两组患者外周血与关节滑液中的circ-AFF2表达水平，并检测相关实验室指标和膝关节超声指标。结果 RA组患者外周血与关节滑液中的circ-AFF2水平均显著高于对照组（P<0.05）。低活动度组、中活动度组、高活动度组患者的外周血与关节滑液中circ-AFF2表达水平及类风湿因子（rheumatoid factor，RF）、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）、抗环瓜氨酸肽（anti-cyclic cirtrullinated peptide，CCP）、滑膜厚度依次升高，滑膜血流分级、滑膜动脉阻力指数（resistance index，RI）依次降低（P<0.05）。RA患者的外周血及关节滑液中circ-AFF2表达水平与RF、ESR、CRP、CCP、滑膜厚度均呈正相关（P<0.05），与滑膜血流分级、RI呈负相关（P<0.05）。RA患者外周血和关节滑液的circ-AFF2、RF均为RA的独立危险因素（P<0.05）。结论 RA患者外周血与关节滑液中的circ-AFF2表达水平均升高，且患者的疾病活动度越高，circ-AFF2表达水平越高。     

CD4~+CD25~+Treg细胞表面CTLA-4及血清IL-10、TGF-β1在类风湿关节炎中的表达及意义

目的通过类风湿关节炎(RA)患者和健康对照组外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达水平的比较,以及与细胞因子IL-10、TGF-β1、临床疾病活动度评分DAS28的相关性分析,探讨CTLA-4在类风湿关节炎发病机制中的可能作用。方法选择符合1987年美国风湿病学会制定的RA诊断标准的30名RA患者作为实验组,选择30名健康人为对照组。用流式法测外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达水平,用ELISA法测血清IL-10、TGF-β1的水平。结果⑴RA患者外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达及血清IL-10、TGF-β1的表达水平要低于健康对照组(P0.01);⑵RA静止组、RA活动组、健康对照组三组间比较,外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达及血清IL-10、TGF-β1的表达水平差异有统计学意义(P0.01);⑶相关性分析结果显示RA组中外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达与血清IL-10、TGF-β1的表达水平均呈正相关关系,与DAS28呈负相关关系。结论 Treg细胞表面CTLA-4的低表达可能参与了RA的发病,并与RA的疾病活动度有一定关系。     

NIX-1与BAP在类风湿性关节炎诊断中的应用价值

目的 将骨代谢指标Ⅰ型胶原氨基末端肽（NTX-Ⅰ）、骨源性碱性磷酸酶（BAP）与传统使用的经典检测方法类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）比较,分析对不同病期的RA患者的敏感性和特异性,为RA早期诊断、确诊、判断发展及疗效评定提供可靠依据.方法 健康对照组50例,RA缓解组50例,RA活动组50例.均分离血清,测定血中CCP、RF、CRP、ESR、NTX-Ⅰ、BAP.结果 RA活动组与对照组、缓解组比较,CCP、RF、ESR、CRP、NIX-Ⅰ、BAP,差异有统计学意义（P＜0.05）.RA缓解组与RA对照组比较,CCP、RF、NIX-Ⅰ水平变化明显,差异有统计学意义（P＜0.05）,而ESR、CRP、BAP水平变化差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 NTX-Ⅰ在RA患者的诊断以及预测病情进展、观察临床治疗效果方面具有重要的意义,可与CCP／RF联合运用于RA的诊断中,可明显提高诊断率.