原发性胆囊癌中PTEN和P53基因表达的研究

背景与目的：研究PTEN和P53基因在原发性胆囊癌（HGC）中的表达，以探讨它们在HGC发生发展中的作用，寻找胆囊癌诊断及预后的指标。方法：应用原位杂交（DNA-RNA）技术与免疫组化SP法分别检测64例HGC中PTEN mRNA、PTEN蛋白和P53蛋白的表达。以22例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎作为对照。结果：①PTEN mRNA和蛋白在HGC组织中的阳性率（56．3％，59．4％）均明显低于胆囊腺瘤组织（81．8％，90．8％）和慢性胆囊炎组织（100％，100％），（P〈0．05）。②P53蛋白在HGC组织中的阳性率（62．2％）均明显高于胆囊腺瘤组织（27．2％）和慢性胆囊炎组织（0．0％），（P〈0．05）。结论：PTEN缺失和P53突变型蛋白共同参与了HGC的发生发展。     

原发性胆囊癌中PTEN表达的临床研究

目的研究抑癌基因-10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)在原发性胆囊癌(HGC)中的表达,以探讨其在HGC发生发展中的作用,寻找胆囊癌诊断及预后的指标。方法应用原位杂交(DNA-RNA)技术与免疫组化S-P法分别检测64例HGC中PTENmRNA、PTEN蛋白的表达。以22例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎作为对照。结果PTENmRNA及蛋白在HGC组织中的阳性表达率(56.3%,59.4%)均明显低于胆囊腺瘤组织(81.8%,90.8%)和慢性胆囊炎组织(100%,100%;P<0.05)。结论PTEN低表达参与了HGC的发生发展,PTEN与HGC分化、转移有关,其蛋白可作为判断HGC预后的指标。     

PDGF-BmRNA在108例胆囊腺癌中的表达及其临床病理意义

[目的1研究胆囊腺癌组织中PDGF-BmRNA的表达及其与临床病理特征的关系。[方法]108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎组织采用原位杂交法检测PDGF-B mRNA。[结果]胆囊腺癌PDGF—B mRNA表达阳性率（60．2％）明显高于癌旁组织（21．7％）、腺瘤性息肉（20．0％）和慢性胆囊炎（11.4％）（P〈0．01）；胆囊中、低分化腺癌、肿块最大径≥2．0cm、有淋巴结转移和有胆囊外器官侵犯病例PDGF-B mRNA表达阳性率明显高于高分化腺癌、肿块最大径〈2．0cm、无淋巴结转移和无胆囊外器官侵犯病例（P〈0．01）。[结论]胆囊腺癌PDGF—B mRNA表达可能是反映胆囊腺癌发生、进展、生物学行为及预后的重要生物学标志物。     

胃癌中CD44v6和PTEN表达及意义

[目的]探讨CD44v6和PTEN蛋白在胃癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测73例胃癌组织和25例正常胃黏膜组织中CD44v6和PTEN蛋白表达,并分析其与临床病理特征间的意义。[结果]73例胃癌组织中CD44v6阳性表达率为71.2%,显著高于正常胃黏膜组织的20.0%（χ2=20.09,P〈0.01）;PTEN蛋白表达阳性率为30.1%,显著低于正常胃黏膜组织的100.0%（χ2=36.42,P〈0.01）;CD44v6高表达和PTEN蛋白低表达与胃癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0.05）,胃癌组织中CD44v6与PTEN蛋白表达呈负相关（χ2=14.06,P〈0.01）。[结论]胃癌组织中CD44v6的高表达与PTEN蛋白的低表达与胃癌的发生、发展、浸润转移密切相关,联合检测CD44v6和PTEN蛋白表达可评估胃癌侵袭转移能力,对胃癌的预后判断具有一定的临床意义。     

胆囊腺癌中KAI 1mRNA、Kiss 1mRNA表达的临床病理意义

目的 研究胆囊腺癌、慢性胆囊炎和胆囊结石组织中KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、15例慢性胆囊炎和20例胆囊结石组织标本常规制作石蜡包埋切片,KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA染色方法为原位杂交染色法。结果 胆囊腺癌组织中KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA阳性表达率明显低于慢性胆囊炎和胆囊结石组织（P＜0.05,P＜0.01）;腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径≤3cm、无淋巴结转移及未侵犯周围组织的病例KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA阳性表达率明显高于低分化腺癌或粘液腺癌、肿块最大径＞3cm、淋巴结转移及侵犯周围组织的病例（P＜0.05,P＜0.01）。结论 KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA表达可能是反映胆囊腺癌发生、进展、转移或侵袭潜力及预后的重要生物学标记物。     

膜联蛋白A1和A2在胆囊良恶性病变组织中的表达水平及其与胆囊腺癌临床病理特征的关系

目的 研究膜联蛋白A1(ANXA1)和膜联蛋白A2(ANXA2)在胆囊腺癌、癌旁组织、胆囊腺瘤性息肉和慢性胆囊炎组织中的表达水平及其与胆囊腺癌临床病理特征之间的关系.方法 选取108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例胆囊腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本,常规制作石蜡包埋切片.采用免疫组织化学EnVsionTM法检测各组织中ANXA1和ANXA2的表达水平.结果 ANXA1和ANXA2在胆囊腺癌组织中的阳性表达率分别为59.3%和56.5%,其评分值分别为3.2±0.9和3.4±0.8;在癌旁组织中的阳性表达率分别为34.8%和30.4%,其评分值分别为1.1±0.8和1.0±0.8;在胆囊腺瘤性息肉组织中的阳性表达率分别为26.7%和26.7%,其评分值分别为0.9±0.7和0.9±0.8;在慢性胆囊炎组织中的阳性表达率分别为17.1%和20.0%,其评分值分别为0.7±0.9和0.8±0.8.胆囊腺癌组织中ANXA1和ANXA2的阳性表达率及其评分均高于癌旁组织、胆囊腺瘤性息肉组织和慢性胆囊炎组织(均P＜0.05).ANXA1和(或)ANXA2阳性表达的癌旁组织、胆囊腺瘤性息肉和慢性胆囊炎上皮均呈轻至重度不典型增生.高分化腺癌、肿瘤最大径＜2 cm、淋巴结未转移及未侵犯周围组织的胆囊腺癌患者ANXA1和ANXA2的阳性表达率,均明显低于中或低分化腺癌、肿瘤最大径≥2 cm、有淋巴结转移及侵犯周围组织者(均P＜0.05).在胆囊腺癌组织中,ANXA1和ANXA2的表达呈高度一致性(x2=67.84,P＜0.01),其评分值之间呈高度密切正相关(r=0.78,P＜0.01).Kaplan-Meier单因素分析及Cox多因素回归分析结果均显示,ANXA1和ANXA2的表达均不是影响胆囊腺癌预后的重要因素.结论 ANXA1和ANXA2的表达水平可能是反映胆囊腺癌发生、发展及生物学行为的重要生物学指标,但并不能预测胆囊腺癌患者的预后.     

胆囊良恶性病变组织中MUC1和MUC5AC 表达及其临床病理意义

 目的 研究胆囊良恶性病变组织中黏液蛋白（MUC1和MUC5AC）表达水平及其临床病理意义。 方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,MUC1和MUC5AC染色方法为Envision免疫组化法。 结果 胆囊腺癌MUC1阳性表达率明显高于癌旁组织（χ^２=16.49,P<0.01）、腺瘤（χ^２=7.40,P<0.01）和慢性胆囊炎（χ^２=28.57,P<0.01）。胆囊腺癌MUC5AC阳性表达率明显低于癌旁组织（χ２=12.83,P<0.01）、腺瘤（χ^２=4.22,P<0.05）和慢性胆囊炎（χ^２=20.25,P<0.01）。MUC1阳性表达和（或）MUC5AC阴性表达的良性病例的胆囊上皮均呈中至重度不典型增生。肿块最大径<2cm、无淋巴结转移、未侵犯周围组织的病例MUC1阳性表达率明显低于肿块最大径≥2cm、淋巴结转移和侵犯周围组织的病例（P<0.05或P<0.01）;高分化腺癌、肿块最大径<2cm病例MUC5AC阳性表达率明显高于低分化腺癌和肿块最大径≥2cm病例（P<0.05或P<0.01）。 结论 MUC1和MUC5AC的表达与胆囊腺癌的发生、临床生物学行为及预后有密切关系。     

B7-H1和PTEN在结肠癌中的表达及其临床意义

目的：研究共刺激分子B7-H1和抑癌基因PTEN在人结肠癌组织中的表达及意义,并探讨B7-H1和PTEN的相互关系。方法：运用免疫组织化学SP法检测46例结肠癌组织、20例腺瘤性息肉组织、28例慢性炎症组织中B7-H1和PTEN的表达情况,并对其表达水平与结肠癌临床病理参数之间的关系进行相关性分析。结果：B7-H1分子在结肠癌组织、腺瘤性息肉及慢性炎症组织中的表达率分别为82.6%（38/46）、20.0%（4/20）、21.4%（6/28）。其阳性表达与患者年龄、性别、癌症分化程度、淋巴结转移及浸润深度未见相关（P〉0.05）。PTEN分子在结肠癌组织中、腺瘤性息肉及慢性炎症组织中的表达率分别为54.3%（25/46）、75.0%（15/20）、78.6%（22/28）,其阳性表达与患者年龄、性别、淋巴结转移及浸润深度无关（P〉0.05）,而与癌症的分化程度相关（P〈0.05）。B7-H1和PTEN在结肠癌组织中的表达未见负相关性,但临床数据提示二者的表达率呈相反趋势。结论：B7-H1高表达、PTEN低表达在结肠癌发生发展中起重要的作用,他们可作为抗肿瘤治疗的有效新靶点。     

表皮肿瘤survivin和PTEN蛋白的表达及其意义

目的观察survivin和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌（BCC）、脂溢性角化病（SK）等表皮肿瘤中的表达情况,探讨其发病机制。方法采用免疫组化和流式细胞术检测survivin和PTEN蛋白在30例SK和15例皮肤BCC皮损中的表达情况,并以20例正常皮肤组织作为对照。结果（1）在30例SK皮损中,19例survivin蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中无1例表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;30例SK皮损中,16例PTEN蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中14例有PTEN表达,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在15例BCC中,13例survivin蛋白阳性表达,高于正常组织（20例中均无survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中19例有survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）;而PTEN蛋白仅在4例BCC中有表达,低于正常组织（20例中有13例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中有17例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）。（3）survivin和PTEN蛋白在SK、BCC中的表达呈显著负相关（r=-0.546,P〈0.05）。结论皮肤SK和BCC的发生、发展可能与survivin基因和PTEN基因的异常表达有关。     

40例胆囊癌中PTEN、COX-2的表达

[目的]探讨PTEN、COX-2在胆囊炎和胆囊癌组织中的表达。[方法]应用免疫组织化学SP法检测10例胆囊炎和40例胆囊癌中PTEN和COX-2蛋白的表达。[结果]胆囊炎组PTEN表达（100％）显著高于胆囊癌组（60％），两组有显著差异（P〈0．01）。在低分化胆囊癌组PTEN表达强度显著低于高分化组（P〈0．05）；胆囊癌伴淋巴结转移组P1EN强度亦显著低于无淋巴结转移组（P〈0．01）；随浸润加深与及临床分期进展，VIEN表达强度也显著降低（P〈0．05）。与胆囊炎组（10％）比较，COX-2在胆囊癌组织中的表达阳性率（73％）显著增高（P〈0．05）。胆囊癌患者COX-2的表达与浸润深度及分化程度亦无统计学相关。在有淋巴结转移的胆囊癌组织中，COX-2表达阳性率显著高于无淋巴结转移组（82．1％vs．41．67％；P〈0．05）；病理分期Ⅲ～Ⅳ期胆囊癌组COX-2阳性率显著高于Ⅰ～Ⅱ期（83．33％ vs．50％，P〈0．05）。[结论]PTEN基因的缺失是胆囊癌发生发展的重要原因，与胆囊癌的病理分级及临床分期和淋巴结转移密切相关。COX-2在胆囊癌组织中的的表达均较胆囊炎显著增高。COX-2主要与淋巴结转移及TNM临床分期有关。PTEN及COX-2在胆囊癌的发生发展中起重要作用。     

原发性胆囊癌中ILK和E-cad的表达及意义

  目的  研究整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在原发性胆囊癌中的表达及相互关系,探讨二者表达与胆囊癌临床生物学行为的关系。  方法  应用免疫组织化学S-P法检测48例胆囊腺癌、25例胆囊腺瘤和25例慢性胆囊炎组织中ILK和E-cad的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨二者间表达的相关性。  结果  胆囊癌组织中ILK阳性表达率为66.7%(32/48)明显高于胆囊腺瘤组36.0%(9/25)和慢性胆囊炎组24.0%(6/25);而E-cad阳性表达率为45.8%(22/48)则明显降低(均P < 0.05);随着胆囊癌的浸润深度增加和淋巴结转移发生,ILK阳性表达显著升高,而E-cad则显著降低(均P < 0.05);胆囊癌组织中ILK与E-cad表达呈负相关(r= -0.411,P < 0.05)。  结论  ILK、E-cad与胆囊癌侵袭、转移等生物学行为密切相关,二者表达呈负相关。联合检测二者有助于判断胆囊癌的发展趋势及评估预后。      

抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌中的表达及临床病理意义

目的:研究抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌组织中的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组化检测PTEN在20例慢性胆囊炎,30例胆囊癌中的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果:PTEN蛋白在20例胆囊炎中全都呈阳性表达,而癌组织中PTEN的表达率为70.0%,癌组织中PTEN蛋白阳性表达与患者性别及年龄无明显相关性,但与组织分化程度明显相关。结论:PTEN蛋白在胆囊癌组织中阳性表达率降低,说明该基因表达下调可能在胆囊癌的发生发展中起重要作用。     

bcl-2与nm-23在胆囊癌发生及发展中的作用

［目的］探讨抗凋亡基因bel－2和肿瘤转移抑制基因nm－23在原发性胆囊癌发生及发展中的作用。［方法］保用免疫组化方法对38例胆囊癌及30例慢性胆囊炎组织中bcl－2及nm-23对基因蛋白表达进行测定。［结果］胆囊癌中的bcl-2及nm-23的阳性表达分别为60．6％、50．0％,显著高于慢性胆囊炎组织（16．7％、20％,P＜0.01）,且bcl-2和nm－23表达与胆囊癌组织分化程度及临床分期密切相关,nm-23表达与淋巴结转移呈负相关。［结论]bcl-2及nm-23对基因在胆囊癌发生及发展中起重要作用,前者过度表达多见于胆囊癌早期．而后者则决定着胆囊癌的浸润及淋巴结转移,是晚期事件。     

胆囊癌组织中p57KIP2、cyclin D1和cyclin E的表达及临床意义

背景与目的：原发性胆囊癌（primary carcinoma of the gallbladder,PCG）是死亡率极高的恶性肿瘤,其恶变的机制目前尚未明确。前期研究发现,p57^KIP2在人类多种恶性肿瘤中异常表达。本研究拟进一步探讨p57^KIP2在PCG组织中的表达及临床意义。方法：运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）、免疫组织化学EliVision法分别检测60例PCG、20例胆囊腺瘤（adenoma of the gallbladder,AG）和20例慢性胆囊炎（chronic cholecystitis,CC）组织中p57^KIP2、cyclin D1、cyclin E mRNA表达及蛋白水平。结果：p57^KIP2 mRNA及蛋白在PCG、AG和CC中的表达逐渐升高,两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。Cyclin D1、cyclin E mRNA及蛋白在PCG、AG和CC中的表达逐渐降低,PCG与AG比较、PCG与CC比较,差异有统计学意义（P<0.05）。在PCG组织中,p57^KIP2蛋白的表达与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关（P<0.05）。Cyclin D1蛋白的表达与临床分期有关(P<0.05)。p57^KIP2与cyclin D1的表达呈负相关（P<0.05）,p57^KIP2与cyclin E的表达呈负相关（P<0.05）,cyclin D1与cyclin E的表达呈正相关（P<0.05）。结论：p57^KIP2表达的降低与cyclin D1、cyclin E表达的增加可能是PCG的发生机制之一;检测p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E对PCG的预后判断有重要意义。     

原发性胆囊癌CD44v6表达的免疫组化研究

目的　研究CD44v6在胆囊癌中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学Elivision二步法测定 40例原发性胆囊癌和 1 2例慢性胆囊炎 ,6例胆囊腺瘤、4例胆囊腺肌症等良性病变CD44v6表达。结果　CD44v6在胆囊癌组织中阳性表达率为 72 .5 % ,胆囊良性病变阳性表达率为 0 % ,胆囊癌组织与胆囊良性病变CD44v6表达水平之间有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,且CD44v6表达与胆囊癌淋巴结转移、临床分期、分化程度有关。结论　CD44v6基因的表达 ,有望成为判断胆囊癌淋巴结转移、病变发展以及评估预后的指标     

外周血PTEN、RASSF1A甲基化及其mRNA表达与结节性甲状腺疾病的关系

目的 探讨PTEN、RASSF1A基因启动子甲基化及其mRNA表达与结节性甲状腺疾病之间的关系。方法 选取46例结节性甲状腺肿、34例甲状腺腺瘤、24例甲状腺乳头状癌患者（甲癌）和30例健康体检者,利用甲基化特异性PCR检测外周血中PTEN、RASSF1A基因启动子区甲基化状态及利用反转录—多聚酶链反应法（RT-PCR）检测mRNA表达情况。结果 （1）腺瘤组和甲癌组中PTEN、RASSF1A甲基化率分别与对照组比较, 差异均有统计学意义（均P<0.05）。（2）腺瘤组和甲癌组中PTEN、RASSF1A基因mRNA表达阳性率分别与对照组比较, 差异均有统计学意义（均P<0.05）。（3）甲癌组中PTEN和RASSF1A基因甲基化率、mRNA表达与淋巴结转移有关（均P<0.05）,与年龄、性别、结节大小无关。结论 甲状腺肿瘤外周血中存在抑癌基因PTEN、RASSF1A高甲基化改变进而导致其功能失活,从而在甲状腺肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。     

肾上腺肿瘤组织中Survivin蛋白和PTEN蛋白的表达及其临床意义

背景与目的:肾上腺肿瘤的组织形态学特征比较特殊,仅根据组织病理切片检查难以判断肿瘤的良、恶性程度,给治疗带来很大的困难.本研究旨在探讨Survivin蛋白和PTEN蛋白表达在肾上腺肿瘤的临床诊断及预后评估中的价值.方法:采用免疫组织化学LSAB方法分别对116例肾上腺肿瘤组织标本进行survivin蛋白和FrEN蛋白表达的检测,分为"一"、" "、" "、" "、" "5个等级.采用SPSS13.0软件进行分析.结果:按"一、" "、" "、" "、" "划分,survivin蛋白的表达分别为29例(25.0%)、36例(31.0%)、30例(25.9%)、14例(12.1%)、7例(6.O%);PTEN蛋白的表达分别为8例(6.9%)、17例(14.7%)、30例(25.9%)、33例(28.4%)、28例(24.1%).Survivin蛋白和PTEN蛋白的表达呈明显负相关(r=-0.486,P＜0.05).Survivin蛋白和PTEN蛋白的表达与肾上腺肿瘤患者年龄、性别、肿瘤部位等无明显相关性(P＞0.05).肾上腺皮质腺瘤中Survivin蛋白的表达明显低于肾上腺皮质腺癌(P＜0.05);良性嗜铬细胞瘤Survivin蛋白的表达明显低于恶性嗜铬细胞瘤(P＜0.05).肾上腺皮质腺瘤中:PTEN蛋白的表达明显高于肾上腺皮质腺癌(P＜0.05),良性嗜铬细胞瘤PTEN蛋白的表达明显高于恶性嗜铬细胞瘤(P＜0.05).Survivin蛋白的表达与肾上腺皮质腺癌和恶性嗜铬细胞瘤患者的预后均相关(P＜0.05),Survivin蛋白表达越强,患者预后越差.PTEN蛋白的表达与肾上腺皮质腺癌、恶性嗜铬细胞瘤患者的预后均相关(P＜0.05),PTEN蛋白表达越低,患者预后越差.结论:Survivin蛋白和PTEN蛋白在肾上腺肿瘤组织中的表达与肾上腺肿瘤恶性程度及预后相关.     

E-cad和VEGF及PCNA表达与胆囊癌生物学特性的相关性研究

目的:研究不同胆囊疾病中E钙黏蛋白(E-cad)、血管内皮生长因子(VEGF)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和分布的差异,探讨E-cad、VEGF和PCNA表达与胆囊癌临床病理特征的相关性及其预后判断的价值。方法:收集胆囊癌标本41例,胆囊腺瘤标本14例,慢性胆囊炎10例,应用免疫组化染色SP法分析。结果:胆囊癌VEGF阳性表达率(33/41)显著高于胆囊腺瘤(6/14)和胆囊炎(0/10),F=24·831,P=0·000,而E-cad阳性表达率(18/41)明显降低,伴有转移者E-cad表达(12/30)更低;胆囊癌PCNA LI高于胆囊腺瘤和胆囊炎组,H=19·03,P=0·008。VEGF过度表达者3年生存率(6/25)较阴性组(5/6)显著降低,F=8·286,P=0·008,PC-NA LI≥50者3年生存率(1/16)较<50者(10/15)显著降低,F=16·151,P=0·000;E-cad高表达者3年生存率(9/16)较阴性组(1/15)明显增高,F=12·511,P=0·001。结论:E-cad和VEGF及PCNA表达在胆囊癌、胆囊腺瘤与慢性胆囊炎之间差异均有统计学意义,均可作为评估胆囊良、恶性肿瘤的参考指标和胆囊癌预后判断的参考指标。