小鼠前胃癌组织形成中VEGF和cyclin D1及p27^kip1的表达

目的：研究VEGF、cyclin D1和p27^kip1在小鼠前胃癌组织形成过程中的表达及意义，初步探讨维甲酸对小鼠前胃癌的干预机制。方法：建立ICR小鼠前胃癌模型，SABC法测定VEGF、cyclin D1和p27^kip1表达。结果：cyclin D1在小鼠前胃癌组织中的表达（64．7％）明显高于癌前期病变（29．4％）。X^2=4．3447，P=0．0371；VEGF表达在癌前期病变（47．1％）高于增生期病变（33．3％），X^2=4．836，P=0．0381；cyclin D1、p27^kip1和VEGF阳性表达与小鼠胃癌组织学分级无相关性。维甲酸抑制组癌及癌前期病变发生率（23．5％）低于单纯诱导组（76．9％），X^2=14．3549．P=0．0002。结论：VEGF、cyclin D1和p27^kip1是小鼠前胃癌组织形成过程中重要的分子事件；维甲酸对亚硝胺类致癌物诱发的小鼠前胃鳞状上皮癌及癌前期病变具有抑制作用，但与对VEGF、cyclin D1和p27^kip1表达的调控无明显相关。     

cyclin D1、p53蛋白在胃癌组织中的表达

目的 研究cyclin D1、p53蛋白在胃癌组织中的表达及两者的相关性。方法 采用原位杂交技术及免疫组化技术，分别检测73例胃癌组织中cyclin D1 mRNA及p53蛋白的表达。结果 cyclin D1在胃癌组织及癌旁组织中的阳性表达率分别为54．79％（40／73）及28．77％（21／73），两者有显著性差异。cyclin D1 mRNA表达强度与肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移及病理分期无关（P＞0．05），p53蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为32．88％（24／73），cyclin D1表达强度与p53表达无关（P＞0．05）。结论 cyclin D1及p53蛋白的过表达在胃癌的发生发展过程中均起重要作用。     

宫颈腺癌组织Skp2与p27kip1表达及临床意义

目的：研究宫颈腺癌组织中S期激酶相关蛋白2（Skp2）和细胞周期调控因子p27^kipl的表达及其临床意义。方法：采用组织微阵列技术结合免疫组化（二步法）检测106例宫颈腺癌组织和22例慢性宫颈炎组织中Skp2和p27^kipl的表达。结果：106例宫颈腺癌组织Skp2阳性表达率为67．9％，显著高于慢性宫颈炎组织（P〈0．01）；p27^kipl阳性表达率为58．5％，明显低于慢性宫颈炎组织（P〈0．05）。Skp2在宫颈腺癌的病理分级中，G2、G3组阳性表达率均明显高于G1组（P〈0．05）。Skp2和p27^kipl表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性，子宫内膜样腺癌Skp2阳性表达率明显高于其他类型宫颈腺癌（P〈0．05），透明细胞腺癌p27^kipl阳性表达率明显低于其他类型宫颈腺癌（P〈0．05）。Skp2和p27^kipl阳性表达率无明显负相关。结论：Skp2高表达与p27^kipl低表达在宫颈腺癌的发生、发展中起重要作用，Skp2高表达可作为宫颈腺癌恶性化的分子指标；采用组织微阵列进行Skp2和p27^kipl免疫组化检测具有可靠性和实用性。     

食管癌组织中p16、p21、p53、cyclin D1表达及其意义

目的 探讨p16、p21、p53、cyclin D1在食管癌中的表达及其作用。方法 采用免疫组化方法检测30例食管癌中p16、p21、p53、cyclin D1的表达,采用PCR－SSCP的表达p53基因突变情况。结果 p16、p21阳性表达率均为63．3％,p53为66．7％,cyclin D1为86．7％,p53基因突变率为26．7％。结论 食管癌以p53第7外显子突变为主cyclin D1过度表达在食管中是常见的并且是早期出现的分子异常,p16、P21可作为判断食管癌分化程度及预后的1个参考指标。     

NF-κB、cyclin D1和p27在非细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨核转录因子-KB（NF-κB）、细胞周期素DI（cyclin D1）和p27在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组化S-P法检测58例非小细胞肺癌（NSCLC）和15例正常肺组织中NF-κBp65、cyclin D1、p27的表达。结果：NSCLC组织中NF-κBp65和cyclin D1的表达明显高于正常肺组织中的表达（P〈0．01），p27表达则明显低于正常肺组织（P〈0．01）。NF-κBp65表达与NSCLC瘤体大小、淋巴结转移、临床分期密切相关（P〈0．05）cyclin D1表达与瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关（P〈0．05）；p27表达与瘤体大小、肿瘤分化密切相关（P〈0．05）。NF-κBp65与cyclin D1在NSCLC组织中的表达呈正相关（P〈0．05），cyclin D1与p27的表达呈负相关（P〈0．05），NF-κBp65与p27的表达无相关性（P〉0．05）。结论：NF-κB、cyclin D1、p27与非小细胞肺癌的发生、发展有关，检测三种蛋白的表达可以间接判断NSCLC的生物学行为。     

mdm2／p53通路相关的乳腺癌差异表达基因分析

目的比较乳腺癌和正常乳腺组织的基因表达差异，探讨与mdm2／p53通路相关的差异表达基因。方法提取11例乳腺癌和将5例正常乳腺组织等比例混合的组织总RNA进行芯片杂交，用SAM软件筛选差异表达基因，用GoMiner软件检索差异表达基因的功能，挑选参与细胞周期和凋亡的基因，通过Pathway分析方法检索与mdm2／p53通路相关的差异基因；用免疫组化方法验证差异基因cyclin A2及其相关基因CDK2在乳腺癌（38例）和正常乳腺组织（16例）中的表达。结果乳腺癌与正常乳腺组织的差异表达基因共548个，其中参与细胞周期的基因有35个，参与凋亡的基因有23个；与mdm2／p53通路相关的差异基因有4个，分别是cyclin A2，cyclin B1，PCNA，YWHAZ；经免疫组化验证的38例乳腺癌和16例正常乳腺组织的cyclin A2表达阳性率分别为42．1％（16／38，和6．25％（1／16）；CDK2表达阳性率分别为47．3％（18／38）和6．25％（1／16），两者均有统计学差异（P〈0．05）；在乳腺癌中cyclin A2与CDK2的表达呈正相关，特别值得一提的是如果以≥2^＋为阳性在乳腺癌cyclin A2为26．3％，CDK2为31．5％，而在正常组几乎看不到≥2^＋的表达。结论乳腺癌组织与正常乳腺组织相比存在着差异表达基因，与mdm2／p53通路相关的差异基因的异常高表达促进细胞增殖，与乳腺癌的发生密切相关，而cyclin A2和CDK2在乳腺癌共表达并明显高于正常组织其意义还不清楚。     

nm23-H1 c-erbB2 p53 蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨c-erbB2,nm23-H1,p53三种基因在宫颈癌中表达及其关系。方法：应用免疫组化法检测40例宫颈癌组织及10例宫颈不典型增生，20例宫颈炎组织标本中nm23-H1,c-erbB2，p53蛋白表达，采用统计学χ^2检验方法，分析这三种蛋白表达与临床病理及预后关系。结果：（1）宫颈癌nm23-H1蛋白表达率为41．14％，宫颈炎组织表达为5．00％，不典型增生组织未见阳性表达，差异有显著性P＜0．01，表达与病理分类有关，腺癌表达为83．33％，高于鳞癌32．35％，差异有显著性（P＜0．05），（2）c-erbB2表达率为37．50％，宫颈炎及不典型增生组织未见阳性表达，腺癌表达66．67％，高于鳞癌32．35％，但无显著差异（P＞0．05），鳞癌过表达与复发有关；（3）p52蛋白表达率为24．14％，宫颈炎组织未见阳性表达，1例重度不典型增生表达阳性，表达与宫颈癌病理分级相关。2．三种基因蛋白表达的比较，nm23-H1与c-erbB2,p53与mnm23-H1之间表达差异无显著性（P＞0．05），p53与c-erbB2之间表达差异有显著性，（P＜0．05），3，c-erbB2阳性／P53阳性患者复发与c-erbB2阴性＋P53阴性患者复发组对照，差异有显著性。结论：nm23-H1表达在宫颈腺癌早期呈高表达，可能为机体抑制肿瘤转移的防御性反应；c-erbB2表达是细胞恶性变标志，宫颈鳞癌中过表达与复发有关，P53表达与宫颈癌发生发展有关，检测c-erbB2/p53-一组基因对宫颈鳞癌预后更有价值。     

散发性结直肠癌、腺瘤组织中hMLH1和突变型p53表达

[目的]探讨hMLH1和p53基因在散发性结直肠癌发生机制中所起的作用。[方法]采用PV-6000二步法免疫组化检测技术对60例散发性结直肠癌，45例大肠腺瘤和26例正常大肠黏膜石蜡切片进行hMLH1和p53表达的检测。[结果]（1）60例散发性结直肠癌hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达分别为11例（18．3％）和32例（53.3％），hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达与患者年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度密切相关（P〈0．05或P〈0．01），而与患者性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结及远处转移与否和患者的Duke’s分期均无显著相关性（P〉0．05）。（2）大肠腺瘤患者p53蛋白阳性表达与患者腺瘤部位、组织学类型和不典型增生程度密切相关（P〈0．05），而与患者性别、年龄无显著相关性（P〉0．05）。（3）散发性结直肠癌中hMLH1蛋白阴性表达组p53蛋白阳性表达率（18.2％，2/11）低于阳性表达组（61．2％，30／49）（P〈O．05）。[结论]（1）大部分散发性结直肠癌是沿染色体不稳定途径发生，其中抑癌基因p53的突变起重要作用。同时，一定比例的散发性结直肠癌中存在错配修复基因的缺陷，并具有相对特殊的临床病理特征。（2）大肠腺瘤组织中有一定比例的hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达，提示hMLH1和p53基因的突变可能是散发性结直肠癌发生的早期事件之一。     

Rb、p53基因与PCNA在膀胱癌中异常表达的意义

 目的　检测膀胱癌中Rb、p53基因及核细胞增生抗原（PCNA）的表达，探讨其与膀胱癌病理分级、临床分期及预后的关系。方法　采用免疫组织化学方法检测60例老年人膀胱癌组织中Rb基因、突变型p53基因及PCNA的表达。结果　60患者中，p53、PCNA阳性表达者均为24例（40 %），Rb异常表达者27例（45.0 %）；30例（50.0 %）膀胱癌患者同时有多个基因的表达异常。多种基因的异常表达与膀胱癌的病理分级、临床分期及复发有密切关系。结论　肿瘤的多基因分析比单基因分析更有价值。Rb基因 、p53基因及PCNA异常表达及协同作用可能在膀胱癌的发生、发展中起重要作用。     

p33ING1、p53在结直肠癌中的表达及其相互关系

目的：探讨p33^ING1、p53在结直肠癌中的表达及其相互关系。方法：应用免疫组化SP法检测60例结直肠癌组织及相应正常黏膜组织中p33^ING1、p53的表达。结果：结直肠癌组织、相应正常黏膜组织中p33^ING1蛋白的阳性表达率分别为43．3％（26／60）、100％（60／60）（P〈O．01），p53蛋白分别为51．6％（31／60）、0％（0／60）。p33^ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组癌组织中的阳性表达率分别为57．6％（19／33）、25．9％（7／27）（P〈0．05）；在DukesA、B期、Dukes C、D期病例中分别为56．7％（17／30）、30．0％（9／30）（P〈0．05）。在p53表达阴性的29例中有12例（41．4％，12／29）p33^ING1表达缺失，而p53阳性的31例病例中有22例（71．0％，22／31）p33^ING1表达阴性（P〈0．05），在p53蛋白表达阳性的病例中p33^ING1蛋白表达明显缺失，两者表达呈负相关。结论：p33^ING1在结直肠癌组织中低表达，与p53互相协同，在结直肠癌的发生、发展中可能起重要作用。     

EGR-1与p53，p16，Cyclin D1在鼻咽癌中的表达及意义

 目的 探讨早期生长反应基因（EGR-1）与p53，p16，Cyclin D1在鼻咽癌中的表达及其意义。方法 应用免疫组化SABC法检测29例鼻咽黏膜慢性炎组织、45例鼻咽癌组织、24例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中EGR-1与p53，p16，Cyclin D1表达。结果 鼻咽癌原发灶及其颈部淋巴结转移灶中EGR-1表达较鼻咽黏膜慢性炎降低，p53，Cyclin D1表达则增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；p16在三种病变中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 EGR-1的表达降低与p53，Cyclin D1的高表达可能与鼻咽癌的发生、发展有关；p16可能在鼻咽癌的发生、发展中不起作用。     

睾丸精原细胞瘤中p27kip1、p21ras、p16的表达及其临床意义

目的探讨p27kip1、p21ras、p16在精原细胞瘤中的表达及临床意义.方法采用免疫组化S-P法检测46例精原细胞瘤组织、10例正常睾丸组织p27kip1、p21ras、p16蛋白的表达情况.同时用PCR法检测27例精原细胞瘤组织p16和p21基因的缺失情况.结果 p27kip1在精原细胞瘤组织中的阳性表达率为48.9%(22/45),显著低于正常睾丸组织的90.0%(P<0.05),p27kip1蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达与淋巴结和远处器官转移相关(P<0.05),与组织学分型无关;p21ras、p16蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达率分别为42.2%(19/45)和60.0%(27/45),与正常睾丸组织比较,差异无显著性(P>0.05).p16、p21ras蛋白在精原细胞瘤组织中的表达与组织学类型及淋巴结转移无相关性(P>0.05).p21基因无纯合子缺失.p16基因纯合子缺失率为44.4%(12/27),其缺失率与精原细胞瘤的组织学类型、淋巴结和远处器官转移无关.p27kip1、p21ras及p16阳性表达率之间有相关性(P<0.05).结论 p27kip1蛋白的低表达或缺失可能与精原细胞瘤的发生、浸润转移有关,可作为估计精原细胞瘤预后的良好指标.p16基因的缺失和表达下降可能是精原细胞瘤发生的早期事件.     

Immunohistochemical analysis of p16INK4a,p14ARF,p18INK4c,p21CIP1, p27KIP1 and p73 expression in 271 meningiomas correlation with tumor grade and clinical outcome

Routine pathological examination cannot distinctively predict the clinical course of meningiomas because even histologically benign tumors may recur after gross total resection. Numerous efforts have been made for the evaluation of different immunohistochemical assays in meningioma prognosis. We investigated the prognostic significance of p16INK4a, p14ARF, p18INK4c, p21CIP1, p27KIP1 and p73 expression by immunohistochemical analysis of 271 meningiomas. All tumors were additionally stained for the proliferation markers Ki-67 and DNA topoisomerase II alpha (TopoIIalpha). Significant differences between the number of p16INK4a-, p18INK4c- and p21CIP1-positive cases were noted among the 3 grades of meningiomas. p16INK4a- and p21CIP-positive tumors were found to prevail among benign meningiomas, whereas p18INK4c immunostaining was closely associated to anaplastic meningiomas. The number of p16INK4a- and p21CIP-positive cases was significantly lower in the cohort of recurrent meningiomas. In contrast, p18INK4c-positive cases were clustered among recurrent meningiomas regardless of tumor grade. Immunoreactivity of p14ARF, p27KIP1 and p73 did not show any differences between meningiomas of various histology and clinical outcomes. Multivariate analysis revealed that only tumor grade and TopoIIalpha index are independent criteria for predicting meningioma recurrence. Thus, the immunohistochemical assessment of p16INK4a, p14ARF, p18INK4c, p21CIP1, p27KIP1 and p73 expression in meningiomas does not appear to provide prognostically useful information. Further studies are needed to identify more reliable prognostic markers and to address in more detail the role of cell cycle aberrations in these tumors.     

HCV C蛋白、p53、Mdm2、p14和p21在原发性肝癌中的表达及相关性

目的:研究原发性肝癌(HCC)组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白对突变p53、Mdm2、p14和p21表达影响及临床意义。方法:收集42例HCC石蜡组织,采用免疫组织化学EnVision法检测HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达,用统计学方法及临床联系分析它们之间的关系。结果:核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的阳性表达主要定位于细胞核中;HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21阳性率分别为40.5%、47.62%、75.57%、45.24%、19.05%;5组间的Kruskal-Wallis检验P=0.000,差异显著,核心蛋白与突变p53、Mdm2、p14和p21间的Mann-WhitneyU秩和检验P值分别为0.043、0.009、1.0、0.023;HCVC蛋白与突变p53、p14、p21阳性强度两者间相关性Spearman检验P值分别为0.000、0.000、0.43,相关系数rs分别为0.67、0.64、-0.29;p53和Mdm2、p21阳性强度间相关性Spearman检验p值为0.000、0.174,rs分别为0.72、-0.45。结论:在HCV感染的HCC中HCVC蛋白可能促进野生p53突变和表达,p14的表达与C蛋白有关联;突变p53和p14很可能促进Mdm2的表达;HCC中p21表达缺陷是十分常见的,HCV相关的HCC主要与p53通路改变有关,C蛋白可能下调p21的表达。因此,HCV相关的HCC中C蛋白、突变p53、Mdm2很可能促进肝细胞增生或恶性生长。     

胃癌及癌前病变中p16、p21WAF1、CDK4、cyclin D1蛋白的表达及其意义

目的探讨胃癌及癌前病变中p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1蛋白的表达、相互关系及其意义。方法应用免疫组化SP法检测胃癌、不典型增生、慢性浅表性胃炎及正常胃组织中p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1蛋白的表达情况。结果胃癌中p16和p21WAF1蛋白表达率分别为52.7％、30.9％,显著低于慢性浅表性胃炎和不典型增生（P<0.01）,而CDK4和cyclinD1蛋白表达率分别为61.8％、47.3％,均明显高于正常胃组织和慢性浅表性胃炎,差异有显著性（P<0.01）,但胃癌和不典型增生组织中CDK4和cyclinD1蛋白表达率之间差异无显著性（P>0.05）。胃癌中p16与cyclinD1蛋白表达呈负相关关系（P<0.05）,而CDK4与cyclinD1呈正相关关系（P<0.01）。结论胃癌发生机制涉及p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1调节通路中多个基因的异常,且与胃癌Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移有关。CDK4和cyclinD1蛋白高表达可能是胃癌发生过程中的早期分子事件。