复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法 大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(50只),造模组连续12周采用香烟烟雾联合气管注射LPS建立COPD大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)和复方佛耳草合剂低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg),每组10只。给药干预24周后,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,HE染色法观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及SOD活性,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及caspase-3 mRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及TNF-α蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠存在肺通气功能障碍,肺组织和支气管受损明显,SOD活性降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平升高(P<0.01),肺组织TLR4、MyD88、NF-κB、caspase-3 mRNA表达和TLR4、MyD8...     

芪苓通络方抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善特发性膜性肾病大鼠肾损伤

目的:探讨芪苓通络方基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路对特发性膜性肾病(IMN)大鼠的治疗效果及作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组(10 mg·kg^-1),芪苓通络方低、中、高剂量组(6.48,12.95,25.9 g·kg^-1),通过尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制IMN大鼠模型。模型制备成功后进行药物灌胃,每日1次,连续给药4周。治疗结束后,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色和碘酸六胺银(PASM)染色观察大鼠肾脏病理学形态变化;检测24 h尿蛋白(24 h UTP),血浆白蛋白(ALB),血清总蛋白(TP),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),尿酸(UA)含量水平;酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),免疫组化法(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠24 h UTP水平和血清中SCr,BUN,UA,IL-1β,IL-6的含量明显升高(P<0.05,P<0.01),ALB,TP水平显著降低(P<0.01);肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05,P<0.01);模型组大鼠炎症反应明显,肾小球结构紊乱,体积增大,基底膜呈不规则增厚,肾间质可见炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞数量减少、脱落和凋亡,部分呈现空泡样变性。与模型组相比,盐酸贝那普利组、芪苓通络方高剂量组大鼠血清中SCr,UA的含量明显降低(P<0.05),ALB,TP水平明显升高(P<0.05);盐酸贝那普利组和芪苓通络方低、中、高剂量组大鼠24 h UTP水平、血清中IL-1β,IL-6含量水平及肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01);盐酸贝那普利组和芪苓通络方各剂量组能够减少IMN炎症反应,大鼠肾小球肿胀、体积增大程度减轻,肾小球毛细血管轻微扩张,系膜基质少量增生,肾间质偶见炎性细胞浸润,大鼠肾脏病理形态学损伤有不同程度的减轻。结论:芪苓通络方可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,减少炎症因子的释放和表达,抑制IMN大鼠炎症反应,减少蛋白尿,减轻肾损伤,保护肾脏功能。     

藏药短穗兔耳草不同部位对急性痛风性关节炎模型大鼠的作用 及其机制研究

目的探讨藏药短穗兔耳草不同极性部位对急性痛风性关节炎大鼠模型的作用,及对模型大鼠Toll 样 受体2（TLR2）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子κB（NF-κB）和NOD 样受体蛋白3（NALP3）信号通路的影 响。方法110 只SD 雄性大鼠,随机均分成正常组,模型组,秋水仙碱（0.3 mg·kg-1）组及短穗兔耳草30%乙 醇低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草50%乙醇低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草95%乙醇 低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）,短穗兔耳草水部位低、高剂量组（0.8、3.2 g·kg-1）。适应性喂养7 d后各给药组 每天按10 mL·kg-1 灌胃剂量进行给药处理,连续灌胃给药7 d,正常组和模型组同等剂量灌胃蒸馏水。于第 5 d给药1 h后向各组（正常组除外）大鼠右后踝关节处注射0.1 mL 尿酸钠混悬液（50 mg·mL-1）建立大鼠急性痛风 性关节炎模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。用足趾容积测量仪检测大鼠右后踝关节的肿胀度;造模 48 h 后取血清和滑膜组织,采用Elisa 法检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）含量, 蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测关节滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB 和NALP3 等相关蛋白含量 的表达;HE 染色法检测大鼠滑膜组织的病理学变化。结果与正常组比较,模型组各时间点均出现明显的踝 关节肿胀,且具有明显差异（P＜0.01）;模型组大鼠血清TNF-α 和IL-1β 含量及滑膜组织中TLR2、TLR4、 MyD88、NF-κB 和NALP3 等蛋白含量水平均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）。与模型组比较,在造模后48 h 内,秋水仙碱组、30%乙醇部位低剂量组和50%乙醇部位的低、高剂量组大鼠踝关节肿胀率均明显下降（P＜ 0.05,P＜0.01）。秋水仙碱组及30%乙醇部位低、高剂量组均能使血清TNF-α 和IL-1β 含量及滑膜组织中 TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB 和NALP3 蛋白表达量下调（P＜0.05,P＜0.01）。同时,滑膜病理切片显示30% 乙醇部位更能改善大鼠滑膜组织病理变化。结论藏药短穗兔耳草对尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎大鼠具有 一定的保护作用,其中30%乙醇部位为有效部位,其作用机制与TLR/MyD88/NF-κB 和NALP3 信号通路有关。     

复方龙脉宁对急性心肌梗死模型大鼠TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响

目的:探讨复方龙脉宁汤对盐酸异丙肾上腺素诱导的心肌梗死大鼠模型的保护作用及其对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:取雄性SD大鼠48只,随机分成6组:正常组,模型组,复方丹参滴丸组(0.072 9 g·kg~(-1)),复方龙脉宁低、中、高剂量组(0.36,0.71,1.43 g·kg~(-1))。采用背部皮下多点注射盐酸异丙肾上腺素的方法建立急性心肌梗死动物模型。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),一氧化氮(NO)的含量;免疫组化法测定大鼠心肌组织中NF-κB激酶β抑制蛋白(IKKβ),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌损伤明显,血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,NO含量明显升高(P0.05),心肌组织中IκBα蛋白表达水平明显降低(P0.05),心肌组织中IKKβ,TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,复方龙脉宁低、中、高剂量组能明显改善大鼠心肌损伤,明显升高IκBα蛋白的表达(P0.05),明显降低血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,NO的活性及心肌组织中IKKβ,TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白的表达(P0.05)。结论:复方龙脉宁对心肌梗死的保护作用,可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路相关因子的表达有关。     

小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导慢性肾小球肾炎的机制研究

目的 探究小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的慢性肾小球肾炎的机制。方法 24只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、小青龙汤组。对照组切片在DMEM基础培养基中培养80min, LPS模型组将10μg/mL浓度的LPS加入基础培养基中，切片在基础培养基中培养30min,转入含有LPS的基础培养基中培养50min。小青龙汤组：将含药血清溶解于基础培养基中，继续培养LPS模型组。造模成功后，取出切片进行指标检测。观察肾组织形态学变化；用ELISA检测肾组织中IL-1β、IL-4、TNF-α等含量；RT-qPCR和Western blot检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达水平。结果 与对照组相比，模型组大鼠肾组织中可见明显的炎性细胞浸润，偶见肾小球体积增大，增生的肾小球内细胞数量增多，肾小管的管腔扩张且内有明显的透明管型，肾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8的含量显著升高，IL-4显著下降(P<0.01);Western blot检测结果显示，与对照组比较，模型组大鼠肾组织TLR4、MyD88和P-NF-...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨刺芒柄花素对LPS诱导的大鼠子宫内膜上皮细胞损伤的影响

目的:探讨刺芒柄花素通过调控Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠子宫内膜上皮细胞损伤的影响。方法:以LPS诱导大鼠子宫内膜上皮细胞损伤,采用CCK8法检测细胞活性;采用RT-qPCR法检测TLR4过表达效率;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;Western Blot法检测TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞抑制率、细胞凋亡率、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显增加,p-P65/P65、p-IκBα/IκBα、MyD88和TLR4蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,刺芒柄花素12μmol/L组细胞抑制率、细胞凋亡率、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显降低,p-P65/P65、p-IκBα/IκBα、MyD88和TLR4蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);TLR4过表达...     

补肺健脾益肾方对COPD模型大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路相关因子的影响

目的:研究补肺健脾益肾方对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)通路的影响。方法:采用随机数字表法将40只大鼠随机分为模型组、常规组、实验组、正常组,每组10只。取其干预12周后肺组织和支气管肺泡灌洗液,比较各组大鼠干预期间一般情况,比较各组大鼠TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA水平及肺组织形态学评分。结果:正常组大鼠在干预期间皮毛、活动度、饮水进食、体重增长趋势均优于其余三组,常规组及实验组上述表现均优于模型组。与正常组比较,模型组大鼠TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA水平均升高; 与模型组比较,常规组、实验组以上指标均低,且实验组低于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肺组织上皮细胞变性坏死糜烂脱落、气道管壁黏膜充血水肿、气道管壁中性粒细胞浸润评分均升高,与模型组比较,常规组、实验组以上指标均降低,且实验组低于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:补肺健脾益肾方可通过抑制大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路相关因子表达改善COPD的气道炎症反应,提高治疗效果。     

汉黄芩素对流感病毒感染肺泡巨噬细胞NF-κB核转位及表达的影响及机制

目的:探讨汉黄芩素对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞( NR8383)中核转录因子-κB(NF-κB)核转位、表达的影响及与Toll样受体7(TLR7)介导的髓样分化因子88( MyD88)依赖性信号通路的关系.方法:流感病毒感染NR8383细胞1h后,加入含汉黄芩素的培养基(终质量浓度0.016 g · L-1),药物作用后6,12,24 h,RT-PCR检测TLR7,MyD88,NF-kB p65mRNA水平;4,6,24 h时,免疫组化法检测NF-κB p65核转位情况,并做半定量分析;24 h时,Western blot检测NF-κB p65表达水平.结果:汉黄芩素降低了流感病毒感染NR8383细胞后TLR7,MyD88,NF-κB p65 mRNA水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),抑制了流感病毒感染后NF-κB p65的核转位及表达(P＜0.01).结论:汉黄芩素通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的核转位及表达,从而减轻流感感染中的炎症反应.     

桃仁承气汤对脓毒症大鼠肠黏膜屏障及TLR9信号通路的影响

目的:探讨桃仁承气汤对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的保护作用以及作用机制。方法:将大鼠分为假手术组,模型组(盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠),桃仁承气汤低、中、高剂量组(2. 85,5. 70,8. 55 g·kg-1),地塞米松组(0. 01 g·kg-1),每组12只。末次给药结束后,处死大鼠,电镜下观察肠黏膜形态变化;检测肠系膜淋巴结、肝、肾、脾组织细菌移位率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)以及小肠组织中二胺氧化酶(DAO),肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot),免疫组化法(IHC)检测小肠组织中Toll样受体9(TLR9),髓样分化因子88(MyD88),核转录因子-κB亚基p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠器官细菌移位率,TNF-α,IL-1β水平明显升高,DAO,i-FABP水平,黏膜厚度,绒毛高度明显降低,TLR9,MyD88,细胞核NF-κB p65蛋白表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01),细胞质NF-κB p65蛋白表达明显降低(P 0. 05);与模型组比较,桃仁承气汤低、中、高剂量组,地塞米松组器官细菌移位率,TNF-α,IL-1β水平明显降低,DAO,i-FABP水平,黏膜厚度,绒毛高度明显升高,TLR9,MyD88,细胞核NF-κB p65蛋白表达明显降低(P 0. 05),细胞质NF-κB p65蛋白表达明显升高(P 0. 05)。结论:桃仁承气汤对脓毒症大鼠肠黏膜屏障具有一定的保护作用,这可能与抑制TLR9信号通路有关。     

艾灸“足三里”“肾俞”抑制miR-155介导的TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠佐剂性关节炎的研究

目的:观察艾灸"足三里""肾俞"对佐剂性关节炎(AA)大鼠miR-155/Toll样受体4 (TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、拮抗剂组、艾灸组,每组12只。采用风、寒、湿环境因素+弗氏完全佐剂复合造模方法复制AA模型。艾灸组于大鼠"足三里""肾俞"给予艾灸治疗,30 min/次,1次/d,连续治疗21 d;拮抗剂组经尾静脉注射TLR4拮抗剂,1次/d,连续注射21 d;正常组和模型组不做任何处理。观察各组大鼠关节肿胀度(JSD)、关节炎指数(AI),荧光定量PCR法及Western blot法检测大鼠滑膜组织中miR-155/TLR4/NF-κB信号通路相关指标miR-155及TLR4、NF-κB、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素(IL)1受体相关酶(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6的mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组、艾灸组及拮抗剂组大鼠JSD、AI明显升高(P<0.01),滑膜组织中miR-155及TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和拮抗剂组大鼠JSD、AI明显降低(P<0.01),滑膜组织中miR-155及TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.01)。艾灸组大鼠JSD、AI及滑膜组织中miR-155 mRNA及NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达明显低于拮抗剂组(P<0.01),滑膜组织中TLR4 mRNA及蛋白表达明显高于拮抗剂组(P<0.01)。结论:艾灸"足三里""肾俞"能够明显改善AA大鼠滑膜炎性反应,可能与艾灸抑制miR-155/TLR4/NF-κB信号通路有关。     

生脉散联合阿托伐他汀对老年冠心病患者TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:研究生脉散联合阿托伐他汀对老年冠心病(CHD)患者TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法:收集112例老年CHD患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组56例。两组均接受常规治疗,对照组加用阿托伐他汀,观察组加用阿托伐他汀与生脉散。比较两组临床疗效、心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVDD)及6 min步行距离(6MWD)],以及外周血TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平。结果:观察组总有效率高于对照组。治疗后,观察组TLR4、MyD88及NF-κB mRNA和蛋白表达低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,观察组LVEF、6MWD水平高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:生脉散联合阿托伐他汀治疗老年CHD疗效较好,可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

基于“脾为之卫”探讨历节胶囊对CIA小鼠炎症信号通路的影响

目的 观察历节胶囊对CIA小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响，探讨其治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法 将60只DBA/1小鼠随机分成3组：正常组，模型组，历节胶囊组，每组各20只。每组给药连灌21天后处死。Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达量；PCR检测TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA表达水平；ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 与正常组比较，模型组MyD88、NF-κB p65及TLR4的mRNA及蛋白表达量均上升，模型组的血清TNF-α水平升高，差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较，历节胶囊组MyD88、NF-κB p65及TLR4 mRNA及蛋白表达量均下降，血清TNF-α水平下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 历节胶囊可以通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65炎症信号通路以取得疗效。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及相关分子的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:将40只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、二陈汤加味组和EVP4593(NF-κB抑制剂)组。以香烟烟雾联合气管滴注脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味组以10 g·kg~(-1)灌胃(ig),EVP4593组皮下注射1 mg·kg~(-1),正常组、模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1),趋化因子(CXCL)-2,CXCL-3和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平,免疫组化(IHC)检测TLR4,MyD88,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)在大鼠肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达均显著增加(P0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著升高(P0.01)。与模型组比较,二陈汤加味组TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA及其蛋白表达均显著减弱(P0.05,P0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路相关信号分子基因的表达,以及减少HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1的释放有关。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探究桃红四物汤对糖尿病周围神经病变大鼠炎症反应的影响

目的:探究桃红四物汤对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠炎症反应及对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子kappan B(NF-κB)通路的影响。方法:从45只SD大鼠中随机选取10只为对照组,其余35只大鼠建立DPN模型,3只大鼠建模失败,其余随机分为模型组,桃红四物汤低、高剂量组及α-硫辛酸组,每组各8只。桃红四物汤低、高剂量组分别给予4.5、18 g/(kg·d)的桃红四物汤,α-硫辛酸组给予α-硫辛酸20 mg/(kg·d),对照组及模型组给予等量的0.9%氯化钠溶液,均灌胃给药。连续给药8周后,检测大鼠血清炎症因子、血糖及血脂指标及神经传导情况,观察坐骨神经病理学变化,检测TLR4相关通路蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)水平升高,血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)及血清总胆固醇(TC)水平升高,感觉神经传导速度(SNCV)及运动神经传导速度(MNCV)水平降低,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达上调(P<0.05)...     

清肝降浊方基于TLR4/NF-ҡB信号通路治疗非酒精性脂肪肝病作用机制研究

目的 通过试验探讨清肝降浊方基于TLR4/NF-κB信号通路治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制.方法 采用高脂饮食饲喂的方法,诱导建立非酒精性脂肪肝病大鼠动物模型.预防性给药12周后,检测血脂(TC、TG)、肝脂(TC、TG)及肝功能(AST、ALT)指标,肝脏病理组织学检查,Western-blot检测信号通路相关蛋白TLR4、NF-κB P65、MyD88表达水平.结果 清肝降浊方3个给药组动物血清AST、ALT活性明显低于模型组、大鼠肝组织中TLR4表达量显著低于模型对照组(P<0.01或P<0.05);高、中给药组大鼠肝组织匀浆及血清中TG、TC浓度明显低于模型组、大鼠肝组织中NF-κB P65、MyD88表达量显著低于模型对照组(P<0.01或P<0.05);清肝降浊方3个给药剂量组都可不同程度地减轻肝脏病理损伤.结论 清肝降浊方具有保肝降酶、降低血脂、肝脂含量,减轻肝脏病理损伤作用,可能是通过调节TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB P65、MyD88蛋白表达,起到防治非酒精性脂肪肝病作用.     

当归多糖通过TLR4/NF⁃κB信号通路对糖尿病肾病大鼠的影响

目的探究当归多糖通过TLR4/NF?κB信号通路对糖尿病肾病大鼠的影响。方法48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(厄贝沙坦,17.5 mg/kg)及当归多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)。给药4周后,观察大鼠一般情况,HE染色观察肾组织病理形态改变,免疫比浊法检测24小时尿蛋白,RT?PCR检测MCP?1、TNF?α、IL?1、TLR4、MyD88、NF?κB mRNA表达,Western blot检测TLR4、MyD88、NF?κB蛋白表达。结果与模型组相比,当归多糖高剂量组大鼠一般情况明显好转,24小时尿蛋白降低,肾组织中TLR4、MyD88、NF?κB mRNA和蛋白表达降低,MCP?1、TNF?α、IL?1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01);肾小球及肾小管病理变化明显减轻。结论当归多糖可降低糖尿病肾病大鼠肾组织中炎性指标,延缓病情发生,其机制可能与干预TLR4/NF?κB信号通路有关。     

萆薢总皂苷对尿酸钠诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制。方法:佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高质量浓度组(1,3,10 mg·L~(-1))和秋水仙碱组(0.2 mg·L~(-1)),除正常组外,其余各组均用400 mg·L~(-1)MSU刺激6 h,诱导体外炎症反应。噻唑蓝(MTT)比色法检测TSD对细胞活力影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TLR4,髓样分化因子88(MyD88)及NF-κB蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4,NF-κB及IL-1β前体(Pro-IL-1β)mRNA表达水平;免疫荧光法检测NF-κB p65的核位移情况。结果:0～32 mg·L~(-1)TSD对细胞活力基本无影响;与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌水平显著升高(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达显著升高(P0.01);与模型组比较,1～30 mg·L~(-1)TSD可显著下调炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达明显降低(P0.05,P0.01),细胞核内NF-κB p65叠加减少,部分转位至胞浆,抑制NF-κB p65核转位。结论:TSD可能通过下调TLR4,NF-κB及Pro-IL-1βmRNA的表达,减少炎性因子TNF-α及IL-1β分泌而发挥抗炎作用。     

强精片对睾丸支持细胞Toll样受体信号通路的作用北大核心CSCD

目的探讨强精片对睾丸支持细胞(SC)Toll样受体(TLRs)信号通路的作用。方法制备解脲支原体(UU)感染SC模型,分为模型组(空白血清)、强精片组(强精片含药血清)、TAK242组(TLR4抑制剂TAK242),另设正常SC采用空白血清培养为空白组。采用RT-q PCR和Western Blot分别检测TLR4、胞内下游分子髓样分化因子(My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因6(TRAF6)、核因子κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光技术检测NF-κB的核转位情况。结果与空白组比较,模型组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κB mRNA和蛋白表达、p NF-κB蛋白表达以及NF-κB核转位比例增加(P<0.05)。与模型组比较,强精片组TLR4、TRAF6 mRNA及蛋白表达降低,MyD88、NF-κB、p NF-κB蛋白表达及NF-κB核转位比例降低(P<0.05);TAK242组MyD88、TRAF6 mRNA及蛋白表达、NF-κB及pNF-κB蛋白表达及NF-κB核转位比例降低(P<0.05)。与TAK242组比较,强精片组TRAF6 mRNA表达升高,pNF-κB蛋白表达及NF-κB核转位比例降低(P<0.05)。结论强精片可抑制TLR4/MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路,作用与TLR4抑制剂TAK242相近。     

补阳还五汤对TLR4介导脑缺血大鼠海马炎症损伤的作用

目的观察补阳还五汤对脑缺血大鼠海马组织Toll样受体4(TLR4)信号及其介导的炎性因子水平的影响,探讨补阳还五汤对脑缺血神经细胞损伤的作用机制。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组和中药组,每组10只。模型组、西药组和中药组大鼠均采用双侧颈总动脉阻断法复制脑缺血模型,术后1周,中药组每日灌胃补阳还五汤20 g/kg,西药组每日灌胃尼莫地平10 g/kg,模型组及正常组灌胃给予等容量生理盐水,均1次/d,连续灌胃4周。HE染色观察各组大鼠海马CA1区组织形态学表现,免疫组化法检测海马CA1区TLR4、髓样分化蛋白88(MyD88)表达水平,ELISA法检测海马CA1区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,Western blot检测海马CA1区核转录因子-κB(NF-κB)表达水平。结果 HE染色显示模型组大鼠海马CA1区神经元细胞数量减少,排列疏松不规则,核浓缩,细胞间隙变大;西药组及中药组大鼠海马神经病变明显轻于模型组,细胞数量较模型组多,且形态规则。与正常组比较,模型组大鼠海马组织中TLR4、MyD88蛋白表达水平及TNF-α、IL-1β、NF-κB表达水平均明显升高(P均0.05);与模型组比较,中药组大鼠海马组织中TLR4、MyD88蛋白表达水平及TNF-α、IL-1β、NF-κB表达水平均明显降低(P均0.05)。结论补阳还五汤可有效改善脑缺血大鼠的神经损伤,作用机制可能与调节TLR4/MyD88/NF-κB信号、抑制炎症因子表达有关。     

流感病毒性肺炎湿热证小鼠TLR-7介导信号通路的变化

目的通过人工气候模拟,观察流感病毒性肺炎湿热证小鼠Toll样受体7(TLR-7)介导信号通路的变化,探讨病毒性疾病湿热证的物质基础。方法将50只BALB/c小鼠随机分为正常对照组10只、单纯湿热组10只、湿热模型组15只、单纯病毒组15只。单纯湿热组:全程高脂饲料喂养,连续10天置于气候箱;湿热模型组:全程高脂饲料喂养,连续10天置于气候箱,第11天接种病毒,接种病毒后不再置入气候箱;单纯病毒组:全程普通饲料喂养14天,不置入气候箱,第11天接种病毒1次,继续喂养3天,第15天处死采集标本,每组随机选取8个样本检测,比较各组TLR-7、核因子-κB(NF-κB)、髓样分化因子88(MyD88)mRNA表达水平。结果湿热模型组TLR-7、MyD88、NF-κB三者mRNA表达水平较其他3组增高,但TLR-7、MyD884组间差异无统计学意义(P>0.05),NF-κB水平湿热模型组高于其他3组(P<0.05或P<0.01)。结论湿热因素干预能上调TLR-7介导信号因子,尤其是下游信号因子NF-κB,从而激发Tol1-NF-κB信号通路,导致湿热模型组小鼠肺脏病变程度较单纯病毒组重。