菌核净的抗雄激素作用及机制的研究

目的　确定有机杂环类杀菌剂菌核净是否具有抗雄激素作用并探讨其可能的作用机制。方法　采用体内和体外相结合的方法 :体内实验采用经典的Hershberger试验 ,菌核净经口给药剂量为 50、10 0、2 0 0mg·kg- 1·d- 1;体外实验采用雄激素依赖基因转录活化试验 ,将人雄激素受体 (AR)表达质粒、AR 依赖荧光素酶报告质粒同时瞬时转染HepG2细胞 ,加入菌核净或已知抗雄激素 ,同时加或不加一定浓度的双氢睾酮以诱导荧光素酶基因的表达。结果　体内实验中 ,菌核净与已知抗雄激素一样能引起雄激素依赖组织重量明显降低 :染菌核净 2 0 0mg/kg组大鼠精囊腺、腹侧前列腺、背后侧前列腺、尿道球腺、提肛肌加球海绵体肌重量分别比溶剂对照组低 57.8%、44.8%、43 .9%、3 0 .1%、3 4 .1%。菌核净对雄激素依赖组织生长的抑制作用弱于氟他胺和腐霉利 ,但强于异菌脲。体外实验中 ,菌核净能抑制双氢睾酮依赖的AR活力 ,并呈现剂量 -反应关系 (r =-0 .952 3 ,P =0 .0 47)。菌核净的抑制作用较氟他胺弱 ,约为氟他胺的 1/10 0。结论　菌核净具有抗雄激素作用 ,是AR拮抗剂 ,其抗雄激素作用强度弱于氟他胺、腐霉利 ,但强于异菌脲     

吡哆素L-2-吡咯烷酮-5-羧酸酯雄性生殖毒性及机制研究

目的:研究吡哆素L-2-吡咯烷酮-5-羧酸酯(Metadoxine,MTDX)对雄性大鼠的生殖毒性及机制。方法:灌胃染毒雄性成年SD大鼠0,250,500和1000 mg/kgMTDX,每天1次,连续4周。染毒结束后观察性腺和附属性腺脏器系数、精子质量、组织形态学和血清睾酮等指标的变化。Hershberger方法检测MTDX抗雄激素活性作用:40只4周龄雄性SD大鼠行双侧睾丸切除手术,2周后,除1组皮下注射花生油并灌胃给予蒸馏水外,其余3组去势大鼠每天皮下注射丙酸睾酮(TP,1 mg/kg),并同时灌胃给予蒸馏水或MTDX(500,1000 mg/kg),连续7 d,观察雄激素依赖组织重量的变化。对体外培养睾丸碎块合成睾酮的影响:利用离体组织培养和放射免疫技术,观察不同浓度MTDX对体外培养睾丸碎块合成睾酮的影响。结果:1000 mg/kg剂量组大鼠睾丸、附睾、前列腺和精囊腺脏器系数明显降低;精子数量和精子存活率减少,精子活力降低,精子畸形率增高,血清T无变化;500 mg/kg剂量组在睾丸相对重量、精子数量和精子活力方面与对照组比较有显著性差异。在Hershberger实验中,1000 mg/kg组大鼠的精囊腺、前列腺以及球海绵体肌的脏器系数值均显著低于对照组。MTDX各剂量组睾丸培养液中睾酮的含量与对照组相比均没有显著性差异。结论:MTDX能引起雄性大鼠生殖毒性,这种毒性作用可能与其具有抗雄激素样作用有关。     

两种拟除虫菊酯类农药抗雄激素活性的Hershberger实验研究

目的 研究两种拟除虫菊酯类农药氯氰菊酯和甲氰菊酯在体内的抗雄激素作用.方法 6周龄雄性SD大鼠去势后恢复一星期,按体重随机分为8组,每组6只,包括阴性对照组,氯氰菊酯与甲氰菊酯低、中、高剂量组,阳性对照组.各组动物均皮下注射丙酸睾酮(TP)100μg/(kg·d)连续7 d.阴性对照组、两种拟除虫菊酯农药组和阳性对照组分别皮下注射给予花生油、氯氰菊酯[45、90、180mg/(kg·d)]、甲氰菊酯[10、20、40mg/(kg·d)]、氟他胺(20mg/kg),连续7 d,观察大鼠性附属组织及血清激素水平的变化.结果 两种拟除虫菊酯类农药各剂量组与阴性对照组比较,大鼠性附属器官精囊腺、背侧前列腺、腹侧前列腺和提肛肌重量,以及大鼠血清睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平差异均无统计学意义.阳性对照组与阴性对照组比较,大鼠各性附属器官重量均降低,大鼠LH水平升高,差异均具有统计学意义.结论 氯氰菊酯和甲氰菊酯对去势雄性大鼠的性附属器官重量和血清T、FSH和LH水平无明显影响,未显示出抗雄激素活性.

Abstract：

Objective To observe the anti-androgenic activity of two pyrethroids (cypermethrin and fenpropathrin) in vivo. Methods SD rats aged 6 weeks were castrated ,and then housed for one week. The rats were randomly divided into groups, six in each: negative control group, cypermethrin and fenpropathrin group, positive control group. The rats were subcutaneously injected with testosterone propionate (TP) 100 μg/(kg·d) for 7 consecutive days. Peanut oil, cypermethrin [ 45, 90, 180 mg/(kg·d)], fenpropathrin[10, 20, 40 mg/ (kg·d) ], fiutamide[ 20 mg/(kg·d) ] were subcutaneously injected for 7 consecutive days at the same time. The sex accessory glands and serum hormone were detected. Results Compared with the negative group, no significant differences were observed in the sex accessory glands/tissues (seminal vesicles with coagulating glands, dorsolateral prostate, the ventral prostate and levator ani muscles) and the levels of serum hormones of the pyrethroids groups. Compared with the negative group, the masses of all the sex accessory glands/tissues decreased significantly in the positive group . Compared with the negative group, the level of LH increased significantly in the positive group. Conclusion No obvious anti-androgenic effects induced by cypermethrin and fenpropathrin in castrated SD rats has been observed.     

有机磷与拟除虫菊酯类混配农药对小鼠自然杀伤细胞的免疫毒性

目的研究有机磷与拟除虫菊酯类混配农药后对小鼠自然杀伤(NK)细胞的免疫毒性。方法将140只健康成年SPF级BALB/c小鼠按体重随机分为空白对照(生理盐水)组、溶剂对照(玉米油)组和毒死蜱(0.01 mg/kg)染毒组、马拉硫磷(0.3 mg/kg)染毒组、氯氰菊酯(0.02 mg/kg)染毒组、氯氟氰菊酯(0.02 mg/kg)染毒组及联合作用(0.01 mg/kg毒死蜱+0.3mg/kg马拉硫磷+0.02 mg/kg氯氰菊酯+0.02 mg/kg氯氟氰菊酯)组,每组20只,雌雄各半。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为0.01 ml/g,每日1次,连续染毒30 d。测定小鼠脾脏NK细胞活性、小鼠全血NK细胞数,血清白介素-2(IL-2)、白介素-15(IL-15)、肿瘤坏死因子(TNF)及前列腺素2(PGE2)水平。结果溶剂对照组、氯氰菊酯组和氯氟氰菊酯组雄性小鼠全血NK细胞数低于联合作用组;溶剂对照组、毒死蜱组、马拉硫磷组、氯氰菊酯组雄性小鼠NK细胞活性高于联合作用组,差异有统计学意义(P0.05)。溶剂对照组、毒死蜱组、马拉硫磷组、氯氰菊酯组、氯氟氰菊酯组雌性小鼠全血NK细胞数高于联合作用组;溶剂对照组雌性小鼠NK细胞活性低于联合作用组,差异有统计学意义(P0.05)。溶剂对照组、毒死蜱组、马拉硫磷组、氯氰菊酯组、氯氟氰菊酯组雄性小鼠IL-2和TNF水平均高于联合作用组,雌性小鼠IL-2水平均低于联合作用组,差异有统计学意义(P0.05);各染毒组间小鼠血清IL-15和PGE2水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论有机磷与拟除虫菊酯类混配农药对小鼠自然杀伤细胞具有免疫毒性,并与IL-2水平有关。     

哺乳期氯氰菊酯暴露对断乳期雄性小鼠生殖内分泌的影响

目的 探讨哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对断乳期雄性子代小鼠生殖内分泌的损害作用,为研究氯氰菊酯的生殖发育毒作用提供理论依据.方法 将21只健康清洁级ICR孕鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、低剂量(6.25 mg/kg)和高剂量氯氰菊酯染毒组(25 mg/kg),每组7只.分娩后第1天,母鼠以灌胃方式进行染毒,每天1次,染毒至分娩后第21天.染毒后,每组随机取雄性仔鼠15只,称重,剖杀取睾丸,称重睾丸并计算脏器系数.采用放免法检测血清、睾丸组织睾酮(T)和血清雌二醇(E2)水平.取小鼠的同侧睾丸,HE染色后进行组织病理学观察.采用TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况.结果 与溶剂对照组相比,高、低剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠体重、睾丸重量和睾丸系数较低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与溶剂对照组相比,高剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠血清T水平较低,差异有统计学意义(P＜0.01).与低剂量氯氰菊酯染毒组比较,高剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠血清T水平较低,差异有统计学意义(P＜0.05).随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,血清和睾丸组织T水平均呈下降趋势.各染毒组雄性仔鼠血清E2和睾丸T水平间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).组织病理学结果显示,处理组仔鼠睾丸生精细胞层减少,管腔内径增大,细胞相对稀疏,且排列较紊乱,但睾丸细胞凋亡无明显影响.结论 哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对断乳期雄性子代小鼠生殖内分泌有明显损害作用.     

高效氯氰菊酯亚慢性暴露对雌性幼鼠性腺作用

目的研究高效氯氰菊酯对雌性幼鼠性腺毒性作用及机理。方法将40只刚断乳雌性SPF级昆明小鼠按体重随机分为溶剂对照0.1、1.0、10 mg/kg高效氯氰菊酯组,皮下注射染毒,每天1次,连续染毒28 d,观察阴道开口时间,动情周期,测定血清中雌二醇,性腺(卵巢及子宫)湿重及系数,子宫内膜层雌激素受体(ER)表达。结果与对照组比较,高剂量高效氯氰菊酯组雌鼠动情期缩短,动情间期延长,子宫湿重(0.109±0.011)g增加(P<0.05),而各组子宫剥离重﹑子宫系数﹑血清雌二醇及子宫内膜腺体数量差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组子宫内膜雌激素受体阳性表达率分别为(56.00±3.32)%,(29.00±5.58)%,明显低于对照组(72.8±3.84)%(P<0.05)。结论高效氯氰菊酯对幼年雌性小鼠生殖系统具有毒性作用,能降低子宫组织雌激素受体的表达。     

农药联苯菊酯对大鼠内分泌干扰作用的研究

目的通过大鼠子宫增重试验和Hershberger试验研究农药联苯菊酯(BIF)的内分泌干扰作用。方法子宫增重试验中,60只雌性SD大鼠随机分为6组,每组10只:BIF低、中、高剂量组分别经口灌胃给予1.47、4.41和13.23mg/kgBW的BIF;溶剂对照组经口灌胃给予玉米油;17α-乙炔雌二醇(EE)经口阳性组经口灌胃给予1.0μg/kg BW的EE,EE经皮阳性组经口灌胃给予玉米油并皮下注射0.6μg/kg BW的EE。连续给药3天后,测定大鼠子宫湿重、干重,计算其子宫系数,并观察病理变化。在Hershberger试验中,60只去势雄性SD大鼠随机分为6组,每组10只:BIF低、中、高剂量组分别经口灌胃给予1.4、4.2和12.6mg/kg BW的BIF,阳性对照组经口灌胃给予3.0mg/kg BW的氟他胺,溶剂对照组和丙酸睾酮对照组(TP组)经口灌胃给予玉米油,除溶剂对照组外,其余各组均皮下注射给予0.2mg/kgBW丙酸睾酮。所有剂量组连续给药10天后,称量腹侧前列腺(VP)、精囊腺和凝固腺(SVCG)、肛提肌加球海绵体肌(LABC)、阴茎头(GP)、尿道球腺(COW)、肝、肾、肾上腺的重量,计算其脏器系数,测定血清中三碘甲腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)水平。结果子宫增重试验中,与溶剂对照组相比,BIF高剂量组子宫湿重系数和干重系数显著增加(P<0.05)。组织病理学检查发现,BIF中、高剂量组子宫内膜增生、增厚,子宫内膜上皮细胞高度增高(P<0.05)。Hershberger试验,与TP组相比,BIF高剂量组VP、LABC重量显著减轻,T3、T4水平显著降低(P<0.05)。结论子宫增重试验和Hershberger试验提示BIF具有潜在的内分泌干扰作用。     

罗猴子宫雄激素受体基因表达的定位及性激素调节

绝经前妇女的血液循环和子宫中富含雄激素,雄激素对人子宫组织似有抑制作用。 为确定灵长类动物子宫雄激素受体基因表达的部位以及性激素对其表达的调节作用,将雌罗猴于卵巢切除3周后,随机分为4组(每组5只)。①对照组:即安慰剂组。②雌二醇(E_2)组:17β-E_2(5 mg)。③E_2+孕酮:17β-E_2(5 mg)+孕酮10 mg)。④E_2+睾酮:17β-E_2(5 mg)+睾酮(45 mg/kg)。用药方式。上述丸剂于肩胛间皮下埋藏,使之持续释     

菌核净内分泌干扰作用研究

目的研究菌核净内分泌干扰作用(雌激素和抗雄激素活性作用)。方法通过不同实验终点探讨菌核净雌激素样作用:(1)每隔5天腹腔注射给予鲫鱼不同浓度菌核净(0、50、100和200mg/kg)诱导卵黄蛋白原(VTG)的产生,2周后收集雄性鲫鱼血浆和肝脏进行VTG检测;(2)人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)中加入不同浓度的菌核净(10-10～10-4mol/L),作用3天后观察菌核净诱导细胞增殖情况;(3)雌性小鼠去势后给予不同浓度菌核净(0、125、250和500mg/kg),计算子宫脏器系数。Hershberger试验研究菌核净抗雄激素样作用:雄性大鼠去势后给予不同剂量的菌核净(0、30、60和120mg/kg),同时皮下注射雄性激素丙酮酸睾酮(TP),计算雄激素依赖组织的脏器系数。结果100mg/kg和200mg/kg菌核净能诱导雄性鲫鱼血VTG产生,200mg/kg菌核净能刺激雄性鲫鱼肝脏产生VTG,与阴性对照组相比,VTG含量差异均具有显著性(P<0.05);各剂量组菌核净对雄性鲫鱼血钙离子、血和肝总蛋白含量均无影响,但阳性对照E2能增高血钙离子水平;10-8、10-7和10-6mol/L菌核净能诱导MCF-7细胞增殖,与对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);菌核净3个剂量组均能增加去势小鼠子宫脏器系数,其中250mg/kg组与阴性对照组比较差异具有显著性(P<0.05);60mg/kg和120mg/kg菌核净均能降低前列腺加精囊腺、肛提肌、球海绵体肌的脏器系数,与模型对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论菌核净具有雌激素和抗雄激素双重内分泌干扰作用。     

大鼠亚急性吸入高效氯氰菊酯的毒性研究

目的研究高效氯氰菊酯原药的亚急性吸入毒性,为确定亚急性最大无作用浓度及靶器官提供依据。方法按GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》进行。SPF级SD大鼠,设5个组,分别为空白对照组、溶剂对照组及受试物低、中、高浓度组,每组12只,雌雄各半。空白和溶剂对照组分别喷入空气和溶剂二甲基亚砜;低、中、高浓度组分别用不同浓度(3.36、16.61、111.05 mg/m3)的受试物行动物吸入染毒28 d。试验结束时,分别对动物作血液常规、生化、体重和脏器系数等测定,并进行组织病理学检查。结果高浓度组受试动物体重有明显降低,脑体比升高,部分动物坐骨神经纤维内轴突肿胀,有轻微的脱髓鞘改变;雌性动物淋巴细胞(LY)计数百分率降低,肾上腺体比、红细胞平均体积(MCV)和平均血红蛋白量(MCH)升高;雄性动物肾体比、睾丸体比和附睾体比升高,总精子数和平均血红蛋白浓度(MCHC)降低。中、高浓度组雄性动物血清尿素氮(BUN)升高,精子活力降低。结论高效氯氰菊酯原药在SD大鼠亚急性(28 d)吸入毒性试验的最大无作用浓度为3.36 mg/m3(4 h/d),在111.05 mg/m3(4 h/d)... 更多还原     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、氯氰菊酯单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和氯氰菊酯(CYP)单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响。方法选择SPF级3周龄雄性SD大鼠24只,随机分为4组,分别为对照组(喂饲玉米油)、DEHP染毒组(500mg/kg)、CYP染毒组(80mg/kg);DEHP、CYP联合染毒组(DEHP 500mg/kg+CYP 80mg/kg),每组6只。采用经口灌胃方式染毒,每天1次,连续染毒30天。于末次染毒24小时后处死动物,测定大鼠体重、睾丸湿重,并计算睾丸系数;测定血清睾酮水平;制备睾丸病理组织切片,光镜观察其组织学改变,电镜观察生殖细胞超微结构;测定睾丸标志酶乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果与对照组相比,DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸下降时间和包皮分离时间明显延迟,肛门生殖器间距明显缩短(P<0.05或0.01);DEHP单独染毒组睾丸重量及睾丸系数明显降低,血清睾酮水平显著下降(P<0.05),睾丸匀浆中ALP、ACP和LDH活性明显增高,SDH活性显著下降(P<0.01);DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸病理组织学、生殖细胞超微结构均可见明显异常。结论 DEHP、CYP单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠均具有明显的生殖毒性作用,可引起生精细胞、支持细胞和间质细胞的变性、坏死及功能障碍,从而导致雄性生殖系统发育和功能的显著异常。其中,DEHP单独染毒呈现主效应,DEHP、CYP联合染毒对大鼠的生殖毒性未呈现明显交互影响。     

哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对雄性仔鼠睾酮合成的影响

目的探讨哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对雄性仔鼠断乳期及成年性激素合成的影响。方法将140只刚出生ICR小鼠随机分为氯氰菊酯染毒组和溶剂对照组,从分娩后第一天,染毒组每天给予母鼠25mg/kg氯氰菊酯灌胃染毒,直至分娩后第21天仔鼠断奶,对照组给予等体积玉米油灌胃。分别于出生后21天及70天时,每组取15只雄性仔鼠,放免法检测血清和睾丸组织睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,用RT-PCR方法检测睾丸中StAR和睾酮合成酶mRNA表达水平,用Western blot检测睾丸中StAR和睾酮合成酶的蛋白表达水平。结果染毒组断乳期雄性仔鼠血清睾酮显著降低(P<0.01)及睾丸睾酮水平降低(P<0.05),对雌激素水平没有影响(P>0.05),且哺乳期氯氰菊酯暴露组雄性仔鼠睾丸中P450scc的mRNA水平与蛋白表达水平较对照组均显著降低(P<0.01),StAR、17β-HSD和P450 17α的mRNA表达水平较对照组有一定降低(P<0.05),但其蛋白表达水平几乎未受影响。哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对成年雄性仔鼠的血清睾酮、睾丸睾酮水平及睾丸中StAR和睾酮合成酶的mRNA与蛋白表达水平几乎没有影响(P>0.05)。结论哺乳期氯氰菊酯暴露可能主要通过下调睾丸中P450scc的mRNA与蛋白表达而影响21天雄性仔鼠睾丸中睾酮的合成。     

低剂量毒死蜱和氯氰菊酯联合染毒对雌性大鼠生殖发育的影响

目的 观察低剂量毒死蜱(氯吡硫磷)和氯氰菊酯联合染毒对雌性大鼠生育功能的影响。 方法 健康Wistar大鼠雌雄按2∶1合笼,将孕鼠分为对照组、毒死蜱组、氯氰菊酯组和联合染毒组等4组,每组8只。按照1 ml/kg量灌胃,毒死蜱组剂量为1.6 mg/kg,氯氰菊酯组剂量为2.5 mg/kg,联合染毒组给药毒死蜱1.6 mg/kg+氯氰菊酯2.5 mg/kg。从孕1~孕8 d染毒,孕19 d,处死孕鼠,记录黄体数和总着床数,活胎的体重和身长,并观察活胎外观是否有畸形。分离胎盘并记录胎盘重量,测定大鼠全血的乙酰胆碱酯酶(AchE)的活力,免疫组织化学检测P450aromA。 结果 孕第19 d,联合染毒组孕鼠体质量与对照组比较明显降低(P<0.05);各组孕鼠黄体数、总着床数、死胎率、胎仔性别比例和胎仔身长与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合染毒组胎盘质量较对照组显著降低(P<0.05)。染毒各组活胎仔体质量较对照组明显降低(P<0.05)。联合染毒组孕鼠全血中AChE活力较对照组显著降低(P<0.05)。单独染毒组胎盘P450aromA蛋白表达与对照组相似,联合染毒组胎盘P450aromA蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。 结论 低剂量毒死蜱和氯氰菊酯联合染毒产生一定的胚胎毒性,造成仔鼠发育迟缓,并引起了孕鼠AchE的下降和胎盘P450aromA蛋白表达的增强。     

氯氰菊酯和溴氰菊酯对雄性小鼠淋巴细胞DNA的损伤

目的研究氯氰菊酯和溴氰菊酯对雄性小鼠外周血淋巴细胞 DNA 的损伤。方法将64只清洁级健康雄性昆明种小鼠随机分为阴性对照组(花生油)、氯氰菊酯低(20mg/kg)、中(40mg/kg)、高(80mg/kg)剂量组,溴氰菊酯低(5mg/kg)、中(10mg/kg)、高(20mg/kg)剂量组和阳性对照组(环磷酰胺40mg/kg)。阳性对照组采用腹腔注射,其他各组采用灌胃染毒,10ml/kg,每天1次,连续染毒7 d。分别于实验前后测量小鼠体重。染毒后,取外周血淋巴细胞进行彗星实验。结果染毒前各组小鼠体重间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。染毒后氯氰菊酯与溴氰菊酯高剂量组体重低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,氯氰菊酯和溴氰菊酯高剂量组的拖尾率及拖尾长度较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。且拖尾率及拖尾长度随着氯氰菊酯和溴氰菊酯染毒剂量的增大而升高,经线性趋势检验,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯氰菊酯和溴氰菊酯对雄性小鼠外周血淋巴细胞具有一定的 DNA 损伤作用。     

氯氰菊酯对小鼠肝细胞的氧化损伤和维生素E的抗氧化作用

目的研究氯氰菊酯对小鼠肝组织的氧化损伤。方法昆明小鼠随机分为5组,包括1个阴性对照组(花生油)、3个氯氰菊酯染毒组(10、20和40 mg/kg)和1个高剂量氯氰菊酯(40 mg/kg)+维生素E(100 mg/kg)组,灌胃7 d,测定肝组织匀浆活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量和肝组织细胞DNA-蛋白质交联(DPC)系数;并观察病理损伤。结果随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,肝组织ROS、MDA、8-OHdG含量和DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系,40 mg/kg组的上述指标与对照组差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。病理学观察可见40 mg/kg组肝细胞水肿严重,体积明显增大,胞浆疏松化甚至气球样变,肝索排列较紊乱。与单独氯氰菊酯染毒组相比较,40 mg/kg+VE组肝组织的ROS、MDA、8-OHdG含量和DPC系数均有下降,GSH含量上升(P0.05,P0.01)。结论 40mg/kg的氯氰菊酯能造成小鼠肝组织的氧化损伤和病理损伤,并可被维生素E所拮抗。     

顺式氯氰菊酯离体拟雌激素活性评价及机制初探

目的研究顺式氯氰菊酯对人类乳腺癌MCF-7细胞增殖及对其雌激素受体αmRNA表达的影响。方法顺式氯氰菊酯分为1.0×10-7、1.0×10-8、1.0×10-9mol/L 3个剂量组,阳性对照β-雌二醇分为1.0×10-7、1.0×10-9、1.0×10-11mol/L剂量组,以及溶剂对照和空白对照组。MCF-7细胞按以上分组于96孔板培养5 d后测吸光度值,计算细胞增殖率;相同分组及方法培养MCF-7细胞后提取RNA,逆转录,应用实时定量聚合酶链反应确定雌激素受体αmR-NA的表达量。结果不同浓度的顺式氯氰菊酯与溶剂对照组比较,细胞增殖率均升高(P<0.01)。1.0×10-7、1.0×10-8、1.0×10-9mol/L浓度顺式氯氰菊酯处理MCF-7细胞的雌激素受体αmRNA表达水平上调,分别为溶剂对照组的1.61、1.45和1.39倍。结论顺式氯氰菊酯可显著促进MCF-7细胞的生长,表现出拟雌激素样作用,并使MCF-7细胞雌激素受体αmRNA表达上调。     

氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的通过观察氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增值的影响,探讨氯氰菊酯促进细胞增殖的生物学机制。方法 MCF-7细胞在加受试物前7 d改为无酚红完全培养基,以耗尽细胞内储存的雌激素。实验设为6组:无水乙醇(EtOH)溶剂对照组、雌二醇(E2)雌激素对照组、他莫西芬(TAM)抗雌激素对照组及氯氰菊酯3个浓度梯度(1.0×10-7mol/L、1.0×10-8mol/L、1.0×10-9mol/L)实验组。采用CCK8法检测各组细胞的增值情况,采用Hoechst 33342和Propidium Iodide双染荧光显微镜观察氯氰菊酯对雌激素耗尽诱导细胞凋亡作用影响。结果第4、5天细胞增殖实验,与EtOH溶剂对照组相比,除TAM抗雌激素组与EtOH溶剂对照组细胞增殖活力低外,其他4组细胞增殖活力低,依次为E2雌激素对照组、氯氰菊酯1.0×10-7mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-8mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-9mol/L组,P均<0.05;第3天与EtOH溶剂对照组比,E2雌激素对照组MCF-7细胞增殖活力高,P<0.05,第2天差异无统计学意义。荧光显微镜下见,EtOH溶剂对照组相比和TAM抗雌激素组细胞的凋亡作用明显,后者强于前者,而E2雌激素对照组、氯氰菊酯1.0×10-7mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-8mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-9mol/L组对细胞凋亡作用不明显。结论氯氰菊酯有可能是通过抑制乳腺癌细胞凋亡而发挥其促进细胞增殖作用的。     

乙体氯氰菊酯对小鼠大脑皮质γ-氨基丁酸水平及相关酶和受体的影响

目的探讨乙体氯氰菊酯的神经毒性,为该类农药的中毒防治提供理论依据。方法 80只健康成年昆明种小鼠按体质量随机分为4组,每组20只,雌雄各半。染毒组小鼠以一次经口灌胃方式分别给予20、40、80 mg/kg剂量的乙体氯氰菊酯,食用油稀释受试物质,对照组给予等量食用油。于灌胃后2、4 h,每组各取10只小鼠大脑皮质,HPLC法检测γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)水平(μmol/g),分光光度法检测γ-氨基丁酸转氨酶(GABA transaminase,GABAT)活力(nmol/min.mg.pro),Real time RT-PCR法检测GABA受体(GABA-A、GABA-B)mRNA水平。结果染毒后2、4 h,80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA水平(99.77±13.80、108.29±29.67)高于对照组(72.10±20.51、72.09±20.49)(P0.05);染毒后2 h,40、80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA-T活力(12.45±2.20、11.48±1.33)低于对照组(14.09±1.64)(分别为P0.05、P0.01);染毒后4 h,80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA-A mRNA表达(0.89±0.07)低于对照组(1.00±0.08)(P0.05),GABA-B mRNA表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论乙体氯氰菊酯可降低小鼠大脑皮质GABA-T活力,使GABA增多,进而反馈性抑制GABA-A受体mRNA表达。     

乙体氯氰菊酯对小鼠脑组织谷氨酰胺酶活性及其mRNA表达的影响

健康成年小鼠按体重随机分成1个对照组及3个染毒组,每组10只,雌雄各半。染毒组小鼠以灌胃方式分别给予20、40、80 mg/kg剂量的乙体氯氰菊酯,以食用色拉油稀释受试物质,对照组给予等量色拉油。3 h后处死小鼠,采用分光光度法和RT-PCR法检测小鼠脑组织谷氨酰胺酶(phosphate-activated glutam inase,PAG)活性及其mRNA水平。结果80 mg/kg剂量组全部小鼠及40 mg/kg剂量组3只小鼠于染毒2 h后出现兴奋症状。小鼠脑组织PAG活性随染毒剂量的增加而递增,PAG mRNA水平则随染毒剂量的增加而逐渐降低,其中,80 mg/kg剂量组小鼠脑组织PAG活性及其mR-NA水平与对照组相比,差异有统计学意义。 更多还原     

维生素E对氯氰菊酯致小鼠肺组织氧化损伤的拮抗

目的 研究维生素E对氯氰菊酯致小鼠肺组织氧化损伤的拮抗.方法 雄性昆明小鼠随机分为6组,包括1个阴性对照(花生油)组、3个氯氰菊酯(10、20和40 mg/kg)染毒组、1个维生素E(100 mg/kg)组和1个高剂量氯氰菊酯(40 mg/kg)加维生素E(100 mg/kg)组,灌胃7d,测定肺组织匀浆活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量和肺组织细胞DNA-蛋白质交联(DPC)系数;并观察病理损伤.结果 随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,肺组织的脏器系数、ROS、MDA含量和DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系.除20 mg/kg组的MDA、DPC系数外,20、40 mg/kg组上述指标与对照组差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).病理学观察可见20、40 mg/kg组肺泡壁血管扩张充血,肺泡壁增厚,肺泡组织血管扩张充血.与高剂量染毒组相比较,高剂量染毒加维生素E组肺组织的脏器系数、ROS、MDA含量和DPC系数均有下降,GSH含量上升(P＜0.05,P＜0.01).结论 较高剂量(20、40 mg/kg)的氯氰菊酯能造成小鼠肺组织的氧化损伤和病理损伤,且可以被维生素E的抗氧化作用所拮抗.