强力霉素调控血小板生成素在CHO细胞中的表达

本实验应用Ｔｅｔ－Ｏｎ基因表达系统,通过强力霉素调控血板生成素（ＴＰＯ）基因在ＣＨＯ细胞中的表达。应用ＤＮＡ重组技术,构建质粒ｐＴＲＥ－ＴＰＯ。应用脂质体介导的基本转染技术,ｐＴＲＥ－ＴＰＯ与ｐＴＫ－Ｈｙｇ共转染ＣＨＯ－Ｔｅｔ－Ｏｎ细胞株,得到双稳定细胞株ＣＨＯ－Ｔｅｔ－Ｏｎ－ＴＰＯ,并筛选高表达、低背景克隆。当培养基中不加强力霉素时,ＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹未见ＴＰＯ表达,ＥＬＩＳＡ测定     

RevTet—On系统调控血小板生成素基因表达的研究

本研究应用ＲｅｖＴｅｔ－Ｏｎ基因表达系统，通过四环素衍生物强力霉素（ｄｏｘｃｙｃｌｉｎｅ，Ｄｏｘ）调控血小板生成素（ＴＰＯ）基因在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中的表达，首先应用基因重组技术构建含ＴＰＯ基因的重组质粒ｐＲｅｖＴＲＥ／ＴＰＯ，然后将Ｒｅｖ－Ｔｅｔ－Ｏｎ基因调控系统的ｐＲｅｖＴｅｔ－Ｏｎ和ｐＲｅｖＴＲＥ／ＴＰＯ分别感染ＴＰ６７细胞，从而包装ＲｅｖＴｅｔ－Ｏｎ和ＲｅｖＴＲＥ／ＴＰＯ重组逆不病毒，同时将此两种病毒感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，建立整合入ＲｅｖＴｅｔ－Ｏｎ和ＲｅｖＴＲＥ／ＴＰＯ逆转录病毒的阳性细胞株（ＲｅｖＴｅｔＯｎ３Ｔ３／ＴＰＯ）。通过Ｄｏｘ调节ＴＰＯ基因在此细胞株中表达，培养基中加入２ｍｇ／Ｌ Ｄｏｘ或不加Ｄｏｘ，然后用ＲＴ－ＰＣＲ，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和ＥＬＩＳＡ方法检测ＴＰＯ基因表达情况，结果发现，Ｒｅｖ     

自身免疫性甲状腺病患者放免法测定TPOAb及其临床评价

为探讨甲朱过氧化物酶抗体不同测定方法结果的差异性及其意义，以免疫亲和纯化的ＴＰＯ制备ＴＰＯ单克隆抗体兔抗人ＴＰＯ抗血清，建立了测定ＴＰＯＳＡｂ的三种方法：液相双抗法ＲＩＡ、单抗固相ＲＩＡ及液相竞争ＲＩＡ。     

关于血小板生成素的研究近况

血小板生成素（ＴＰＯ）是参与巨核细胞系充造血的系特异性因子，多年来，人们一直在提纯ＴＰＯ，纯度不高，Ｗｅｎｄｌｉｎｇ等人在骨髓增殖性白血病病毒中发现了特异性参与巨核细胞系统造血的原癌基因ｃ－ｍｐｌ。在此基础上，１９９４年，美国、法国、日本的５组科学家各自独立地克隆了ＴＰＯ的ｃＤＮＡ，并获得了重组了ＴＰＯ；人、狗、小鼠和猪的ＴＰＯｃＤＮＡ的开放读码框架分别可以编码３５３、３５２、３５６和３５３个氨基     

血小板生成素在体内造血调控中的作用

本文综述了ＴＰＯ在体内注射治疗血小板减少症，其ｃＤＮＡ过度表达或基因敲出的后果，对各系细胞的作用以及血清中的ＴＰＯ浓度与血小板和巨核细胞计数的关系等的最新进展。     

促血小板生成素的研究进展

促血小板生成素也叫巨核细胞增殖成熟因子或ｃ－ｍｐｌ配体，它由３３２个氨基酸组成，由位于染色体３ｑ２７－２８上的一个单基因编码，体内ＴＰＯ水平与外周血小板计数呈负相关关系。ＴＰＯ与ｃ－ｍｐｌ受体结合后，活化酪氨酸激酶，激活信号传递系统，Ｊａｋ２、Ｓｈｃ和Ｇｒｂ２是参与信号传递过程的信号分子。ＴＰＯ能显著、特异地刺激巨核细胞生成和血小板产生。     

050急性和慢性肝功能衰竭患儿的肝血小板生成素mRNA水平

肝脏是血小板生成素 (ＴＰＯ)生成的主要脏器 ,ＴＰＯ调节巨核细胞和血小板生成的作用。为了研究受损ＴＰＯ基因表达在肝功能衰竭患儿血小板减少发病机理中的作用 ,作者应用肝ＲＮＡ的逆转录———聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)对肝硬化或急性肝衰 (ＡＬＦ)患儿肝组织中的ＴＰＯｍＲＮＡ水平进行定量测定 ,并用商品化的ＥＬＩＳＡ进行了ＡＬＦ患儿在施行常位肝移植术前后血清ＴＰＯ免疫测定。43名住院患儿 (平均年龄 15个月 ,范围 1个月～ 17岁 )中 ,胆道闭锁 (ｎ =2 1)、代谢性疾病(ｎ =4)、新生儿肝炎 (ｎ =4)、Ｍｏｒ ｂｕｓＢｙｌｅｒ(ｎ …     

肥胖儿童红细胞膜变化与血压的关系

目的：探讨细胞膜结构和功能改变在肥胖引起儿童高血压发病机制中的作用。方法：测定了１０４例「正常对照（ＮＴ）３７例,正常血压肥胖（ＮＯＴ）３４例,高血压肥胖（ＯＨＴ）３３例」１２～１６岁中学儿童的Ｎａ＾＋－ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性、膜Ｃａ＾２＋结合力和磷脂含量。结果：ＯＮＴ组和ＯＨＴ组的Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及膜Ｃａ＾２＋结合力显著低于ＮＴ组,ＯＨＴ组     

氧自由基血清离子变化在支气管哮喘中的作用与机制研究

目的 为了探讨哮喘患者体内氧自由基、镁离子与红细胞膜ＡＴＰ酶的变化情况,以及它们与疾病发生程度和相关关系。方法 观察了４０例哮喘发作期、３０例缓妥期者和健康对照组４０例正常人,用生化方法测定了黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）、红细胞膜ＡＴＰ酶、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性变化,过氧化脂质（ＬＰＯ）、丙二醛（ＭＤＡ）和血清镁钾、钠离子变化情况。结果 ①哮喘发作组红细胞膜钙镁ＡＴＰ酶、钠钾     

P2z受体在介导慢性淋巴细胞白血病细胞凋亡中的作用

目的：研究嘌呤能Ｐ２ｚ受体在介导慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）细胞凋亡中的作用。方法：将表达Ｐ２ｚ受体［Ｐ２ｚ（＋）］与不含Ｐ２ｚ受体［Ｐ２ｚ（－）］的两组ＣＬＬ细胞分别同１．０ｍｍｏｌ／Ｌ三磷酸腺苷（ＡＴＰ）体外培养８小时，以电镜、ＤＮＡ凝胶电泳和定量ＤＮＡ３′端ＴｄＴ法检测细胞凋亡；并对ＡＴＰ、苯甲酰苯甲酸ＡＴＰ（ＢｚＡＴＰ）、２甲基硫ＡＴＰ（２ＭｅＳＡＴＰ）、γ硫代ＡＴＰ（ＡＴＰγＳ）及其它核苷的诱导效应和氧化型ＡＴＰ（ＯｘＡＴＰ）、１［Ｎ，Ｏ二（５异喹啉碘酰基）Ｎ甲基Ｌ酪氨酰］４苯哌嗪（ＫＮ６２）的抑制效应做定量研究。结果：①Ｐ２ｚ＋细胞能在ＡＴＰ诱导下呈现典型的细胞凋亡形态和ＤＮＡ梯形条带；②不同的Ｐ２ｚ受体激活剂可通过Ｐ２ｚ受体诱导细胞凋亡并产生不同量的ＤＮＡ降解片段，诱导能力的强弱顺序是ＢｚＡＴＰ＞ＡＴＰ＞２ＭｅＳＡＴＰ，而ＡＴＰγＳ或其它核苷几乎无诱导能力；③ＯｘＡＴＰ和ＫＮ６２可完全阻止诱导剂诱导的细胞凋亡。结论：Ｐ２ｚ受体在介导由ＡＴＰ等诱导ＣＬＬ细胞凋亡的过程中起着十分重要的作用     

紫外线照射充氧自血回输治疗脑梗塞观察红细胞膜Na+-K+-ATP酶的变化

目的：探讨紫外线照射充氧自血回输疗法（ＵＢＩＯ）对脑梗塞治疗作用及其机制。方法：５０例急性脑梗塞患者分为治疗组和对照组,治疗组３０例用ＵＢＩＯ与传统药物联合治疗,对照组２０例仅用传统药物治疗,进行两组疗效比较,同时检测两组患者治疗前后红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。结果：治疗组的总有效率为９０％,对照组为７５％,经过Ｒｉｄｉｔ法分析,两组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。两组患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性明显低于健康人对照组（Ｐ＜０．０１）。ＵＢＩＯ治疗１个疗程患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性比治疗前显著增强（Ｐ＜０．００１）,而药物治疗组治疗前后患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性无明显变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＵＢＩＯ治疗脑梗塞,疗效显著。其机制可能与ＵＢＩＯ对患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性增强效应有关。     

血小板生成素生物学活性及其临床应用前景

大量研究结果证明“孤子”受体ｃ－ＭＰＬ为造血细胞生长因子受体超家族成员之一，其配体血小板生成素（ＴＰＯ）具有能特异性地刺激世核系祖细胞增殖分化和促进巨核细胞成熟的活性，临床前期试验显示重组ＴＰＯ具有乐观的临床应用前景。     

腺苷对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：探讨腺苷对肾脏缺血－再灌注损伤的保护作用机制。方法：将大鼠随机分为对照组（ＣＯＮ）、缺血－再灌注组（ＩＲ）、给予腺苷后缺血－再灌注组（ＡＤ）。除病理组织学变化外,分别检测各组不同灌注时间Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活力的变化。结果：病理组织学肾小管评分,ＡＤ组和ＣＯＮ组均明显低于ＩＲ组,ＡＤ组和ＣＯＮ组之一无显著性差异。Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的活性,在ＡＤ组和Ｃ     

组氨酸与心肌再灌注损伤

心肌缺血再灌产生大量的氧自由基，使心肌细胞膜脂质过氧化，蛋白质破坏，ＤＮＡ链断裂，尤其是单线态氧（‘Ｏ２）直接损伤心肌细胞肌膜的Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶，肌浆肉Ｃａ＾＋＾＋－ＡＰＴ酶，严重影响肌浆网功能，使心脏出现明显的再灌性心律失常。组的有清作缺血再灌时产生的羟自由基（．ＯＨ）和‘Ｏ２，从而保护肌膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶，肌浆肉Ｃａ＾＋＾＋－ＡＴＰ酶，其作用优于超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），过     

抗人甲状腺过氧化物酶抗体的测定

用胰酶消化法纯化高纯度的甲状腺过氧化物酶（ＴＰＯ），建立了酶免疫法测定抗－ＴＰＯ抗体的方法。结果试验ＣＶ在８．１％￣１０．９％之间。甲亢病人血清阳性率为４２．２％，桥本氏甲状腺炎为７７．７％，ＲＡ为３．１％，ＳＬＥ为２７．８％，甲状腺瘤为４２．１％。与抗ＴＭ抗体测定的结果比较ｒ＝０．７３１。     

烧伤延迟复苏大鼠肝脏损伤

目的 研究延迟复苏大鼠肝脏损伤情况。方法 ＳＤ大鼠３０％Ⅲ度烧伤后,随机分成烧伤组、早期复苏组、延迟复苏组。伤后９ｈ取肝组织,测定脏器血管通透性、组织含水量、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性和Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性,髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性和一氧化氮（ＮＯ）代谢产物量。结果 与烧伤组与早期复苏组相比,伤后９ｈ延迟复苏组大鼠肝脏的血管通透性和含水量明显增高,Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活     

U—74006F对脊髓创伤后线粒体系列酶活性的影响

目的：为了探讨Ｕ－７４００６Ｆ对脊髓创伤后线粒体系列酶活性的影响。方法：采用Ａｌｌｅｎ法造成猫脊髓损伤，观察线粒体Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶，Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋ＡＴＰ酶，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及ＭＤＡ含量的变化。结果：Ｕ－７４００６Ｆ治疗组ＡＴＰ酶及ＳＯＤ酶活性下降幅度较低，ＭＤＡ含量增加不明显。结论：Ｕ－７４００６Ｆ在脊髓线粒体在病理生理改变中起着重要作用。     

ATP与CO—A联合治疗椎—基底动脉供血不足性眩晕

应用ＡＴＰ与ＣＯ－Ａ治疗椎－基底动脉供血不足性眩晕３５２株，获得９８５的总有效率，本文介绍其治疗方法，并进行讨论。     

ATP与CO－A联合治疗椎－基底动脉供血不足性眩晕

应用ＡＴＰ（三磷酸腺苷）与ＣＯ－Ａ（辅酶Ａ）治疗椎－基底动脉供血不足性眩晕３５２例，获得９８％的总有效率，本文介绍其治疗方法，并进行讨论。     

山莨菪碱在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中对一氧化氮内皮素-1及能量代谢的影响

目的　了解山莨菪碱在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中对一氧化氮（ＮＯ）、内皮素－１（ＥＴ－１）、ＡＴＰ及乳酸的影响,探讨山莨菪碱（Ａｎｉ）对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Ｒｕｌｓｉｎｅｌｌｉ方法建立大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型。观察Ａｎｉ在再灌注期间对ＮＯ、ＥＴ－１及能量代谢的影响。结果Ａｎｉ可以抑制再灌注早期（１小时组）ＮＯ、ＥＴ－１及乳酸的过量产生,提高脑组织ＡＴＰ含量。结论　Ａｎｉ可以通过对ＮＯ、ＥＴ－１及能量代谢的影响对脑起保护作用。