缺血后处理减轻兔缺血再灌注心肌细胞损伤

目的探讨缺血后处理对在体兔心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和线粒体结构与功能的影响以及可能机制。方法80只兔随机分为假手术组(sham组)、心肌缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组)、缺血后处理组(PC组)以及缺血后处理加5-羟葵酸(5-HD)干预组(PC+5-HD组)。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用透射电镜观察心肌细胞的超微结构,用荧光法检测线粒体膜电位,比色法测线粒体Ca2+浓度、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物岐化酶(SOD)活性。结果与IR组比较,PC组和IP组兔心肌细胞凋亡减少,心肌及线粒体形态结构改变明显减轻,线粒体跨膜电位、SOD活性明显升高、线粒体Ca2+浓度、MDA浓度均下降(P<0.05),5-HD部分降低上述作用。结论PC可能通过提高线粒体跨膜电位、降低线粒体氧自由基水平、减轻线粒体钙超载而减轻心肌细胞损伤,其机制可能与线粒体功能损伤有关。     

亚低温对大鼠视网膜缺血再灌注自由基损伤的保护

目的 :探讨亚低温是否对大鼠视网膜缺血再灌注自由基损伤具有保护作用。方法 :采用提高眼压法造成视网膜缺血后 ,恢复眼压形成血流再灌注。应用透射电镜观察正常对照组、缺血再灌注组和亚低温缺血再灌注组三组大鼠视网膜的超微结构 ;同时测定三组大鼠视网膜组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)的含量。结果 :缺血再灌注组大鼠视网膜视细胞外节膜盘肿胀 ,排列紊乱 ;节细胞水肿明显 ,多数线粒体肿胀 ;滑面内质网扩张 ,部分粗面内质网扩张、脱粒。亚低温缺血再灌注组视网膜的视细胞外节膜盘略见疏松 ;节细胞胞浆内可见肿胀线粒体 ,但肿胀较轻。缺血再灌注组和亚低温缺血再灌注组大鼠视网膜的SOD含量分别是 5 6 2± 1 .8nu/ml和72 .3± 2 .3nu/ml;MDA含量分别是 8.0 5 4+0 .893nmol/ml和 6.0 2 3 +0 .3 98nmol/ml。结论 :亚低温可通过抑制脂质过氧化反应和自由基的过多生成 ,对视网膜缺血再灌注损伤起保护作用。     

天保宁对阿霉素所致大鼠心肌线粒体毒性的保护作用

应用电镜细胞化学方法，从心肌细胞超微结构和细胞素Ｃ氧化酶的改变方面，观察了天保宁对阿霉素所致心肌细胞线粒体损伤的保护作，霉素造成的大鼠心肌细胞肌原纤维排列紊乱，线粒体肿胀，嵴断裂及细胞色素Ｃ氧化酶活性降低，可明显地被抗氧天保宁所防止，说明天保宁能够清除阿霉素所产生的有害自由基，对心肌细胞起保护作用。     

不同浓度1,6-二磷酸果糖对IL-1β损伤的乳鼠胰岛细胞功能的影响

1,6-二磷酸果糖(Fructose-1,6-Disphosphate,FDP)能在分子水平上调节细胞代谢中若干酶活性,恢复和改善细胞代谢,对多种组织细胞有明显的保护功能。本实验室已报道5～10mmol／LFDP对白介素-1β(IL-1β)损伤的胰岛有保护作用,但是笔者也发现低浓度和高浓度的FDP不具相同作用。提示应用FDP需注意剂量对其效应的影响。     

微波辐射对大鼠能量代谢及心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨不同强度微波辐射对大鼠心脏的损伤作用,并初步探讨其作用机制。方法:分别以强度为500、1 000、1 500和2 000 W/m2,频率为2 450 MHz微波照射大鼠6 min,照射后6 h取大鼠心脏,检测心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,透射电镜观察心脏组织超微结构的改变,Muse细胞分析仪检测心肌细胞凋亡,Western blotting检测心肌细胞内cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:随着微波辐射强度的增加,大鼠心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性呈现降低趋势,与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。透射电镜结果显示,微波辐射致细胞线粒体数量减少且形态异常,大部分线粒体溶解空化,基质明显肿胀。心肌细胞凋亡检测结果显示,微波辐射能够诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,且随着微波辐射强度的增加,细胞凋亡率呈上升趋势(P0.05)。Western blotting结果显示,微波辐射后心肌细胞内cleaved caspase-3蛋白表达水平随着辐射强度的增加呈上升趋势(P0.05)。结论:微波辐射对大鼠心脏具有明显的损伤作用,能够引起心脏能量代谢出现异常,诱发心肌细胞发生凋亡。     

升主动脉缩窄心衰游离心肌细胞骨架三椎构筑特点

目的 研究心衰时心肌细胞及亚细胞结构的形态学改变,材料和方法,制作鼠升主动脉缩窄模型,制备鼠心衰时的游离心肌细胞,用细胞骨架抽提法制备细胞骨架扫描电镜标本,结果：升主动脉缩窄心衰鼠心肌细胞骨架中微管增加,肌原纤维减少,线粒体固定装置破坏,线粒体发生移位,空泡样改变,Ｔ管开口明显增大,结论：慢性心衰时心肌细胞形态及亚细胞结核均已发生明显的形态学改变。     

硫化氢通过调控瘦素保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤

目的探讨瘦素(leptin)在高糖损伤心肌细胞中的作用及硫化氢(H2S)是否通过调控瘦素保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤。方法应用细胞计数盒(CCK-8)检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色检测凋亡细胞形态及数量的改变,双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相测定胞内活性氧(ROS)水平;罗丹明123(Rh123)染色及荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP);Western blot法检测瘦素蛋白的表达。结果 35 mmol/L葡萄糖(高糖)作用H9c2心肌细胞9h可明显地促进瘦素表达,并引起心肌细胞损伤,表现为细胞存活率降低、凋亡细胞数量和ROS生成增多及线粒体膜电位(MMP)丢失。硫化氢钠(NaHS,为H2S的供体)预处理能抑制高糖对心肌细胞瘦素表达的上调作用。NaHS预处理或瘦素拮抗剂均能保护H9c2心肌细胞对抗高糖引起的上述损伤。结论瘦素参与高糖引起的心肌细胞损伤。外源性H2S可通过抑制瘦素表达保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤。     

富马酸氯马斯汀对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究富马酸氯马斯汀(CLE)对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将培养的H9C2细胞通过缺氧4 h,复氧4 h,建立缺血再灌注损伤模型,实验随机分为3组:正常组、缺血再灌注组(MIRI组)、缺血再灌注加CLE后处理组(MIRI+CLE组)。采用CCK-8法检测不同浓度CLE对缺血再灌注损伤心肌细胞活性的影响;比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量;透射电镜观察心肌细胞的超微结构;激光扫描共聚焦显微镜观察钙离子再分布状态。结果:CCK-8结果显示,培养基中CLE浓度为1.25×10~(-3)μg/μl时,H9C2细胞活力最强;比色法结果显示,MIRI组中LDH、MDA含量较正常组增高,MIRI+CLE组较MIRI组含量降低;透射电镜结果显示,与正常组相比,MIRI组细胞出现核膜模糊、线粒体空泡样变、髓样变,与MIRI组比较,MIRI+CLE组细胞的线粒体改变减轻;激光扫描共聚焦显微镜观察到,MIRI组细胞内钙离子荧光强度较MIRI+CLE组明显增强。结论:CLE减轻了缺血再灌注引起的H9C2心肌细胞损伤。     

缺血预处理对心瓣膜置换术中心肌细胞Bcl-2及线粒体的影响

目的:研究体外循环下(CPB)心瓣膜置换术中缺血预处理(IP)对心肌细胞Bcl-2及线粒体的影响。方法:取2004年4月-2004年12月我院接受心脏瓣膜置换手术治疗的患者54例,随机分成2组,IP组(n=22):主动脉阻断前实行单次缺血2min和开放3min的IP方案,阻断主动脉后采用冷晶体心脏停搏液心肌保护进行手术;对照组(n=32):未进行IP方案,余步骤同IP组。比较2组术前和术后射血分数(EF)、短轴缩短百分率(FS)及每搏心输出量(SV)变化,观察肌钙蛋白T(c-TnT)、Bcl-2蛋白表达以及电镜下心肌细胞线粒体的改变。结果:对照组术后EF、FS及SV均较术前降低,P0.05;IP组术前后EF、FS及SV变化不明显,IP组术后6h、24h、48h、72h及第5dc-TnT水平均低于对照组,且随时间呈下降趋势;2组术前Bcl-2表达无显著差异(P0.05),术后IP组为19.85±5.88,较术前显著上升(P0.05);对照组为14.17±3.39,与术前无明显差别(P0.05)。术后2组Bcl-2表达具有显著差异(P0.05)。电镜观察:对照组心肌细胞线粒体肿胀,线粒体膜模糊不清,部分线粒体膜破裂;线粒体嵴明显疏松溶解,大量空泡形成;IP组心肌细胞线粒体膜基本完整,线粒体嵴密集,电子密度增高,无空泡形成。结论:IP可能上调心肌抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,对心肌细胞线粒体起保护作用,减轻缺血再灌注对心肌细胞的损伤作用,一定程度上维护心脏功能。     

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶对培养心肌细胞的损伤及硒的保护作用

向培养心肌细胞中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)后,动作电位的APA、OS、V_(max)及APD减少,MDP、TP水平上移;细胞在MEM中搏动率降低,加钡后细胞收缩频率迅速增加,且X-XOD作用时间越长,上述改变越显著。X-Mo的作用与此类似,但较轻。加硒则能逆转上述的细胞损伤性变化。这表明X-XOD和X-Mo均能造成心肌细胞损伤,硒对心肌细胞有保护作用。     

前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护性作用

目的本实验采用酶组织化学法观察前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤是否有保护性,并探讨其可能机理。方法选用275±25g的SD雄性大白鼠,随机分为6组,每组8只。假手术对照组(A),心肌缺血再灌注模型组(B),经典缺血预处理组(C),前列地尔脂肪乳剂早期保护组(D),前列地尔脂肪乳剂延迟保护组(E),前列地尔脂肪乳剂在缺血前72h应用组(F)。采用酶组织化学方法观察心肌过氧化氢酶及琥珀酸脱氢酶表达。结果与模型组相比,经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组心肌过氧化氢酶及琥珀酸脱氢酶明显升高(p<0.05),且早期保护作用强于延迟作用。结论前列地尔预处理对大鼠心肌损伤具有早期和延迟保护作用。     

An ischemia detection method based on artificial neural networks

An automated technique was developed for the detection of ischemic episodes in long duration electrocardiographic (ECG) recordings that employs an artificial neural network. In order to train the network for beat classification, a cardiac beat dataset was constructed based on recordings from the European Society of Cardiology (ESC) ST-T database. The network was trained using a Bayesian regularisation method. The raw ECG signal containing the ST segment and the T wave of each beat were the inputs to the beat classification system and the output was the classification of the beat. The input to the network was produced through a principal component analysis (PCA) to achieve dimensionality reduction. The network performance in beat classification was tested on the cardiac beat database providing 90% sensitivity (Se) and 90% specificity (Sp). The neural beat classifier is integrated in a four-stage procedure for ischemic episode detection. The whole system was evaluated on the ESC ST-T database. When aggregate gross statistics was used the Se was 90% and the positive predictive accuracy (PPA) 89%. When aggregate average statistics was used the Se became 86% and the PPA 87%. These results are better than other reported.     

Ultrasound-mediated microbubble destruction enhances the therapeutic effect of intracoronary transplantation of bone marrow stem cells on myocardial infarction

Objective: The combination of intracoronary transplantation and ultrasound-mediated microbubble destruction may promote effective and accurate delivery of bone marrow stem cells (BMSCs) into the infarct zone. To test this hypothesis in this study we examined the effectiveness of ultrasound-mediated microbubble destruction in combination with intracoronary transplantation of BMSCs for the treatment of myocardial infarction in canine model of acute myocardial infarction. Method: The dogs were randomly assigned to four groups: PBS, ultrasound-mediated microbubble destruction, BMSCs, BMSCs together with ultrasound-mediated microbubble destruction. At 28 days post-surgery, cardiac function and the percentage of perfusion defect area to total left ventricular perfusion area (DA%) were determined by myocardial contrast echocardiography. Nitro blue tetrazolium staining was performed to determine myocardial infarct size, hematoxylin and eosin staining for assessing microvascular injury, Masson’s staining for analyzing myocardial tissue collagen, immunohistochemical analysis of α-actin to measure cardiac contractile function and of BrdU-labeled myocardial cells to measure the number of the BMSCs homing to the infarcted region. Results: The transplantation of BMSCs significantly improved heart function and DA% (P < 0.05). The group that received ultrasound-mediated microbubble destruction with BMSCs transplantation showed the most improvement in heart function and DA% (P < 0.05). This group also showed a denser deposition of BMSCs in the coronary artery and more BrdU positive cells in the infarcted region, had the maximum number of α-actin positive cells, showed the smallest myocardial infarct area compared to other groups (P< 0.05). Conclusion: Ultrasound-mediated microbubble destruction increases the homing of BMSCs in the target area following intracoronary transplantation, which allows more BMSCs to differentiate into functional cardiomyocytes, thereby reducing myocardial infarct size and improving cardiac function.     

卡托普利对培养窦房结细胞功能缺血损伤的保护作用

目的：研究不同缺血时间对培养窦房结细胞Ｇｌｖｃｏｇｅｎ,ＳＤＨ,ＬＤＨ和ＡＮＦ的损伤及卡托普利对这种损伤的保护作用。材料和方法：取２００只新生４天ＳＤ乳鼠的心窦房结组织用于细胞培养,再制作拟缺血模型,然后采用下列方法进行实验：ＰＡＳ反应示精原颗粒,Ｐｅａｒｓｏｎ法示琥珀酸脱氢酶（Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　 ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＳＤＨ）,Ｐｒｅｓｔｏｎ法示乳酸脱氢酶（Ｌａｃｔａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ, ＬＤＨ）,免疫细胞化学方法（ＡＢＣ法）示心钻素（Ａｔｒｉａｌ ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＡＮＦ）,并对实验结果作图像分析。结果：缺血６０’时,培养细胞的ＬＤＨ,ＳＤＨ和ＡＮＦ活性明显受损,糖原颗粒也明显减少;缺血 ９０’时,这种缺血损伤进一步发展,糖原颗粒几乎耗竭;而缺血 ９０’＋Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ处理组的缺血损伤明显减轻（与缺血组相比 Ｐ＜０．０５）。结论;从形态学上观察到,卡托普利对新生 ＳＤ乳鼠窦房结培养细胞的细胞器和膜性结构及细胞功能的缺血损伤有明显保护作用。     

卡托普利预处理对家兔实验性心肌梗塞范围及心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨卡托普利预处理对家兔实验性心肌梗塞范围及心肌细胞凋亡的影响。方法:健康家兔,分为(1)假手术对照组(sham-operated control group),(2)急性心梗组(acuteinfarct group),(3)卡托普利预处理组(captopril group,25mg·kg^-1·d^-1,喂饲1周)。结扎冠状动脉左旋支造成急性心肌梗塞模型。测结扎前、结扎后15、30、60min的心功能。结扎前及结扎后1h的全血粘度与血球压积。结扎后6h取心脏,以缺血区重/左室重比为缺血范围,梗塞区重/缺血区重比为梗塞范围。TUNEL法染色检测细胞凋亡,以心肌凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数。结果:(1)卡托普利预处理组梗塞范围显著小于心梗组(16.60%±0.94%比36.24%±1.94%,P＜0.05),并改变左室功能及血粘度。(2)梗塞周围可见凋亡心肌细胞,卡托普利预处理该区心肌细胞凋亡指数明显小于急性心梗组(26.37%±0.71%比42.44%±2.32%,P＜0.05)。结论:卡托普利预处理可明显减少梗塞范围及心肌细胞凋亡程度,改善心功能。     

冷刺激对实验性心肌缺血家兔血浆内ET和血液流变学的影响

本文测定了冷刺激条件下，正常家兔和心肌缺血家兔内皮素（ＥＴ）和血液流变学各指标，结果发现冷刺激组ＥＴ高于非冷刺激组，心肌缺血组ＥＴ高于非冷刺激组，且心肌缺血二组间差值是非心肌缺血二组间差值的二倍多，说明冷刺激促进正常机体和心肌缺血机体ＥＴ分泌释放，心肌缺血机体对冷刺激反应更为敏感，同时，冷刺激下，正常机体血液流变学异常，心肌缺血家兔也在原异常基础之上呈加重趋势，提示：ＥＴ升高和血液流变异常可以作为     

非创伤性预处理对大鼠缺血心脏的保护效应

目的 :探讨三种非创伤性预处理对大鼠缺血心脏的保护效应。方法 :采用 2 5 0g～ 3 0 0 gSD雄性大鼠 48只 ,分成 6组 ,即假手术组(Ⅰ组 )、缺血 /再灌组 (Ⅱ组 )、经典缺血预处理组 (Ⅲ组 ) ,缺氧预处理组 (Ⅳa组 )、后肢缺血预处理组 (Ⅳb组 )、去甲肾上腺素预处理组 (Ⅳc组 ) ,观察各组左室梗塞范围、心肌琥珀酸脱氢酶 (SDH )、Ca2 + Mg2 + ATPase、细胞色素氧化酶 (CCO)活性的变化。结果 :Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc三组非创伤性预处理均可明显缩小左室梗塞范围、提高心肌SDH、Ca2 + Mg2 + ATPase、CCO酶活性。结论 :三种非创伤性预处理均能使大鼠显示和经典预处理相类似的心脏保护效应。     

大鼠心脏腺苷预处理心肌组化和细胞化学变化

目的：应用图象分析和电镜细胞化学方法,观察大鼠心脏腺苷预处理心肌琥到脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ｃa＾２＋Ｍg＾２＋－ＡＴＰase活性变化。方法：采用ＳＤ雄性大鼠３２只 分４组,即正常对照组（ＮＣ）,缺血/再灌组（Ｉ/Ｒ）,缺血预处理组,腺苷预处理组。用图象分析检测琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶和Ｃa＾２＋Ｍa＾２＋－ＡＴＰase活性。 结果：在缺血预处理组及腺苷预处理组琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、Ｃa＾２＋Ｍa＾２     

川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌重要呼吸酶的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)的影响及可能机制。方法:结扎冠状动脉30 min后再灌20 min,复制缺血再灌注模型。测定心肌线粒体中SDH、CCO、SOD和GSH·PX活力及MDA和细胞色素含量。结果:缺血再灌组(IR)SDH和CCO活力显著低于假手术对照组;缺血再灌加川芎嗪组(IR+L)的SDH和CCO活力显著高于缺血再灌组(P＜0.01),MDA含量明显降低,SOD及GSH·PX活力也明显升高。结论:川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌中SDH和CCO活力降低有显著的拮抗作用,其机理可能是通过提高对氧自由基的清除及抑制脂质过氧化