微载体培养L02人肝细胞应用于生物人工肝的初步研究

Ｌ0 2人肝细胞株组织学来源为人正常肝组织 ,具备一定正常肝细胞的生物功能。我们将高密度微载体培养的Ｌ0 2人肝细胞聚集体加入中空纤维生物反应器 ,构建简易体外生物人工肝装置并进行初步的应用研究。一、材料与方法1.材料 :Ｌ0 2人肝细胞株购于中国科学院上海细胞生物学研究所 ;Ｃｙｔｏｄｅｘ3微载体为Ｐｈａｒｍａｓｉａ公司产品 ;聚羟乙基异丁烯酸 (Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ )及ＤＭＥＭ、ＨａｍｓＦ12培养基均为Ｓｉｇｍａ公司产品。2 .Ｌ0 2人肝细胞的微载体培养 :( 1)取 1.4ｇＣｙｔｏｄｅｘ 3,水化处理[1] ;( 2 ) 12 %Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ…     

球体培养人、猪肝细胞：一种理想的体外生物人工肝模式

体外培养的肝细胞有多种临床用途〔１〕。其中将肝细胞置入特殊的生物反应器,构建生物人工肝（ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ,ＢＡＬ）支持系统有重要的临床价值。有研究报道,细胞聚集成多细胞的球体（ｓｐｈｅｒｉｏｄ）更类似于体内条件;并且可在有限的容积内高密度地培养肝细胞〔２〕。因此,我们实验构建人、猪肝细胞球体,并比较肝细胞普通培养与球体培养蛋白分泌功能的变化。１．材料和方法：试剂：Ｄｕｂｅｃｃｏ′ｓ磷酸盐缓冲液;Ｈａｎｋ′ｓ平衡盐;ＩＴＳ（胰岛素,运铁蛋白和硒,ｉｎｓｕｌｉｎ,ｔｒａｎｓｆｅｒ…     

人肝细胞系生物功能筛选测定

生物人工肝利用原代肝细胞或人肝细胞系提供肝功能支持［１～４］。我国是世界上最早建立人肝细胞系的国家之一［５］。本研究收集国内的９株人肝细胞系,从中筛选出分化程度高者,测定其生物功能,以备作为人工肝的生物材料。材料与方法１．材料９株人肝细胞系由中国科学院上海细胞生物学研究所提供,编号为细胞系１～９（ＣＬ１～９）。原代肝细胞取自５月胎龄水囊引产的人胚胎肝组织。Ｌ－１５培养基为Ｇｉｂｃｏ产品。Ｌ－谷氨酰胺为Ｓｉｇｍａ产品。ＦＡＣＳ　４４０流式细胞仪为美国Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ公司产品。２．方…     

体外生物人工肝对无肝模型犬的支持效果

我们用悬浮高密度大量培养的肝细胞与中空纤维生物反应器及由血液透析仪改装的辅助循环装置共同构成一种体外生物人工肝支持系统（ＥＢＬＳＳ），对无肝模型犬进行人工肝支持实验，以期推动我国生物人工肝的研究，为肝衰竭的治疗开辟新的途径。一、材料与方法１．ＥＢＬＳ...     

微囊肝细胞血液灌流治疗大鼠暴发性肝衰竭的实验研究

作为暴发性肝衰竭（ｆａｌｍｉｎａｎｔｈｅｐａｔｉｃｆａｉｌｕｒｅ，ＦＨＦ）的一种治疗手段，人工肝辅助装置正在不断的发展，但至今尚无一种理想的人工肝［１］。我们在微囊肝细胞同种移植成功治疗ＦＨＦ大鼠模型的基础上［２］，建立起一种新型人工肝即微囊肝细胞血液灌流。一、材料和方法１．ＦＨＦ大鼠动物模型应用健康雄性ＳＤ大鼠，１０％Ｄ氨基半乳糖溶液一次腹腔内注射，剂量：１２００ｍｇ／ｋｇ。２．采用改进的Ｓｅｇｌｅｎ原位胶原酶（Ⅳ型）灌注法，经门静脉，腹主动脉双重灌洗分离新生雄性乳猪肝细胞。３．微囊肝细胞…     

经皮,经肝放置EMS治疗恶性胆道狭窄

作者以经皮，经肝介入法放置胆道ＥＭＳ（ＥｘｐａｎｄａｂｌｅＭｅｔａｌｌｉｃＳｔｅｎｅｔｓ）成功地治疗６例胆道狭窄病人（恶性５例，良性１例），共放置ＥＭＳ８枚（Ｗａｌｌｓｔｅｎｔ２枚，Ｇ－ＲＺ－ｓｔｅｎｔ５枚，改良了Ｚ－ｓｔｅｎｔ２枚）首次放置ＥＭＳ技术成功率７５％，发生支错位２例次，发生错位的病人均经追加ＥＭＳ得以纠正，最终效果良好，随访５例恶性狭窄病人存活１－７个月，退黄效果满意，１例良性狭窄病     

肝细胞性肝癌P53、Bcl-2蛋白表达及其临床意义

应用ｓｐ免疫组织化学方法研究Ｐ５３、Ｂｃｌ２蛋白在肝细胞性肝癌中的表达,结合病理及临床指标探讨其临床意义。结果报道如下。材料与方法１．材料：１９９１年至１９９３年肝切除的原发性肝细胞性肝癌标本７６例,其中男５８例,平均年龄（４４－５±１２－８）岁,女１８例,平均年龄（４２－３±１０－６）岁,男∶女之比为３－２∶１。取肝破裂、肝海绵状血管瘤切除的肝组织作正常对照,所有标本均经１０％中性甲醛固定,常规石蜡包埋切片,ＨＥ染色,常规病理诊断。２．试剂：ｐ５３、ｂｃｌ２单克隆抗体均为Ｄａｋｏ公司产品…     

血清糖基化终产物水平与小鼠糖尿病肾病的关系

我们分别采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和流动注射分析法测定了糖尿病小鼠血清总糖基化终产物（ＡＧＥｓ）和ＡＧＥ－肽（ＡＧＥ－ｐｅｐｔｉｄｅ,ＡＧＥ－Ｐ）水平,并分析了其与肾功能、尿蛋白及尿微白蛋白排泄之间的关系。 一、材料与方法 １．试剂：牛血清白蛋白（ＢＳＡ,ＢＭ产品）,人血清白蛋白（ＨＳＡ）、四氧嘧啶为Ｓｉｇｍａ产品,生物素化羊抗兔ＩｇＧ、链霉亲和素－ＨＲＰ系Ｖｅｃｔｏｒ产品。 ２．仪器及器材： Ｍｏｄｅｌ ５５０酶标仪（美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）,带荧光检测器的高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ,日本岛…     

晚期糖基化终产物受体介导AGE—β2微球蛋白与成人纤维细胞的结合

目的 探讨被晚期糖基化终产物修饰的β２微球蛋白（ＡＧＥｓ－β２Ｍ）与人类成纤维细胞的相互关系，方法 用去垢剂提取人工纤维细胞系（ＨＳＦｓ）膜成份。用免疫印迹法和免疫荧光法鉴定细胞ＡＧＥ受体（ＲＡＧＥ）。用放射性配体结合法观察了ＡＧＥ－β２Ｍ与ＨＳＦｓ相互关系。结果 ＨＳＦｓ膜表面表达ＲＡＧＥ。ＡＧＥ－β２Ｍ能以特异，剂量依赖的方式与ＨＳＦｓ结合（亲和常数（Ｋｄ）≈８６．５ｍｍｏｌ／Ｌ）这一过程可被     

内皮素在大鼠系膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的 研究内皮素－１（ＥＴ－１）在系膜增生性肾小球肾炎（ＭｓＰＧＮ）模型中的表达。方法 以小鼠抗大鼠Ｔｈｙ１．１单克隆抗体单次尾静脉注射诱导的大鼠ＭｓＰＧＮ模型,,病理观察分析该模型的系膜细胞和系膜基质增生;Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析肾小有内此素（ｐｐＥＴ－１）ｍＲＮＡ表达水平;放射免疫分析（ＲＩＡ）测定肾小球ＥＴ－１蛋白水平。结果 在大鼠ＭｓＰＧＮ模型中,第２ｄ系膜细胞溶解消失,第４ｄ系膜细胞增生