应用即刻性进行抗-HCV检测的室内质控

目前国内检测抗 -HCV的 ELISA法大多参照生化的质控方法 ,即选择弱阳性标本为质控物 ,以 x质控图法控制日常工作的精密度 ,判断实验的有效性。但由于 ELISA检测试剂有效期短 (一般为 6个月 ) ,用同一批号试剂盒连续常规检测 2 0次难度大 ,有一定的局限性。笔者结合 x质控图和“即刻性”质控的优点 ,建立了抗 -HCV的即刻性 x质控图方法 ,现介绍如下。材料与方法1　试剂与质控物　试剂为厦门新创公司生产 ,批号 2 0 0 2 0 45 80 5。 2 Ncu/ml低值质控物购自上海市血液中心 ,批号2 0 0 1 0 81 5。阴性质控物则取 A值在 0 .0 2～ …     

Shewhart—cusum质控图在酶联法检测HBsAg室内质控中的应用

目的 探讨ELISA法检测HBsAg的室内质控方法 .方法 用ELISA法检测0.5 ng/ml的HBsAg质控血清,采用Shewhart-cusum联合质控图制作质控图,结果 检测浓度为0.5 ng/ml的HBsAg质控品的s/co均值为1.879,s为0.205,告警限k为均值士1s,分剐是1.674和2.084,失控限h为均值±2.7s,分别是2.433和1.325.结论 Shewhartcusum联合质控图对于容易出现随机误差和系统误差的定性ELISA方法 较为适用,并且准确区分随机误差和系统误差有助于临床实验室采取相应的措施有针对性的进行改正.     

实时荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA室内质控累积数据的评价

目的对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA室内质控累积的数据进行评价。方法用Taqman实时荧光定量PCR法检测2010年1～12月两个批号的质控血清HBV DNA,计算每次阳性质控结果的常用对数、标准曲线的斜率、截距和相关系数(r)及相关结果的均值(x)、标准差(s)和变异系数(CV)。结果本室2010年测定的室内质控物结果对数的累计数据x±2s范围为4.470～5.429,在参考范围内,符合要求。结论 本实验室采用Taqman实时荧光定量PCR法检测HBV DNA实验中,选用的质控方法和质控品稳定性良好,能可靠有效地为临床提供准确的结果。     

移动均值法在血浆二氧化碳检验质量控制中的应用

目的探讨移动均值法(X-B分析)在血浆二氧化碳(CO2)测定的质量控制中建立及应用。方法应用医院的LIS系统收集2017年1月12日-2017年1月31日CO2检验结果,为了防止极值对均值的影响,剔除超出正常参考值范围的数据,以均值作为靶值,以x±s范围为控制限,再分别统计2017年2月份每天的均值作为当日质控测定值,绘制X-B分析质控图。对X-B分析与本月室内质控物Levey-Jennings质控图进行对比分析。结果 X-B分析法的变异系数明显小于室内质控物Levey-Jennings质控法,两者呈正相关关系。结论患者血浆移动均值法可用于CO2测定的质量控制,可作为室内质量控制的有效辅助质控方法。     

全血细胞计数的(x|ˉ)-B分析及其靶值确定

(x|-)-B分析是BULL根据DORSEY的基本原理,把病人数据用于临床血液学室内质控的方法。全血细胞计数的(x|-)-B分析则是库尔特公司把BULL法在血液分析仪(CBC)上的应用。本室用COULTER-JT-IR全血细胞计数仪按照BULL法,计算红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH),红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC),确定本室以上三项的(x|-)-B靶值。经过近一年的应用,基本达到了室内质控的目的。1 材料与方法     

移动均值质控法用于住院患者血常规标本

目的了解移动均值质控法(XB质控)可否用于住院病人血常规标本。方法以仪器均值为靶值,设定±3%浮动范围,观察一定数量标本的数据情况,在认为可初步运用XB质控的前提下校准好仪器的工作状态,继续验证。结果观察校准前13d121个数据点2040个标本情况,通过校准仪器得出XB质控法的靶值设定±3%浮动范围的允许范围,继续验证15d,结果只有一个失控点,但并未发生失控。通过XB质控发现仪器自动进样系统出现了故障。结论XB质控可运用于住院病人血常规标本。     

三种效期末HBsAg酶免试剂盒的敏感性分析

ELISA法是测定HBsAg最常用的方法。进口试剂的敏感性为０．１～０．２ng／ml,国产试剂为０．５～１．０ng／ml。国内较多实验室常用１ng／ml质控品作临界值质控。笔者在应用中注意到试剂盒在效期初使用时,测得１ng／ml质控品的S／co值均大于１,而在效期末使用时,部分试剂测得的S／co值有时会小于１,结果变为阴性造成了误判。且在效期末总体S／co值降低,报道如下。１材料和方法１．１材料三种不同品牌经卫生部药品生物制品检定所批批检合格的试剂盒。试剂盒１：批号２００００６１０,试剂盒２：批号２００００６１３,试剂盒３：…     

血液病毒核酸筛查系统室内质控方法的建立及评价

目的建立并评价血液病毒核酸检测系统的室内质控方法。方法将浓度为200 IU/m L的HBV DNA、2 000 IU/m L的HCV RNA及2 000 IU/m L的HIV RNA质控标准品用已知阴性献血者血浆标本作不同倍数稀释,直至接近检测下限,确定合适质控品浓度后与献血者标本一同进行核酸提取、扩增,连续检测20次,用即刻法分析所得核酸扩增循环阈值(Ct值)结果,计算Ct值的均值(x珋)、标准差(s)和变异常数(CV),以x珋±2s为警告限,超过x珋±3s为失控限,以此分别建立核酸筛查室内质控图框架并分析室内质控结果。绘制Levey-Jennings质控图,统计180次室内质控结果,结合Westgard多规则质控方法,评价该室内质控模式的可行性和有效性。结果以HBV DNA为例,室内质控品浓度与Ct值的相关系数r=-0.920,在0.05水平达到高度相关。选择浓度100 IU/m L的HBV DNA室内质控品,连续测定20次的Ct值x珋为31.76,s为1.10,CV为3.46%。连续检测180次室内质控品Ct值的x珋为32.02,s为1.13,CV为3.53%。结论 Ct值可以作为室内质控的依据。本实验室选择的弱阳性质控品能增强当次实验结果的可靠性,可以排除因人员更换等实验条件的差异而导致的误差,可用于日常监控核酸提取扩增检测的有效性。     

血站核酸筛查混样和拆分单检室内质控方法的建立和评价

目的:建立核酸检测技术(NAT)用于血液筛查的室内质量控制(QC)方法。方法:将浓度为60 IU/ml HBV-DNA质控标准品,以6个混样常规筛查浓度稀释至10.0 IU/ml,接近检测下限的2倍。如出现混样结果阳性,则需进行拆分单检,以同管HBV-DNA质控品(浓度为60 IU/ml)作为拆分单检质控品,与需拆分样品同时单检。分别通过平行检测各20份同一批次质控品的方式,所得结果用即刻法分析其核酸扩增循环数,计算Ct值的均值()、标准差(SD)和变异常数(CV),以±2SD为警告限,超过±3SD为失控限,输入Excel后绘制LeveyJennings质控图,并以此分别建立核酸筛查混样和拆分单检室内质控图框架。结果:混样和拆分单检连续20次检测结果,其±2SD分别为33.03±1.47和30.08±0.98;±3SD分别为33.03±2.20和30.08±1.47;CV分别为2.22﹪和1.63﹪。t检验计算其P值分别为0.08和0.17。在此质控标准下,在同等条件下混样检测60份、拆分单检13份质控品,检测结果为混样检测59次结果在控,1次失控;拆分单检13次全部在控。阴阳性对照物结果均符合实验要求,结果有效。结论:核酸筛查时混样检测和拆分单检采用不同浓度的质控品,混样时以接近试剂检测限的弱阳性血清作为核酸筛查的质控品,拆分单检时的浓度是混样检测浓度的6倍。此质控方法可保证检测核酸提取和扩增的有效性,提高实验结果的稳定性。     

大便隐血质控物的配制及应用

目前,在市场上很难有大便隐血质控物出售,而在日常工作中经常需要使用。经过长期的实践,我们自行配制了隐血质控物,进行日常质量控制,效果好,结果稳定。1质控品的配制1.1材料与方法1.1.1试剂全血质控物、蒸馏水、普通琼脂、棕黄色浓缩广告颜料、粪便隐血II号检测试剂盒(Fecal OB-II)、大便隐血(FOB)检测试剂盒(胶体金法)、邻甲联苯胺溶液、3%过氧化氢。1.1.2方法将普通琼脂按半固体培养基和固体培养基的配制的量,称取二者的平均量加入至1000ml蒸馏水中,按配制培养基的方法,反复煮沸,充分进行灭菌,再加入0.8g/L天然棕黄色浓缩广告颜料混…     

即刻法室内质控在ELISA实验中的应用

室内质控是保证血液质量的重要措施之一 ,EL ISA实验的质控一般采用临床化学实验质控的方法。由于 ELISA试剂盒效期短、批号更换频繁 ,试剂昂贵。加上其灵敏度高、特异性强 ,批内测定不能代表批间测定 [1] ,故实际操作较难。笔者在EL ISA实验中采用即刻法室内质控 ,并绘制了即刻法室内质控表。取得了良好的效果。现以 EL ISA法检测抗 - HIV为例报告如下。材料与方法1　质控血清　由卫生部临检中心提供 ,抗 - HIV4NCU/ml,批号 0 0 0 2。2　试验　抗 - HIV ELISA试剂盒 ,由北京金豪公司提供 ,批号 2 0 0 0 0 5 2 3。3　仪器　 …     

自制人类免疫缺陷病毒抗体等质控血清及室内质控方法建立研究

目的用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体酶联免疫试剂盒中阳性对照,制备室内质控血清。建立艾滋病酶联免疫检测的室内质控方法。进行方法可靠性和质控血清稳定性的评价,同时比较两个厂家生产的HIV抗体试剂盒进行自制质控血清室内质控结果以及自制丙型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原血清的室内质控结果的评价。方法将自制的HIV质控品与卫生部HIV质控品按照HIV抗体检测的SOP文件用HIV抗体试剂随患者进行检测,每天测定吸光度,计算S/CO値。连续检测20次计算S/CO值和s,以x±2s为控制限,以x±3s为失控限绘制质量控制框架图。每天随患者标本各加入1份自制质控品和1份卫生部购质控品进行质控将其各自的S/CO描在质控图上,应用多规则质量控制原则分析以发现当天测定批的误差以及误差原因。控制每批次检测的重复性,观察试剂盒间的差异进行两种质控血清质控结果的比对研究。结果自制HIV抗体质控血清方法科学可靠,减少了基质效应,能确保结果的准确性和可靠性。结论稀释阳性对照制备质控品,建立酶联免疫室内质控方法也适用于乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体等其他免疫项目的酶联免疫室内质控。不同厂家试剂用自制质控品进行质控结果无差异。     

ELISA法检测HBsAg室内质控方法及结果分析

目的 探讨ELISA法测定HBsAg的室内质控方法 .方法 选择一个阳性(0.5mg/ml)质控品和一个阴性质控品,采用L-J的室内质控方法 和对阳性、阴性质控品进行检测,采用12S、13S质控规则和Icutoff(+)、Icutoff(-)质控规则对ELlSA法测定HbsAg进行室内质控.结果 检测0.5ng/ml质控血清20天,得20个s/co值,经统计得20个s/co值的X为1.984,SD为0.551,CV为27.8%.2月份74个阳性(0.5ng/ml)质控结果中,最大的s/co值为3.01,最小值为0.952,按12S、13S质控规则无失控和警告结果,而按Icutoff(+)有一次失控,2月份74个阴性质控品测定结果中最大值为0.653,均小于1,按Icutoff(-)质控规则本月阴性质控品无失控,即无假阳性结果 .3月份96个s/co结果 的时段均值(x)为1.746,时段标准差(SD)为0.5385,时段CV为30.8%,按12S、13S质控规则仅有一次警告,按Icutoff(+)规则也无失控.3月份96个阴性质控品测定结果 中有一次阴性质控品检测的s/co结果 大于1.按Icutoff(-)规则判断本批次为失控.结论 ELISA检测试剂盒生产厂商应标明试剂的灵敏度或检测低限,ELISA法的室内质控品应选择一个灵敏度(或检测低限)浓度处的室内质控品,采用于Icutoff(+)规则用于监控检测结果 中的假阴性;同时选择一个阴性质控品,采用Icutoff(-)用于监控检测结果 的假阳性,不能按统计学方法 来选择什么样浓度的质控品或按经验选择s/co值在2～4相当浓度的质控品,而用L-J室内质控方法 进行ELISA法检测过程的室内质控,本作者认为意义不大,但其可用于评估和监测ELISA法检验过程中的精密度.     

ELISA检测冷沉淀中纤维连接蛋白含量初探

目的　探索用ELISA检测冷沉淀中Fn的含量。方法　用Fn ELISA试剂、Fn标准品,建立Fn ELISA标 准曲线,进行方法学研究,并与常规免疫扩散法作相关比较。结果　Fn ELISA重复性好,批内两种浓度的CV分别 为4.5%[ x1±s=(2130±96)μg/ml],3.8%[ x2±s=(1086±41)μg/ml];批间CV分为5.6%[ x1±s=(2154± 121)μg/ml],5.3%[ x2±s=(1095±58)μg/ml]。与常规免疫单扩散法比较,两者相关性好,r=0.8844,Y= 0.7127X免疫单扩散法+843.4。结论　Fn ELISA较免疫单扩散法,灵敏、特异、重复性好,结果更客观。     

血细胞分析仪室内质控方法的选择与比较

目前 ,我国大中型医院同一实验室使用不同厂家或型号的血细胞分析仪已较普遍。血细胞分析仪室内质控方法多采用Levey Jennings质控法 ,判断失控的界限为“ x± 3s” ,个别实验室采用经典的Westgard多规则控制方法 (N =2 )。这些方法带有极大的盲目性 ,没有考虑测定方法本身的性能特征 (方法的准确度、精密度、允许总误差等 ) ,对许多测定项目未能做到真正的控制 ,致使在同一实验室内同一标本用不同仪器分析 ,测定结果的准确性和可比性不能保证。为此 ,我们利用功效函数图[1 ,2 ] 法 ,对本室 3台血细胞分析仪各项目质控方法进行选择与比较…     

应用即刻性-x质控图进行抗-HIV检测的室内质控

[目的]建立便于自动化管理且适用于ELISA的室内质控方法，对可造成失控的系统误差，过失误差、偶然误差进行监控。[方法]每批抗-HIV试剂第l～20次实验采用“即刻法”质控，并计算其均值(x)和标准差(s)，绘制x质控图，然后从第21次实验自动转入x质控图。把酶标仪和我站局域网连接，数据自动传输至网络质控模块统计分析。[结果]室内质控结果显示，失控现象时有发生，且以超过下限为多，使临界值检测结果为阴性。这应引起血站系统的高度重视，以防输血性疾病的传播。[结论]该方法可以对灵敏度和特异性同时监控，符合ELISA定性实验的特性。     

Levery-Jennings 室内质控图的建立

室内质控 ( IQC)是血液学实验室内部进行的最基本的质量监督、检测、评价和改进 ,是全面质量管理体系中的一个重要环节 ,目的是对质控品的各项测得数据进行统计学处理 ,从而保证实验室结果的可重复性和精密度 ,判断检验报告是否可发出。目前 ,血站采用 ELISA法检测 ,其室内质控仍沿用 Levery-Jennings质控图 (简称 L-J质控图 ) ,此法科学性强、规范、实用。现以 HBs Ag为例 ,报告如下。材料与方法1　材料1 .1　试剂 :上海科华试剂盒 ,批号 :2 0 0 2 0 5 2 6。1 .2　质控血清 :上海血液中心生产 ,低值含量 ( 2 .0± 0 .5 )ng/ ml,批号 …     

自制ASO抗体质控品在生化分析仪上的应用

我们经过近2a的体会，摸索出一种适合免疫比浊定量测定方法的自制抗链球菌溶血素O（ASO）抗体高低值质控血清的方法，现报道如下。1材料和方法1．1材料（1）试剂：ASO试剂盒和质控品均购于上海申能德赛诊断系统有限公司，使用日立7600全自动生化分析仪分析。（2）质控品的制备：①分别收集ASO测定值小于150IU／ml和大于400Iu／ml的我院住院及门诊链球菌感染疾病的患者混合血清各约300ml，要求标本无溶血、无黄疸、无脂浊，     

质控血浆x-R图与患者数据均值共同用于凝血试验的室内质控

目的探讨患者均值与质控血浆x—R图在凝血试验室内质控中的应用。方法利用正态均值法计算患者均值控制限，将位于患者数据接受限内的患者数据以20例为一组计算均值并与均值控制限比较。计算每天若干个质控血浆结果的均值（x）及极差（R）并绘制Levey—Jennings质控图。结果1w内的患者均值有3次超出控制限，经分析1次为样本原因，2次为试剂原因。2W内质控血浆值有1次出控，原因是质控血浆复溶时间过长。x图无失控，R图的1次失控是由于当天的第一个质控值过高所致。结论将患者均值与质控血浆x—R图共同用于凝血试验的室内质控不仅能有效提示分析中系统误差与随机误差，而且对分析前的质量控制也具有较好的作用。     

对“即刻性“质控方法的思考

目前血站系统的检测项目大多采用ELISA法,因EUSA法的影响因素较多,如何加强室内质控就成为一个重要的问题.由于ELISA检验方法的特殊性,直接引用比较成熟的常规室内质控方法有其局限性.近年来文献[1、2]介绍并有较多实验室建立起了“即刻性“质控方法(Grubbs异常值取舍法),并对其应用作了报道[3、4].“即刻法“质控弥补了x图法的不足,使实验检测较早就可进入质控状态,较好地解决了ELISA法的室内质控问题,但作为一种统计学方法同样存着局限性.本文对笔者在建立这一方法时及后来实验室碰到的一些问题进行分析探讨,以期抛砖引玉.……