游离猪肝细胞的大量制备

因供肝缺乏,需人工肝的支持,以桥接肝移植。人工肝脏的研究已从非生物型发展到生物型。目前研制的生物型人工肝生物成分多用来源丰富、价格低廉的猪肝细胞。为适应生物型人工肝的临床应用,本研究参照和改良Ｎａｒｕｓｅ方法［２］,大量制备了高活率的游离猪肝细胞,报道如下。材料与方法１．材料①杂种猪,雌雄不限,体重１２～１５ｋｇ。②Ⅳ型胶原酶（Ｓｉｇｍａ产品）、ＭＥＭ、ＷＥＭ（Ｇｉｂｉｃｏ产品）。③氯胺酮、安定、肝素、生理盐水均为药用规格。④实验用水为三蒸水。２．试剂的制备（１）灌注液（ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｂｕ…     

微载体培养L02人肝细胞应用于生物人工肝的初步研究

Ｌ0 2人肝细胞株组织学来源为人正常肝组织 ,具备一定正常肝细胞的生物功能。我们将高密度微载体培养的Ｌ0 2人肝细胞聚集体加入中空纤维生物反应器 ,构建简易体外生物人工肝装置并进行初步的应用研究。一、材料与方法1.材料 :Ｌ0 2人肝细胞株购于中国科学院上海细胞生物学研究所 ;Ｃｙｔｏｄｅｘ3微载体为Ｐｈａｒｍａｓｉａ公司产品 ;聚羟乙基异丁烯酸 (Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ )及ＤＭＥＭ、ＨａｍｓＦ12培养基均为Ｓｉｇｍａ公司产品。2 .Ｌ0 2人肝细胞的微载体培养 :( 1)取 1.4ｇＣｙｔｏｄｅｘ 3,水化处理[1] ;( 2 ) 12 %Ｐｏｌｙ ＨＥＭＡ…     

腹腔镜胆囊切除术并发肝外胆管损伤的防治

腹腔镜胆囊切除术（简称ＬＣ）降低肝外胆管损伤率是腹腔镜外科医师值得重视的问题。Ｖｅｃｃｈｉｏ［１］于１９９８年综合美国４０篇有关论文１１４００５例ＬＣ胆管损伤率０．５％。国内刘国礼［２］于１９９８年调查了１８个省市、自治区的１８７所医院１０５１８８例ＬＣ,胆管损伤率０．１９％,我院从１９９１年９月－１９９９年１月共施行ＬＣ５６８０例,胆管损伤９例,损伤率０．１５％,现报告如下。１　临床资料１．１　一般资料本组９例,男３例、女６例,年龄３８～６２岁,胆囊结石８例,胆囊息肉１例,术中发现３例,术后发…     

体外生物人工肝对无肝模型犬的支持效果

我们用悬浮高密度大量培养的肝细胞与中空纤维生物反应器及由血液透析仪改装的辅助循环装置共同构成一种体外生物人工肝支持系统（ＥＢＬＳＳ），对无肝模型犬进行人工肝支持实验，以期推动我国生物人工肝的研究，为肝衰竭的治疗开辟新的途径。一、材料与方法１．ＥＢＬＳ...     

探讨并改进Cockcroft-Gault公式的有效性

肾小球滤过率（ＧＦＲ）的快速测定,对于临床判断肾功能和依据肾功能指导药物使用具有实际意义。根据Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ－Ｇａｕｌｔ公式［１］由血肌酐（Ｓｃｒ）计算肌面清除率（Ｃｃｒ）,进而由Ｃｃｒ估计ＧＦＲ是目前最常用的方法。本研究中,我们主要探讨和改进Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ－Ｇａｕｌｔ公式在南方汉族慢性肾脏疾病患者中运用的有效性。 一、材料和方法 １．对象：南方汉族慢性肾脏疾病患者９６例,年龄１８～８６岁,平均（５７．７±１６．９）岁;其中男性４９例,女性４７例,Ｓｃｒ４７～７０４ μｍｏｌ／Ｌ,平均值为…     

肝细胞癌经皮穿刺肝动脉化疗栓塞缩小后切除及疗效分析

作者为探讨不能切除的肝细胞癌经肝动脉化疗栓塞（ＴＡＣＥ）缩小后行肿瘤切除的疗效,总结了５９例肝细胞癌患者的经验。本组患者首次ＴＡＣＥ前肿瘤直径５．６～２０．０ｃｍ,平均９．４３ｃｍ,每人接受ＴＡＣＥ１～６次,平均２．９次,手术前肿瘤直径缩小至３．２９ｃｍ,末次ＴＡＣＥ距手术时间１～７个月,平均２．５个月。ＡＦＰ阳性３５例,ＴＡＣＥ治疗后１３例转为正常。５９例患者中行肝段、联合肝段或肝部分切除５６例,左三叶切除２例,左半肝切除１例。切除的肿瘤各有４０％～１００％坏死,其中９例１００％坏死。ＴＡＣＥ后１３例ＡＦＰ转为正常的患者中,９例镜下仍见癌细胞。５９例患者１、３、５年生存率分别为７９．７％、６５％和５６％。作者认为ＴＡＣＥ可为一期不能切除的肝癌患者争取手术切除的机会,且可获得满意疗效。     

球体培养人、猪肝细胞：一种理想的体外生物人工肝模式

体外培养的肝细胞有多种临床用途〔１〕。其中将肝细胞置入特殊的生物反应器,构建生物人工肝（ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ,ＢＡＬ）支持系统有重要的临床价值。有研究报道,细胞聚集成多细胞的球体（ｓｐｈｅｒｉｏｄ）更类似于体内条件;并且可在有限的容积内高密度地培养肝细胞〔２〕。因此,我们实验构建人、猪肝细胞球体,并比较肝细胞普通培养与球体培养蛋白分泌功能的变化。１．材料和方法：试剂：Ｄｕｂｅｃｃｏ′ｓ磷酸盐缓冲液;Ｈａｎｋ′ｓ平衡盐;ＩＴＳ（胰岛素,运铁蛋白和硒,ｉｎｓｕｌｉｎ,ｔｒａｎｓｆｅｒ…     

微囊肝细胞血液灌流治疗大鼠暴发性肝衰竭的实验研究

作为暴发性肝衰竭（ｆａｌｍｉｎａｎｔｈｅｐａｔｉｃｆａｉｌｕｒｅ，ＦＨＦ）的一种治疗手段，人工肝辅助装置正在不断的发展，但至今尚无一种理想的人工肝［１］。我们在微囊肝细胞同种移植成功治疗ＦＨＦ大鼠模型的基础上［２］，建立起一种新型人工肝即微囊肝细胞血液灌流。一、材料和方法１．ＦＨＦ大鼠动物模型应用健康雄性ＳＤ大鼠，１０％Ｄ氨基半乳糖溶液一次腹腔内注射，剂量：１２００ｍｇ／ｋｇ。２．采用改进的Ｓｅｇｌｅｎ原位胶原酶（Ⅳ型）灌注法，经门静脉，腹主动脉双重灌洗分离新生雄性乳猪肝细胞。３．微囊肝细胞…     

Thy1肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂p27的变化

有报道细胞增生与否受细胞周期调节蛋白（ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＣＲＰ）控制［１］。其中周期素激酶抑制剂ｐ２７是一种十分重要的ＣＣＲＰ,在血管平滑肌等非肾细胞增生中起重要作用［２］。我们通过观察Ｔｈｙ１肾炎大鼠肾小球ｐ２７水平的变化,为防治系膜增生性肾炎提供理论依据。 一、材料和方法 １．Ｔｈｙｌ肾炎模型的制备及分组：１８０～２００ｇ雄性ＳＤ大鼠尾静脉注射兔抗大鼠胸腺细胞抗体（０．５ｍｌ／只）,于注射后第１ｄ查尿蛋白,如尿蛋白＋＋＋则判定ｔｈｙ１肾炎模型建立。将ｔ…     

生物人工肝人肝细胞系进展

大多数生物人工肝(bioartificial liver，BAL)装置以原代猪肝细胞作为生物成分，然而，由于异种移植相关危险性，猪肝细胞终究不是最佳选择。人肝细胞系无论哪方面都具有比动物肝细胞要好的特性，所以是应用于BAL的候选细胞。肿瘤来源细胞系C3A和HepG2具有多种肝细胞功能，