TGF-β1在哮喘小鼠气道组织中的表达及吡非尼酮的干预作用

目的 观察TGF-β1致支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道黏液高分泌的机制及吡非尼酮的干预作用.方法 选择45只BALB/c雌性小鼠,按随机数字法分为5组：正常对照组（A组,9只）、哮喘组（B组,9只）、哮喘/强的松干预组（C组,9只）、哮喘/吡非尼酮干预组（D组,9只）、哮喘/羧甲基纤维素钠组（E组,9只）.除A组用生理盐水致敏和激发外,其余各组均于第0、10天用0.1 mL鸡卵清蛋白（OVA）和氢氧化铝凝胶混合液致敏,第14天开始每天用1％ OVA激发30 min,连续激发7d.每次激发前1h用药物干预,给药途径灌胃给药.测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞总数和细胞分类计数,以及IL-4和TNF-α水平;采用AB-PAS对气道杯状细胞进行染色,用免疫组织化学法检测气道Muc5ac和肺组织中的TGF-β1蛋白表达.结果 C组BALF中的炎症细胞总数、嗜酸细胞和淋巴细胞分类组、IL-4、TNF-α水平,气道杯状细胞及气道Muc5 ac蛋白较B组明显减低（P均＜0.01）,但两组肺组织中的TGF-β1水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）.D组BALF中的TNF-α、IL-4水平,气道杯状细胞及Muc5ac和TGF-β1蛋白表达显著低于A组（P均＜0.01）.结论 TGF-β1在哮喘小鼠肺组织中的表达明显增加,其变化与气道Muc5ac蛋白表达密切相关;吡非尼酮能有效抑制肺组织TGF-β1表达而降低气道黏液高分泌;提示TGF-β1在哮喘气道黏液高分泌中可能起重要作用.     

PTEN在支气管哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的探讨PTEN在支气管哮喘（简称哮喘）人鼠气道炎症中的作用。方法20只SPF级雄性SD大鼠随机分为2组。对照组和哮喘组。以卵清白蛋白致敏激发法复制大鼠哮喘模型,每只大鼠左肺留取肺组织,右肺进行支气管肺泡灌洗歼留取支气管肺泡灌洗液（BALF）。对BALF进行细胞分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（Sandwich ELISA）法测定BALF中IL-4、IL-12浓度;采用免疫组织化学法和Western blot法测定PTEN蛋白的表达和量的变化。结果①BALF IL-4的浓度哮喘组显著高于对照组,BALF中IL-12的浓度哮喘组屁著低于对照组（P值均〈0．01）;②免疫组织化学显示PTEN蛋白主要表达细胞是支气管上皮细胞,Western blot法显示哮喘组支气管PTEN蛋白的表达显著低于对照组（P〈0．01）;③支气管上皮细胞PTEN蛋白表达量分别与BALF中的IL-4浓度呈显著负相关,与BALF中的IL—12浓度呈显著正相关。结论哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,它能减少Th2因子的表达,可能与哮喘大鼠气道炎症中Th1／Th2平衡密切相关。     

FIZZ1对α-肌动蛋白和Ⅰ型胶原在大鼠支气管哮喘模型中表达的影响

支气管哮喘（简称哮喘）患者的气道慢性炎症可导致上皮细胞损伤，成纤维细胞活化并分化为表达α-肌动蛋白（α-SMA）的肌成纤维细胞和胶原沉积，因此，α-SMA和Ⅰ型胶原是哮喘早期气道重塑中的重要指标。FIZZ1是2000年首次在过敏性炎症中发现的独立新基因。我们试图检测大鼠哮喘模型Ⅱ期肺泡上皮细胞（AECⅡ）中FIZZ1表达水平、肺组织内α-SMA和成纤维细胞内Ⅰ型胶原含量，揭示FIZZ1与早期气道重塑的关系。     

PTEN在支气管哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的 探讨PTEN在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道炎症中的作用.方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为2组,对照组和哮喘组.以卵清白蛋白致敏激发法复制大鼠哮喘模型,每只大鼠左肺留取肺组织,右肺进行支气管肺泡灌洗并留取支气管肺泡灌洗液(BALF).对BALF进行细胞分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4、IL-12浓度;采用免疫组织化学法和Western blot法测定PTEN蛋白的表达和量的变化.结果 ①BALF IL-4的浓度哮喘组显著高于对照组,BALF中IL-12的浓度哮喘组显著低于对照组(P值均＜0.01);②免疫组织化学显示PTEN蛋白主要表达细胞是支气管上皮细胞,Western blot法显示哮喘组支气管PTEN蛋白的表达显著低于对照组(P＜0.01);③支气管上皮细胞PTEN蛋白表达量分别与BALF中的IL-4浓度呈显著负相关,与BALF中的IL-12浓度呈显著正相关.结论 哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,它能减少Th2因子的表达,可能与哮喘大鼠气道炎症中Th1/Th2平衡密切相关.     

转化生长因子β1Ⅰ型受体拮抗剂对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)Ⅰ型受体拮抗剂SB 431542对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型气道炎症及气道重塑的影响,为哮喘的治疗提供新思路.方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组及SB 431542组,每组10只;卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;布地奈德组和SB 431542组分别给予布地奈德雾化吸入和SB 431542滴鼻,每周3次.HE和Masson染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;AB-PAS染色观察杯状细胞增生情况;免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平及血清总IgE水平;免疫印迹法(Western blot)测定各组小鼠肺组织中Smad3、p-Smad3及Smad7蛋白表达.结果 哮喘组与正常组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生;布地奈德组上述改变均较哮喘组轻;SB 431542组嗜酸粒细胞浸润较哮喘组减轻,但仍高于正常组及布地奈德组,平滑肌层增厚、胶原纤维增生较哮喘组明显减轻(P＜0.05),与布地奈德组比较差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组比较,哮喘组小鼠支气管AB-PAS及α-SMA 阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组小鼠支气管AB-PAS及α-SMA 阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组(P＜0.05).哮喘组气道炎症指标(血清总IgE、IL-4、IL-5及TGF-β1)显著高于正常组(P＜0.05),布地奈德组上述指标低于哮喘组(P＜0.05),SB 431542组与哮喘组比较差异无统计学意义(P＞0.05).MMP-9、TIMP-1在哮喘组的表达明显高于正常组(P＜0.05),在布地奈德组及SB 43542组的表达低于哮喘组(P＜0.05),两治疗组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot检测显示,各组小鼠肺组织Smad3的表达差异无统计学意义(P＞0.05);哮喘组p-Smad3表达明显高于正常组(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组p-Smad3表达低于哮喘组(P＜0.05);与正常组比较,哮喘组Smad7表达降低(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组Smad7表达高于哮喘组(P＜0.05),且这两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SB 431542能显著减轻哮喘小鼠细胞外基质沉积及平滑肌增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其调节MMP-9、TIMP-1的表达有关.SB 431542对哮喘小鼠气道炎症浸润无明显改善,说明哮喘气道炎症可能不依赖于TGF-β1/Smads通路.     

1,25-二羟维生素D3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1/TRX的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3（1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25（OH）2D3）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fuluid,BALF）中维生素D上调蛋白1（vitamin D up-regulated protein 1,VDUP1）和硫氧还蛋白（thioredoxin,TRX）表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组,以卵白蛋白（ovalbumin,OVA）诱导哮喘发作,并给予1,25（OH）2D3和地塞米松干预,同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平,细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞,体外给予1,25（OH）2D3干预。用逆转录-聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果 1,25（OH）2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低,IL-10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1,25（OH）2D3可抑制气道炎症,增加TRX和VDUP1的表达,两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。     

BMP-7过表达抑制大鼠肝星状细胞上皮-间叶转化

目的观察慢病毒介导的BMP-7高表达是否能抑制大鼠HSC-T6细胞发生上皮-间叶转化（epithelial to mesenchymal tran-sition,EMT）,并能拮抗TGF-β1的促EMT作用。方法构建大鼠BMP-7慢病毒表达载体,体外感染HSC-T6细胞株,将成功感染BMP-7重组慢病毒的细胞给予TGF-β1（5 ng/mL）或溶酶体处理。Real-time PCR检测α-SMA、S100A4、E-cadherin mRNA转录水平。Western blotting检测α-SMA、S100A4、E-cadherin、Ⅰ型胶原蛋白表达水平。结果 BMP-7慢病毒感染HSC-T6后,无论TGF-β1存在与否,real-time PCR检测到α-SMA、S100A4 mRNA转录下调,E-cadherin转录上调。Western blotting显示α-SMA、S100A4及Ⅰ型胶原蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调。实验组与空病毒对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,空病毒对照组与空白组比较,差异无统计学意义。结论 BMP-7能有效拮抗TGF-β1对HSC-T6的促EMT作用,可能成为肝纤维化治疗的新途径。     

转化生长因子β1Ⅰ型受体拮抗剂对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)Ⅰ型受体拮抗剂SB 431542对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型气道炎症及气道重塑的影响,为哮喘的治疗提供新思路.方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组及SB 431542组,每组10只;卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;布地奈德组和SB 431542组分别给予布地奈德雾化吸入和SB 431542滴鼻,每周3次.HE和Masson染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;AB-PAS染色观察杯状细胞增生情况;免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平及血清总IgE水平;免疫印迹法(Western blot)测定各组小鼠肺组织中Smad3、p-Smad3及Smad7蛋白表达.结果 哮喘组与正常组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生;布地奈德组上述改变均较哮喘组轻;SB 431542组嗜酸粒细胞浸润较哮喘组减轻,但仍高于正常组及布地奈德组,平滑肌层增厚、胶原纤维增生较哮喘组明显减轻(P ＜0.05),与布地奈德组比较差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组比较,哮喘组小鼠支气管AB-PAS及a-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组小鼠支气管AB-PAS及α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组(P＜0.05).哮喘组气道炎症指标(血清总IgE、IL-4、IL-5及TGF-β1)显著高于正常组(P＜0.05),布地奈德组上述指标低于哮喘组(P ＜0.05),SB 431542组与哮喘组比较差异无统计学意义(P＞0.05).MMP-9、TIMP-1在哮喘组的表达明显高于正常组(P＜0.05),在布地奈德组及SB 43542组的表达低于哮喘组(P＜0.05),两治疗组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot检测显示,各组小鼠肺组织Smad3的表达差异无统计学意义(P＞0.05);哮喘组p-Smad3表达明显高于正常组(P＜0.05),布地奈德组及SB431542组p-Smad3表达低于哮喘组(P＜0.05);与正常组比较,哮喘组Smad7表达降低(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组Smad7表达高于哮喘组(P＜0.05),且这两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SB 431542能显著减轻哮喘小鼠细胞外基质沉积及平滑肌增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其调节MMP-9、TIMP-1的表达有关.SB 431542对哮喘小鼠气道炎症浸润无明显改善,说明哮喘气道炎症可能不依赖于TGF-β1/Smads通路.     

联合应用白介素-4突变体及白介素-5可溶性受体对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液及血清中转化生长因子-β1、活化素-A水平的影响

目的 探讨联合应用白介素-4突变体(IL-4MT)及白介素-5可溶性受体(s IL-5Rα)对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、活化素-A(Act-A)水平的影响。方法50只雌性BALB/c小鼠被随机分为对照组、哮喘组、IL-4MT治疗组、s IL-5Rα治疗组、联合IL-4MT及s IL-5Rα治疗组(简称联合治疗组);哮喘组和各治疗组分别给予卵蛋白(OVA)致敏和激发。其中,各治疗组(IL-4MT治疗组、s IL-5Rα治疗组、联合治疗组)分别于激发前30 min腹腔注射IL-4MT 100μg、s IL-5Rα100μg及IL-4MT、s IL-5Rα各100μg进行干预,对照组和哮喘组给予生理盐水代替;末次激发后收集小鼠BALF、血清;用ELISA法比较各组(BALF)及血清中TGF-β1、Act-A的水平变化。结果 与对照组比较,哮喘组小鼠BALF及血清中的TGF-β1、Act-A水平显著升高(P<0.01);与哮喘组比较,各治疗组BALF及血清中TGF-β1、Act-A水平明显下降(P<0.01);与单独治疗组相比,联合治疗组BALF及血清中的TGF-β1、Act-A水平下降地更明显(P<0.05)。结论 联合应用IL-4MT及s IL-5Rα可明显降低哮喘小鼠BALF及血清中TGF-β1、Act-A水平,在减轻哮喘小鼠气道重塑方面可能发挥了重要作用。     

冬虫夏草及地塞米松对SD大鼠急性支气管哮喘肺组织AQP1表达的影响

目的通过观察SD大鼠急性支气管哮喘肺组织中水通道蛋白1（AQP1）的分布及表达和冬虫夏草（CS）及地塞米松（DM）对AQP1表达的影响,探讨AQP1在急性支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、哮喘对照组、CS干预组（灌胃4 g/kg）、DM干预组（腹腔注射2.5 mg/kg）,干预组在激发阶段进行,2周后处死大鼠。观察肺组织病理学改变,对支气管肺泡灌洗液（BALF）的炎症细胞进行计数及分类,用ELISA法检测BALF中IL-4、INF-γ;用免疫组化、Western blot方法检测哮喘大鼠肺部AQP1的分布及表达。结果①哮喘对照组肺组织内可见弥漫的炎性渗出性改变,而CS、DM干预组炎性改变程度则较轻。②与生理盐水对照组比较,哮喘对照组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞（EOS）、中性粒细胞、淋巴细胞、IL-4均升高（P〈0.01）,INF-γ降低（P〈0.05）;CS、DM干预后细胞总数及EOS、中性粒细胞、淋巴细胞、IL-4均明显下降（P〈0.05）,CS、DM组间无统计学差异（P〉0.05）。③AQP1主要分布在肺泡周围毛细血管内皮细胞、黏膜固有层的血管内皮细胞、气道黏膜上皮细胞、淋巴细胞及EOS;哮喘对照组呈强阳性表达（P〈0.01）,CS、DM干预组较哮喘对照组表达减弱,但较生理盐水对照组强（P〈0.05）,CS、DM组间AQP1表达无统计学差异（P〉0.05）。结论①AQP1在急性支气管哮喘大鼠的支气管、肺组织内及炎症细胞呈强阳性表达。②CS及DM均能抑制炎症细胞及炎症因子在肺内聚集,并对SD大鼠急性支气管哮喘肺组织AQP1的表达有显著抑制作用。     

支气管哮喘患者气道中白介素17表达与气道重塑关系的研究

目的初步探讨白介素17（interleukin-17,IL-17）在支气管哮喘（简称哮喘）患者气道重塑中的作用。方法选择40例2007年9月至2008年9月在北京市房山区良乡医院呼吸科门诊行气管镜检查的非急性发作期哮喘患者。按肺功能测定结果分为两组。采用免疫细胞化学方法分别检测其支气管肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞及气道上皮细胞的IL-17及转化生长因子β-（TGF-β1）的表达。结果。实验组支气管肺泡灌洗液肺泡巨噬细胞及气道上皮细胞中IL-17表达[（0．3614±0．1896）,（0．3062±0．0136）],较对照组[（0．2061±0．0198）,（0．1957±0．0311）]明显升高,P值均〈0．01,差异均有统计学意义。TGF—β1表达[（0．2801±0．0176）,（0．2743±0．0039）],较对照组[（0．2065±0．0057）,（0．1931±0．0153）]明显升高,P值均〈0．01,差异均有统计学意义。结论 IL-17可能在哮喘气道重塑的发生发展中发挥作用。     

口服卡介苗对哮喘小鼠气道炎症细胞的影响

目的探讨口服卡介苗（BCG）对哮喘小鼠气道炎症细胞及外周血嗜酸粒细胞（Eos）的影响。方法以卵蛋白（OVA）致敏激发建立哮喘小鼠模型，哮喘动物模型制作成功，将32只BABL／c小鼠分为正常对照组、哮喘组、皮内注射卡介苗组、口服卡介苗组。皮内注射组及口服卡介苗组于第一次OVA激发前8周卡介苗皮内注射及口服干预，收集BALF（支气管肺泡灌洗液）和外周血，各类细胞学计数。结果哮喘组与卡介苗干预两组小鼠BALF中细胞学总数和分类计数均较正常对照组明显增多，哮喘组以Eos、淋巴细胞、中性粒细胞增多明显，卡介苗干预两组以淋巴细胞、巨噬细胞增多明显，P〈0．01。卡介苗干预后，口服卡介苗组与皮内注射卡介苗组BALF中Eos较哮喘组明显下降，下降率约50％，P〈0．05，而巨噬细胞明显增多，P〈0．05，同时淋巴细胞有所增多，但无统计学意义，P〉0．05。不同的是外周血Eos在卡介苗干预后的两组与哮喘组比较无统计学意义，P〉0．05。结论口服卡介苗可明显抑制哮喘小鼠BALF中Eos水平，巨噬细胞明显增多。对外周血Eos水平降低无明显变化。能获得与皮内注射卡介苗相同的免疫效力。     

高良姜素对哮喘小鼠气道炎症及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨高良姜素对哮喘小鼠气道炎症及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响。方法 40只小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松组、高良姜素组。卵白蛋白致敏并激发建立小鼠哮喘模型,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞,观察支气管肺组织病理的改变,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清TNF-α的水平,Western印迹法检测肺组织TNF-α蛋白的表达。结果高良姜素组BALF中嗜酸粒细胞计数及肺内炎症细胞评分明显低于哮喘组(P<0.01);哮喘组血清TNF-α含量、肺组织TNF-α蛋白表达均显著高于正常对照组,高良姜素组上述指标均低于哮喘组(P<0.01)。结论高良姜素可降低哮喘小鼠TNF-α的表达,减轻哮喘小鼠气道炎症。     

青蒿琥酯抑制TGF-β1-smad2/3信号通路和改善支气管哮喘大鼠模型气道重塑关系的研究

目的 通过观察青蒿琥酯对支气管哮喘 (简称哮喘)大鼠气道重塑的影响,并探讨其作用与TGF-β1-smad2/3信号通路的关系.方法 采用卵白蛋白激发和雾化吸入的方式建立哮喘模型,并给予药物治疗.观察各组大鼠肺组织的病理形态改变并用 Image-Pro plus 6.0图像分析软件测量大鼠支气管壁厚度和平滑肌厚度;用免疫组织化学法检测大鼠肺组织 smad2/3表达情况,RT-PCR法检测大鼠肺组织TGF-β1、smad2、smad3表达情况;ELISA法检测大鼠血清及 BALF中 TGF-β1的表达情况.结果 青蒿琥酯干预哮喘组大鼠支气管壁厚度、平滑肌厚度均明显低于哮喘组大鼠,差异有统计学意义 (P<0.01).青蒿琥酯干预哮喘组大鼠肺组织 TGF-β1、smad2、smad3 mRNA 的表达均明显低于哮喘组,差异有统计学意义 (P<0.01).青蒿琥酯干预哮喘组大鼠肺组织 smad2/smad3蛋白表达、血清及BALF中TGF-β1的表达水平均明显低于哮喘组,差异有统计学意义 (P<0.01).结论 青蒿琥酯改善哮喘大鼠气道重塑的机制可能与抑制TGF-β1-smad2/3信号通路活性有关.     

黄芪对慢性阻塞性肺病大鼠气道炎症干预作用实验研究

目的探讨黄芪注射液对慢性阻塞性肺病（COPD）大鼠气道炎症的干预作用。方法30只SD大鼠随机分为3组：正常对照组、COPD组、黄芪干预组。观察支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清中白细胞总数及百分比,IL-8、TNF-α浓度变化及肺组织形态学改变。结果干预组肺组织形态学改变较COPD组减轻但未恢复正常;干预组BALF和血清中IL-8及TNF-α水平、白细胞总数、中性粒细胞绝对计数、中性粒细胞百分比较COPD组降低（P〈0.05）。结论黄芪注射液可降低COPD大鼠血清及BALF中IL-8及TNF-α水平,并使炎症细胞减少,对COPD大鼠气道炎症具有保护作用。     

去甲斑蝥素抑制单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的实验研究

目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和UUO+NCTD治疗组(NCTD组),每组6只。采用单侧(左)输尿管结扎方法,建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型,Sham组只游离输尿管而不结扎。术后14d处死动物,取结扎侧肾脏,同时处死Sham组大鼠,取出肾组织。采用免疫组化、Western Blot及RT-PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的mRNA表达的变化。结果:免疫组化、Western Blot及RT-PCR均显示,与Sham组比较,UUO组肾组织α-SMA和TGF-β1的mRNA表达升高、E-cadherin蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);NCTD能抑制UUO大鼠肾组织α-SMA和TGF-β1表达的上调,上调E-cadherin的表达(P<0.05)。结论:NCTD具有抑制UUO大鼠肾小管上皮-间充质转化的作用,该作用可能与抑制TGF-β1的过表达有关。     

沙利度胺联合丹参川芎嗪治疗大鼠肺纤维化的实验研究

目的探讨沙利度胺联合丹参川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织病理改变及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原、α-SMA表达的影响。方法选取SPF级SD雄性大鼠100只,根据随机数字表法分为正常组、对照组、研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组。除正常组外,余4组均制备大鼠肺纤维化模型。在造模28d后,沙利度胺组给予沙利度胺灌胃、丹参川芎嗪组给予丹参川芎嗪灌胃、研究组给予沙利度胺联合丹参川芎嗪灌胃、对照组及正常组灌注相同体积的生理盐水。连续灌胃28 d,灌胃结束后,取肺组织进行HE染色,分别检测5组大鼠血清及肺泡灌洗液VEGF、TNF-α及TGF-β1水平,比较5组大鼠肺组织Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA阳性细胞数的变化情况。结果肺组织病理学观察结果显示,对照组大鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁增厚、肺泡腔及肺间质内有大量炎性细胞浸润,部分肺泡消失。研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组肺泡壁厚度、炎性因子浸润程度及肺泡破坏程度均有所改善。相较于对照组,研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组大鼠血清及肺泡灌洗液VEGF、TNF-α及TGF-β1水平及肺组织Ⅲ型胶原、α-SMA表达水平均有所改善,且研究组改善程度更优(P0.05)。结论沙利度胺联合丹参川芎嗪可有效抑制肺纤维化大鼠VEGF、TNF-α、TGF-β1、Ⅲ型胶原及α-SMA水平,从而减轻肺纤维化程度。     

可溶性IL-13受体α2对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响

目的通过观察可溶性IL-13受体α2（sIL-13Rα2）对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道炎症的影响,了解sIL-13Rα2对哮喘潜在的治疗价值。方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘组及sIL-13Rα2治疗组,哮喘组和sIL-13Rα2治疗组以鸡卵白蛋白（OVA）致敏和激发,建立哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA。sIL-13Rα2治疗组每次激发前30min腹腔注射sIL-13Rα2100μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代。比较各组支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数、肺组织学检查。结果与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著增加（P值均〈0.001）,血清及BALF中IL-13明显增多（P值均〈0.001）,病理示肺组织损害明显。与哮喘组相比,sIL-13Rα2治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著降低（P值均〈0.001）,血清及BALF中IL-13明显减少（P值均〈0.001）,病理示肺组织损害明显减轻。结论 sIL-13Rα2可明显减轻哮喘小鼠气道炎症。     

转化生长因子-β在哮喘气道重构中的作用研究进展

转化生长因子-β(TGF-β)是一个结构相关的生长因子大家族的一员,具有广泛调节细胞增殖、分化和凋亡等生物学功能。肺组织中多种细胞如肺泡巨噬细胞和肺纤维原细胞、上皮细胞、内皮细胞和平滑肌细胞均可合成TGF-β。发作期哮喘患者支气管肺泡灌洗液中以及在中度和重度哮喘患者气道黏膜活检标本中,TGF-β为过度表达。TGF-β可加重气道上皮的损害,刺激成纤维细胞、气道平滑肌细胞增殖,通过促进细胞外基质的合成、诱导结缔组织生长因子表达而导致气道上皮下纤维化,在哮喘的气道重构中具有重要的功能,因此针对TGF-β治疗成为防治哮喘气道重构新的研究方向。     

不同浓度脂多糖对支气管哮喘大鼠模型建立的影响及调节机制

目的 观察不同浓度大肠埃希菌脂多糖（E．coli LPS）对年幼期哮喘大鼠模型建立的影响及其调控机制。方法 清洁级SD大鼠45只，随机分为对照组（A组）、哮喘组（B组）、LPS组（C组），FC组又分为C1组（LPS0．1μg／m1）、C2组（LPS10μg／m1）、C3组（LPS100μg／m1）]，每组9只。用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。光镜、电镜观察肺组织病理及超微结构的变化；支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）及其它炎症细胞计数；酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清OVA-sIgE与BALF中TGF-β1含量；TUNEL法检测肺组织EOS凋亡。结果①光镜电镜观察：光镜下B组见支气管及血管周围、肺间质及肺泡腔内炎性细胞浸润，支气管黏膜下水肿，黏液腺增生，黏膜皱折增多，部分黏膜上皮细胞脱落，可见气道黏液栓；C1组、C3组上述改变无明显减轻；C2组上述现象明显减轻。电镜下B组见EOS数量增多，周围有大量浆细胞聚集；C1组无明显改变；C2组凋亡的EOS增多；C3组中性粒细胞和凋亡的EOS均增多。②BALF中炎症细胞计数：B组BALF中细胞总数、EOS绝对计数和EOS占细胞总数的百分比（EOS％）均高于A组（均P〈0．01）；C2组均低于B组（均P〈0．01）。③血清OVA-sIgE和BALF中TGF-β1含量：血清OVA-sIgE检测，B组高于A组（P〈0．01）；C2组、C3组明显低于B组（均P〈O．01）；但C1组与B组比较无统计学意义（P〉0．05）。BALF中TGF-β1。含量测定，B组与A组比较，两组有显著性差异（P〈0．05）；C2组、C3组明显高于B组（均P〈0．01）。④肺组织EOS凋亡率检测结果，B组与A组比较，两组有显著性差异（P〈0．05）；C2组、C3组与B组比较EOS凋亡率均明显增高（均P〈0．01）；但C1组与B组比较无统计学意义（P〉0．05）。相关分析结果，BALF中TGF-β1。水平与EOS数呈显著性负相关（r=-0．483，P〈0．01）；EOS绝对计数与血清OVA-sIgE水平呈显著性正相关（r=0．634，P〈0．01）。结论E．coliLPS（〉10μg／m1）通过降低OVA—sIgE水平，增加TGF-β1分泌，诱导EOS凋亡，从而可能减轻变态反应症状，但过高浓度E．coliLPS（100μg／m1）可能会促使中性粒细胞增高。