胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批向不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５     

血清结合胆红素的酶法测定

目的 建立用胆红素氧化酶（ＢＯＤ）作为催化剂，选择性地测定血清结合胆红素（ＣＢ）的新方法。方法 测定条件为：０．１ｍｏｌ／Ｌ甘氨酸缓冲液、ｐＨ１０．０，ＢＯＤ活性０．５～０．８Ｕ／反应管，反应时间２分钟。结果 线性至少可达到２２０μｍｏｌ／Ｌ；精密度为批内ＣＶ１．７１～３．９８％、批间ＣＶ８．０～９．７２％；正常参考值范围为０～３．１４μｍｏｌ／Ｌ；与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的Ｃ     

化学氧化法测定血清直接胆红素试剂的研制

利用过硫酸钾为氧化剂,在含有稳定剂的Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液条件下,仅使血清中结合胆红素被氧化,以此作直接胆红素测定,本法与改良Ｊ－Ｇ法（Ｘ１）和胆红素酶法（Ｘ２）的直接胆红素测定相关良好,分别Ｙ＝１．０４７Ｘ１＋１．１２０,ｒ＝０．９８９６;Ｙ＝１．０３９Ｘ２＋１．５６７,ｒ＝０．９８３１。线性为０～３５０μｍｏｌ／Ｌ,低、中、高血清标本的ＣＶ值批内为３．４２％、３．２６％;２．０４％２．０４％批间为４．９７％;３．８４％,３．１８％,平均回收率１０５．６％,血红蛋白,维生素Ｃ干扰不明显,结论：化学氧化法测定结果的准确性和精密度均条例临床要求。     

高效液相色谱检测胆红素及其临床应用

由于常规的血清胆红素检测方法不能灵敏、准确的测定结合胆红素。笔者参考国外文献采用国产填料和试剂建立了敏感和特异的高效液相色谱胆红素测定法，结果表明本法可对血清胆红素作出较为灵敏和准确的测定，未结合胆红素批内和批间变异系数（ＣＶ）值分别为９．８％～１０．９％和７．３％～１２．７％，结合胆红素批内和批间ＣＶ值分别为２．５％～９．２％和９．７％～１１．０％；未结合和结合胆红素的最低检出浓度分别为０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．０２μｍｏｌ／Ｌ。同时采用本法分析了部分肝病患者和健康人血清胆红素，并对其临床意义进行了初步探讨。     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

自制双试剂测定血清胆红素的探讨

目的；建立准确的自动生化分析测定血清胆红素的方法。方法：采用双试剂测定，以尿素咖啡因及Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００组成的加速剂作为第一试剂，重氮试剂为第二试剂测定总胆红素，以对氨基苯碘酸溶液为第一试剂，亚硝酸钠浓度为１．４５ｍｍｏｌ／Ｌ的重氮试剂为第二试剂测定直接胆红素。结果：总胆红素回收率为９９．８５％，批内艰０．８２％，批间ＣＶ为１．５４％，与咖啡因法比较ｒ＝０．９９９９。ｔ＝１．３２３，Ｐ〉０．２     

胆红素氧化酶消除血清肌酐测定中胆红素的干扰

为消除肌酐测定中血清胆红素干扰，采用由卫生部临床检验中心提供的高纯度胆红素氧化酶（ＢＯＸ）和苦味酸试剂，设计了在ＣＯＢＡＳＦＡＲＡ－Ⅱ型全自动生化分析上检测肌酐的新方法，仅需样品８μｌ，ＢＯＸ８μｌ，苦味酸试剂８０μｌ，在１９０秒钟就可完成反应，所得结果表明，用该法对７５份总胆红素在０～６１６μｍｏｌ／Ｌ的标本进行检测，可以有效的消除胆红素对肌酐测定时的干扰。而且结果准确可靠，回收试验，黄疸血清标本用原法回收率仅为４９％～７１％，而用本法回收率可达９４％～１０５％。本法的重复性也较好，批内变异系数（ＣＶ）为２．８％～１２．７％，批间ＣＶ为１４．０％。本法操作简单，标本也不需要作人工预处理，是肌酐测定消除胆红素干扰比较理想的方法。     

连续监测法测定血清α—L—岩藻糖苷酶

建立了血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶单一试剂连续监测法。本法与改良Ｔｒｏｏｓｔ终点法比较，２０份血清的测定值经配对ｔ检验，Ｐ＞０．０５，差异无统计意义；同一份混合血清用本法测定，批内ＣＶ＝５．０％，批间ＣＶ＝７．４％；一份３２Ｕ／Ｌ的高值血清经稀释后测定，仍呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９）；胆红素１１５μｍｏｌ／Ｌ、血红蛋白３２ｇ／Ｌ及三酸甘油３００μｍｏｌ／Ｌ对测定值无明显干扰。     

过硫酸钾氧化胆红素比色法的实验研究

本文对过硫酸钾氧化总胆红素比色法的实验作了系统性研究。结果表明：瓜液中过硫酸钾芭为１１．７７ｍｍｏｌ／Ｌ,线性可达６１２．５μ ｍｏｌ／Ｌ,批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）分别为０．７２％和２．４４％,平均回收率为９９．８％。本法（Ｙ）与改良Ｊ－Ｇ法（Ｘ）结果比较：ｒ＝０．９９５４,Ｙ＝０．９５４０Ｘ＋０．１４６５。溶血（１２．０ｇ／Ｌ血红蛋白）,脂血（８．４ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯）,维生素Ｃ（１     

用Triton X－100作加速剂测定胆红素

本文应用Ｔｒｉｔｏｎｘ─１００作为加速剂，利用重氮试剂配制成单一测定Ｔ．Ｂｉｌ试剂。该试剂能适用于自动生化分析仪和手工测定Ｂｉｌ，最大吸收波长５４８ｎｍ，摩尔吸光系数ε＝７１．６×１０￣３，胆红素在３０７．８μｍｏｌ／Ｌ内线性良好，平均回收率１００．８５％，批内ＣＶ＝１．１０４％，血清中Ｈｂ≥５ｇ／Ｌ时，ＴＧ≥８ｍｍｏｌ／Ｌ时对Ｂｉｌ测定产生明显影响。经与Ｔｒａｃｅ试剂实验对照，γ＝０．９９８７．ｔ＝０．０２９４，Ｐ＞０．０５。γ＝０．９２２２．ｔ＝０．０９１．Ｐ＞０．０５。     

新生儿不同部位经皮检测胆红素与血清胆红素的对比分析

目的探讨新生儿不同部位经皮检测胆红素与血清胆红素的差异,指导临床选择合适的检测部位。方法采用同期标准对照的方法,对250例新生儿分别于前额、左右两侧脸颊部、前胸等部位经皮检测胆红素,并与血清总胆红素测定值进行比较。结果前额和前胸两部位测得的胆红素值均低于血清总胆红素值,差异有统计学意义(P<0.01);左右两侧脸颊部所测得的胆红素值与血清总胆红素值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论左右两侧脸颊部测得的胆红素与血清总胆红素值最接近,是经皮检测胆红素的首选部位。     

钒酸氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法学评价

目的 :WAKO钒酸氧化法与改良J -G法测定胆红素的方法学比较。方法 :采用WAKO钒酸氧化法胆红素测定试剂盒同时测定血清中的总胆红素、直接胆红素 ,与改良J -G法测定胆红素的方法进行了比较 ,并对钒酸氧化法的重复性试验、线性试验、干扰试验、回收试验进行了评价。结果 :钒酸氧化法(Y)与改良J-G法 (X)有很好的相关性 (总胆红素 :Y =0 992 6X 2 2 344,r =0 9991 ;直接胆红素 :Y =0 9968X 1 1 694,r=0 9982 ) ;测定总胆红素的线性可达 684μmol/L ,直接胆红素的线性可达342 μmol/L ;测定总胆红素天内重复性变异平均为 1 1 7% ,天间重复性变异平均为 1 88% ,直接胆红素天内重复性变异平均为 1 88% ,天间重复性变异平均为 2 76% ;溶血、脂浊、维生素C对测定表现为较微的干扰。总胆红素的回收率平均为 98 7% ,直接胆红素的回收率平均为 1 0 2 0 %。结论 :钒酸氧化法是一准确、灵敏的、适用于实际工作的测定胆红素的方法。     

血清胆红素水平与胆红素脑病MRI表现的相关性分析

【目的】探讨MRI信号改变与高胆红素血症的严重程度的相关性,为胆红素脑病的早期诊断提供客观依据。【方法】432例重度高胆红素血症新生儿[血清总胆红素（TSB）≥342μmol／L）]在黄疸高峰期后接受头部MRI检查,根据TSB峰值将高胆红素血症患儿分为轻度组（342～427．5μmol／L）,中度组（427．5～513μmol／L）和重度组（≥513μmol／L）,分析MRI T1WI苍白球高信号阳性率与TSB水平的关系,并进行统计学分析。【结果】432例重度高胆红素血症患儿中338例苍白球T1WI呈对称性高信号改变（78．2％）,重度组阳性率最高（94．4％,34／36）,中度组和轻度组阳性率分别为80．5％（95／118）,75．2％（209／278）,黄疸程度与苍白球信号改变有密切关系（X2=7．438,P=0．024）;早期新生儿组苍白球信号改变（82．5％,222／269）明显高于晚期新生儿组（71．2%,116／163）,差异有统计学意义（X2=7．697,P〈0．01）。【结论】MRI T1WI苍白球对称性高信号与高胆红素血症的严重程度及日龄密切相关,是新生儿急性胆红素脑病的重要表现特征。