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相似文献
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1.
目的分析临床分离的产ESBLs大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性,并了解其修饰酶基因携带状况及耐药机制。方法采用纸片扩散法测定临床分离的32株产ESBLs大肠埃希菌对5种氨基糖苷类抗生素的耐药性,用CLSI推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株,采用PCR法检测氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,8aC(6’)-Ⅰ ad,aac(6')-Ⅰ b,aac(6')-Ⅱ,ant(3")-Ⅰ,ant(2")-Ⅰ。提取携带单一修饰酶基因临床菌株的质粒并转化入宿主菌BL21中,比较临床分离菌与转化菌对5种氨基糖苷类药物敏感性及产ESBLs情况的区别。结果32株产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素耐药率最高(84.3%),对阿米卡星耐药率最低(25%)。检出氯基糖苷粪修饰酶基因aac(6')-Ⅱ,ant(3")-Ⅰ,ant(2")-Ⅰ,阳性分别为22株(68.8%),9株(28.1%),5株(15.6%),1株(3.1%)。质粒转化菌产ESBLs且同时检出原携带基因,但耐药表型有区别。结论临床分离的产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素耐药率最高,对阿米卡星敏感性最高,氨基糖苷类耐药与氨基糖苷类修饰酶基因表达有关,临床应对此类菌株引起重视。  相似文献   

2.
目的明确广州地区临床分离的耐药绿脓假单胞菌各种β内酰胺酶编码基因、外膜通道蛋白oprD2基因、氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法采用MicroScan微生物鉴定系统微量肉汤法测定临床分离的18株绿脓假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析β内酰胺酶基因型、氨基糖苷类修饰酶基因型及外膜通道蛋白oprD2基因。结果该18株菌呈现多重耐药,对氨基糖苷类抗生素的耐药率在50.0%-72.2%之间,对其他抗绿脓假单胞菌药物耐药率在16.7%-83.3%之间;14株(77.8%)检出氨基糖苷类修饰酶基因,aac(6),-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ、ant(3”).Ⅰ、aac(60')Ⅰ、ant(2”)-Ⅰ、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aph(3’)-Ⅵ和aac(3)-Ⅳ基因的阳性率分别为50.0%、38.9%、38.9%、33.3%、27.8%、11.1%、5.6%、5.6%和0;13株(72.2%)检出β内酰胺酶编码基因,TEM、DHA、IMP和OXA基因阳性率分别为55.6%、27.8%、22.2%和11.1%,SHV、PER、VER、GES和VIM基因阴性,3株外膜通道蛋白oprD2基因缺失。结论广州地区临床分离的绿脓假单胞菌多重耐药严重,氨基糖苷类修饰酶基因和β内酰胺酶编码基因携带率很高。  相似文献   

3.
大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性及耐药基因检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:了解大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药情况与耐药基因携带情况。方法:使用K-B法检测大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性,同时用PCR技术扩增氨基糖苷类抗生素的耐药基因以明确其基因型。结果:40株大肠埃希菌中耐氨基糖苷类抗生素菌株32株,耐药率为80.0%(32/40),其中aac(3)-Ⅰ 2株,占6.3%(2/32),aac(3)-Ⅱ 28株,占87.5%(28/32),aac(6′)-Ⅰ 12株,占37.5%(12/32),aac(6′)-Ⅱ 8株,占25%(8/32),ant(2″)-Ⅰ 4株,占18.8%(6/32),ant(3″)-Ⅰ 9株,占28.1%(9/32)。结论:耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌比较普遍,氨基糖苷类耐药基因以aac(3)-Ⅱ和aac(6′)-Ⅰ为主。  相似文献   

4.
目的对来自临床腹泻患者大肠埃希菌的第Ⅰ类整合子分布及其耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用聚合酶链反应(PCR)方法检测第Ⅰ类整合酶基因intⅠ阳性菌株,并对其整合的耐药基因进行测序及序列分析。结果在40株大肠埃希菌中有28株(70%)第Ⅰ类整合酶基因阳性。耐药基因盒扩增结果,13株菌得到1664bp的扩增产物,10株得到1586bp的产物,3株得到1009bp的产物,2株得到1009bp和1586bp两种不同产物。序列分析结果表明,1664bp携带aadA5和dfr17,1586bp携带aadA1和dhfrⅠ,均为对氨基糖苷类抗生素壮观霉素、链霉素和磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒;1009bp为aadA23b,为对氨基糖苷类抗生素壮观霉素、链霉素产生耐药的基因盒。结论测出的28株第Ⅰ类整合子阳性菌株携带耐氨基糖苷类抗生素的基因,应从基因水平上对细菌耐药及其传播进行监测。  相似文献   

5.
目的了解临床分离的54株肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱,分析氨基糖苷乙酰转移酶基因的分布规律及其与氨基糖苷类抗生素耐药的相关性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用MIC法测定临床分离的54株肺炎克雷伯菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,应用Whonet5.4软件统计耐药率,通过聚合酶链反应进行氨基糖苷乙酰转移酶基因研究。结果 54株肺炎克雷伯菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、68.5%、66.7%、61.1%、22.2%;测试菌株中存在aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(3)-Ⅳ、aac(3)-Ⅰ4种耐药基因,aac(3)-Ⅱ和aac(6′)-Ⅰ是主要的产酶基因,检出率分别为78.5%和65.0%。结论产生氨基糖苷类钝化酶是临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素主要的耐药机制,临床分离菌的耐药表型和钝化酶基因关系较为复杂,可能与耐药菌中存在多钟耐药基因有关,临床实验室应加强检测,指导临床合理使用抗菌药物。  相似文献   

6.
目的探讨KPN多重耐药性及AMEs基因携带状况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法采用K-B纸片法进行药敏试验,筛选多重耐药KPN,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,再用PCR检测AMEs基因并序列分析,结果61株多重耐药KPN对IMP无耐药,氨基糖苷类抗菌药物耐药率为60.7-100%,其他抗菌药物耐药率为44.3-100%;产ESBLs、AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶检出率分别为31.1%、14.8%、45.9%,有8.2%均未检出;AMEs基因阳性检出率86.9%,其中aac(3)-I、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-I b、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-I和ant(2″)-I阳性检出率分别为13.1%、60.7%、55.7%、11.5%、6.6%和26.2%,结论KPN多重耐药严重,临床可选择的药物有限,产ESBLs、AmpC酶和携带AMEs基因较高,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗菌药物,以便减少耐药菌株传播流行。  相似文献   

7.
目的探讨KPN多重耐药性及AMEs基因携带状况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法采用K-B纸片法进行药敏试验,筛选多重耐药KPN,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,再用PCR检测AMEs基因并序列分析,结果61株多重耐药KPN对IMP无耐药,氨基糖苷类抗菌药物耐药率为60.7-100%,其他抗菌药物耐药率为44.3-100%;产ESBLs、AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶检出率分别为31.1%、14.8%、45.9%,有8.2%均未检出;AMEs基因阳性检出率86.9%,其中aac(3)-I、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-I b、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-I和ant(2″)-I阳性检出率分别为13.1%、60.7%、55.7%、11.5%、6.6%和26.2%,结论KPN多重耐药严重,临床可选择的药物有限,产ESBLs、AmpC酶和携带AMEs基因较高,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗菌药物,以便减少耐药菌株传播流行。  相似文献   

8.
目的调查广州地区临床分离产AmpC酶肺炎克雷伯菌对抗菌药物耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因分布。方法采用纸片扩散法(即K-B法)测定51株产AmpC肺炎克雷伯菌对15种抗菌药物的耐药情况,聚合酶链反应(PCR)分析ampC和氨基糖苛修饰酶基因型。结果51株产AmpC肺炎克雷伯菌呈现多重耐药,对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为39.2%、66.7%、58.8%和43.1%,除亚胺培南外其余抗生素耐药率在47.0%-100%;41株(80.3%)检出氨基糖苷修饰酶基因。结论临床分离的产AmpC酶肺炎克雷伯菌多重耐药严重,氨基糖苷修饰酶基因携带率很高。  相似文献   

9.
目的调查广州地区临床分离产AmpC酶肺炎克雷伯菌对抗菌药物耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因分布。方法采用纸片扩散法(即K-B法)测定51株产AmpC肺炎克雷伯菌对15种抗菌药物的耐药情况,聚合酶链反应(PCR)分析ampC和氨基糖苛修饰酶基因型。结果51株产AmpC肺炎克雷伯菌呈现多重耐药,对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为39.2%、66.7%、58.8%和43.1%,除亚胺培南外其余抗生素耐药率在47.0%-100%;41株(80.3%)检出氨基糖苷修饰酶基因。结论临床分离的产AmpC酶肺炎克雷伯菌多重耐药严重,氨基糖苷修饰酶基因携带率很高。  相似文献   

10.
肺炎克雷伯菌耐药基因及菌株聚类分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌耐药相关基因存在状况和菌株间的亲缘性。方法细菌鉴定和药敏试验用Phoe-nixTM-100系统检测。PCR扩增β-内酰胺酶、氨基糖苷类药物修饰酶、氯己定-磺胺等22种耐药基因,并用DNA测序证实。结果53株肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感,而对其余9种抗生素的耐药率均高于60%。53株肺炎克雷菌中检出TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1群、LEN、OKP和DHA8种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为75.5%、22.6%、18.9%、7.5%、11.3%、5.7%、3.8%和41.5%。aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb和ant(3″)-Ⅰ的阳性率分别为90.6%、49.1%和24.5%。而氯己定-磺胺(qacE△1-sul1)基因的阳性率达90.6%。18株肺炎克雷伯菌聚类分析显示有2株菌为同一克隆株,其耐药表型基本一致。结论常州地区肺炎克雷伯菌已携带多种β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶等耐药基因,同一克隆株易传播医院内感染。  相似文献   

11.
目的 探讨陕西省人民医院重症监护室非发酵菌的感染分布及其临床治疗策略.方法 回顾性分析陕西省人民医院201 2年1月~2013年12月期间重症监护室送检的3 850份标本经普通培养分离鉴定的非发酵菌,以MIC法进行药敏试验分析抗生素的耐药性.结果 3 850份标本分离出1 872株病原菌,其中革兰阳性细菌479株(占25.6%),革兰阴性细菌1 393株(占74.4%).在革兰阴性细菌中有732株(占52.5%)为非发酵菌,其中铜绿假单胞菌385株(占52.6%),鲍曼不动杆菌209株(占28.6%),嗜麦芽窄食单胞菌为114株(占15.6%),其余非发酵菌24株(占3.2%).非发酵菌对不同抗菌药物呈多重耐药性,其中铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为31.7%和14.3%;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、替加环素的耐药率为25.8%和1.5%,对其它抗生素如庆大霉素、哌拉西林、亚胺培南和美罗培南等的耐药率>60%;嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素、复方新诺明的耐药率为1.0%和10.5%.在治疗非发酵菌感染时依据细菌的药敏结果单药治疗或联合治疗,总体治愈率>80%,很大程度地降低了多重耐药菌在重症监护室的传播.结论 重症监护室非发酵菌的耐药性日趋严重,临床的抗感染治疗需要依据微生物室的敏感性报告;合理使用抗生素,以降低院内感染发生率和非发酵菌耐药率.  相似文献   

12.
目的分析安图医院尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性及耐药基因,为临床用药提供参考。方法选取尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌(23株)和屎肠球菌(18株),采用API进行菌种鉴定,纸片扩散法进行体外药物敏感性试验,并采用聚合酶链反应(PCR)对其耐药基因进行检测。结果 23株粪肠球菌中tetM、ermB、aac(6')/aph(2')、ant(6)-Ⅰ和aph(3')-Ⅲ基因阳性检出率分别为65.2%、82.6%、100.0%、100.0%和100.0%;18株屎肠球菌中tetM、ermB、aac(6')/aph(2')、ant(6)-Ⅰ和aph(3')-Ⅲ基因阳性检出率分别为55.5%、55.5%、100.0%、94.4%和100.0%。粪肠球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的耐药率50.0%,屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的耐药率为100.0%。结论临床分离的肠球菌属耐药相关基因携带率很高,肠球菌属对多种抗菌药物耐药率较高。  相似文献   

13.
目的 了解新疆乌苏地区常见病原菌的分布及耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 回顾分析2011~2013年间临床分离的1 961株病原菌的分布及耐药情况.结果 病原菌的来源以伤口分泌物、尿液和痰液为主,分布以革兰阴性杆菌为主,占57.07%,革兰阳性球菌和真菌各占40.74%和2.1s%.主要的病原菌是大肠埃希菌、凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和肠球菌等.大多数病原菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、阿米卡星敏感率高(敏感率>70%),对青霉素、红霉素、克林霉素、氨苄西林和一、二代头孢菌素耐药率高(耐药率>70%),还发现了部分泛耐药菌.肠杆菌属对三代头孢菌素类、喹诺酮类的耐药率低于非发酵菌属,酶抑制剂能明显降低革兰阴性杆菌的耐药率,未发现万古霉素耐药菌株.葡萄球菌耐甲氧西林菌株、肠杆菌科产超广谱β内酰胺酶(ESBL)菌株的检出率呈逐年上升趋势.结论 细菌的耐药状况形势严峻,临床医师应结合病原菌耐药监测结果,合理、有效、正确的使用抗菌药物,避免耐药菌株的产生.  相似文献   

14.
由然  孙立颖 《检验医学》2010,25(5):341-344
目的了解耐阿米卡星(AMK)铜绿假单胞菌(Pa)的氨基糖苷类修饰酶基因和氨基糖苷耐药基因的存在情况及其基因型。方法对临床分离的72株多重耐药Pa(其中对AMK耐药Pa组和对AMK敏感Pa组各36株)分别用聚合酶链反应(PCR)测定9种主要的氨基糖苷类修饰酶基因和2种氨基糖苷耐药基因,用基因外重复回文序列(REP)-PCR进行基因型研究。结果在分组研究中AMK耐药Pa组表现为aac(6′)-Ⅰ和aac(3)-Ⅱ基因同时阳性的占42.4%,aac(6′)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ基因同时阳性的占36.4%,是耐药组的主要修饰酶基因;AMK敏感Pa组表现为aac(6′)-Ⅰ基因阳性的占50.0%,aac(3)-Ⅱ基因阳性的占33.2%,是敏感组的主要修饰酶基因。2种氨基糖苷耐药基因(RmtA和RmtD)均为阴性。REP-PCR显示耐药菌株可分为A~G 7型,其中AMK耐药Pa组的主要分型为F型(其中尤以F1型为多);AMK敏感Pa组以E型为多见。结论通过2种或多种氨基糖苷类修饰酶同时作用于AMK是Pa对AMK耐药的重要途径之一。  相似文献   

15.
目的 探讨医院内鲍曼不动杆菌分离菌株氨基糖苷类耐药基因存在情况以及药物敏感性,指导临床合理应用抗生素.方法 采用法国梅里埃VITEK2 COMPACT全自动微生物分析仪对临床标本进行细菌鉴定和药物敏感试验.聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,aac(6′)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅱ四种氨基糖苷类修饰酶耐药基因.结果 共分离鉴定出36株鲍曼不动杆菌,药敏结果显示分离菌株呈现多重耐药,耐药性最低为多粘菌素,未检测到耐药菌株;其次为亚胺培南,耐药率为55%;其余抗生素耐药率均在86%以上.耐药基因检测显示aac(3)-Ⅰ阳性11株,占30.6 %,aac(3)-Ⅱ阳性 12 株,占33.3 %,aac(6′)-Ⅰ阳性15株,占41.7 %,aac(6′)-Ⅱ未检测出.常见的基因组合为aac(3)-Ⅰ与aac(6′)-Ⅰ同时阳性,占36.4%.结论 鲍曼不动杆菌临床分离株耐药现象严重,aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ与aac(6′)-Ⅰ耐药基因携带率较高.  相似文献   

16.
Stenotrophomonas maltophilia is an emerging nosocomial pathogen that displays high-level intrinsic resistance to multiple antibiotics including aminoglycosides. A gene [aac(6')-Iz] encoding an aminoglycoside-modifying enzyme, AAC(6')-Iz acetyltransferase, was recently cloned and sequenced in S. maltophilia, but its importance with respect to aminoglycoside resistance in this organism was not determined. Using a homologous gene replacement approach, mutants carrying unmarked chromosomal deletions of the aac(6')-Iz gene were constructed in wild-type and in vitro-selected aminoglycoside-resistant S. maltophilia. AAC(6')-Iz-deficient mutants derived from both wild-type and aminoglycoside-resistant strains displayed an increase in susceptibility to amikacin, netilmicin, sisomicin and tobramycin (4- to 32-fold decrease in MICs), known substrates for AAC(6')-I enzymes. The cloned aac(6')-Iz gene restored the aminoglycoside resistance of the aac(6')-Iz mutants, and could also confer aminoglycoside resistance upon Escherichia coli. To assess the significance of the aac(6')-Iz gene with respect to the aminoglycoside resistance of clinical strains, its distribution was assessed in 65 clinical isolates from two hospitals. Using PCR, Southern hybridization, RT-PCR and/or nucleotide sequencing, the aac(6')-Iz gene was identified in 57% of the isolates. Susceptibility tests indicated a good correlation between the presence of the aac(6')-Iz gene and the resistance to tobramycin, netilmicin and sisomicin in these strains. These results indicate that the aac(6')-Iz gene is an important contributor to aminoglycoside resistance in clinical strains of S. maltophilia, particularly to tobramycin.  相似文献   

17.
目的 分析医院感染肺炎克雷伯杆菌的临床分布及耐药情况,为减少院内肺炎克雷伯菌感染提供理论依据.方法 对2011年3月至2012年2月我院临床分离的101株肺炎克雷伯杆菌标本来源临床科室分布及对17种常用抗菌药物的耐药率进行统计;并对菌株进行超广谱β内酰胺酶检测;运用PCR法检测KPC、IMP、VIM及NDM-1耐药基因并测序.结果 101株肺炎克雷伯杆菌标本,来自痰87株,占86.14%;临床科室分布以高干科、神经内科为主各40株,各占39.60%;药敏结果显示我院肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南最敏感,敏感率为92.08%;其次是头孢替坦和头孢吡肟,敏感率分别为85.15%及80.20%;产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌70株,检出率为69.31%;耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌6株,其中4株检出KPC-2基因,未检出IMP、VIM及NDM-1耐药基因型.结论 在我院,产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌检出率较高;肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类抗生素可能与携带KPC-2有关,合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生.  相似文献   

18.
目的探讨临床分离的纸片扩散法药物敏感性试验对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的肠杆菌科细菌相关携带基因及药物诱导对耐药基因rnRNA表达量的影响。方法收集纸片扩散法药物敏感性试验对AMK呈双圈耐药的大肠埃希菌(编号Ec085)和肺炎克雷伯菌(编号Kpn110)各1株;纸片诱导法探讨耐药表型的改变;聚合酶链反应(PCR)扩增氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及其可变区以及16SrRNA甲基化酶基㈥;逆转录PCR分析armA基因在AMK诱导前后菌株中的表达情况;接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果Ec085和Kpn110分别在第10代和第16代诱导后转变为双圈消失;2株菌均扩增出I类整合子基因,可变区分别携带aadA5-dfra17和aadA2-dfrA12基因盒,未扩增出Ⅱ和Ⅲ类整合子基因;Ec085扩增出aac(6)-I基因,而Kpnll0扩增出ant(3”)-I基因;Ec085和Kpn110均扩增出armA基因,基因测序未发现突变,未检出rratB基因;经AMK诱导后菌株armA基因mRNA表达量明显上升;接合试验未获成功。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯茵对AMK呈双圈耐药可能与16SrRNA甲基化酶armA基因的诱导表达相关。  相似文献   

19.
目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因的存在情况。方法收集2012年8—11月江苏大学附属医院和镇江市第一人民医院住院患者的临床标本中分离到的多重耐药鲍曼不动杆菌菌株36株。应用KB纸片扩散法检测多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性、应用PCR检测细菌对氨基糖苷类药物的耐药基因。结果36株多重耐药鲍曼不动杆菌对头孢哌酮一舒巴坦有较高的敏感率(33.3%),对其他抗菌药物的敏感率均较低(20.0%)。36株多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因aac(3)-I、aac(6’)Ib、aph(3’)-I和16SrRNA甲基化酶基因armA的阳性率分别为72.2%(26株)、72.2%(26株)、80.6%(29株)和80.6%(29株)。结论本组多重耐药鲍曼不动杆菌多耐药情况比较严重,其对氨基糖苷类药物耐药与氨基糖苷类耐药基因的存在密切相关。  相似文献   

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