芦荟大黄素对便秘小鼠结肠肌电表达的影响

目的探究芦荟大黄素(aloe emodin,AE)对便秘小鼠结肠肌电表达的影响.方法30只小鼠均匀分布,分对照组、模型组、AE组.用复方地芬诺酯片混悬液灌胃法建立慢性传输型便秘模型,AE治疗AE组.检测小鼠每日排便量、粪便性状和结肠肌电活动,从而探讨AE对便秘小鼠结肠肌电表达的影响,同时用免疫组织化学方法测定各组小鼠结肠P物质(P substance,SP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的表达情况.结果三组小鼠的结肠慢波表现与正弦波样曲线相接近.模型组结肠慢波频率为(47.97±2.63)次/min,与对照组(43.75±0.69)次/min相比明显加快,差异有高度统计学意义(P<0.01),AE组结肠慢波频率与模型组比较明显减慢,差异有高度统计学意义(P<0.01);模型组结肠慢波频率变异系数(6.02±0.23)%,与对照组(1.83±0.38)%相比明显增大(P<0.01),AE组小鼠频率变异系数(2.77±0.19)%,与模型组相比更趋于正常(P<0.01);模型组结肠慢波振幅(0.05±0.03)mV,与对照组(0.16±0.03)mV相比显著减少(P<0.01),AE组振幅(0.13±0.03)mV,与模型组相比明显回升(P<0.01);模型组结肠慢波振幅变异系数(62.79±1.71)%,与对照组(10.13±0.55)%相比明显增大(P<0.01),AE组小鼠振幅变异系数(25.31±1.97)%,与模型组相比明显减小(P<0.01).免疫组化实验结果中小鼠肠道SP和VIP含量较对照组明显升高(P<0.01).结论AE对便秘小鼠具有缓解性作用,其缓解机制可能是通过升高SP和VIP来实现的.     

细菌脂多糖免疫对炎症性肠病小鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨细菌脂多糖免疫对炎症性肠病小鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其作用机制.方法 BALB/C雌性小鼠10只随机分为实验组5只和对照组5只,实验组腹腔内注射1.0 mg/kg细菌脂多糖和免疫佐剂的混合物,对照组腹腔内注射免疫佐剂1.0 mg/kg,2组小鼠均每周注射1次,注射4次.末次注射1周后均给予150 mg/kg的三硝基苯磺酸乙醇溶液灌肠诱导炎症性肠病.观察2组小鼠一般状态、体质量改变情况、粪便性状,检测粪便隐血;灌肠1周后处死小鼠,观察结肠组织学改变,采用ELISA法检测结肠组织TNF-α表达情况,采用Western blot法检测结肠组织核因子(nuclear factor,NF)-κB表达情况.结果 2组小鼠灌肠后第2天均出现懒动、厌食、皮毛凌乱、腹泻,第3天出现血便、体质量下降,实验组上述表现较对照组轻,恢复快;实验组小鼠第3天体质量下降克数((1.60±0.38)g)、粪便隐血阳性持续时间((2.40±0.54)d)、结肠组织学评分((3.72±2.45)分)、结肠组织TNF-α表达水平((20.16±3.21) ng/L)和NF-κB吸光度值((18.43±5.36)×10 3)均明显低于对照组((2.80±0.45)g、(3.60±0.46)d、(6.39±1.72)分、(32.35±2.80)ng/L、(25.80±3.79)×10-3)(P＜0.05).结论 细菌脂多糖免疫可降低炎症性肠病小鼠结肠组织TNF-α和NF-κB表达水平,减轻结肠组织病理损伤,机体对细菌脂多糖反应异常可能是炎症性肠病的发病因素之一.     

益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及机制研究

目的探讨益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及作用机制。方法 60只雄性C57BL6小鼠随机分为三组,分别为假手术组(20只)、对照组(20只)和实验组(20只)。在饲养2 d后,实验组小鼠每天给予200μL的益生菌制剂,对照组和假手术组小鼠每天给予200μL等渗Na Cl溶液,连续灌胃4周。分别对实验组小鼠与对照组小鼠进行盲肠结扎穿孔术(CLP),而假手术组小鼠不予盲肠穿刺,其余步骤同CLP。每组10只用于观察小鼠活动状态及7 d存活情况;每组剩余10只,术后24 h取血液、结肠组织。采用酶联免疫吸附实验法检测各组小鼠血清中炎症因子白细胞介素22(IL-22)、IL-2及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织形态,免疫组织化学法观察各组小鼠肠黏膜抗紧密连接相关蛋白(Occludin)表达。结果假手术组小鼠生长状态良好;对照组小鼠则蜷缩在笼角,浑身战栗;实验组小鼠较对照组活跃,活动较多,未见明显战栗。术后第7天,对照组无小鼠存活,实验组小鼠仍有3只存活,予安乐死,其7 d存活情况显著高于对照组小鼠(P=0.020);而假手术组小鼠10只均存活,予安乐死。对照组与假手术组比较,小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=7.590,P0.001]、IL-2[(328±27)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=21.368,P0.001]及TNF-α[(94±22)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=4.734,P0.001]表达水平比较,差异均有统计学意义;实验组与假手术组小鼠血清IL-22[(75±33)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=3.755,P=0.001]、IL-2[(217±30)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=10.850,P0.001]及TNF-α[(107±20)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=5.956,P0.001]表达水平比较,差异亦均有统计学意义;与对照组相比,实验组小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(75±33)ng/L,t=2.185,P=0.042]及IL-2[(328±27)ng/L vs.(217±30)ng/L,t=8.371,P0.001]表达水平差异均有统计学意义,而TNF-α[(94±22)ng/L vs.(107±20)ng/L,t=1.363,P=0.188]表达水平比较,差异无统计学意义。假手术组小鼠的结肠黏膜上皮完整,腺体排列规则,少许或无炎症细胞浸润;对照组小鼠则出现结肠黏膜上皮腺体排列紊乱、变形、缺失,肠上皮细胞间紧密连接结构模糊,以及炎症细胞广泛浸润现象,有些伴有隐窝脓肿形成;而实验组小鼠结肠上皮基本完整,未有糜烂缺失,腺体排列基本正常,炎症细胞浸润程度也较对照组小鼠有所减轻。免疫组织化学法检测结果显示,假手术组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构完整,Occludin蛋白表达较多;对照组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构破坏、消失,炎症细胞浸润,Occludin蛋白表达较少;实验组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构尚完整,腺泡间间隙增宽,Occludin蛋白表达较对照组有所增加。结论益生菌可通过抑制肠上皮细胞间紧密连接相关蛋白的减少,稳定肠道黏膜屏障结构,有效提高脓毒症小鼠的存活情况。     

新生小鼠全身炎症反应综合征时肺组织糖皮质激素受体的表达及意义

目的 检测小鼠全身炎症反应综合征(SIRS)时肺组织糖皮质激素受体(GR)的表达,探讨GR在内毒素引起SIRS过程中的作用.方法 40只新生小鼠随机分为4组,每组10只:实验组A、B、C及对照组D.实验组以尾静脉注射脂多糖(LPS)法建立SIRS模型,其中实验组A予麻醉后尾静脉注射LPS(5 mg/kg);实验组B、C均先予LPS预处理:实验组B予腹腔注射LPS(0.25 mg/kg),24 h后处理同实验组A;实验组C予腹腔注射LPS(0.25 mg/kg),24 h后再次腹腔注射LPS(0.5 mg/kg),第2次注射24 h后处理同实验组A;对照组D仅予以麻醉.各组末次注射24 h后采集肺脏标本,行HE染色肺组织病理评分,免疫组化检测GR蛋白、逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测GR mRNA的表达.结果 (1)小鼠肺组织病理评分实验组A(6.44±1.16)、B(4.12±1.07)和C组(4.10±1.31)均高于对照组D(2.52±0.93,P均＜0.05);LPS预处理组B、C的肺组织病理评分明显低于实验组A(P均＜0.05).(2)对照组D小鼠肺组织GR蛋白及GR mRNA的表达水平高于实验组A,低于预处理组B和C,差异有统计学意义(P均＜0.01).结论 新生小鼠SIRS时肺组织GR表达减少,其与SIRS的发展、转归相关;LPS重复刺激可使新生小鼠产生耐受性,耐受性的产生与GR的表达调高相关.     

慢传输型便秘患者α-突触核蛋白硝基化的意义

目的探讨α-突触核蛋白(α-Syn)在结肠慢传输型便秘(STC)中的变化及病理学意义。方法应用免疫荧光双染技术和病理显微分析图像系统,在中倍光镜下比较22例STC患者(STC组)和20例健康志愿者(对照组)结肠黏膜α-Syn及硝基化α-Syn。结果两组结肠黏膜神经元及胶质细胞均有α-Syn及硝基化α-Syn表达。STC组结肠黏膜α-Syn及硝基化α-Syn较对照组明显增加,α-Syn黏膜层1101.1±26.34 vs.1431.3±30.36;黏膜下1023.1±31.42vs.1332.7±26.3;硝基化α-Syn(黏膜层396±14.16 vs.688.5±28.34;黏膜下129.7±3.78 vs.220.9±8.55),差异有显著性(P<0.05)。结论结肠黏膜神经α-Syn的硝基化参与STC的发病。     

骨关节炎患者滑膜细胞对于成骨细胞骨向分化的影响及机制研究

目的 探索骨关节炎患者滑膜细胞对成骨细胞骨向分化的影响及其相关机制。方法 取骨关节炎患者滑膜组织及正常滑膜组织,采用酶消化法分离培养滑膜细胞,并传代,取第2代滑膜细胞和成骨细胞进行实验。首先将滑膜细胞与成骨细胞在体外进行共培养,实验分为两组,取P2代骨关节炎患者滑膜细胞与成骨细胞transwell共培养作为实验组(A组),正常滑膜细胞与成骨细胞transwell共培养作为对照组(B组),共培养36 h后,利用CCK-8法检测成骨细胞存活率,实时荧光定量PCR检测成骨细胞miR-21表达。然后,体外培养成骨细胞,构建过表达miR-21的重组慢病毒表达载体并转染入成骨细胞,实验分为两组,转染对照组(C组),miR-21转染组(D组),体外培养7 d后,实时荧光定量PCR检测成骨细胞miR-21表达以及成骨相关基因骨钙素(OCN)、RUNX2及I型胶原(Collagen I) mRNA表达,茜素红S法检测钙离子吸光度,ELISA法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,western blot法检测OCN、RUNX2蛋白表达。结果 共培养36 h后,A组与B组成骨细胞存活率无显著差异[(98. 21±1. 07)%vs.(96. 14±0. 93)%,P 0. 05],而A组miR-21表达量明显高于B组(4. 61±0. 47 vs. 0. 32±0. 11,P 0. 05);体外培养7 d后,D组miR-21表达量明显高于C组(11. 02±0. 97 vs. 0. 41±0. 08,P 0. 05),而D组OCN、RUNX2及Collagen I基因表达显著低于C组(0. 33±0. 06 vs. 1. 04±0. 27,0. 27±0. 03 vs. 0. 99±0. 12,0. 73±0. 08 vs. 1. 05±0. 08,P 0. 05),D组钙离子吸光度和ALP活性显著低于C组(P 0. 05),此外,D组OCN、RUNX2蛋白相对表达量均明显低于C组(1. 02±0. 16 vs. 15. 66±1. 37,1. 03±0. 11 vs. 8. 47±0. 94,P 0. 05)。结论 骨关节炎成骨细胞内miR-21水平呈高表达,而成骨细胞存活率却未受明显影响。骨关节炎患者滑膜细胞miR-21可抑制成骨细胞的矿化作用。     

功能性便秘与生物反馈治疗

目的　探讨功能性出口梗阻型便秘及混合型便秘的肛管动力学特点及其生物反馈治疗的意义。方法　 36例患者生物反馈治疗 1个月 ,治疗前后进行排便情况、肛管测压、2 4小时GITT以及直肠和盆底肌电描记并进行对比分析。结果　生物反馈治疗后患者每周自主排便次数由治疗前的 (0 .8± 0 .3)次 /周增加到 (4 .1± 1.1)次 /周 ;2 4小时GITT由治疗前的平均 19.4 %增至 6 2 .1% ;功能性出口梗阻及混合型便秘患者经治疗后盆底肌与腹前斜肌的矛盾运动消失 ;便秘组直肠感知阈值、最大耐受量、肛管 直肠抑制反射阈值有所下降。结论　功能性出口梗阻型便秘及混合型便秘均存在肛管 直肠动力异常 ,并有盆底肌与腹前斜肌的矛盾运动 ,治疗后肛管直肠动力异常改善 ,盆底肌与腹前斜肌的矛盾运动消失 ,每周排便次数增加 ,便秘改善。     

高脂饮食对结肠炎小鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨高脂饮食对结肠炎小鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响及作用机制。方法 雌性BALB/C小鼠10只随机分为实验组和对照组各5只,2组小鼠均给予100mg/kg三硝基苯磺酸乙醇溶液灌肠诱导结肠炎,实验组给予高脂饮食喂养,对照组给予普通饮食喂养,观察2组小鼠一般状态、体质量改变和粪便性状,检测粪便隐血,灌肠1周后行结肠组织病理学检查,采用ELISA法检测结肠组织肿瘤坏死因子-α表达情况,采用鲎试剂检测结肠组织脂多糖水平。结果 2组小鼠灌肠后第2天出现懒动、厌食、皮毛凌乱、腹泻,第3天出现血便、体质量下降;实验组小鼠疾病活动指数(6.02±0.73)、结肠损伤组织学评分(6.87±2.02)、结肠组织肿瘤坏死因子-α((34.57±3.64)ng/L)和脂多糖水平((349.46±45.27)EU/L)高于对照组(4.48±0.36、4.23±1.38、(23.25±2.18)ng/L、(263.77±38.43)EU/L)(P<0.05)。结论 高脂饮食可加重小鼠实验性结肠炎的病变程度,可能与高脂饮食加重肠道功能紊乱导致细菌脂多糖过多进入机体引起严重炎症反应有关。     

姥鲛烷联合鼠源性B淋巴瘤A20细胞株诱导淋巴瘤小鼠模型的实验研究

目的建立有一定免疫功能的B细胞淋巴瘤小鼠模型。方法 38只BALB/c小鼠,其中32只小鼠尾静脉注射1×106个A20细胞后分为实验组16只和对照组16只,分别腹腔注射姥鲛烷0.5mL和生理盐水0.5mL,观察2组小鼠成瘤情况、时间、部位和成瘤率,并分别取各脏器组织行组织病理检查,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织免疫表型。另6只小鼠作为空白对照组,采用流式细胞术检测3组小鼠的免疫功能。结果对照组小鼠成瘤率为43.8%,成瘤时间为(72.6±8.7)d;实验组小鼠成瘤率为87.5%,成瘤时间为(32.5±4.1)d,差异有统计学意义(P<0.05);荷瘤鼠的免疫功能未明显改变,实验组成瘤小鼠CD19阳性细胞表达率为(90.01±3.51)%,对照组为(87.79±5.62)%,差异无统计学意义(P>0.05);实验组、对照组小鼠第30天NK细胞数(40.7±2.2和60.3±1.9)均明显高于空白对照组(15.1±0.6)(P<0.05),对照组高于实验组(P<0.05)。结论姥鲛烷联合A20细胞株成功构建了有一定免疫功能的播散性B细胞淋巴瘤小鼠动物模型,成瘤率高,成瘤时间短,且保留了较好的免疫功能。     

CD44单克隆抗体诱导THP-1细胞分化和凋亡作用及其机制探讨

目的 观察CD44单克隆抗体A3D8对急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞的增殖抑制作用,并探讨其作用途径.方法 采用MTT法检测A3D8对THP-1细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析THP-1细胞CD33、CD15、CD11b、CD14、Annexin-V、caspase-3、细胞周期;Western blot法分析p-Akt、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(P-ERK)、bcl-2和p27kip1蛋白的表达.结果 A3D8能显著抑制THP-1 细胞增殖,呈剂量和时间的量效关系.2.0 μg/ml A3D8作用THP-1细胞1～6 d后细胞明显分化.A3D8处理4 d,THP-1细胞CD33、CD15、CD11b、CD14表达水平与对照组比较[平均荧光强度(MFI)]分别为68.9±2.0对39.3±1.5、61.7±5.5对12.9±2.6、67.3±3.8对14.0±2.0、83.0±5.7对8.0±1.0(P均<0.01).细胞周期阻滞在G0/G1期.处理4 d实验组和对照组p-Akt、p-ERK、bcl-2蛋白分别为0.24±0.06对1.20±0.15、0.32±0,05对1.24±0.09、0.11±0.05对0.65 ±0.07,实验组较对照组显著减少(P均<0.01);处理4 d实验组和对照组p27kipl.蛋白分别为1.08±0.09对0.10±0.02,实验组较对照组显著增加(P<0.05).A3D8处理5 d THP-1细胞Annexin-V、caspase-3阳性率与对照组比较,分别为(32.5±2.5)%对(2.4±0.3)%、(33.3±2.5)%对(3.6±0.3)%(P均<0.01).结论 CD44单克隆抗体A3D8可能通过抑制PI3K/Akt和ERK1/2信号通路诱导THP-1细胞分化和凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the effects of anti-CD44 mAb A3D8 on the cell proliferation of human acute monocytic leukemia cell line THP-1 and its mechanism. Methods Cell proliferation was assayed with MTT method, the expression of CD33, CD15, CD11b, CD14, Annexin-V, caspase-3 and cell cycle with flow cytometry, and the expression of p-Akt, p-ERK, bcl-2 and p27kipl with Western blot. Results A3D8 could remarkably inhibit the proliferation capacity of the THP-1 cells in a dosage- and time-dependent manner. THP-1 differentiation was observed when treated with A3D8 (2.0 μg/ml) for one to six days. Expression of CD33 (68. 9 ±2.0 vs 39.3 ± 1.5), CD15(61. 7 ±5.5 vs 12.9 ±2.6), CD11b (67.3 ± 3.8vs 14.0±2.0) and CD14 (83.0 ±5.7 vs 8.0 ± 1.0) was significantly increased at day 4 compared with the control group ( all P < 0.01). Cell cycle of the THP-1 cells was arrested in G1/G1. Expression of the Annexin-V [(32.5±2.5)% vs (2.4±0.3)%] and caspase-3 [(33.3 ±2.5)% vs (3.6±0.3)%] was much higher than that in normal controls (all P <0. 01) , and apoptosis was observed in THP-1 cells at day 5. Expression of p-Akt (0.24 ±0.06 vs 1.20 ±0.15), p-ERK (0. 32 ±0.05 vs 1. 24 ±0. 09), and bcl-2 (0. 11 ±0.05 vs 0. 65 ± 0. 07) was much lower than that of the controls ( all P < 0. 01), while p27kipl (1.08 ± 0.09 vs 0. 10 ± 0.02) was significantly increased at day 4 (P < 0.05). Conclusion Anti-CD44 antibody can induce the differentiation and apoptosis of THP-1 cell through inhibiting PI3K/Akt and ERK1/2 signaling pathway.     

脐带源间充质干细胞移植对慢性结肠炎小鼠环氧化酶2表达的影响

目的探讨人脐带源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)移植对慢性实验性结肠炎小鼠肠黏膜炎症的治疗作用及其机制。方法 55只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)+vehicle组(溶剂对照组)和DSS+hUC-MSCs组,其中正常对照组15只,其余两组各20只。通过饮用2%DSS建立慢性实验性结肠炎模型,DSS+hUC-MSCs组在造模第14天时经尾静脉注射1×106/200μl的hUC-MSCs,正常对照组与DSS+Vehicle组则给予等体积磷酸盐缓冲液(Phosphate BufferedSaline,PBS)作为对照,分别于hUC-MSCs移植后1、2和4周处死动物。结肠黏膜炎症改变的评估包括每天体质量改变、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度等指标,以及结肠形态学改变和组织病理学评分,同时应用免疫组织化学方法检测结肠组织中环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达。结果与正常对照组比较,DSS+Vehicle组小鼠DAI、结肠形态学评分及结肠组织病理评分均显著增加(P<0.01),经过hUC-MSCs移植各项指标均显著降低(P<0.01);免疫组织化学染色显示DSS+Vehicle组较正常对照组小鼠结肠组织COX-2蛋白表达明显增加(移植1周0.387±0.013vs 0.065±0.015,移植2周0.548±0.037vs 0.065±0.015,移植4周0.606±0.034vs0.065±0.015,P<0.01),经过hUC-MSCs移植,结肠组织COX-2蛋白表达较DSS+Vehicle组明显降低(移植2周0.446±0.030vs 0.548±0.037,移植4周0.331±0.026vs 0.606±0.034,P<0.01)。结论 hUC-MSCs移植可减轻慢性结肠炎肠黏膜炎症,其机制可能与抑制结肠组织炎症因子COX-2表达有关。     

卧床便秘患者加强床上锻炼的疗效观察

目的 评价加强床上锻炼对解除卧床患者便秘的效果.方法 136例卧床便秘患者按随机数字表法将其平分为A、B两组,每组再根据性别不同分为2个亚组(A1和A2组,B1和B2组).A1和A2组为对照组.根据医嘱给予药物治疗;B1和B2组为实验组,根据医嘱给予药物治疗,同时辅助床上锻炼.结果 A组有效率为54.4%,B组有效率为86.8%.B组总有效率明显高于A组,两组比较具有统计学意义(P<0.01),A1和A2、B1和B2差异均无统计学意义(P>O.05).结论 对卧床便秘患者进行针对性的床上锻炼,有助于缓解便秘症状.     

先天性巨结肠患儿结肠组织巨噬细胞表型变化及巨噬细胞活化与发病的相关性分析

目的分析先天性巨结肠患儿结肠组织巨噬细胞表型变化及巨噬细胞活化与发病的相关性。方法采用回顾性研究,收集三二〇一医院和汉中市人民医院2013年3月至2019年3月收治的83例先天性巨结肠患儿的临床资料,根据是否伴有巨结肠相关性小肠结肠炎(HAEC),分为A组(无HAEC) 51例和B组(伴有HAEC) 32例。取两组患儿近、远段结肠标本,行苏木素-伊红染色,观察患儿结肠组织病理学改变情况;采用诱导型一氧化氮合酶(i NOS)与CD68免疫荧光双染法判断患儿M1型巨噬细胞活化情况,并通过精氨酸酶1(Arg-1)与CD68免疫荧光双染法判断患儿M2型巨噬细胞活化情况;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组患儿近、远段结肠标本中i NOS和Arg-1 mRNA的相对表达量。结果经免疫荧光双染法检测发现,两组患儿结肠远段i NOS/CD68阳性细胞的百分比显著低于结肠近段(P <0. 01);与A组结肠近、远段比较,B组结肠近、远段i NOS/CD68阳性细胞的百分比均显著升高(P <0. 01)。两组结肠远段Arg-1/CD68阳性细胞的百分比均显著高于结肠近段(P <0. 01);B组结肠近、远段Arg-1/CD68阳性细胞的百分比均显著低于A组(P <0. 01)。经实时荧光定量聚合酶链反应检测结果发现,B组结肠近段i NOS mRNA的相对表达量较结肠远段、A组结肠近段均显著上调(P <0. 01);两组结肠远段Arg-1 mRNA的相对表达量较结肠近段均显著上调(P <0. 01)。结论 HAEC的发病与巨噬细胞向M1型转化可能存在密切关系。     

囊性纤维化跨膜转运调节体对高果糖高盐诱导的小鼠高血压的影响

目的探讨囊性纤维化跨膜转运调节体(CFTR)敲除对高果糖高盐诱导的小鼠高血压的影响。方法培育C57B/L(8～12周龄,25～30 g)背景的CFTR+/+(WT)和CFTR-/-(KO)小鼠。高果糖(65%)联合中等高盐(2%)诱导原发性饮食性高血压模型。实验分组(n=20):(1)WT对照组,给予正常食物和饮水8周;(2)WT实验组,给予65%高果糖食物和2%盐水8周;(3)KO对照组,给予正常食物和饮水8周;(4)KO实验组,给予65%高果糖食物和2%盐水8周。采用先进的遥测血压技术精确监测血压。观察高果糖联合中等高盐诱导前后的血压变化;比较4组小鼠24 h动态血压变化值;比较4组小鼠24 h动态血压变异率。结果高果糖和高盐饮食明显增加了WT小鼠24 h动态收缩压(SBP)和24 h动态舒张压(DBP)水平,饮食干预前后血压水平比较差异具有统计学意义(111. 4±2. 2 vs. 123. 5±2. 6mm Hg,85. 4±3. 7 vs. 94. 6±3. 2 mm Hg,P 0. 05)。高果糖联合中等高盐明显诱导WT小鼠血压升高,CFTR敲除明显延缓了高果糖高盐诱导的高血压的发生、发展。饮食干预8周后,KO实验组与WT实验组相比,24 h动态SBP变化值和24 h动态DBP变化值两组间比较差异具有统计学意义(3. 6±1. 5 vs. 11. 8±1. 6 mm Hg,3. 3±2. 3 vs. 8. 9±1. 4 mm Hg,P 0. 05)。饮食干预8周后,WT小鼠的24 h动态SBP变异率和24 h动态DBP变异率均明显升高(13. 2±0. 8 vs 17. 8±2. 6,11. 7±0. 5 vs. 14. 8±1. 7,P 0. 05),KO小鼠的24 h动态SBP变异率和24 h动态DBP变异率无明显变化(16. 0±2. 1 vs. 18. 3±3. 2%,15. 6±2. 1 vs. 16. 7±1. 4%,P 0. 05)。结论 CFTR参与调控高果糖高盐诱导的高血压的发生、发展。     

DNA甲基转移酶3(DNMT 3)在乳腺癌患者中的表达及意义

目的检测DNA甲基转移酶3(DNA methyltransferase 3,DNMT 3)基因在乳腺癌患者外周血中的表达,并分析其临床意义。方法采用实时定量PCR(RT-PCR)检测60例乳腺癌患者(实验组)及50例体检健康女性(对照组)外周血中DNMT 3A、DNMT 3B、DNMT 3L基因的表达,Western blot检测两组间DNMT 3A、DNMT 3B、DNMT 3L蛋白表达,并分析它们与各临床特征之间的关系。结果实验组DNMT 3A表达(16.592±2.350)较对照组(4.868±3.014)显著升高,差异有统计学意义(t=4.499,P0.01);实验组DNMT 3B表达(10.926±3.353)较对照组(3.350±2.2367)显著升高,差异有统计学意义(t=13.642,P0.01);实验组DNMT 3L表达(8.318±5.707)较对照组(7.373±5.680)比较无统计学差异(t=0.866,P=0.388);在不同临床参数的比较中,仅DNMT 3A的表达在组织学类型上有统计学差异(G1Vs G2,P=0.017;G2Vs G3,P=0.018);实验组DNMT 3A和DNMT 3B蛋白表达较对照组显著增加,而DNMT 3L蛋白表达在两组间无差异。结论 DNMT 3A和DNMT 3B在乳腺癌患者外周血中高表达,而DNMT 3L与乳腺癌患者外周血中表达不显著。     

功能性结肠运输时间延长与便秘的相关性

目的：通过回顾性比较分析，探讨结肠运输试验检查在便秘病因学诊断所起的作用。方法：收集3年中根据Agachan计分确定为便秘并至少做过一次结肠运输实验的病人87例，分为：A组，全结肠运输时间正常组；B组，全结肠运输时间延长组。比较分析各组乙直肠运输占全结肠运输的比（简称乙全比）值过小的情况。结果：A组32例，占总例数的36．8％；B组55例，占63．2％。A组乙全比过小者的有10例，占31．3％；B组9例，占16．4％。经χ^2检验，A、B两组之间的差异显著（P＜0．01）。结论：结肠运输蝗测定对于便秘病因的确定有重大帮助，其中乙直肠运输功能的测定至关重要。     

快速康复外科理念在内镜辅助腹腔镜结肠手术护理中的应用

目的 探讨快速康复外科理念在内镜辅助腹腔镜结肠手术护理中的应用价值. 方法 60例内镜辅助腹腔镜结肠手术随机分为实验组和对照组,每组30例. 实验组采用快速康复外科理念护理方案并加强围术期营养护理,对照组采用传统护理方案. 观察两组术后肛门首次排气时间、术后住院时间和并发症发生率,问卷调查两组患者对护理满意度情况. 结果 实验组术后肛门首次排气时间[(28. 5±12. 5) vs(36. 5 ± 14. 6)h, P<0. 05)]和术后住院时间[(3. 5±1. 5)vs(5. 0±1. 8)d,P<0. 05]显著低于对照组,术后并发症发生率显著低于对照组(0 vs 13. 3%,P<0. 05),患者对护理满意度显著高于对照组(96. 7% vs 80. 0%,P<0. 05),患者对护理评分显著高于对照组[(92. 8±15. 2)vs(82. 5±20. 3),P<0. 05)]. 结论 快速康复外科理念指导下的护理方案有助于提高内镜辅助腹腔镜结肠手术的安全性并促进患者快速康复.     

B16F10黑素瘤细胞培养上清液对脂多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和一氧化氮的影响

目的 探讨B16F10黑素瘤细胞培养上清液对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子-α (TNF-α)和一氧化氮(NO)的影响.方法 体外培养同基因小鼠腹腔巨噬细胞,分为实验组和空白对照组.实验组加入B16F10黑素瘤细胞培养上清液,空白对照组加入RPMI 1640完全培养基,分别用LPS刺激后继续培养24 h,采用免疫细胞化学染色法及L929细胞抑制实验[四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法]检测巨噬细胞TNF-α的表达及活性,Griess法检测NO的含量.结果 实验组TNF-α阳性表达较空白对照组明显减少,TNF-α活性较空白对照组明显降低[吸光度(A值):0.746±0.049比0.387±0.030,P＜0.01];巨噬细胞释放NO的水平明显低于空白对照组(μmol/L:4.830± 1.384比11.455±0.175,P＜0.01).结论 B16F10黑素瘤细胞培养上清液对LPS诱导的同基因小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、NO具有抑制作用.     

生物反馈对功能性便秘患者心理状态和生活质量的影响

目的探讨生物反馈对功能性便秘患者（FC）心理状态和生活质量的影响。方法对39例符合FC罗马Ⅲ标准的患者行生物反馈训练,应用Zung焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）、便秘患者生活质量特异量表（PACQOL）等评定患者治疗前后心理状态和生活质量的综合改善情况。结果生物反馈治疗前后患者焦虑（39±8对33±7）和抑郁（52±9对45．8±8．2）显著改善（P〈0．01）;生活质量显著提高,生理功能紊乱（1．94±1．13对1．03±1．04）、心理障碍（1．02±0．84对0．76±0．76）、对便秘的焦虑与关注（1．99±1．16对1．01±0．72）、满意度（2．82±1．10对1．81±0．97）四个亚项和总体评价（1．94±0．81对1．16±0．68）积分值较干预前明显降低（P〈0．01）。结论生物反馈可提高患者的生活质量,对患者的焦虑、抑郁情绪有明显的缓解作用。     

功能性便秘患儿胃肠传输时间的测定

背景:功能性便秘对小儿的身心健康、社会心理发育和远期生活质量均有很大影响.目前国内尚无儿童功能性便秘的确切定义,无明确分型,亦无统一诊断标准和系统的治疗方案.而胃肠传输时间测定是客观了解胃肠转运功能的动力学检查方法之一,对胃肠道动力异常的诊断、病因研究和疗效评价具有重要意义,是目前诊断慢传输型便秘的惟一无创手段.目的:分析功能性便秘患儿和正常儿童胃肠传输时间区别,了解胃肠传输时间测定在评估全胃肠及各段动力的意义.设计:以患儿、正常儿童为研究对象,病例-对照,观察对比研究.单位:武警部队广东总队医院儿科.对象:研究对象为2002-08广州市某幼儿园和某小学健康儿童共68例及2002-03/2003-01在武警部队广东总队医院儿科门诊确诊或住院的功能性便秘患儿28例. 方法:通过口服不透X线标志物,用X线拍片法分别于12,24和48 h摄腹部平片,测定28例功能性便秘患儿和68例正常儿童全胃肠传输时间、口-盲时间和结肠传输时间.主要观察指标:功能性便秘患儿与正常儿童全胃肠传输时间、口-盲时间、结肠传输时间以及右半结肠传输时间、左半结肠传输时间、直肠乙状结肠传输时间比较.结果:正常儿童及功能性便秘患儿的50%全胃肠传输时间[(23.6±1.6),(80.4±2.1)h],口-盲时间[(9.9±1.4),(20.7±0.6)h]和结肠传输时间[(14.8±0.8),(59.9±2.3)h]比较,差异有显著性意义(P<0.01).两组儿童右半结肠传输时间、左半结肠传输时间和直肠乙状结肠传输时间比较,差异也有显著性意义(P<0.01).结论:正常儿童胃肠传输时间明显不同于功能性便秘患儿;胃肠传输时间测定可了解全胃肠及各段的动力情况,对功能性便秘的诊断及评估治疗效果有实用意义.