叶酸缺乏对小鼠脑组织PS1基因表达和Aβ沉积的影响

目的探讨叶酸缺乏对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠脑组织中早老素1(Presenilin1)基因表达和β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)沉积的影响。方法将6月龄APP/PS1双转基因AD模型小鼠24只,随机分为AD叶酸缺乏组(AD+FA-D)和AD叶酸对照组(AD+FA-N),每组12只,12只正常同月龄C57小鼠作为阴性对照组(WT+FA-N)。AD+FA-D组给予叶酸缺乏饲料,AD+FA-N组和WT+FA-N组给予正常饲料。免疫组织化学技术检测脑组织β-淀粉样蛋白沉积;实时定量PCR(RT-PCR)和荧光原位杂交(FISH)检测脑组织中PS1m RNA表达;免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学法检测脑组织中PS1蛋白表达。结果 WT+FA-N组脑组织Aβ沉积低于AD+FA-N组(P0.05);AD+FA-D组高于AD+FA-N组(P0.05);WT+FA-N组PS1 m RNA和蛋白表达均低于AD+FA-N组(P0.05);AD+FA-D组均高于AD+FA-N组(P0.05)。结论叶酸缺乏可以增加APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑组织中PS1 m RNA和蛋白表达并促进β-淀粉样蛋白沉积。     

莱菔硫烷对APP/PS1转基因AD模型小鼠认知功能的影响及其机制探讨北大核心CSCD

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制,为防治AD提供依据。方法将20只4月龄APP/PS1双转基因小鼠分为AD模型(APP/PS1)和AD模型干预(APP/PS1+SFN)、野生型小鼠对照(Wild type)和野生型小鼠干预(Wild type+SFN)4组,每组10只,雌雄各半。各干预组经口灌胃SFN 25 mg/(kg·bw),1/d,Wild type及APP/PS1组灌胃等量蒸馏水,连续5月。采用跳台实验检测小鼠的认知功能;刚果红染色法检测脑组织淀粉样斑块;丫啶橙染色法检测自噬小体,Western Blot法、免疫组织化学法分别检测脑皮质与海马微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平,以反映脑组织自噬水平。结果与Wild type组相比,APP/PS1组小鼠的认知功能下降,脑组织淀粉样斑块增多,脑组织自噬小体减少、脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+SFN组小鼠认知功能增强,脑组织淀粉样斑块减少,脑组织自噬小体增多,脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平升高差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Wild type+SFN组小鼠海马CA1区LC3蛋白表达水平高于Wild type组(P<0.05),其余各检测指标与Wild type组相比,均未见统计学差异(P>0.05)。结论 SFN可改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能,减轻该模型小鼠脑组织自噬水平的下降以及脑内淀粉样斑块的异常沉积。     

S-腺苷甲硫氨酸对阿尔茨海默病小鼠淀粉样蛋白生成的影响

目的探讨S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM),对自发阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的APP/PS1双转基因小鼠淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)生成的影响。方法 7月龄APP/PS1双转基因AD小鼠10只,随机分为2组,每组5只,均饲喂叶酸缺乏饲料。干预组(SAM),每日灌胃400μl SAM溶液(13.2 mg/kg bw);对照组(Cont)每日灌胃400μl双蒸水。干预60 d后分别检测两组肝脏SAM、S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH);脑组织海马区Aβ沉积,淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、早老素1(presenilin 1,PS1)蛋白表达,DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)活性及APP、PS1基因启动子的甲基化水平。结果 SAM干预60 d后,SAM组小鼠脑海马区Aβ沉积及PS1蛋白表达均低于Cont组(P0.05);与Cont组相比,肝脏SAM水平与细胞甲基化潜能升高,脑组织中DNMTs活性升高,促进APP、PS1基因启动子甲基化(P0.05)。结论补充SAM可减少AD转基因小鼠脑海马区Aβ沉积,其可能机制是:SAM作为甲基供体,可增高AD小鼠甲基化潜能与DNMTs活性,降低PS1蛋白表达,从而抑制海马区Aβ沉积。     

莱菔硫烷对APP/PS1转基因AD模型小鼠认知功能的影响及其机制探讨

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制,为防治AD提供依据。方法将20只4月龄APP/PS1双转基因小鼠分为AD模型(APP/PS1)和AD模型干预(APP/PS1+SFN)、野生型小鼠对照(Wild type)和野生型小鼠干预(Wild type+SFN)4组,每组10只,雌雄各半。各干预组经口灌胃SFN 25 mg/(kg·bw),1/d,Wild type及APP/PS1组灌胃等量蒸馏水,连续5月。采用跳台实验检测小鼠的认知功能;刚果红染色法检测脑组织淀粉样斑块;丫啶橙染色法检测自噬小体,Western Blot法、免疫组织化学法分别检测脑皮质与海马微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平,以反映脑组织自噬水平。结果与Wild type组相比,APP/PS1组小鼠的认知功能下降,脑组织淀粉样斑块增多,脑组织自噬小体减少、脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+SFN组小鼠认知功能增强,脑组织淀粉样斑块减少,脑组织自噬小体增多,脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平升高差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。Wild type+SFN组小鼠海马CA1区LC3蛋白表达水平高于Wild type组(P0.05),其余各检测指标与Wild type组相比,均未见统计学差异(P0.05)。结论 SFN可改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能,减轻该模型小鼠脑组织自噬水平的下降以及脑内淀粉样斑块的异常沉积。     

铝对APP/PS1双转基因小鼠认知能力及mGluR1表达的影响

[目的]对子代APP/PS1双转基因小鼠进行基因鉴定,研究铝对小鼠学习记忆及脑组织内代谢性谷氨酸受体-1（mGluR1）表达的影响。[方法]用PCR扩增转入基因组DNA中的APP基因,鉴定其基因型;将鉴定出的子代小鼠随机分为2组,即生理盐水组和5mg/kg铝暴露组,每组8只;采用腹腔注射,连续2个月,采用①Morris水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力的改变;②用蛋白印迹法（Western blot）和实时荧光定量PCR法检测脑组织中mGluR1蛋白和基因的表达水平。[结果]①鉴定出APP/PS1双转基因小鼠;②Morris水迷宫实验结果显示,染铝组小鼠找到平台的潜伏期较对照组显著增加（P〈0.01）;③Western blot结果显示染铝组mGluR1蛋白表达量高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;实时荧光定量PCR结果显示染铝组mGluR1基因表达量高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。[结论]铝可致APP/PS1双转基因小鼠学习和记忆能力障碍,且与mGluR1蛋白和基因的表达水平均升高有关。     

Fmr1基因敲除型小鼠肠道菌群结构分析

目的探讨Fmr1基因敲除型小鼠粪便肠道细菌群落的结构及多样性。 方法利用16S rRNA高通量测序技术对10份小鼠粪便样本进行测序分析并进行生物学分析。 结果两组样本测序共获得高质量序列325 280条，核心菌门为拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门。Anosim分析表明基因敲除(KO)组与正常野生型(WT)组小鼠两组间具有显著差异，组内样品重复性满足数据分析要求，Adonis分析表明本次检验可信度高(P<0.05)。LDA值展现KO组与WT组小鼠肠道微生态菌群有明显差异，基于Unifrac距离，Amova分析表明KO和WT组组间差异显著(P<0.05)。 结论KO组与WT组小鼠肠道微生物群落的结构及多样性存在显著差异且具有统计学意义，提示孤独症与肠道微生态系统密切相关，肠道微生态系统可能通过微生物代谢的间接作用影响孤独症的发生发展，但具体的作用机制仍需进一步的研究。     

Toll样受体2和肠道菌群在高脂饮食诱导的胰岛素抵抗中的作用

目的 研究高脂喂养与基础饮食喂养条件下,野生型（wild type, WT）小鼠与Toll样受体2（Toll like receptor 2,TLR2）基因敲除(TLR2-/-）小鼠肠道菌群的变化及其与胰岛素抵抗的关系。 方法 出生10周龄雄性TLR2-/-小鼠和WT小鼠各两组分别进行高脂饲料与基础饲料喂养,每组3只小鼠,喂养9周后,进行葡萄糖耐量实验（glucose tolerance test, GTT）和胰岛素抵抗实验（insulin resistance test, ITT）实验;收集小鼠粪便进行16S rDNA高通量测序;处死后,ELISA测定血清中细胞因子IL - 6、TNF - α和IL - 10的含量。结果 与基础饮食组的WT小鼠和高脂饮食组的TLR2-/-小鼠相比,高脂饮食组的WT小鼠GTT（t = 3.210,P = 0.033;t = 3.689,P = 0.021）、ITT（t = 3.332,P = 0.029;t = 4.125,P = 0.015）曲线下面积均升高,差异具有统计学意义;与基础饮食组的WT小鼠、基础饮食组的TLR2-/-小鼠和高脂饮食组的TLR2-/-小鼠相比,高脂饮食组的WT小鼠血清炎性因子IL - 6和TNF - α含量均升高,差异具有统计学意义（IL - 6:t = 9.646,P = 0.001;t = 16.02,P＜0.001;t = 7.677,P = 0.002;TNF - α:t = 7.731,P = 0.002;t = 10.73,P＜0.001;t = 5.802,P = 0.004）;抗炎因子IL - 10均降低,差异具有统计学意义（t = 4.219,P = 0.014;t = 27.6,P＜0.001;t = 10.2,P = 0.001）;与基础饮食组的WT小鼠相比,高脂饮食组的WT小鼠肠道菌群组成发生变化,拟杆菌门减少（Z = - 1.528,P = 0.127）,厚壁菌门/拟杆菌门比值升高（Z = - 0.218,P = 0.827）,变形菌门占比升高（Z = - 0.655,P = 0.513）,普雷沃菌属降低（Z = - 0.218,P = 0.827）,颤螺旋菌属和拟杆菌属升高（Z = - 1.528,P = 0.127;Z = - 1.964,P = 0.050）;与基础饮食组的TLR2-/-小鼠相比,高脂饮食组的TLR2-/-小鼠厚壁菌门/拟杆菌门比值没有明显改变,变形菌门占比升高（Z = - 1.964,P = 0.050）,普雷沃菌属降低（Z = - 0.655,P = 0.513）,颤螺旋菌属和拟杆菌属升高（Z = - 1.993,P = 0.046;Z = - 1.528,P = 0.127）。结论 高脂饮食会导致肠道菌群紊乱,并改变小鼠的葡萄糖调节能力,TLR2信号通路的激活促进炎症反应以及胰岛素抵抗的发生,但可能并不通过肠道菌群发挥作用。     

宫颈癌术后放疗对患者肠道菌群结构失衡的影响

目的探讨宫颈癌术后放疗对患者肠道菌群结构失衡的影响。方法选取天津市宝坻区人民医院2018年1月—2021年12月收治的104例需行手术治疗的宫颈癌患者纳入研究,按照抽签法随机分为两组,各52例,对照组行手术治疗,而观察组则在对照组的基础上进行术后放疗。分析两组患者肠道菌群水平情况、丰富度与多样性指数及便秘发生情况。结果治疗前,两组患者的乳酸杆菌、双歧杆菌水平比较差异无统计学意义(t=0.257、0.235,均P>0.05);治疗后两组乳酸杆菌、双歧杆菌数量均低于治疗前,且观察组显著低于对照组,差异有统计学意义(t=7.443、7.696,均P<0.05)。治疗前,两组肠道菌群丰富度与多样性比较差异无统计学意义(t=0.412、0.615,均P>0.05);治疗后两组肠道菌群丰富度与多样性低于治疗前,且观察组肠道菌群丰富度与多样性低于对照组,差异均有统计学意义(t=7.815、66.400,均P<0.05)。观察组便秘发生率明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=8.565,P<0.05)。治疗后,观察组有30例发生放射性直肠炎,其中1级、2级占比为83.33%(25/30),有7例患者在治疗结束3个月之后才出现症状。结论在宫颈癌术后对患者进行放疗,会破坏患者体内菌群平衡,不仅会降低患者体内双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群的数量,降低机体内的肠道菌群丰度,从而一定程度上促使患者便秘情况的发生,在临床术后放疗方案的实施中,值得警惕。     

高脂饲料诱导小鼠代谢综合征及对肠道发育、肝脏功能和肠道菌群的影响

目的探究高脂饲料诱导小鼠代谢综合征的效果,以及对肠道发育、肝脏功能以及肠道菌群的影响。方法40只3周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组:空白对照组和高脂饲料组。适应性喂养一周后,高脂饲料组采用高脂饲料(脂肪供能比60%)饲喂,空白对照组采用普通饲料(脂肪供能比11%)饲喂,共计20周。每周测量小鼠体重,每月测量空腹血糖。实验末测定小鼠糖耐量,收集粪便,提取粪便DNA,实时荧光定量PCR和二代测序分析小鼠粪便双歧杆菌含量及肠道菌群组成。收集血清、脏器和内脏脂肪,测定小鼠肝脏、脾脏、胰腺脏器系数、脂体比及肠道长度,测定血清中血脂水平、肝功能指标、瘦素和脂联素水平,HE染色观察小鼠肝脏炎症状况,油红O染色观察肝脏脂肪浸润程度。结果长期高脂饲料干预后,C57BL/6J小鼠体重增加,空腹血糖、口服糖耐量、血脂水平、脂肪含量以及瘦素、脂联素水平升高(P<0.05);肝脏炎症状况及脂肪浸润程度增加,小鼠肠道长度降低(P<0.05);双歧杆菌属浓度降低(P<0.05),两歧双歧杆菌和角双歧杆菌浓度增加(P<0.05);肠道菌群ACE、Chao1、Simpson和Shannon指数下降(P<0.05),门水平上高脂饲料组厚壁菌门、变形菌门和脱铁杆菌门增加(P<0.05),拟杆菌门和疣微菌门减少(P<0.05),且厚壁菌门与拟杆菌门的比例显著上升。结论高脂饲料可诱导C57BL/6J小鼠出现代谢综合征,并引起小鼠肠道发育受损、肝脏组织及功能异常、肠道菌群多样性降低,群落结构向肥胖型转变。     

小鼠肺细菌感染模型肠道菌群变化的实验研究

目的 构建小鼠肺细菌(肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌)感染模型，分析小鼠肠道菌群的变化。方法 C57BL/6小鼠经气管插管分别诱导感染肺炎克雷伯菌(Kp)、鲍氏不动杆菌(Ab)及金黄色葡萄球菌(Sa),观察肺部炎症，取肺组织匀浆培养进行细菌计数，采用16S rDNA测序技术对粪便菌群进行检测并进行生物学信息分析。结果 感染后第7天，显微镜下可见各感染组小鼠肺部支气管周围均可见大量炎症细胞浸润，肺组织病理评分>3分，肺匀浆病原菌计数均超过10⁵ CFU/g,符合急性肺部感染指征。感染后第3、7天，Kp组、Sa组较PBS组(磷酸缓冲盐溶液对照组)小鼠肠道菌群物种数增加(P<0.05);随感染时间延长，各组间肠道菌群群落结构差异显著增大(P<0.05);随感染时间延长，各组间肠道菌群门水平差异显著增大(P<0.05);各感染组较PBS组小鼠肠道益生菌联合乳杆菌属比例显著降低，NK4A136组、另枝菌属比例显著增加(P<0.05); Kp组较PBS组小鼠肠道益生菌乳杆菌科比例降低(P<0.05)。结论 不同细菌所致肺感染对小...     

Human gut microbiota Agathobaculum butyriciproducens improves cognitive impairment in LPS-induced and APP/PS1 mouse models of Alzheimer's disease

Alzheimer's disease (AD) is the most prevalent neurodegenerative disease, and is characterized by the accumulation and presence of amyloid plaques (Aβ), tangles, dementia, and cognitive impairment. Currently, there is no known cure for AD; however, recently, the association between alteration of the gut microbiota and AD pathology has been explored to find novel therapeutic approaches. Microbiota-targeted intervention has been suggested as an attractive therapeutic approach for AD. Agathobaculum butyriciproducens (SR79) is a strict anaerobic and butyric acid-producing bacteria. We hypothesized that administration of SR79 might have a beneficial effect on cognitive deficits and AD pathologies. To determine the therapeutic effects of SR79 on AD pathologies, APP/PS1 transgenic and lipopolysaccharide -induced cognitive impairment mouse models were used. In the lipopolysaccharide -induced cognitive deficit model, the administration of SR79 improved cognitive function and decreased microglia activation. In addition, the administration of SR79 to APP/PS1 mice significantly improved novel object recognition and percent alteration results in novel object recognition and Y-maze alteration tests. Furthermore, Aβ plaque deposition and microglial activation were markedly reduced in the parietal cortex and hippocampus after SR79 treatment in APP/PS1 mice. SR79 treatment significantly decreased gene expression levels of IL-1β and C1QB and increased the gene expression levels of IGF-1 and thereby the downstream signaling pathway in the cortex of APP/PS1 mice. In conclusion, SR79 administration improved cognitive function and AD pathologies through the regulation of neuroinflammation and IGF-1 signaling in an animal model.     

毒死蜱对小鼠焦虑样行为以及肠道菌群的影响

目的 观察毒死蜱暴露致小鼠焦虑样行为及肠道菌群的影响,并探讨两者之间的关系。方法 30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组:对照组(CTL)、毒死蜱低剂量组(CPF2.5)和毒死蜱高剂量组(CPF5),分别灌胃植物油、毒死蜱2.5 mg/kg bw和毒死蜱5 mg/kg bw,1次/d,连续14 d。采用旷场实验(OFT)和高架十字迷宫实验(EPM)对小鼠焦虑样行为进行检测; 采用16S rDNA测序检测粪便肠道菌群变化; 用LEfSe筛选各组间差异菌群; 采用Spearman分析研究肠道差异菌和焦虑样行为指标之间的相关性。结果 与CTL相比,CPF2.5和CPF5小鼠进入旷场中心次数减少(F=6.404,P=0.042,P=0.002),在开臂的活动路程百分比、开臂停留时间百分比以及进入开臂次数百分比均降低(F=8.525,P=0.002,P=0.002; F=17.486,P<0.001, P<0.001; F=4.751,P=0.023,P=0.010),以上差异均有统计学意义。LEfSe 多级物种差异判别分析结果显示,Dubosiella、Muribaculum、Akkermansia等菌在对照组富集; Odoribacter、PrevotellaceaeUCG_001菌在CPF2.5组富集; Proteobacteria、Rhizobiaceae、Ochrobactrum、Rhizobiales菌在CPF5组富集。Spearman相关分析结果表明,Muribaculum与EPM开臂活动路程百分比和开臂停留时间百分比呈正相关(r=0.506, P=0.012; r=0.455, P=0.025),Odoribacter和EPM开臂停留时间百分比呈负相关(r=-0.486, P=0.016)。结论 毒死蜱暴露后引起的小鼠焦虑样行为改变可能与特定的肠道菌群丰度(Muribaculum和Odoribacter)改变相关。     

1型糖尿病儿童肠道菌群谱分析研究

目的 通过16SrRNA基因测序方法探索1型糖尿病(T1DM)儿童肠道菌群结构变化的特征,并比较T1DM儿童与健康儿童间肠道菌群的差异,为临床应用益生菌进行TIDM早期干预提供理论基础和实验依据。方法 选取2018年10月-2019年10月在昆明市儿童医院内分泌遗传代谢科住院并初诊为T1DM的5~14岁儿童18例,同时选取19例性别、年龄相近的健康儿童为研究对象,收集两组儿童粪便标本后进行16SrRNA基因测序实验,并采用QIIME 2分析流程进行生物信息学分析,比较两组间肠道菌群的差异。结果 1)利用QIIME2软件将相似度100%的序列聚类分析后共获得3 248个Feature数;2)经物种鉴定及注释,绝大部分菌群都分类到属级和种级;3)Alpha多样性分析说明本次研究测序深度充分,并且T1DM儿童肠道菌群的丰富度及多样性较健康儿童降低 (P<0.05);4)Beta多样性分析中,PCoA图说明T1DM儿童和健康儿童间肠道菌群结构存在明显差异;5)肠道菌群组成差异分析中,在门水平上,T1DM儿童放线菌门、拟杆菌门和蓝细菌门丰度显著增高,而变形菌门、杆菌门的丰度降低(P<0.05);在属水平上,T1DM儿童粪杆菌属、双歧杆菌属和拟杆菌属的丰度较健康儿童增高,而埃希氏杆菌属-志贺氏杆菌、肠球菌属、Blautia菌属丰度降低(P<0.05)。结论 T1DM儿童存在肠道菌群生态失衡,并且菌群物种的丰富度及多样性降低。此外,T1DM儿童与健康儿童肠道菌群结构分布存在明显差异。     

1型糖尿病儿童肠道菌群谱分析研究

目的 通过16SrRNA基因测序方法探索1型糖尿病(T1DM)儿童肠道菌群结构变化的特征,并比较T1DM儿童与健康儿童间肠道菌群的差异,为临床应用益生菌进行TIDM早期干预提供理论基础和实验依据。方法 选取2018年10月-2019年10月在昆明市儿童医院内分泌遗传代谢科住院并初诊为T1DM的5~14岁儿童18例,同时选取19例性别、年龄相近的健康儿童为研究对象,收集两组儿童粪便标本后进行16SrRNA基因测序实验,并采用QIIME 2分析流程进行生物信息学分析,比较两组间肠道菌群的差异。结果 1)利用QIIME2软件将相似度100%的序列聚类分析后共获得3 248个Feature数;2)经物种鉴定及注释,绝大部分菌群都分类到属级和种级;3)Alpha多样性分析说明本次研究测序深度充分,并且T1DM儿童肠道菌群的丰富度及多样性较健康儿童降低 (P<0.05);4)Beta多样性分析中,PCoA图说明T1DM儿童和健康儿童间肠道菌群结构存在明显差异;5)肠道菌群组成差异分析中,在门水平上,T1DM儿童放线菌门、拟杆菌门和蓝细菌门丰度显著增高,而变形菌门、杆菌门的丰度降低(P<0.05);在属水平上,T1DM儿童粪杆菌属、双歧杆菌属和拟杆菌属的丰度较健康儿童增高,而埃希氏杆菌属-志贺氏杆菌、肠球菌属、Blautia菌属丰度降低(P<0.05)。结论 T1DM儿童存在肠道菌群生态失衡,并且菌群物种的丰富度及多样性降低。此外,T1DM儿童与健康儿童肠道菌群结构分布存在明显差异。     

昼夜节律紊乱对大鼠肠道菌群及肠道屏障的影响

目的 研究昼夜节律紊乱对机体肠道菌群和肠道屏障的影响,为预防和干预昼夜节律紊乱引发机体健康问题提供理论依据。方法 30只SD雄性大鼠,随机分为对照组和昼夜节律紊乱组（下文简称紊乱组）,对照组大鼠用正常光周期暴露（12 h光照/12 h黑暗周期）,紊乱组大鼠用轮回颠倒的光照周期暴露（12 h光照/12 h黑暗周期,每3 d颠倒一次,共计5个轮回）。采用16S rRNA测序技术测定分析大鼠结肠肠道菌群的物种组成和群落结构变化,利用苏木精-伊红染色法（HE）观察结肠组织学变化,采用Western blot方法检测大鼠结肠Occludin、Claudin1、Claudin3和ZO - 1紧密连接蛋白表达。结果 与对照组比较,紊乱组大鼠肠道菌群多样性降低和构成发生改变。门水平上,紊乱组大鼠肠道拟杆菌门（t = 2.672, P = 0.028）的丰度增加,而厚壁菌门（t = 2.732, P = 0.024）和放线菌门（t = 2.717, P = 0.026）的丰度减少。属水平上,紊乱组大鼠肠道毛螺菌（t = 4.468, P = 0.002）、瘤胃球菌（t = 4.096, P = 0.007）、梭状杆菌（t = 2.619, P = 0.038）和嗜木聚糖真杆菌（t = 2.500, P = 0.041）丰度减少。结肠粘膜下层轻度水肿但粘膜上皮没有发生明显损伤。大鼠结肠紧密连接蛋白Occludin（t = 7.283, P＜0.001）、Claudin1（t = 13.660, P＜0.001）、Claudin3（t = 10.596, P＜0.001）和ZO - 1（t = 6.919, P＜0.001）表达均降低。结论 长期昼夜节律紊乱导致大鼠肠道菌群组成和结构发生改变。长期昼夜节律紊乱还可通过破坏肠道紧密连接而损害肠道上皮屏障的完整性,进而增加肠道通透性。     

孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆及其海马组织中IL-1β表达的影响

目的:探讨母体铅染毒对其子一代海马组织中白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的影响。方法:雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3 g/L、1.0 g/L、3.0 g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21天断乳为止。随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅含量;在出生后第21天时,采用Y型迷宫实验测定仔鼠的学习记忆能力,并通过免疫组化方法测定各组海马组织中IL-1β的表达。结果:孕哺期不同剂量铅暴露后,第7、14和21天的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Y型迷宫实验结果显示,低、中、高剂量铅暴露组21天的仔鼠,获取记忆的能力(T1)、保持记忆的能力(T2)和记忆保持率(T3)均低于同期对照组仔鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,各剂量铅暴露组仔鼠海马的CA1区IL-1β免疫组化阳性反应物的面密度明显高于对照组,IL-1β免疫组化阳性反应物的平均灰度值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中IL-1β的表达,可能干扰了海马神经元的功能,进而影响了仔鼠的学习记忆能力。     

Yellow pea fiber improves glycemia and reduces Clostridium leptum in diet-induced obese rats

Numerous studies have demonstrated the impact of functional fibers on gut microbiota and metabolic health, but some less well-studied fibers and/or fractions of foods known to be high in fiber still warrant examination. The aim of this study was to assess the effect of yellow pea-derived fractions varying in fiber and protein content on metabolic parameters and gut microbiota in diet-induced obese rats. We hypothesized that the yellow pea fiber (PF) fraction would improve glycemia and alter gut microbiota. Rats were randomized to 1 of 5 isoenergetic dietary treatments for 6 weeks: (1) control; (2) oligofructose (OFS); (3) yellow PF; (4) yellow pea flour (PFL); or (5) yellow pea starch (PS). Glycemia, plasma gut hormones, body composition, hepatic triglyceride content, gut microbiota, and messenger RNA expression of genes related to hepatic fat metabolism were examined. Pea flour attenuated weight gain compared with control, PF, and PS (P < .05). Pea flour, PS, and OFS had significantly lower final percent body fat compared with control. Oligofructose but not the pea fraction diets reduced food intake compared with control (P < .05). Pea fiber resulted in lower fasting glucose and glucose area under the curve compared with control. Changes in gut microbiota were fraction specific and included a decrease in Firmicutes (percent) for OFS, PF, and PFL compared with control (P < .05). The Firmicutes/Bacteroidetes ratio was reduced with OFS, PF, and PFL when compared with PS (P < .05). Taken together, this work suggests that yellow pea-derived fractions are able to distinctly modulate metabolic parameters and gut microbiota in obese rats.     

内蒙古在校大学生体质量指数与肠道菌群宏基因组浓度的关联

  目的  探索内蒙古地区在校大学生体质量指数(BMI)与肠道菌群的关联性,为揭示肠道菌群与肥胖之间的关联性提供参考依据。  方法  以内蒙古医科大学为试点,通过招募方式共收集88名志愿者。测量研究对象的身高和体重,并收集粪便样本。提取干粪便样本中的细菌宏基因组,并检测干粪便细菌宏基因组质量浓度(μg/μL)。统计分析BMI与肠道菌群宏基因组质量浓度的相关性,并比较不同BMI组的肠道菌群宏基因组质量浓度差异。  结果  大学生BMI与肠道菌群的宏基因组质量浓度呈负相关(r=-0.27,P < 0.05)。不同BMI大学生的肠道菌群宏基因组质量浓度差异有统计学意义(F=3.62,P < 0.05)。分性别分析,女生中,不同BMI的肠道菌群宏基因组质量浓度差异有统计学意义(F=1.87,P < 0.05),两两比较正常组与超重组、正常组与肥胖组差异均有统计学意义(P值均 < 0.05);男生中,不同BMI的肠道菌群宏基因组质量浓度差异无统计学意义(F=0.60,P>0.05)。  结论  内蒙古地区在校大学生BMI与其肠道菌群具有关联性,超重及肥胖人群肠道菌群宏基因组质量浓度显著降低。     

肺泡表面活性物质联合早期NCPAP治疗NRDS的临床疗效观察

目的 观察肺泡表面活性物质(PS)联合早期鼻塞持续气道正压呼吸(NCPAP)治疗新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的临床疗效.方法 选取2015年1月至2016年6月于同济大学附属上海市第一妇婴保健院收治的110例NRDS者,经PS治疗为观察组,经PS联合早期NCPAP治疗为治疗组,每组各55例,对比两组患儿的治疗效果,并进行统计分析.结果 治疗1h、1d后,治疗组的pH值高于观察组(t3=9.87、t4=10.35,均P<0.05),动脉血氧分压高于观察组(t3=8.97、t4=9.03,均P<0.05),呼气末正压低于观察组(t3=-7.86、t4=-6.06,均P<0.05),血二氧化碳分压低于观察组(t3=-8.86、t4=-10.32,均P<0.05),吸入氧浓度亦低于观察组(t3=-8.65、t4=-7.93,均P<0.05);治疗组的总有效率(96.36%)明显高于观察组(78.18%),χ2=4.76,P<0.05,治疗组并发症发生率显著低于观察组(χ2=10.85,P<0.05),治疗组生存率显著优于观察组(χ2=6.54,P<0.05).结论 经PS联合早期NCPAP治疗能够显著提高NRDS的治疗总有效率,可有效降低并发症发生率,临床疗效更为理想.     

长期抗生素暴露对高脂饮食负荷小鼠糖代谢和肠道菌群的影响

目的 探究长期抗生素暴露对高脂饮食负荷小鼠糖代谢和肠道菌群的影响。方法 45只新生BALB/c小鼠随机分为对照组、高脂饮食组和高脂饮食抗生素联合组（n=15）,联合组小鼠出生后以头孢曲松（100mg/kg）灌胃15周,第21d起,高脂组和联合组以高脂饲料,对照组以普通饲料喂养12周。实验结束后,对小鼠进行口服糖耐量实验并采集小鼠内脏、脂肪、血清和粪便,测定小鼠脏器系数、脂体比、血糖、胰岛素和瘦素及肠道菌群。结果 高脂饮食引起小鼠肝脏系数、总脂体比、胰岛素抵抗指数、空腹血糖和血糖曲线下面积显著升高（P均<0.05）。与对照组和高脂组比较,联合组alpha多样性指数显著降低（P<0.05）;主坐标分析显示三组组间群落组成具有明显差异。门水平上,与高脂组比较,联合组厚壁菌门相对丰度显著升高（P<0.05）,拟杆菌门相对丰度显著降低（P<0.05）,高脂组变形菌门相对丰度显著高于对照组和联合组（P均<0.05）。属水平上,高脂饮食诱导厚壁菌门布劳特氏菌属（Blautia）相对丰度增加,降低了拟杆菌门另枝菌属（Alistipes）相对丰度,联合组厚壁菌门肠球菌属（Enterococcus）和葡萄球菌属（Staphylococcus）相对丰度明显升高,其他菌属相对丰度均降低。结论 长期抗生素暴露可能通过改变肠道中细菌生长从而调节肠道菌群,在一定程度上抵抗高脂饮食负荷小鼠的糖代谢失调,表明肠道细菌和宿主代谢功能间存在密切的关联,肠道细菌有望成为改善膳食营养调节的机体能量代谢的重要靶点。