雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达

目的 观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）以及TNF-α基因表达的改变和雌激素的影响。方法 健康3m龄雌性SD大鼠72只，24只为假手术对照组，48只去卵巢，随机分为去卵巢组和雌激素组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12w每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果 与对照组相比，去卵巢后2W．去卵巢组骨髓细胞TNF-α和RANKLmRNA表达显著升高（P〈0．05—0．01），第4-6w，上述改变达高峰，至第12w TNF-α仍呈有意义增高；而OPG表达在第2-6W则明显降低（P〈0．01），2-4W为最低点；OPG／RANKL比值2-6W为最低（P〈0．01），12W仍低于对照组。雌激素组以上各时间TNF-α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01）而OPG表达和OPG／RANKL比值明显高于去卵巢组（P〈0．01）。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论 雌激素抑制大鼠去卵巢后骨髓细胞过度表达RANKL和TNF-α而增加OPG的表达。     

去卵巢大鼠骨代谢及骨髓细胞0PG、RANKL 基因表达的实验研究

目的观察去卵巢大鼠血清丨型原胶原C-端前肽（P丨CP)、骨钙素（BGP)和I型胶原交联羧基 末端肽（ICTP)的变化，以及骨髓细胞骨保护素（OPG)和核因子kB受体活化因子配体（RANKL)的基 因表达变化。方法取3月龄雌性SD大鼠16只，随机分2组：假手术对照组（8只）和假手术组（8 只）。采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松大鼠模型。术后12周，应用双能X线吸收仪法（DXA)测骨 密度，EL丨SA法测量血清PICP、BGP及1CTP浓度，qRT-PCR法半定量骨髓细胞0PG和RANKL mRNA 表达量。结果与假手术组比较，大鼠去卵巢12周后腰椎和股骨骨密度下降显著（P <0.01);血清 ?1€卩、80?和10^含量显著升高（/><0.01);骨髓细胞RANKL的mRNA表达量增加（尸< 0. 05)且 0?0/1^1>^1^的比率降低（/><0.0〗），而两者0PG的mRNA表达量无显著性差别（P > 0. 05 )。结论 去卵巢12周后的大鼠表现出高骨转换率的特点。OPG/RANKL/RANK系统失衡可能在以破骨细胞 功能亢进为特点的骨代谢中起重要作用。     

跑台运动对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达的影响

目的：观察去卵巢大鼠经跑台运动后其骨组织中OPG、RANKL和RUNX2mRNA表达变化,探讨力学刺激防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法：健康3月龄雌性SD大鼠30只,体重（270±10）g,按随机方法平均分为假手术组、去卵巢组和跑台运动组,每组10只。假手术组仅在术中牵动卵巢并不行卵巢切除,其余两组均行卵巢切除术。假手术组和去卵巢组大鼠正常饲养;跑台运动组大鼠在术后1周开始在动物跑台上运动,跑速为18m／min,每次45min,1次／d,6d／周,共训练11周。12周后处死所有动物,取左侧股骨头,脱钙后石腊切片,用倒置相差显微镜观察其组织学变化;取右股骨头提总RNA,实时PCR法检测OPG、RANKL和RUNX2的mRNA表达情况。结果：去卵巢组骨小梁稀疏,骨细胞少,跑台运动组骨小梁粗壮增厚。去卵巢组骨组织中OPG的mRNA表达为（0．131±0．080）,RNAKL的mRNA表达为（8．013±3．550）,RUNX2的mRNA表达为（3．245±5．090）。跑台运动组其骨组织中OPG的mRNA表达为（0．566±0．260）,RANKL的mRNA表达为（5．232±3．670）,RUNX2的mRNA表达为（2．753±3．680）。和去卵巢组比较,跑台运动组的OPG的mRNA表达升高,差异有统计学意义;而RANKL和RUNX2的表达下降,差异无统计学意义。结论：力学刺激能通过促进去卵巢大鼠骨组织中OPG的表达而发挥其抗绝经后骨质疏松的效果,这对今后研究绝经后骨质疏松症的治疗提供了新的思路。     

骨质疏松症大鼠模型生物力学性能和OPG/RANKL/RANK信号通路研究

摘要：目的 研究针刺对骨质疏松症（osteoporosis，OP）模型大鼠生物力学性能和骨保护素（OPG）/核因子-κB受体活化因子（RANKL） /核因子-κB受体活化因子受体（RANK）信号通路的影响，探讨针刺防治OP的作用机制。方法 选取50只雌性SD大鼠，通过摘除卵巢建立OP大鼠模型，分为假手术组、模型组、针刺低剂量组、针刺高剂量组、阿仑膦酸钠组，每组10只。成功建立模型并对大鼠进行适应性喂养2个月后，连续灌胃给药12周，再进行腹主动脉取血并处死大鼠。通过双能X射线仪测定各组大鼠右侧下肢股骨骨矿含量；用酶联免疫吸附法测定法检测血清钙（Ca2+）、磷（P）和OPG、RANKL、RANK的水平；采用AG-IX万能实验机检测股骨的生物力学性能；采用蛋白质印迹法检测骨组织OPG、RANKL、RANK蛋白的表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠骨组织中骨矿含量、血清Ca2+、P、OPG的表达、股骨组织中OPG蛋白含量和股骨最大载荷、刚度及弹性模量均明显降低（P＜0.01）；血清RANKL和RANK的表达及股骨组织中RANKL、RANK蛋白含量明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，针刺低剂量组和针刺高剂量组以及阿仑膦酸钠组上述指标均有明显改善（P<0.05或P<0.01），且针刺的作用具有剂量依赖性（P<0.05或P<0.01）。结论 针刺具有明显的抗OP作用，可能与其改善骨组织生物力学特性以及调控OPG/RANKL/RANK通路有关。     

鲑鱼降钙素对去卵巢大鼠骨髓细胞OPG、RANKL基因和蛋白表达的影响

[目的]观察鲑鱼降钙素(sCT)对去卵巢大鼠骨密度(BMD)、血清Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)变化的影响,以及骨髓细胞骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的基因表达和两者在胫骨骨骺端蛋白含量的变化.[方法]取3个月龄雌性SD大鼠24只,随机平均分3组:假手术组(Sham)、鲑鱼降钙素处理组(sCT)、安慰剂组(OVX).采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松大鼠模型.术后2周CT组予鲑鱼降钙素皮下注射12周,应用双能X线吸收仪法(DXA)测BMD,ELISA法测量血清ICTP浓度,qRT-PCR法定量骨髓细胞OPG和RANKL的mRNA表达量,免疫组织化学染色法测定胫骨干骺端OPG和RANKL蛋白表达量.[结果]与OVX组比较,sCT组的腰椎BMD上升显著(P＜0.05),但股骨BMD改变不明显(P＞0.05);血清ICTP含量显著降低(P＜0.05);骨髓细胞RANKL的mRNA表达量变化不大(P＞0.05),但OPG的mRNA表达量升高(P＜0.05),OPG/RANKL的比率升高(P＜0.05);胫骨干骺端也呈现出RANKL蛋白改变不明显(P＞0.05),而OPG的蛋白分泌增加(P＜0.05),从而OPG/RANKL的比率高于OVX组(P＜0.05)的现象.[结论]降钙素可以预防腰椎BMD的丢失,降低血清ICTP水平,在体内可能主要通过上调OPG的mRNA表达和蛋白分泌,影响OPG/RANKL/RANK系统,影响破骨细胞功能,抑制骨吸收,进而达到预防绝经后骨质疏松的目的.     

甲状旁腺激素相关蛋白对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL基因表达的影响

目的观察不同剂量间歇性注射甲状旁腺激素相关蛋白氨基端片段1—34（PTHrP1—34）对去卵巢大鼠骨密度及股骨RANKL、OPG基因表达的影响。方法4月龄健康雌性未孕Wistar大鼠60只，随机分为6组，假手术组（Sham组）和卵巢切除＋安慰剂组（Placebo组）给予生理盐水；卵巢切除＋雌激素治疗组（E2组）给予苯甲酸雌二醇注射液；卵巢切除＋PIHrP治疗组分别用20、40、80ktg／kg剂量，每日1次注射PTHrP1—34。给药12周后，测定腰椎L3-6及股骨BMD，利用实时荧光定量RT-PCR方法检测大鼠股骨RANKL、OPG基因表达的水平。结果①BMD结果：PTHrP40组和PTHrPS0组大鼠股骨、腰椎BMD明显高于Placeb0组。②与Sham组相比，Placebo组OPGmRNA明显下降（P〈0．01），RANKLmRNA水平则显著升高（P〈0．01）。E2组OPGmRNA水平较Placebo组明显升高（P〈0．01），RANKLmRNA水平显著下降（P〈0．01）。与Placebo组相比，不同剂量胛HrP（1-34）治疗组OPG、RANKLmRNA水平无明显变化（P〉0．05）。结论PTHrPl—3440或80ug／kg每天皮下注射能提高去卵巢大鼠股骨、腰椎BMD，间歇性注射PTHrP（1-34）对去卵巢大鼠骨组织RANKL、OPGmRNA水平无明显影响。     

核因子κB受体活化因子及其配体在5/6肾切除大鼠肾脏中表达及缬沙坦对其影响

目的 探讨核因子κB受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)在5/6肾切除大鼠(STNx)残肾中表达的意义，以及血管紧张素受体拮抗剂(ARB)缬沙坦对其表达的影响。方法 制备5/6肾切除的SD大鼠动物模型， 分为未给药组、治疗组及假手术组。治疗组在5/6肾切除后即给予缬沙坦治疗，大鼠分别于第4、8、12 周杀检。第12 周时用ELISA方法检测大鼠血清中骨保护蛋白(OPG)及RANKL水平；显微镜观察肾脏病理变化；免疫组化方法及Western印迹方法分析RANK/RANKL/OPG蛋白表达；RT-PCR检测RANK/RANKL/OPG的mRNA表达。结果 (1)第12周时假手术组尿蛋白量为(6.1±0.6) mg/24 h；未给药组为(19.0±1.5) mg/24 h；治疗组为(13.4±1.2) mg/24 h，3 组间的差异有统计学意义(P均 < 0.01)。(2)第12周时未给药组及治疗组肾脏均有明显硬化，但治疗组硬化程度较未给药组轻。(3)未给药组RANK及RANKL蛋白及mRNA的表达均高于治疗组及假手术组，3 组间的差异有统计学意义(P均 < 0.01)。OPG蛋白及mRNA的表达在3 组间无显著性差异。(4)血清中OPG及RANKL含量在3 组间的差异亦无统计学意义。结论 在5/6肾切除大鼠残肾中表达上调的RANK和RANKL可能参与了肾小球硬化的发生发展。抑制RANK和RANKL的表达可能是缬沙坦延缓肾小球硬化的原因之一。     

去卵巢大鼠骨髓微环境中RUNX2\PPARγ基因及OPG\RANKL基因蛋白表达变化的实验研究

[目的]探讨在去卵巢大鼠骨质疏松模型骨髓微环境中成骨细胞、脂肪细胞和破骨细胞分化的相互关系及其机制.[方法]将3个月龄雌性SD大鼠16只随机分为2组:假手术组(SHAM)和去卵巢组(OVX),每组8只.采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松大鼠模型.术后14周,应用双能X线吸收仪法(DXA)测第4腰椎和股骨骨密度(BMD).qRT-PCR法测量骨髓细胞RUNX2、PPARγ、OPG和RANKL mRNA表达量.石蜡组织切片HE染色测量第3腰椎和胫骨近端骨组织脂肪细胞数目.免疫组织化学染色测定胫骨近端骨组织OPG/RANKL蛋白表达量.[结果]与SHAM比较,OVX组腰椎和股骨BMD下降(P＜0.05).OVX组股骨骨髓细胞成骨分化转录因子RUNX2 mRNA水平比SHAM组增高(P＜0.05),成脂分化转录因子PPAR γ mRNA表达水平比SHAM组增高(P＜0.05).OVX组胫骨和第3腰椎脂肪细胞数目比SHMA组增多(P＜0.05).与SHAM组比较,OVX组股骨骨髓细胞RANKLmRNA和胫骨RANKL蛋白表达量增加(P＜0.05)且OPG/RANKL的比率都降低(P＜0.05),而两者OPG的mR-NA和蛋白表达量无统计学差异(P＞0.05).[结论]去卵巢大鼠骨量丢失可能是骨髓微环境中成骨细胞分化、脂肪细胞分化和破骨细胞分化紊乱导致.     

OPG过表达的ADSC对大鼠牙槽后槽骨缺损的修复作用

目的：探究骨保护素（Osteoprotegerin,OPG）过表达的脂肪间充质干细胞（Adipose-derivedstemcell,ADSC对大鼠牙槽后槽骨缺损修复的影响。方法：选择SD雄性大鼠38只,其中6只用于获得ADSC及ADSCOPG过表达转染,鉴定转染情况并观察不同ADSC的形态、成骨分化、成脂分化及增殖能力;其中8只作为对照组,另外24只建立牙槽后槽骨缺损大鼠模型,随机分为模型组、正常ADSC组和OPG过表达的ADSC组。6周后,Micro-CT扫描观察骨缺损愈合情况;苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色观察骨缺损组织病理改变;免疫组化分析组织中碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）、骨钙素（Osteocalcin,OCN）的表达;Westernblot分析组织中OPG/核因子-κB受体活化因子配体（Receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand,RANKL）/核因子-κB受体活化因子（Receptoractivatorof nuclearfactor-κB,RANK）通路蛋白表达。结果：...     

益肾健骨膏对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的 探讨益肾健骨膏对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响及可能机制。方法 50只雌性SD大鼠被随机分为假手术组、模型组、高剂量膏方组、低剂量膏方组、阳性药物组,每组10只。假手术组、模型组给予10 mL /（kg·d）生理盐水灌胃,低、高剂量膏方组分别给予2 g /（kg·d）、13 g/（kg·d）益肾健骨膏灌胃,阳性药物组灌服6.25 mg/（kg·w）阿仑膦酸钠维D3。治疗12周后检测大鼠腰椎骨密度和腰椎最大压缩载荷,通过Elisa检测血清骨代谢指标抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）、骨保护素(OPG)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅰ),RT-PCR检测腰椎骨组织OPG、RANKL、RANK、TRAF6的 mRNA表达,RT-PCR及Western blot检测腰椎Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2的基因及蛋白表达。结果 益肾健骨膏治疗12周后,与模型组比较,高剂量膏方组大鼠腰椎骨密度、最大压缩载荷,血清PINP、OPG水平,骨组织Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2的mRNA和蛋白表达,OPG的mRNA表达显著升高（P<0.05）,而血清TRACP、CTX-Ⅰ水平,骨组织RANKL、RANK、TRAF6的mRNA表达显著降低（P<0.05）。结论 高剂量益肾健骨膏能改善去卵巢骨质疏松大鼠骨密度、骨强度及骨代谢,其作用机制可能与Notch通路及OPG/RANKL/RANK系统有关。     

氯化汞诱导大鼠肾间质纤维化的脂质过氧化损伤机制研究

目的：探讨氯化汞（HgCl2）灌胃诱导大鼠肾间质纤维化模型的脂质过氧化损伤病理机制。方法：以8mg／kgHgCl2水溶液灌胃9周，设1周、2周、4周、6周和9周5个观察时间点。试剂盒方法检测肾功能（Scr、BUN）和脂质过氧化情况（GSH、GSH—Px、MDA、SOD），盐酸水解法检测肾组织羟脯氨酸（Hyp）含量，HE染色和Masson染色观察肾组织病理形态，免疫组化观察肾组织金属硫蛋白（MT）的表达和分布，免疫印记法观察核因子-κB（NF-κB）信号途径的激活（IκB、P—IκB、TNF—α）和α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）等蛋白的表达。结果：与正常组相比，9周模型大鼠血清Scr、BUN含量增高（Scr，P〈0．05；BUN，P〈0．01），肾组织GSH含量、GSH—Px活力明显降低（GSH，P〈0．05；GSH～Px，P〈0.01），MDA含量升高（P〈0．05），SOD活力各组无差异（P〉0．05）；肾组织Hyp含量逐渐升高（P〈0．05）。模型大鼠肾组织炎性浸润，肾间质胶原沉积增多，间质增宽，肾小管萎缩，表现出较为典型的肾间质纤维化。模型大鼠肾组织MT表达逐渐减少；IκB表达无差异（P〉0.05），P—IκB、TNF—α蛋白表达均明显增加（P—IκB，P〈0．05；TNF—α，P〈0．01）。α～SMA表达增加（P〈0．01）。结论：HgCl2诱导大鼠肾间质纤维化病变机制在于肾组织脂质过氧化损伤，从而诱导NF-κB信号途径的活化和肌成纤维细胞活化。最终造成肾间质纤维化。     

RANKL/RANK/OPG信号通路参与调控磷酸三钙磨损颗粒诱导假体周围骨溶解的研究

目的探讨RANKL/RANK/OPG信号通路在磷酸三钙磨损颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用。方法将30只小鼠随机分为假手术组、模型组和OPG组,制备小鼠颅骨溶解模型,OPG组于术后第2天在颅顶局部注射骨保护素(osteoprotegerin,OPG)(3 mg/kg),每隔2 d 1次;假手术组和模型组给予等量生理盐水,共2周。测定破骨细胞数和骨溶解面积,检测白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、OPG、NF-kappa B的受体激活因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)和RANK配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的水平。结果与假手术组比较,模型组小鼠颅骨破骨细胞数、骨溶解面积均增加,IL-1β、IL-6和TNF-α水平均增加,RANKL和RANK mRNA的相对表达量均增加,OPG mRNA的相对表达量降低(P0.05);与模型组比较,OPG组小鼠颅骨破骨细胞数和骨溶解面积减少,IL-1β、IL-6和TNF-α水平减少,RANKL和RANK mRNA的相对表达量均降低,OPG mRNA的相对表达量增加(P0.05)。结论 RANKL/RANK/OPG信号通路参与调控磷酸三钙磨损颗粒诱导假体周围骨溶解,通过给予外源性OPG能显著抑制磷酸三钙磨损颗粒诱导的骨溶解。     

护骨素及配体在卵巢切除大鼠骨组织的蛋白表达和细胞定位

目的对卵巢切除和假切大鼠骨组织中护骨素（OPG）和配体（RANKL）的表达进行比较，观察不同分化阶段成骨细胞的OPG和RANKL表达变化，深入地探讨成骨细胞对破骨细胞发生的调控作用。方法9月龄雌性大鼠分为卵巢切除组和假切组，相同条件喂养3月后处死，取材制作骨病理切片，用免疫组织化学方法测定大鼠股骨OPG和RANKL的蛋白表达，用图像分析软件对蛋白表达情况半定量分析，对各组数据和组织形态进行分析比较。结果OPG和RANKL蛋白在骨组织表达相对稳定。RANKL主要表达在增殖活跃的成骨细胞和幼稚的骨细胞，OPG主要表达在成熟骨细胞和静息骨衬里细胞。与假切组相比，卵巢切除组骨组织内RANKL表达升高（P〈0．01），OPG表达降低（P〈0．05）。结论卵巢切除后骨组织中RANKL/OPG升高，破骨细胞活性增强，骨转换加快。不同发育阶段的成骨细胞对破骨细胞有不同的调节作用，幼稚阶段表现出对破骨细胞的诱导作用，而成熟阶段则表现为抑制作用。     

维持性血液透析患者血清骨保护素与肾性骨营养不良的关系

骨保护素（OPG）是近年来在肿瘤坏死因子受体超家族中发现的一种具有调控破骨细胞产生和活化作用的生物活性物质。它与核因子κB活化子受体配体（RANKL,亦称骨保护素配体OPGL）和核因子κB活化子受体（RANK）组成的分子调控系统是体内维持骨代谢平衡的重要分子机制。在正常的骨转化中成骨细胞表面表达RANKL．它与破骨细胞前体或破骨细胞表面的RANK结合后启动了信号转导，使破骨细胞增殖和活化．溶骨活动增强。同时成骨细胞分泌OPG，它与RANK竞争性的抑制RANKL使溶骨作用不致过度强烈。     

丙泊酚对大鼠缺血再灌注肾NF-κB、TNF-α表达的影响

目的 研究丙泊酚对大鼠肢体缺血再灌注损伤后肾组织中肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）、核因子-κB（nuclear factor-κxB，NF-κB）表达的影响。方法 24只SD雄性大鼠，随机分为假手术对照组（A组），肢体缺血再灌注组（B组）和丙泊酚干预组（C组），每组8只。采用免疫组织化学方法检测TNF-α、NF-κB的表达，行图像分析半定量。结果 B组大鼠肾组织中TNF-α、NF-κB的表达明显高于A组（P〈0．05），C组明显低于B组（P〈0．05）。结论 肢体缺血再灌注后有明显肾损伤，丙泊酚对肢体缺血再灌注肾损伤有一定程度的保护作用，其机制可能与下调大鼠肢体缺血再灌注损伤肾组织中TNF-α、NF-κB的过度表达有关。     

核因子κB活化对急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞炎症介质表达的影响及意义

目的探讨核因子κB（NF-κB）活化对急性坏死性胰腺炎（ANP）肺泡巨噬细胞（AM）分泌炎症介质的影响和对肺损伤的影响。方法30只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP后1、3、6、12h组，每组6只。逆行性胰胆管注射5％牛磺酸钠建立ANP大鼠模型，正常对照组大鼠自胆胰管内逆行注入生理盐水。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞，检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）水平、肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNFα），一氧化氮（N0）水平，测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达情况。行肺组织的病理学检查并评分，同时行免疫组化检查肺组织中NF-κB的表达。结果正常肺组织较少见到NFκB活化的AM，ANP各组肺组织均可见到NF-κB活化，并且随时间进展NF-κB逐渐由细胞质更多进入细胞核。ANP大鼠肺损伤随着病情进展而逐渐加重，肺组织MPO及支气管肺泡灌洗液中蛋白含量逐渐升高；肺泡巨噬细胞分泌TNFα，NO水平逐渐升高，至6h达到高峰，12h又回落。ANP发生后，肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、iNOSmRNA的表达情况与TNFα，NO的变化趋势相似。ANP大鼠各组指标与正常对照组相比均有统计学差异（P〈0．05）。结论ANP形成后，NF-κB发生活化，使AM炎症介质表达增强，并促进肺损伤。     

二甲双胍对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响及机制研究

目的 以雌二醇为对照,观察二甲双胍(metformin, MF)对去卵巢大鼠骨密度及骨矿含量的影响,并从细胞、分子水平探究MF可能的骨保护机制。方法 将60只雌性SD大鼠随机均分4组：假手术（SHAM）组、去卵巢（OVX）组、去卵巢+二甲双胍（OVX+MF）组和去卵巢+雌二醇(OVX+E2 )组。分组灌胃给药60 d后测量大鼠右侧胫骨骨密度和骨矿含量;分离培养各组大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导其向成骨细胞分化,用MTT法测定细胞活性及增殖能力;测定各组碱性磷酸酶（ALP）活性、矿化结节数目、钙含量以及I型胶原（collagen type I）、骨钙素（OC）、骨保护素 (OPG)、NFκB受体的配体 (RANKL)、白细胞介素-6（IL-6）基因表达水平。结果 与OVX组相比,OVX+MF组和OVX+E2组成骨细胞的增殖能力与ALP活性明显增强,骨密度、骨矿含量以及钙沉积量显著增加(P均<0.05),且两组collagen type I、OC、OPG mRNA的表达水平显著升高,而RANKL、IL-6mRNA表达明显受到抑制;但OVX+MF组去卵巢大鼠成骨细胞的增殖能力、ALP活性、钙沉积量、collagen type I、OC、OPG mRNA表达水平低于OVX+E2组,RANKL、IL-6mRNA表达高于OVX+E2组（P均<0.05）;与SHAM组比较,OVX+MF组的collagen type I、OC、OPG mRNA的表达水平更高（P<0.05）。结论 二甲双胍可能通过OPG/RANKL/RANK信号通路促进BMSCs向成骨细胞分化,有效逆转去卵巢大鼠骨质疏松的状态,这种潜在的骨保护作用可能会改善糖尿病引起的骨质疏松。     

核因子κB抑制剂对缺血再灌注皮瓣TNF-α和ICAM-1表达的影响

目的观察缺血再灌注（I／R）期间，皮瓣肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（1CAM-1）表达及核因子κB（NF—κB）活性抑制剂的影响。方法雄性Wistar大鼠27只，随机分为对照组（A组）、I／R组（B组）及吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）处理组（C组）。制备右下腹岛状皮瓣I／R模型。C组于再灌注前及早期，各静脉注射PDTC 300mg／kg。逆转录-聚合酶链式反应法检测皮瓣再灌注2、6h TNFα、ICAM-1 mRNA表达。测定再灌注12h皮瓣髓过氧化物酶活性（MPO）并行组织学观察。结果B组再灌注2、6h TNF—α、ICAM-1表达较A组明显增加（P〈0．01）。C组再灌注2、6hTNF—α、ICAM-1表达明显低于B组（P〈0．01，P〈0．05）；再灌注12h，组织MPO活性及中性粒细胞浸润、水肿情况明显减轻。结论再灌注早期炎症介质表达增加在皮瓣I／R损伤中起重要作用。NF—κB抑制剂可下调TNF—α和ICAM-1转录表达，明显减轻皮瓣I／R损伤。     

益肾补骨汤调节去卵巢大鼠骨代谢的作用研究

目的研究益肾补骨汤对去卵巢大鼠骨代谢的调节作用。方法取51只大鼠建立去卵巢大鼠模型,另取10只大鼠设置为假手术组。将建模成功的大鼠随机分为尼尔雌醇组、高剂量益肾补骨汤组、中剂量益肾补骨汤组、低剂量益肾补骨汤组及空白模型组,每组各10只,灌胃治疗。对比各组大鼠股骨、胫骨骨密度,骨代谢指标;观察骨组织形态学变化;检测大鼠胫骨组织中基因和蛋白表达。结果模型组骨密度均较正常组下降,血清骨形成指标均下降、骨吸收指标均升高,胫骨组织病理改变严重,且骨形成蛋白-2(BMP-2)、Smad-1/5/8、Runt相关转录因子2(Runx 2)、骨保护素(OPG) mRNA和蛋白表达水平及p-Smad1/5/8水平均下降,而核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK) mRNA和蛋白表达水平均升高,尼尔雌醇组和益肾补骨汤三个剂量组对上述指标均有改善作用。益肾补骨汤的作用效果呈剂量依赖性,且益肾补骨汤中剂量作用与尼尔雌醇组接近,其余每两组间对比差异均有统计学意义(P0.05)。结论益肾补骨汤可提高去卵巢大鼠骨密度,促进骨形成,减少骨吸收,推侧其机制可能与调控BMP/Smads通路、OPG/RANKL/RANK通路有关。     

共轭亚油酸c9,t11-CLA及t10,c12-CLA对大鼠骨髓细胞骨代谢相关基因表达的影响

目的 观察c9,t11-CLA及t10,c12-CLA干预后,大鼠骨髓细胞过氧化物酶体增殖物激活受体2(PPARγ2)及核因子(NF)-κB活化受体配体(RANKL)、碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)、NF-κB活化受体(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) mRNA表达的变化,探讨其对骨代谢的影响.方法 体外培养大鼠骨髓细胞,分别加入c9,t11-CLA及t10,c12-CLA干预24h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PPARγ2、RANKL、ALP、OPG、RANK、TRAP mRNA表达水平,比较其对骨髓细胞上述基因表达的影响.结果 (1)c9,t11-CLA呈剂量依赖性下调RANK、TRAP mRNA表达,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),而其对RANKL、ALP、OPG及PPARγ2 mRNA 表达的影响不明显.(2) t10,c12-CLA呈剂量依赖性上调RANKL、OPG mRNA的表达,同时下调 RANK、TRAP及PPARγ2 mRNA的表达,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),但对ALP mRNA的表达无明显影响.结论 c9,t11-CLA可能通过抑制破骨细胞标记物基因表达阻断骨髓细胞向破骨细胞分化,而t10,c12-CLA在抑制破骨细胞标记物基因表达的同时也可促进成骨细胞标记物基因表达,两者均有利于骨形成.