奥曲肽诱导体外培养人胃癌细胞MGC-803凋亡的研究

目的研究不同浓度，不同作用时间奥曲肽（Oct）对体外培养胃癌细胞MGC-803的作用及可能机制．方法采用MTT比色法检测Oct对体外培养胃癌细胞生长的抑制作用．用DNA断片法和流式细胞仪观察了Oct对胃癌细胞凋亡的影响，扫描电镜和透射电镜同时显示了凋亡细胞的形态学特征．结果MTT比色法测得Oct对胃癌细胞增殖有明显的抑制作用，呈剂量相关性Oct能有效地诱导人胃癌细胞MGC-803凋亡．经Oct处理12h～48h的胃癌细胞，DNA琼脂糖电泳呈现典型的梯形条带（Ladder），电镜和流式细胞仪（FcM）检测出现典型凋亡特征结论Oct对胃癌MGC-803细胞生长增殖有抑制作用；能有效地诱导人胃癌细胞MGC－803凋亡；是潜在的抗癌剂     

丁酸钠对胃癌细胞株MGC-803的增殖抑制和凋亡诱导作用机制

目的研究丁酸钠对人胃癌细胞系MGC-803的生长抑制和诱导凋亡作用，并探讨其作用机制。方法以不同浓度的丁酸钠对体外培养的人胃癌细胞系MGC-803进行处理，应用MTE法检测其对细胞生长的抑制情况；应用免疫细胞化学染色法观察其对凋亡相关基因p53表达的影响。结果不同浓度的丁酸钠均可抑制MGC-803细胞的增殖，且抑制率具有剂量和时间依赖性；突变型p53在丁酸钠作用的细胞中的表达明显低于未进行处理的细胞（P〈0．05）。结论丁酸钠可抑制体外培养的人胃癌细胞的生长，诱导癌细胞发生凋亡。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法 MGC-803细胞增殖抑制率测算采用MTT法;EGCG作用后,MGC-803细胞凋亡变化采用AO/EB荧光染色、DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测,细胞有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族3个主要信号分子JNK、ERK、p38的磷酸化水平用Western blot法检测。结果 EGCG对MGC-803细胞生长具有明显的抑制作用,呈时间和剂量依赖性效应(P均<0.05),并可见明显的细胞凋亡特征。100、200μmol/L的EGCG作用24 h后,其细胞DNA在琼脂糖凝胶上可见特征性的阶梯状条带。50、100、200μmol/L的EGCG作用于MGC-803细胞24 h后,细胞DNA出现明显的亚二倍体峰。EGCG抑制人胃癌MGC-803细胞中ERK的活性,并在一定程度上提高p38和JNK的活性。结论 EGCG可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,并诱导其凋亡。其机制与EGCG抑制MGC-803细胞中ERK活性、提高p38和JNK的活性有关。     

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

[目的]研究胃安宁颗粒含药血清体外对人胃癌MGC-803细胞株增殖、凋亡的影响.[方法]采用MTT比色法检测不同剂量胃安宁颗粒含药血清作用12 h、24 h、48 h后对MGC-803细胞生长增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率.[结果]随着胃安宁颗粒含药血清浓度逐渐增加,细胞增殖率逐渐降低,细胞抑制率、凋亡率逐渐升高,且以早期凋亡为主.[结论]胃安宁颗粒能够抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,对MGC-803细胞有诱导其早期凋亡作用.     

SCH66336对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的探讨法尼基转移酶抑制剂（FTIs）SCH66336对胃癌SGC-7901与MGC-803细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法取对数生长期胃癌SGC-7901与MGC-803细胞,分为实验组和对照组,实验组加入SCH66336使终浓度分别为0.1、0.3、1.0、3.0μM,对照组加入含等体积DMSO的培养基,每组设3个复孔。MTT法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期与细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中核糖体蛋白S6的磷酸化（S235/236）、细胞周期素D1（cyclin D1）与活化的Caspase-3表达情况。结果与对照组比较,SCH66336作用后SGC-7901与MGC-803细胞抑制率及凋亡率明显升高,呈G0/G1细胞周期阻滞,cyclin D1与S6磷酸化表达明显降低、活化的Caspase-3表达升高（P〈0.05）,且呈时间及剂量依赖性。结论 SCH66336对SGC-7901与MGC-803胃癌细胞具有增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能为抑制S6的活化、下调cyclin D1表达、激活Caspase-3依赖的凋亡通路。     

长链非编码RNA SNHG16靶向miR-16-5p调控胃癌细胞增殖、凋亡的机制

目的研究小核内RNA宿主基因(SNHG)16对胃癌MGC-803细胞增殖、凋亡的影响和潜在的分子机制。方法 qRT-PCR检测SNHG16和miR-16-5p RNA的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测MGC-803细胞增殖,流式细胞术测定MGC-803细胞凋亡率,双萤光素酶报告系统验证SNHG16和miR-16-5p的调控关系。结果与人正常胃上皮细胞GES-1组相比,在胃癌细胞MGC-803组中SNHG16的表达量显著升高(P0.05),而miR-16-5p的表达量显著下降(P0.05);抑制SNHG16表达或过表达miR-16-5p均可抑制胃癌MGC-803细胞增殖,促进MGC-803细胞凋亡;双萤光素酶报告系统实验结果表明,SNHG16靶向负调控miR-16-5p的表达;抑制miR-16-5p表达逆转了抑制SNHG16表达对MGC-803细胞增殖、凋亡的影响。结论 SNHG16通过靶向调控miR-16-5p表达影响MGC-803细胞增殖凋亡,可作为胃癌诊断和治疗的分子靶点。     

熊果酸对人胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其机制

目的观察熊果酸（UA）对胃癌细胞株MGC-803的抑制增殖作用。方法培养胃癌细胞株MGC-803，以MTT比色法及生长曲线测定UA对MGC-803抑制增殖的作用。免疫印记法测定p-ERK1/2、CyclinD1、p21^waf/tip。表达。结果MTT实验及生长曲线均显示UA明显抑制MGC-803细胞增殖，免疫印记法显示UA抑制pERK1/2、CyclinD1表达，同时上调p21^waf/vip。表达。结论熊果酸可以抑制MGC-803增殖，机制与影响p-ERK1／2及下游CyclinD1、p21^waf/cipl表达有关。     

慢病毒介导的E2F-1沉默对人胃癌细胞MGC803中药人参黄芪复方药物敏感性的影响

目的:利用重组慢病毒介导的E2F-1基因沉默载体感染人胃癌MGC-803细胞,观察其对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响.方法:将胃癌MGC-803细胞接种于培养板中分为4组:正常组(正常培养基)、空白对照组(中药培养基)、阴性对照LV-RNAi组(中药培养基+感染空载体慢病毒颗粒2.0×109TU/mL)、E2F-1-RNAi-LV组(中药培养基+感染E2F-1基因重组慢病毒颗粒2.0×109TU/mL),分别采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测E2F-1mRNA及蛋白表达;MTT方法检测细胞的增殖抑制率;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;流式细胞仪检测细胞的凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果:E2F-1基因沉默蛋白及mRNA表达水平均明显下降,差异有统计学意义(0.384±0.036vs0.883±0.051和0.923±0.049,0.220±0.056vs0.729±0.021和0.712±0.037,P<0.05).中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成及迁移;与空白对照组及阴性对照组相比较,E2F-1基因沉默组MGC-803细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著提高,其细胞克隆形成、细胞迁移面积显著降低,差异均有统计学意义(0.789±0.013vs0.484±0.060和0.454±0.006,0.383±0.027vs0.114±0.038和0.089±0.051,0.024±0.003vs0.036±0.004和0.052±0.002,0.553±0.038vs0.897±0.020和0.928±0.051,P<0.05).结论:重组慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默能有效增强中药人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞的药物敏感性.     

大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803增殖的影响及其作用机制

目的通过大蒜素作用于人胃癌细胞系MGC-803,探讨其对胃癌细胞增殖的影响及机制。方法通过细胞培养技术检测大蒜素作用胃癌细胞后细胞增殖抑制率;免疫组化及RT-PCR法检测胃癌细胞中p16INK4因子表达变化。结果大蒜素作用于MGC-803细胞后,对其增殖表现出了明显的抑制作用,且呈浓度依赖性：大蒜素处理的MCC-803细胞p16蛋白及p16INK4 mRNA表达明显强于未应用大蒜素处理组（P〈0．05）。结论大蒜素可以抑制MGC-803细胞的增殖,其机制之一可能为上调了细胞抑癌基因p16INK4的表达。     

塞来昔布对不表达环氧合酶-2的胃癌细胞生长的影响

目的: 探讨选择性COX-2抑制剂celecoxib抑制不表达COX-2的胃癌细胞MGC-803生长的机制.方法: 采用MTT法研究celecoxib对细胞存活率的影响;流式细胞术检测celecoxib处理后细胞DNA含量的变化, 免疫组织化学方法检测Bax及Bcl-2的表达, Elisa法检测VEGF蛋白表达水平, Western blot法检测COX-2及NF-κB蛋白的表达.结果: MGC-803中未检测到COX-2的表达;选择性COX-2抑制剂celecoxib呈浓度和时间依赖性抑制MGC-803细胞生长( r = 0.985,P<0.05), 流式细胞仪检测DNA图谱上表现为G0/G1期前出现一个代表凋亡细胞的亚G1峰. Bax及Bcl-2无表达, celecoxib对细胞分泌VEGF( r = 0.928, P<0.01)及NF-κB蛋白均有抑制作用, 并且NF-κB蛋白的表达和celecoxib呈浓度和时间依赖性( r = 1).结论: celecoxib可诱导不表达COX-2的胃癌细胞MGC-803凋亡, 可能通过抑制IKKβ-NF-κB信号通路影响MGC-803细胞的凋亡, 而不依赖COX-2途径.     

miR-10b通过抑制KLF4表达诱导胃癌细胞对顺铂耐药

背景胃癌(gastric cancer, GC)化疗容易产生获得性化疗耐药.miR-10b能参与调节食管癌和鼻咽癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药,而在GC中其与DDP化疗敏感性的关系并不清楚.目的探讨miR-10b是否参与GC细胞对DDP耐药,以及其中的分子机制.方法采用DDP反复刺激SGC-7901和MGC-803细胞并浓度递增法构建SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞.检测SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中mi R-10b和KLF4的表达.对SGC-7901和MGC-803细胞转染慢病毒携带的miR-10b过表达载体, MTT法检测miR-10b过表达对DDP敏感性的影响; Annexin V-FITC/PI染色法检测miR-10b过表达对DDP诱导的细胞凋亡的影响; RT-qP CR和Western blot检测miR-10b过表达对KLF4mR NA和蛋白表达的影响.进一步构建异体移植瘤模型,并给予DDP化疗后,宏观观察瘤体形态并称量瘤体质量.对SGC-7901和MGC-803细胞共转染miR-10b和KLF4后,MTT法检测细胞对DDP敏感性变化.结果与SGC-7901和MGC-803细胞比较, SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中miR-10b表达水平显著增加(P 0.01),KLF4mRNA和蛋白水平显著降低(P 0.01).体外实验显示,过表达miR-10b促进GC细胞对DDP耐药,抑制KLF4表达(P0.01);在体实验显示, DDP治疗后, miR-10b组瘤体质量显著高于NC组(P0.01).过表达KLF4能部分逆转过表达miR-10b诱导的GC细胞对DDP耐药.结论miR-10b通过抑制KLF4表达促进GC细胞DDP化疗耐药,而miR-10b高表达产生的DDP耐药性可以被上调KLF4解除.     

三氧化二砷对肝癌细胞株凋亡的诱导作用

目的研究三氧化二砷(As2O2)对人、鼠肝癌细胞株凋亡的诱导作用.方法用不同质量浓度(0.25,0.5,1,2,3,4 mg/L)的三氧化二砷处理体外培养的鼠7919,人HePG2肝癌细胞株,以MTT比色法、AO/EB荧光染色法、DNA凝胶电泳和免疫组化染色法检测细胞凋亡.结果不同浓度的三氧化二砷均可抑制7919,HePG2细胞生长;AO/EB荧光染色在荧光显微镜下观察肝癌细胞呈典型的凋亡形态学改变;DNA凝胶电泳呈梯形条带为凋亡的特征;免疫组化染色加药组bcl-2表达下调,bax表达上调,对照组bcl-2表达上调,bax表达下调,两株细胞结果相同.结论As2O3对两株细胞均有诱导凋亡作用.这为临床应用As2O3治疗肝癌提供了一个可供参考的实验依据.     

ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对胃癌细胞MGC-803中RECK、MMP-9基因表达的影响

目的:探讨ERK1/2信号通路在RECK基因抑制侵袭转移中的作用.方法:体外培养人胃癌MGC-803细胞,采用MTT法观察胃癌细胞MGC-803增殖情况,Western blot检测P-ERK的蛋白表达,RT-PCR法和Western blot法检测RECK和基质金属蛋白酶9(MMP-9) mRNA和蛋白表达.结果:M...     

舒林酸抑制人胃腺癌细胞增殖及诱导凋亡

目的在体外对舒林酸抗人胃腺癌细胞增殖和凋亡诱导作用及其机制进行初步研究.方法采用人胃腺癌细胞株MKN45,MKN28作为研究对象.体外药物敏感试验(MTT)检测不同浓度和作用时间的舒林酸对细胞的增殖抑制效应;分别用Hoechst33258细胞核荧光染色、透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳观察舒林酸诱导的细胞凋亡改变;应用Western斑点免疫印迹法观察经舒林酸2mmol·L-1和4mmol·L-1作用24 h后细胞内环氧化酶-2(COX-2)和凋亡抑制蛋白Bcl-2表达程度的变化.结果舒林酸对人胃腺癌细胞MKN45,MKN28的杀伤率随着剂量的增大和作用时间的延长而增加,舒林酸对不同类型的细胞杀伤率不同.舒林酸能够诱导人胃腺癌细胞MKN45,MKN28产生凋亡,凋亡诱导作用的强弱同样具有时间和剂量依赖性,而且对不同类型胃癌细胞的凋亡诱导效应有显著差异.经舒林酸2 mmol·L-1和4 mmol·L-1作用24 h后,MKN45细胞内COX-2和Bcl-2蛋白比未经舒林酸作用的细胞表达明显减少,而MKN28细胞内COX-2和Bcl-2蛋白的表达未出现明显变化.结论舒林酸在体外对人胃腺癌细胞株MKN45和MKN28有良好的增殖抑制作用,诱导凋亡是其抑制胃癌细胞增殖的重要作用机制.舒林酸对人胃腺癌细胞的抑制和凋亡诱导作用与其抑制细胞内环氧化酶-2,并进而抑制Bcl-2的表达有关,并可能与胃癌细胞的分化状态有关.     

槐耳对人胃癌细胞MGC803增殖和凋亡的影响

[目的]观察中药槐耳对胃癌细胞株MGC803增殖和凋亡的影响.[方法]以不同浓度的槐耳（4、8、16、32、64 mg/ml）分别作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803,通过MTT法、划痕实验等检测槐耳对MGC803细胞增殖和迁移的作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果]MTT实验显示槐耳可抑制MGC803细胞的生长,呈时间及浓度依赖性;显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状;划痕实验显示,4、8 mg/ml槐耳分别作用MGC803细胞,划痕愈合明显慢于对照组,呈剂量依赖关系;流式细胞仪可检测到MGC803细胞凋亡率明显增加,呈时间及浓度依赖性.[结论]槐耳可抑制人胃癌MGC803细胞的迁移,且能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人胃癌细胞MGC803的生长.     

生存素反义寡脱氧核苷酸对人胃癌细胞株凋亡的影响

背景：生存素（survivin）是凋亡抑制蛋白（IAP）基因家族成员之一，在多数肿瘤组织中高表达。目的：观察生存素反义寡脱氧核苷酸（ASODN）对人胃癌细胞株凋亡的影响。方法：将体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901分为不同浓度生存素ASODN组、无关寡脱氧核苷酸（N-ODN）组和对照组。以四甲基偶氮唑蓝（MTT）试验检测生存素ASODN对SGC-7901细胞生长的影响；通过形态学观察、DNA电泳和流式细胞仪分析反映细胞凋亡情况；以端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附测定（TRAP-ELISA）方法检测端粒酶活性。结果：生存素ASODN能抑制SGC-7901细胞生长，诱导细胞凋亡，抑制端粒酶活性。凋亡细胞形态学上表现为细胞膜起泡、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成；DNA电泳呈现凋亡特征性阶梯状条带；流式细胞仪分析显示G1期前出现亚二倍体凋亡峰。结论：生存素ASODN能诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡，抑制细胞生长及其端粒酶活性。     

扁塑藤素对胃癌细胞MGC803及SGC7901增殖和凋亡的影响

目的:研究扁塑藤素对胃癌MGC803和SGC7901细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法:体外培养MGC803和SGC7901细胞,细胞接受0-50μmol/L药物处理之后,采用CCK-8实验、Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测及细胞周期检测实验研究扁塑藤素对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响;采用罗丹明123测定细胞线粒体跨膜电位变化,最后采用Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)表达水平.同时用人胃癌细胞系MGC803进行裸鼠成瘤实验,观察扁塑藤素对裸鼠成瘤的影响.结果:扁塑藤素可以抑制MGC803和SGC7901细胞增殖,其IC_(50)值分别为8.5μmol/L和12.6μmol/L;Annexin V-FITC/PI双染实验显示随着药物浓度的增加,出现凋亡的细胞明显增加;细胞周期实验显示扁塑藤素可以诱导MGC803细胞出现G_1期阻滞;细胞经过药物处理后,细胞线粒体跨膜电位明显下降.Western blot实验显示随着药物浓度的增加,细胞中Bax蛋白表达水平上升,Bcl-2蛋白表达水平下降,呈现一定的浓度依赖性.裸鼠成瘤实验显示,扁塑藤素可以抑制裸鼠种植瘤的生长.结论:扁塑藤素能显著抑制胃癌MGC803和SGC7901细胞增殖并诱导其凋亡,认为扁塑藤素可能通过增强线粒体通透性来诱导细胞凋亡.     

姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的机制

目的通过体外实验探讨姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的作用机制。方法取人胃癌细胞系MGC-803培养至对数生长期,按姜黄素作用的不同浓度分组:3.12、6.25、12.5、25.0、50.0μmol/L,作用的不同时间分组:24、48、72 h,采用四甲基耦氮唑蓝(MTT)计算细胞抑制率;应用吖啶橙荧光染色观察细胞的形态学改变;流式细胞仪检测细胞周期的变化;使用琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA片段化作用。结果 (1)利用MTT比色分析法,发现MGC-803细胞分别用含不同浓度姜黄素溶液培养24、48、72 h后,细胞增殖受到明显的抑制,且与浓度和时间呈正相关;(2)通过吖啶橙染色发现,在姜黄素作用下,部分细胞明显变圆,体积缩小,荧光增强,核染色质固缩,呈新月形、肾形在核膜周边聚集;(3)流式细胞仪分析结果显示,姜黄素主要使细胞周期阻滞于S期,G1期细胞数减少,G2/M期细胞数变化不明显;(4)DNA琼脂糖凝胶电泳显示,12.5、25.0、50.0μmol/L浓度处理组作用48 h后出现典型的DNA断裂的梯子样外观。结论姜黄素能明显抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与细胞的S期阻滞有关。     

抗Fas单克隆抗体诱导人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡

目的探讨抗Fas单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡的规律及在胃癌治疗中的意义.方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗Fas 单克隆抗体对胃癌细胞SGC-7901增殖周期的影响以及对细胞杀伤作用的方式,并检测了SGC -7901细胞表面Bcl-2的表达情况..结果抗Fas单克隆抗体有阻滞细胞周期、通过诱发凋亡而抑制肿瘤细胞生长的作用. 经抗Fas单克隆抗体处理后,SGC-7901细胞表面Bcl-2蛋白表达无明显变化. .结论抗Fas单克隆抗体可以诱导胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡. 抗Fas单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡与Bcl-2表达无关.     

中药靛玉红衍生物通过信号转导子和转录激活子3途径促进胃癌细胞自噬

目的通过MTT细胞活性实验、Western蛋白印记实验,证明E804能够对MGC803等胃癌细胞系产生抑制细胞活性的作用,提高自噬标记物的表达,促进MGC803细胞进行自噬过程,并且探究E804的药理机制.方法正常培养的MGC-803与MKN-45细胞作为阴性对照组,实验组将E804按照相应梯度浓度处理24 h,部分实验加入白介素-6浓度100 ng/mL处理2 h作为阳性对照组.采用MTT实验、蛋白印记实验和裸鼠成瘤模型建立实验来分析两组细胞的细胞活性、细胞的自噬标记物表达升高情况及检测检测移植瘤直径变化.结果随着E804浓度的上升,MGC-803与MKN-45两组细胞的细胞活性均降低,差异有统计学意义(P0.05),E804处理后到自噬标记物LC3-B及Beclin-1的表达量显著上升,并且呈现明显的剂量依赖效应;比较对照组载瘤鼠与给药组载瘤鼠肿瘤最大径随时间的变化曲线,给药组的肿瘤生长速度显著慢于对照组,有统计学差异(P0.05).结论 E804通过抑制S t a t3活化促进胃癌细胞自噬活动来抑制胃癌细胞生长,为胃癌的联合治疗提供了新的思路.