多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药性分析

目的分析邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌菌株DNA同源性与耐药性,了解多重耐药鲍曼不动杆菌在该院的流行状况。方法DNA同源性分析：收集该院2009年1—6月份临床送检标本分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌,采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法;药敏试验：采用VITEK一2细菌鉴定仪器法与KB法确定药敏结果。结果DNA同源性分析结果：40株多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出4种电泳条带数目位置完全相同的克隆株,其中A型11株,B型11株,C型9株,D型9株。菌株分布在该院外科、内科、ICU、新生儿科四个病区,10个科室。普通病室与ICU病室均存在A、B、c、D4种型别克隆株感染。药敏试验结果：头孢哌酮／舒巴坦耐药率仅为5％,4种克隆株均对头孢哌酮／舒巴坦较敏感;阿米卡星耐药率为17．5％,A、B、C型克隆株对阿米卡星较敏感,但D型克隆株对阿米卡星的敏感性明显降低;4种克隆株对亚胺培南耐药率已达75．0％,显著高于文献报道的耐药率。4种克隆株对庆大霉素、氨苄西林／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星7种抗生素耐药率均达60％以上,较多克隆株的耐药率已达100％。结论A、B、C、D4种克隆株在该院未见明显集中流行趋势,呈散在分布特点。4种克隆株检出率差异无统计学意义。     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药基因研究

目的研究邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征与相关耐药基因流行情况。方法对临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌经采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法同源性分析获得的A、B、C、D 4种克隆株,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析耐药基因类型。结果本院多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,未检出SHV、DHA、OXA-24、GES、IMP、VIM耐药基因。TEM-1检出率为100%,OXA-23(45%),PER-1(10%),其中2株菌同时检测到TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,分别为A型和C型各1株,另2株菌同时检测到TEM-1和PER-1两种耐药基因,分别为C型和D型各1株,有16株菌同时检测到TEM-1和OXA-23两种耐药基因。结论携带TEM-1和OXA-23耐药基因多重耐药鲍曼不动杆菌是本院主要流行菌株,且存在克隆流行。携带TEM-1、OXA-23、PER-1三种耐药基因的菌株和携带TEM-1、PER-1两种耐药基因的菌株在临床分离株中已不鲜见。临床应加强鲍曼不动杆菌医院感染的控制,防止耐药菌株在医院暴发流行。     

应用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应对鲍曼不动杆菌进行同源性分析

目的了解临床不同来源的鲍曼不动杆菌是否存在同源性,判断其是否存在耐药菌株的克隆播散,追踪其在医院交叉感染的可能途径,以便有效防控鲍曼不动杆菌在医院中传播。方法收集2012年10月至2013年6月临床分离的73株多重耐药鲍曼不动杆菌,用肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)对菌株进行同源性分析。结果 73株多重耐药鲍曼不动杆菌经ERIC-PCR分型分为8个基因型,分别用A、B、C、D、E、F、G、H表示,其中A型31株,B型15株,C型12株,D型8株,E型3株,F型2株,G和H型各为1株。A型为主要的流行株,分布在多个不同的科室。重症监护室(intensive care unit,ICU)分离的菌株存在6个基因型;骨科系统病区存在4个基因型;急诊科有5个基因型;内科发现有6个基因型;外科发现3个基因型。ICU病房环境物体表面共分离出4株鲍曼不动杆菌,其中9号和10号菌株来自于不同患者的床旁,12号和13号来自于护理站电脑键盘。结论临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌存在多个基因型。多重耐药鲍曼不动杆菌存在时间和空间的聚集性。     

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究

目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4．7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

多重耐药鲍曼不动杆菌RND外排泵基因检测及流行病学分析

目的了解宁波地区鲍曼不动杆菌的耐药率及RND外排泵基因的携带情况,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法采用琼脂稀释法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),PCR检测9种RND外排泵基因的携带情况,脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分析多重耐药鲍曼不动杆菌的同源性。结果 30株鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素普遍耐药,对美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率相对较低;adeABC、ade IJK、ade FGH外排泵基因分布广泛,在敏感菌株中的存在率也很高;PFGE分型结果显示,14株多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)主要以流行克隆A为主。结论临床分离鲍曼不动杆菌耐药情况严峻,克隆播散是MDRAB的主要传播方式,携带ade B、ade J等多种外排泵基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的重要原因。     

ICU多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染的同源性分析 FREE

目的对某院重症监护室（ICU）流行的多重耐药鲍曼不动杆菌感染进行同源性分析。方法收集该ICU鲍曼不动杆菌感染流行期间住院患者标本中分离的9株以及环境中分离的24株鲍曼不动杆菌,采用基因外重复回文序列聚合酶链反应（REP PCR）技术对其进行基因分析,建立DNA指纹图谱;同时应用K B纸片扩散法进行药敏试验。结果9株临床分离的鲍曼不动杆菌共分为4个基因型,其中E1和E2型分别有4株和3株,E3和E4型各1株;环境样本分离的24株中,17株属E1型。药敏结果显示,临床分离株均为多重耐药株,环境分离株中19株为多重耐药株。结论此次ICU多重耐药鲍曼不动杆菌感染的流行主要是由E1和E2基因型在患者之间的相互传播所致,同时患者所处环境也被明显污染。     

鲍曼不动杆菌PER型超广谱β 内酰胺酶耐药基因研究

目的探讨某院产PER型超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）鲍曼不动杆菌分子流行病学特点及耐药机制。方法选取该院2009年1-5月临床分离的非重复鲍曼不动杆菌129株,采用K B纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应（PCR）扩增PER基因并测序,肠杆菌科基因间重复一致序列（ERIC） PCR进行同源性分析。结果78株鲍曼不动杆菌携带PER 1型基因,阳性率60.47%（78/129）。PER 1阳性鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为46.15%、44.87%、38.46%、10.26%和8.97%,对其余10种抗菌药物的耐药率均＞60%;PER 1阳性菌株对头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率明显高于PER 1阴性菌株（均P＜0.05）。78株PER 1阳性菌株包括7型,分别为A型（1株）、B型（1株）、C型（55株）、D型（18株）、E型（1株）、F型（1株）、G型（1株）,C和D型为主要克隆型。结论C和D型PER 1阳性鲍曼不动杆菌为该院最主要的流行株。产PER 1型ESBLs鲍曼不动杆菌呈多重耐药,米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦可作为该院鲍曼不动杆菌感染治疗的最佳选药。     

吴江地区多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因携带情况及同源性

目的了解吴江地区临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)碳青霉烯酶基因携带情况和同源性。方法收集吴江地区3所综合性医院2010年1月—2013年12月临床分离的非重复MDRAB 44株,测定其最低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应（PCR）扩增碳青霉烯酶基因OXA 51、OXA 23、OXA 24、OXA 58、IMP、TEM、SHV和GES,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果44株MDRAB主要来源标本为痰（占93.18%）,主要分布在重症监护病房（ICU）、呼吸科和神经外科,各占45.45%、27.27%和13.64%;MDRAB对米诺环素和多粘菌素B均敏感,对哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星耐药率均为100.00%,对亚胺培南和美罗培南耐药率均为97.73%。44株MDRAB均检出OXA 51、OXA 23和TEM基因,其中12株菌GES基因阳性,OXA 58和SHV基因阳性各1株,未检测到OXA 24及IMP基因;MDRAB分为A—G 7个型别,分别为19、3、9、3、1、4、5株。A型主要来源于吴江地区的两所大型综合性医院（吴江第一人民医院和盛泽医院）,吴江第一人民医院未发现B、D和E型;E型仅1株,分布在永鼎医院,其余型别散在分布。结论吴江地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药严重,基因OXA 23和TEM是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,并以A、C型为主,呈克隆性传播。     

浙江省永康地区多重耐药鲍曼不动菌的分子分型研究

目的分析永康市第一人民医院临床分离的30株多重耐药鲍曼不动杆菌的同源性分布情况及亲缘进化关系,明确永康市第一人民医院多重耐药鲍曼不动杆菌的基因分型。方法收集永康市第一人民医院临床分离的30株多重耐药鲍曼不动杆菌,利用限制性内切酶ApaI酶切进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,利用BioNumerics软件进行聚类分析反映菌株间的同源性分布情况;通过多位点序列分型(MLST)方法反映菌株间的进化关系,经过数据共享及比较,进行基因分型。结果通过PFGE技术将30株(其中3株菌无PFGE结果)多重耐药鲍曼不动杆菌分为4个脉冲群,其中脉冲群A为主要流行克隆;经MLST分析,永康市第一人民医院感染多重耐药鲍曼不动杆菌主要流行克隆为ST208,且得到一个新的序列型。结论经PFGE和MLST分析,均得到了一个主要流行克隆。永康市第一人民医院的主要流行株ST208与世界上的主要流行克隆具有高度的同源性。     

2010-2012年某院鲍曼不动杆菌耐药分析

目的：了解临床分离的鲍曼不动杆菌耐药情况。方法：收集某院门诊和住院患者临床分离的鲍曼不动杆菌146株,采用法国梅里埃ATB进行细菌鉴定及药敏分析。结果：146株鲍曼不动杆菌耐药率呈逐年增加,而且是多重耐药。结论：鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药率高,且易形成多重性耐药（泛耐药）。     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药基因研究

目的探讨岳阳市第一人民医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的分子流行病学特征,以及碳青霉烯酶基因在介导CRAB对碳青霉烯类药物耐药性形成中的作用。方法收集岳阳市第一人民医院分离的CILAB共65株,其中对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌（IRAB）38株,亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌（ISAB）27株。采用琼情稀释法检测上述细菌对15种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR扩增碳肯霉烯酶基因;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性。结果在检测的15种药物中,敏感性最高的药物为多黏蒂素B-IRAB与ISAB组除对头饱两丁、多黏菌素B耐药性较一致外,对其他抗菌药物耐药性差异均有统计学意义（P〈0．05）;改良Hodge试验阳性率为66％（43／65）,其中38株IRAB中,阳性36株,27株ISAB中,阳性4株;38侏IRAB有32株携带OXA-23基因,1SAl3组菌株中均未检测到OXA-23基因;65株菌主要分为6型,A型52株,是主要的流行克隆。结论本院存在CRAB的流行,主要为A型株。OXA-23基因的产生在介导CRAB碳青霉烯药物耐药中发挥作用。     

新生儿重症监护病房鲍曼不动杆菌耐药性监测及AmpC酶检测

目的了解深圳妇幼保健院新生儿重症监护病房（NICU）新生儿感染鲍曼不动杆菌耐药情况及其产AmpCβ酶的情况。方法收集2006年1月-2009年12月NICU新生儿临床样本分离鲍曼不动杆菌109株,采用纸片扩散法检测其对常用抗生素的耐药性,采用改良三维试验检测其是否产AmpC酶。结果 2006年1月-2009年12月NICU鲍曼不动杆菌分离率呈逐年增长趋势,产AmpC酶菌株检出率为35.8%（39/109）,产AmpC酶菌株对第三代头孢菌素耐药率为92.3%-100.0%,对亚胺培南、阿米卡星、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低为7.6%-33.0%,产AmpC酶菌株耐药率明显高于非产AmpC酶菌株。结论 NICU鲍曼不动杆菌产AmpC酶率较高,其对常用抗生素耐药率高,且呈多重耐药,应引起临床高度重视,并加强AmpC酶的检测。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的 探讨耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对临床常见抗生素的耐药性,为临床用药提供参考.方法 对某院2011年1～12月期间呼吸内科下呼吸道感染患者痰标本分离所得871株鲍曼不动杆菌对15种抗生素的药物敏感试验结果进行回顾性分析.结果 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌者有261例(29.91％),非耐亚胺培南鲍曼不动杆菌者有610例(70.09％),对15种临床常用抗生素药物耐药性:非耐亚胺培南鲍曼不动杆菌株耐药率≥90％的药物有5种,耐药率≥50％的药物有12种,耐药率＜50％的药物有3种,头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低为6.89％,氨苄西林/舒巴坦耐药率为30.66％,头孢他啶耐药率为43.61％;耐亚胺培南鲍曼不动杆菌株耐药率≥90％的药物有13种,耐药率＜90％的药物有2种,其中以头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低为29.89％,头孢他啶耐药率为59.00％.结论 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对临床多数抗生素耐药,泛耐药现象明显,仅对头孢哌酮/舒巴坦等少数药物敏感.     

青岛两所医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分析

目的了解青岛市两所医院鲍曼不动杆菌(AB)耐药情况、分布特征,碳青霉烯酶基因携带情况。方法收集两所医院临床分离的145株(A院78株,B院67株)AB进行药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶基因,肠杆菌科基因间一致重复序列(ERIC)-PCR对菌株进行同源性分析。结果 A院AB对临床常用的16种抗菌药物普遍耐药,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(3.85%),其次是米诺环素(16.67%),对其他抗菌药物耐药率均73%。B院AB对常用的23种抗菌药物普遍耐药,对米诺环素和替加环素均不耐药,对阿米卡星和左氧氟沙星的耐药率分别为23.88%、38.81%,对其他抗菌药物的耐药率均64%。两院所有菌株均携带OXA-51基因,A、B两院碳青霉烯耐药组OXA-23基因的携带率分别为86.76%(59/68),56.67%(34/60),差异有统计学意义(χ2=14.53,P0.001);A院3株菌携带OXA-58基因,B院未检出OXA-58基因。145菌株共分为8个基因型,其中A型71株和E型37株,为主要流行株;A院主要流行A型(46.15%)和E型(41.03%),B院主要流行A型(52.24%)和C型(17.91%)。结论两所医院临床分离的AB耐药情况严重,且存在医院流行,OXA型酶OXA-23、OXA-51基因在介导AB对碳青霉烯类药物耐药中发挥重要作用。     

新生儿革兰氏阴性杆菌败血症临床特点及药敏分析

目的分析新生儿革兰氏阴性杆菌败血症的临床特点、病原菌分布及药敏特点,为早期诊断和治疗提供临床依据。方法回顾性分析我院NICU2006年1月～2010年2月确诊的38例革兰氏阴性杆菌败血症临床特点、病原菌分布及耐药情况。结果临床表现的主要特征为发热、吃奶差、皮肤苍白花纹、不哭不动、黄疸、呻吟、呼吸暂停等。37例为单一菌种生长。主要病原菌为肺炎克雷伯杆菌21株（55.26%）,鲍曼不动杆菌6株（15.78%）,大肠埃希氏菌5株（13.15%）。先期使用3代头孢菌素36例、早产儿22例、动脉留置22例、鼻饲喂养21例、外周置入中心静脉导管（Peripherally Inserted Central Catheter,PICC）14例。38例中28例为院内感染,院内感染的病原菌主要是肺炎克雷伯杆菌21例（75%）、鲍曼不动杆菌6例（21.42%）。肺炎克雷伯杆菌17例（80.95%）为产β-内酰胺酶（ESBLS）菌株,对碳青霉烯类、喹诺酮类100%敏感,对哌拉西林/他唑巴坦76.47%敏感,对2、3代头孢类100%耐药。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类及头孢吡肟敏感率33.3%,对青霉素及2、3代头孢类100%耐药。结论新生儿革兰氏阴性杆菌败血症的临床特点是病情凶险,易并发严重并发症,主要病原菌是肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌及大肠杆菌,而且多为院内感染（73.68%）,与早产、侵入性操作、先期使用3代头孢关系密切,耐药性强,碳青霉烯类是首选药物。     

鲍曼不动杆菌产AmpC酶的耐药性分析

目的 探讨鲍曼不动杆菌分布特征及耐药性。方法 对临床分离的142株鲍曼不动杆菌分布科室、感染部位及对13种抗生素耐药性进行分析，并通过酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶。结果 标本来源主要为患者的痰液、创口分泌物、尿液、血液等，科室以重症监护室为多，感染部位以下呼吸道为主，耐药性较高的抗生素为头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南等，142株鲍曼不动杆菌中产AmpC酶菌株共23株，产AmpC酶阳性率占总菌株数16．2％，产AmpC酶菌株对各种抗生素的耐药率比不产AmpC酶的明显增高，治疗首选泰能。结论 鲍曼不动杆菌的多重耐药率高，应采取针对性的控制措施。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染暴发的分子流行病学研究

目的分析某院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的分子流行病学特征和耐药机制,为预防和控制医院感染提供依据。方法对该院2010年1月-2012 年5月临床分离的32株CRAB,采用随机扩增多态性DNA法进行基因分型,并进行流行病学分析;通过改良Hodge试验和EDTA协同试验对碳青霉烯酶进行表型分析;检测外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙（CCCP）对美罗培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,筛选外排泵表型阳性菌株。结果32株CRAB检测出9种基因型,其中以A（10株）、H（7株）两种基因型为主,其次为I型（4株）,B和E基因型各3株,其他基因型各有1或2株。2012年3-5月分离11株CRAB,10株为H(7株)和I(3株)两种基因型,1株为A型。21株（65.63%）CRAB检测到OXA 23特异性条带,且其在改良Hodge试验中均为阳性（包括2012年3-5月分离的11株CRAB）;除1株CRAB检测到NDM 1外,其余金属β 内酰胺酶基因检测均为阴性;CRAB在CCCP存在的条件下对美罗培南MIC仅有轻微改变,均为外排泵表型阴性。CRAB主要分布在重症监护室（13株）和神经外科（7株）。结论该院2012年3-5月间暴发了CRAB同一基因型克隆株的医院感染,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制是表达OXA 23;鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药与外排泵无关,产NDM 1菌株已在该院出现。     

287株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析

目的:调查医院鲍曼不动杆菌分布及药物耐药情况。方法:采集2008年1月-2009年10月年临床标本,并进行鲍曼不动杆菌分离培养、鉴定及药物敏感试验。结果:共分离出鲍曼不动杆菌287株,其中85.37%分离来自痰标本,42.16%来自儿科。鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率最低,为10.10%,其次为头孢哌酮/舒巴坦,为27.87%,对其他抗菌药物耐药率高达70.38%～97.91%。结论:鲍曼不动杆菌主要侵犯儿科患者,主要分离部位是呼吸道;耐药率最低是亚胺培南,临床用药要根据药敏结果来选择很有必要。