急性髓系白血病患者MMP-2、MMP-9的表达及其临床意义

MMP-2、MMP-9属于基质金属蛋白酶家族中的Ⅳ型胶原酶，可以降解明胶和Ⅳ型胶原，破坏细胞外基质(ECM)和基底膜，在肿瘤侵袭和转移中发挥重要作川我们应用RTPCR和明胶酶谱检测了急性髓系白血病(AML)患MMP-2、MMP-9的表达，并探讨其临床意义     

不同种属来源明胶及其他因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶的影响

金属蛋白酶12（MMP-2，明胶酶A）与金属蛋白酶-9（MMP-9，明胶酶B）在多种生理过程中起作用，病理状态下如肿瘤、心血管疾病和呼吸系统疾病，则这些酶的表达和活性增加。明胶酶谱法多用于检测血浆、细胞培养上清及组织中的金属蛋白酶-2和9的活性，我们先前的实验发现不同来源的明胶直接影响明胶酶谱法结果，不同方式处理样本对酶的活性检测有影响，本研究就明胶的来源（自猪、牛皮肤提取）是否影响金属蛋白酶活性的检测，以及不同样本量、样本储存温度、反复冻融等因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶活性的影响进行探讨。     

胰腺癌患者血浆中MMP-9T、IMP-1浓度变化及其意义

胰腺癌是发生在胰腺器官中的恶性肿瘤,5年生存率不足5%,痊愈率极低[1]。目前仍缺乏有效的实验室胰腺癌诊断指标。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是一种内肽酶，在组织重建及细胞外基质降解中起作用。金属蛋白酶组织抑制物（TIMP）可以抑制MMP-9的酶作用。已有免疫组化实验证实在胰腺癌患者肿瘤组织中MMP-9高表达，     

MMP-2和MMP-9在急性B淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

本研究探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者骨髓细胞中基质金属蛋白酶-2和-9（MMP-2,MMP-9）的表达及临床意义。采用半定量RT-PCR方法检测初治、复发B-ALL患者和正常对照骨髓中单个核细胞MMP-2,MMP-9mRNA的表达。采用明胶酶谱检测B-ALL患者和正常对照骨髓单个核细胞孵育上清中MMP-2,MMP-9的酶活性。结果表明,初治、复发组B—ALL患者中MMP-2表达率明显高于正常对照组（P〈0．05）;MMP-9表达率明显低于正常对照组（P〈0．05）。髓外浸润组患者MMP-2和MMP-9表达率均明显高于无髓外浸润组（P〈0．05）,而MMP-2／MMP-9（＋）组髓外浸润发生率明显高于MMP-2／MMP-9（-）组。高危组B—ALL患者MMP-9表达率明显高于标危组,而两组间MMP-2表达率无显著性差异（P〉0．05）。结论：B-ALL患者白血病细胞可以产生MMP-2,MMP-9,可能参与了B-ALL的髓外浸润,MMP-9表达可能提示预后不良。     

人参皂甙Rg3对乳腺癌细胞(MCF-7)表达金属蛋白酶2、9(MMP-2,MMP-9)的影响

目的为了研究人参皂甙Rg3对乳腺癌细胞(MCF-7)细胞分泌的基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)表达的影响。方法免疫组化法测定了用人参皂甙Rg3前后MCF-7细胞基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)的表达。结果分析表明人参皂甙Rg3能减少MCF-7细胞基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)表达。结论人参皂甙Rg3能抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的分泌。     

子宫内膜异位症患者腹腔液和血清MMP-2、MMP-9测定

【目的】探讨血清和腹腔液基质金属蛋白酶（MMPs）水平与子宫内膜异位症发病的关系。【方法】收集30例子宫内膜异位症患者和30例对照组血清和腹腔液。采用明胶酶谱分析法定量分析血清和腹腔液中MMP-2、MMP-9的水平。【结果】1子宫内膜异位症患者血清中MMP-2和MMP-9的水平与正常对照组无显著性差异（P〉0．05）。子宫内膜异位症患者腹腔液中MMP-9高于正常对照组（P〈0．01），而二组腹腔液中MMP-2则无显著性差异（P〉0．05）。【结论】子宫内膜异位症患者腹腔液MMP-9含量升高，可能与子宫内膜异位症发病有关。     

RECK基因与基质金属蛋白酶-2相关性在早孕滋养细胞侵袭调控中的作用

目的：探讨RECK基因与基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）相关性在早孕滋养细胞浸润调控中的作用。方法：分别采用免疫组化、Western blot法、明胶酶谱法检测52例正常妊娠（早孕组27例、足月妊娠组25例）胎盘组织中RECK表达定位、蛋白含量及MMP-2的活化比例。结果：免疫组化提示早孕、足月妊娠均有RECK蛋白表达，其主要表达在细胞滋养细胞、合体滋养细胞的胞膜和胞质。RECK表达随孕周增加而增强．早孕组RECK表达明显低于足月妊娠组（P〈0．05），且在具有侵袭力的早孕锚定绒毛的细胞柱上RECK表达呈弱阳性；Western blot检测亦显示早期妊娠RECK蛋白质含量显著低于足月妊娠（P〈0．05））；明胶酶谱示MMP．2的活化比例则相反，早孕组MMP-2活化比例明显高于足月妊娠组（P〈0．05）。结论：MMP-2活性的表达变化与滋养细胞浸润活性呈正相关，而肿瘤抑制基因RECK的表达变化与之呈负相关．MMP-2与RECK基因相互作用在滋养细胞浸润活性调控中可能起重要作用。     

急性髓系白血病82例患者VEGF与MMP-2、MMP-9的相关性研究

为了探讨急性髓系白血病（AML）患者中血管内皮生长因子（VEGF）与基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的相互关系及二者在AML中的意义，采用半定量RT—PCR技术检测AML患者与正常人骨髓单个核细胞（MNC）MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、VEOF mRNA的表达，用明胶酶谱的方法测定原代MNC和HL-60细胞分泌的MMP-2、MMP-9的活性。应用ELISA方法检测AML患者血清中VEGF蛋白的水平，分析VEGF和MMP-2、MMP-9 mRNA之间的关系。结果显示：AML患者MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA与VEGF mRNA的表达和VEGF蛋白水平呈正相关，缓解期患者和正常对照无相关性；VEGF阳性组发生髓外浸润率明显高于阴性组；VEOF上调HL-60细胞中bcl-2的表达：结论：AML患者中MMP-2，MMP-9的表达和VEGF具有正相关性，VEGF可以上调部分AML患者中MMP-2，MMP-9的表达，VEOF可能与MMP-2，MMP-9共同参与了白血病髓外浸润的发生。     

MMP-2、MMP-9、TIMP-1在侵袭性垂体瘤中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制物TIMP-1与垂体瘤侵袭性的关系.方法应用免疫组化方法(SP法)检测了19例侵袭性垂体瘤,6例非侵袭性垂体瘤中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达,分析了这3个指标与垂体瘤侵袭性的关系.结果MMP-2、MMP-9的表达在侵袭性垂体瘤组明显高于非侵袭性垂体瘤组(P＜0.05).TIMP-1的表达在侵袭性垂体瘤组中有增加的趋势,但与非侵袭性垂体瘤相比,无统计学意义(P＞0.05).结论在垂体瘤的侵袭性生物行为中,基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9,可能扮演着重要角色.     

骨髓来源细胞表达的MMP-2/MMP-13在脉络膜新生血管发生发展中的作用

目的探讨骨髓来源细胞(BMCs)基质金属蛋白酶(MMP)的动态表达及其与脉络膜新生血管(CNV)发生、发展的关系。方法选取成功接受骨髓移植的24只C57BL/6J绿色荧光蛋白(GFP)嵌合体小鼠为观察组,未接受骨髓移植的48只C57BL/6J小鼠为对照组。两组均予激光光凝照射以诱发CNV,利用Western blot法及明胶酶谱法检测对照组在激光诱发前、诱发后1、3、5、7、10、14、28 d时MMP-2/MMP-13的表达情况,利用免疫荧光染色检测观察组CNV中GFP阳性细胞(即移植的骨髓细胞)是否表达MMP-2/MMP-13,并进行定量分析。结果 Western blot法、明胶酶谱法、免疫荧光均显示在激光诱发早期两组CNV中MMP-2的表达即开始快速增加,在诱导第3天表达量最高、活性最强,且观察组BMCs表达MMP-2也在此时达到高峰,占总表达量的63.21%,随后MMP-2表达量开始下降;在激光诱发早期两组CNV中MMP-13的表达缓慢增加,在诱导后第7天表达量最高、活性最强,且观察组BMCs表达MMP-13亦达最高峰,占总表达量的77.87%,随后下降。结论 BMCs可能作为调控靶点改变MMP-2/MMP-13的表达,进而影响血管细胞的出芽、移行、凋亡及CNV纤维化。     

基质金属蛋白酶9在涎腺肿瘤中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）在涎腺肿瘤中的表达及其与涎腺肿瘤侵袭性生物学行为的关系,为涎腺肿瘤临床治疗寻找新思路提供理论依据。方法手术切除且资料完整的涎腺肿瘤存档蜡块共140例,多形性腺瘤32例;基底细胞腺瘤28例;腺样囊性癌40例,其中,癌细胞转移16例,无转移24例,神经侵润18例,无神经侵润22例;黏液表皮样癌40例。另选取10例手术切除的正常涎腺组织作为对照。采用免疫组化PV-9000两步法检测80例涎腺恶性肿瘤、60例良性肿瘤和10例正常涎腺组织的MMP-9表达,计算每例切片中细胞的阳性率并进行对比分析。结果MMP-9在80例涎腺恶性肿瘤、60例涎腺良性肿瘤和10例正常涎腺组织中阳性表达率分别为72．5％、30．0％、10．O％,差异有统计学意义（X^2=32．12,P〈0．01）。腺样囊性癌组织癌细胞转移组MMP-9的阳性表达率93．75％（15／16）,癌细胞未转移组阳性表达率为66．67％（16／24）,差异有统计学意义（X^2=4．038,P〈0．05）。MMP-9在正常涎液腺组织、粘液表皮样癌组、腺样囊性癌组中的阳性表达率分别为10．0％（1／10）、67．5％（27／40）、77．5％（31／40）,三组阳性率比较差异有统计学意义（X2=16．263,P〈0．01）。腺样囊性癌组织中有神经浸润者的MMP-9的阳性表达率为94．44％（17／18）明显高于无神经浸润者的阳性率63．63％（14／22）,差异有统计学意义（X^2=5．389,P〈0．05）。结论MMP-9与涎腺恶性肿瘤的浸润、转移有关,可作为预测转移潜能的指标。     

层粘蛋白表达在涎腺肿瘤诊断中的意义

探讨基底膜标记物层粘蛋白表达与涎腺肿瘤生物学行为间的关系。方法应用人层粘蛋白多克隆抗体对８３例涎腺良、恶性肿瘤进行免疫组化染色。结果层粘蛋白在延腺良性肿瘤中实性上皮四周围呈连续的阳性染色。在高分化涎腺恶性肿瘤中癌巢周围基底膜常为线状阳性染色，但染色不规则、不连续或断裂。低分化癌多呈碎片状或不定形颗粒状基底膜染色，有些区域基底膜缺如。结论层粘蛋白的染色有助于观察癌巢基底膜结构的完整性，对判断肿瘤的良恶性程度及侵袭行为具有意义。     

基质金属蛋白酶MMP-2、-9表达与卵巢肿瘤细胞侵袭能力的研究

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)表达与肿瘤细胞侵袭能力的关系。方法MMP-2和MMP-9的表达采用免疫组化S-P法。结果MMP-2、MMP-9在卵巢良性肿瘤有少量弱表达,在卵巢恶性肿瘤阳性表达率显著升高,差异显著(P<0.01),且随恶性肿瘤细胞分化程度的降低而有升高趋势,其中MMP-2在低分化卵巢肿瘤组织的强阳性表达率显著高于高、中分化者(P<0.05)。结论MMP-2、MMP-9的表达与卵巢肿瘤的恶性程度及侵袭相关,在卵巢肿瘤侵袭和转移的早期起关键作用。     

Oxidative stress activates MMP-2 in cultured human coronary smooth muscle cells

Oxidative stress is a cardinal feature of the inflammatory process and is involved in various pathologies including atherosclerosis. One of the important mechanisms in which oxidative stress may play a role is activation of matrix metalloproteinases such as MMP-2, which are involved in plaque destabilization. We investigated the mechanisms by which oxidative stress induces MMP-2 activation in cultured human coronary artery smooth muscle cells. Using zymography and Western blot analysis, we showed that oxidized low-density lipoproteins activate MMP-2 through up-regulation of the expression and activation of a membrane-type 1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP). A second mechanism of MMP-2 activation involves oxidative radicals generated by the xanthine/xanthine oxidase complex (X/Xo). Research on these two mechanisms of MMP activation could lead to the elaboration of new vascular therapies for the treatment of atheroma based on interruption of a specific oxidative stress pathway.     

MMP-2和MMP-9在早孕不同孕周滋养细胞中的表达及意义

目的:探讨MMP-2和MMP-9在早孕胎盘滋养细胞中的表达及意义。方法:通过免疫组织化学技术及West-ern blot技术检测早孕早期和早孕晚期绒毛组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果:MMP-2和MMP-9蛋白主要定位在绒毛细胞滋养细胞和合体细胞滋养细胞胞浆内,绒毛间质细胞内亦有少量阳性染色,且早孕早期绒毛滋养细胞中MMP-2表达量高于早孕晚期(P0.05),而MMP-9表达量在早孕晚期高于早期(P0.05)。结论:MMP-2和MMP-9在调节滋养细胞浸润过程中起重要作用,且在早孕不同时期,二者表达不同,为深入探讨MMPs在滋养细胞浸润机制中的作用提供理论基础。     

类风湿关节炎和系统性红斑狼疮患者血清基质金属蛋白酶2、9检测的意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMPs）在类风湿关节炎（RA）和系统性红斑狼疮（SLE）中的重要作用。方法采用酶联免疫吸附试验和酶谱分析了48例RA和27例SLE患者及186例健康对照者血清中MMP-2和MMP-9的浓度和活性。结果酶谱分析结果显示RA和SLE患者血清MMP-2和MMP-9的活性显著高于对照组（P〈0.01）。ELISA检测结果也表明RA、SLE组的MMP-2和MMP-9浓度明显高于对照组（P〈0.05）。结论MMP-2和MMP-9在RA和SLE患者血清中的水平及活性明显升高,表明MMPs在这些自身免疫疾病起一定的作用,可作为临床辅助诊断指标。     

缺氧对肺腺癌细胞A549MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:研究缺氧条件下基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达变化规律。方法:人肺腺癌细胞A549常氧/缺氧培养,酶谱法测定培养基中MMP-9酶活性,免疫细胞化学、免疫印迹技术分别检测MMP-9及TIMP-1原位蛋白及分泌蛋白表达量。结果:MMP-9、TIMP-1的阳性染色颗粒主要呈胞浆着色。缺氧48h内,MMP-9酶活性、原位蛋白及分泌蛋白表达均无显著变化;随缺氧时间延长,TIMP-1原位蛋白及分泌蛋白表达均有升高趋势(P<0.05)。结论:缺氧24h内MMP-9表达不增加,可能与癌基因、激酶活化引发的细胞筛选有关;TIMP-1在缺氧状态下表达增多,可能与其多种功能相关。     

Gelatinase matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9 of the umbilical cord blood in preeclampsia.

BACKGROUND: Preeclampsia is associated with accumulation of collagen and proteoglycans in the umbilical cord tissues as a result of increased biosynthesis and decreased degradation of these components. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes engaged in the degradation of collagen and the protein core structures of proteoglycans, including those which bind peptide growth factors. METHODS: We used Western immunoblots, immunoenzymatic assay (ELISA) and zymography techniques for the detection of gelatinases and their inhibitors. RESULTS: We found that both umbilical cord blood plasma and serum of controls and preeclamptic newborns contained MMP-2 and MMP-9, as well tissue inhibitors of metalloproteinase (TIMP)-1 and TIMP-2. The umbilical cord plasma of preeclamptic subjects contained large amounts of MMP-9 in a form of complexes with other plasma components, and zymographic analysis demonstrated increased gelatinolytic activity at a position corresponding to MMP-9, compared to control samples. By contrast, MMP-2, TIMP-1 and TIMP-2 data showed no significant differences between preeclamptic and control samples. CONCLUSIONS: The high activity of MMP-9 in preeclamptic plasma suggests its participation in the proteolytic release of peptide growth factors from their complexes with other matrix components, with subsequent stimulation of cell division and matrix biosynthesis. We suggest this might represent one of the mechanisms for matrix remodeling in the umbilical cord of preeclamptic newborns.     

Gene expression screening of salivary gland neoplasms: molecular markers of potential histogenetic and clinical significance

Salivary gland neoplasms comprise phenotypically and biologically diverse lesions of uncertain histogenesis. The molecular events associated with their development and clinicopathological heterogeneity remain unknown. To reveal these events, we performed microarray expression analysis using a nylon-filter membrane platform on 18 primary lesions representing the most common benign and malignant types. Our study identified a small set of genes that are differentially altered between normal salivary gland tissues and benign and malignant tumors. Of the 5000 genes arrayed, 136 genes were differentially expressed by normal tissue, benign tumors, and various malignant neoplasms. Hierarchical clustering analysis differentiated between adenoid cystic carcinomas (ACCs) and other malignant subtypes. Non-ACC specimens manifested overlapping patterns of gene expression within and between tumors. Most of the differentially expressed genes share functional similarities with members of the adhesion, proliferation, and signal transduction pathways. Our study identified: 1) a set of genes that differentiate normal tissue from tumor specimens, 2) genes that differentiate pleomorphic adenoma and ACCs from other malignant salivary gland neoplasms, and 3) different patterns of expression between ACCs arising from major and minor salivary gland sites. The differentially expressed genes provide new information on potential genetic events of biological significance in future studies of salivary gland tumorigenesis.