应用协同凝集反应快速诊断流行性脑脊髓膜炎的研究

<正> 金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)具有与许多哺乳动物IgG分子的Fc段结合的特性,结合后Fab段暴露于外并保持其抗体活性,当与特异性抗原相遇时,使已标记抗体的SPA菌相互连结引起协同凝集反应(简称COAG)。国内外已应用COAG进行脑膜炎球菌的鉴定和分群,检测脑脊液中的可溶性抗原,并利用此法与细菌培养法、对流免疫电泳法做     

酶标记SPA在DASS法检测腺病毒抗体中的应用

<正> 金黄色葡萄球菌 A 蛋白(SPA)能和人及某些哺乳动物的 lgG 的 Fe 段发生非特异性的结合。据此理论,国内外学者开始应用 A 蛋白作为硷测特异性 lgG 的手段。我们曾报道应用 DASS 法检测宄腺病毒的 lgG 抗体。最近试用酶标记 SPA 代替酶标记抗 lgG 用 DASS法检测腺病毒抗体,结果比较满意。     

HRP-SPA免疫组织细胞化学法检测抗核抗体

用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记葡萄球菌A蛋白(SPA),在酶标记免疫组织细胞化学法中,代替酶标记第二抗体(马抗人IgG)。以鼠肝印片作为抗原基质,检测32例病人血清中的抗核抗体,并与免疫荧光间接法、酶标记抗体(HRP—IgG)免疫组织细胞化学法,检测抗核抗体比较,三者在敏感性和特异性方面基本相符。HRP—SPA免疫组织细胞化学法,HRP—IgG免疫组织细胞化学法,都可在光学显微镜下观察,标本可长期保存。但是HRP—SPA试剂较HRP—lgG试剂稳定,为检测抗核抗体提供了更便于推广的一种新方法。     

荧光标记A蛋白检测IgG抗体的研究

葡萄球菌A蛋白(SPA)对多种哺乳动物免疫球蛋白G(IgG)有很强的亲和性。SPA可同荧光色素、放射性同位素或酶等结合成各种IgG试剂。在检出IgG抗体中使用标记SPA和标记抗IgG(抗体)这两类IgG指示性试剂,各有优点和缺点。一般认为前者敏感性略差,但是,非特异性反应较轻。     

SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

介绍一种更为敏感的免疫金银染色方法

免疫金银染色(Immunogold—silver staining,IGSS)法敏感、简便、省时、安全可靠,葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性,且它们之间的连接不干扰抗原抗体的结合。简单的SPA金标两步后,第三步     

葡萄球菌蛋白A在病毒学诊断中的应用

<正> 葡萄球菌蛋白A(SPA)是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白成份,具有与人及多种哺乳动物血清中IgG类抗体Fc段结合的特性。国外自七十年代起对SPA广泛开展了研究;国内自1979年由张颖悟引进标准株以来也进行了大量研究。近年国内外学者应用SPA作为一种新的免疫学试剂,建立了许多敏感、特异、快速而简便的检测方法,本文仅就SPA在病毒学诊断中的应用综述如下。一、SPA主要性质 SPA分子是高度稳定的单一多肽链,分子量为42000。从N端开始有4个高度同源性片段,每个片段都具有与IgG Fc段结合的特性。SPA具有多结合片段的特性使SPA碘化     

用特异性抗体标记含A蛋白金葡菌(简称SPA菌)所作的钩体玻片凝集试验

本试验的原理是基于金黄色葡萄球菌表面的A蛋白(简称SPA)能非特异地结合IgG的Fc段,能与特异性抗原相结合的Fab段仍然具有抗体活性。以SPA菌作为载体,使特异性免疫血清结合于金葡菌上,然后再与相应的抗原(如钩体)在玻片上作用,从而出现肉眼可见的协同凝集反应(Co—agglutination)。在教学和科研工作中,对于钩端螺旋体的定型,迄今所用的可靠方法仍为显微镜凝溶试验,该试验敏感性和特异性虽高,但需用暗视野显微镜,所用抗原应为活的钩体,操作麻烦,     

抗体与人体健康关系

抗体是机体受到抗原刺激而产生的特异性免疫球蛋白,它能与相应抗原结合。其最显著的特点是特异性和多样性,抗体的产生主要有天然和人工两种方式;而人工产生的抗体又可因所用方法的不同而获得多克隆抗体和单克隆抗体(McAb),后者均一的高特异性使其有广泛的应用。抗体具有结合特异性抗原、激活补体、结合细胞、通过胎盘和粘膜、结合葡萄球菌A蛋白(SPA)以及本身具有抗原性等生物活性,在效应上既可对人体有利,也可对人体有害。     

HRP-SPA用于丙型肝炎检测

葡萄球菌A蛋白(SPA),能与人和多种哺乳动物的IgG FC段呈非特异性结合,标记上酶等结合物,可作为广谱的第二抗体,而广泛地应用于各种疾病的IgG型抗体的检测。利用SPA以上特征,我们以南京铁道医学院自制的HRP-SPA试用于丙型肝炎的检测,取得了满意的效果。1 材料和方法     

间接过氧化物酶法检测流行性出血热特异性IgG抗体试验

<正> 流行性出血热(简称EHF)特异性抗体检测近年来采用方法较多,但都未解决一个根本问题即面向基层、便于推广、简便敏感特异的方法,因此使EHF的实验室诊断仍未能很好开展。流行病学调查的研究很多地区和单位也未能进行。本研究采用酶标记SPA(葡萄球菌A蛋白)作为第二抗体进行间接酶标记染色,测得结果敏感性与特异性可与免疫荧光法相媲美,阴性对照明确、重复性好,因而可以代替需要昂贵设备的荧光法,给EHF诊断与研究等提供优越的检测手段。材料与方法一、抗原片制备 EHFV接种于传代人淋巴细胞LY-A6,5～7日观察到CPE后,用0.02％EDTA(乙二胺四乙酸二钠)消化,加含10％小牛血清的     

协同凝集试验的应用进展

协同凝集试验是目前用于快速诊断,微生物定群或分型的一种新近发展起来的敏感而简便的方法。此种试验是根据金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)表面的A蛋白成分,能结合IgG的Fc段,但不影响IgG的Fab段与相应抗原反应的特性而建立的一种凝集试验。方法是将特异性抗体致敏含A蛋白的金葡菌(SPA),再与相应微生物或抗原接触,相应微生物则与菌体表面吸附的抗体Fab段相结合,从而使含A蛋白金葡菌通过抗体与特异性抗原结合而互相联结,起到扩大的作用,呈现出肉眼可见的凝集颗粒。这一试验的特点是不论是颗粒抗原,还     

用SPA协同凝集快速诊断志贺氏菌属的实验研究

金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一个主要成份,能与人和某些哺乳动物血清IgG的Fe段发生非特异性结合。利用这一特点,我们将含有SPA的葡萄球菌制成稳定液,然后将志贺氏菌属抗血清中经DEAE离子交换纯化的IgG,标记在SPA稳定液上,制成SPA痢疾分型试剂用于快速诊断志贺氏菌属。此法简便,节省人力、物力和时间,且具有良好的敏感性和特异性。     

酶标葡萄球菌A蛋白组化法在流行性出血热诊断上的应用

使用辣根过氧化酶标记葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)间接免疫酶组化法检测100例流行性出血热病人、54例非出血热病人及31名正常人血清中出血热异特性抗体。结果表明(HRP—SPA)在灵敏度和特异度上与间接免疫荧光法IFA基本相同,由于HRP—SPA简便易行,可作为EHF诊断的一种新方法。     

用协同凝集试验筛检实验动物沙门氏菌感染的探讨

实验动物常易感染沙门氏菌,常规细菌学检测不仅需用大量培养基,而且费时费力。为及时及早检测感染的病原菌,必须建立简易快速筛检法。近年发展了细菌的协同凝集试验,用于沙门氏菌属的鉴定和诊断。该试验是利用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与特异性抗体IgG分子的可结晶分段(Fc)结合,成为吸附特异性抗体的载体;作为指示系统的葡萄球菌,通过标记在表面的特异性抗体的抗原结合分段(F(ab’)_2,与受检细菌互相连结,而显现凝集反应。本法具有较高的敏感性,已用于某些肠道菌的鉴定和分型,特别是标本经增菌培养后效果更好。本文报道用协同凝集试验快速筛检实验动物粪便中沙门氏菌的应用结果。材料和方法     

SPA协同凝集反应快速检定痢疾杆菌的实验研究

1940年Verwey首先发现葡萄球菌A蛋白(Staphlococcal Protein A、简称SPA),以后经许多学者相继研究,证明它能与免疫球蛋白Ig~G FC段结合,结合后的IgG的Fab段仍能与特异性抗原结合,形成凝集,即协同凝集反应(Coaggulutination reaction,简称COA)目前已广泛用于很多微生物的鉴定和诊断。但作为快速     

免疫传感器载体上SPA法固定抗体的条件探讨

目的 以乙肝病毒表面抗体为研究对象,摸索在免疫传感器载体上用葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein, SPA)固定抗体的最佳条件.方法 用SPA法在载体上固定系列浓度酶标记抗体,绘制抗体浓度-吸光度曲线,寻找SPA与抗体的最佳结合条件.结果 实验表明5 μl浓度为1 mg/ml的SPA与10 μl浓度为300 mIU/ml的抗体固定效果最佳.结论 用SPA法在免疫传感器载体上固定乙肝病毒表面抗体,能使检测达到较好的重现性、稳定性、线性和较宽的检测范围,为生物传感器用于临床免疫检测打下基础,具有实际的应用价值.     

免疫组织化学方法在眼眶肿瘤病理诊断中的应用及其前景

免疫组织化学方法是将一些可视性物质 ,如荧光素染料、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等与组织和细胞中的特异性抗原相结合 ,利用抗原与抗体的特异性反应来检测组织中的未知抗原或者抗体 ,借以判断检测组织的来源和分化程度 ,协助病理诊断和鉴别诊断[1-4 ] 。免疫组织化学技术一般分为两大类 :一为直接免疫组织化学方法 ,即用标记有可视性物质的特异性抗体证实抗原的存在。二为间接免疫组织化学方法 ,即用标记可视性物质的第二抗体来检测初级抗体 -抗原反应复合物的存在[2 ] 。传统使用的荧光素染料标记特异性抗体的方法 ,称为免疫荧光技术。此…     

热吸水链霉菌代谢产物诱导鼠实验性农民肺的研究

本实验试用热吸水链霉菌代谢产物诱导小鼠实验性农民肺。经呼吸道反复吸入代谢产物的小鼠血清中产生了相应抗体,并有抗原存在,肺组织类似农民肺患者的肺部病理变化,肺内有免疫复合物沉积。说明此菌代谢产物亦可引起农民肺。同时为Ⅲ型和Ⅳ型变态反应共同参与此病的发生提供了证据。本文还报道了以富含SPA的葡萄球菌标记抗体,用于组织中免疫复合物的定位研究。     

冻干葡萄球菌A蛋白菌体试剂和纯品的制备和应用

葡萄球菌A蛋白(SPA)是一种在微生物学、免疫学和细胞学等领域中具有多种用途的试剂。冻干SPA菌体试剂是以自身菌体为载体的固相免疫试剂。在协同凝集试验中,此试剂可用于细菌、病毒等微生物的定群和分型,抗原或抗体测定,T、B淋