虹膜色素上皮细胞自体移植研究进展

虹膜色素上皮细胞(IPE)白体移植术是继视网膜色素上皮细胞(RPE)移植术之后发展起来的一项新技术。它不但避免了异体RPE移植的免疫排斥反应，还克服了白体RPE移植取材操作的困难，为老年性黄斑变性等与视网膜色素上皮损害相关眼病的治愈带来了新的希望。本介绍IPE的体外培养研究、IPE白体移植的动物实验、临床初步研究及最新进展。     

虹膜色素上皮移植

自体虹膜色素上皮容易获得，能够吞噬光感受器外节盘膜，使得用它替代视网膜色素上皮细胞移植到视网膜下腔以治疗视网膜色素上皮变性疾病成为可能。对IPE和视网膜色素上皮(RPE)细胞的功能进行了比较，并对IPE细胞的培养方法，用IPE细胞移植治疗老年性黄斑变性和视网膜色素变性等技术进行了综述。     

自体虹膜色素上皮细胞移植治疗视网膜色素上皮细胞变性研究

目的:研究自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法:采用酶-机械分离-酶消化法获取高纯度、高活力的IPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果:IPE移植术后患者眼底移植区色素沉着减少,未见渗出,出血,视网膜平,视力入院时的0.15,术后2wk提高至0.2。多焦ERG显示移植区P1波平均反应密度上升。结论:自体虹膜色素上皮细胞移植有望成为视网膜色素上皮细胞变性疾病治疗的一新方法。     

虹膜色素上皮自体移植的现状及展望

随着对虹膜色素上皮(iris pigmant epithelium,IPE)细胞形态及功能研究的深入,IPE细胞有望取代视网膜色素上皮(retinal pigment epithelinm,RPE)细胞用于自体移植,从而避免了异体RPE移植的免疫排斥反应和自体RPE取材困难的问题.本文就IPE细胞生理功能和IPE细胞移植的动物试验和临床研究及进展进行了综述.     

自体色素上皮细胞移植

随着视网膜色素上皮 (RPE)细胞移植研究的不断深入 ,人们对于它可用于治疗老年性黄斑变性 (ARMD)等视网膜色素上皮变性类疾病寄予了希望。但异种或同种异体的RPE细胞移植总不能完全避免免疫排斥反应 ,所以人们开始研究自体色素上皮细胞的移植。本文对近年来有关自体色素上皮细胞 (包括虹膜色素上皮细胞和视网膜色素上皮细胞 )的形态、功能、取材及移植等方面的研究作一综述。     

虹膜色素上皮细胞自体移植的研究

虹膜色素上皮 (iris pigment epithelium ,IPE)与视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)都来源于神经外胚层 ,二者可能具有许多相似的功能 [1 - 4 ] 。国外进行了 IPE细胞移植的研究 ,但主要是异种或同种异体间的移植。自体 IPE细胞移植已应用于临床 ,然而 ,自体 IPE细胞移植后移植结果的组织学研究报道甚少。我们将兔的自体 IPE细胞移植到视网膜下腔并对其进行了光镜和电镜观察 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　IPE细胞的准备12只健康有色兔 (青岛大学医学院动物中心提供 ) ,摘除右眼 ,分别取其 IPE细胞单独培…     

眼部色素上皮培养与移植的最新进展

视网膜色素上皮 (retinal pigm entepithelium,RPE)具有重要的生理功能 ,一旦其功能或结构异常 ,将导致许多眼底病。近年来用 RPE移植已成为一个重要课题 ,但随着研究的深入 ,发现移植异体 RPE发生慢性排斥反应 ,影响手术效果或导致手术失败。鉴于虹膜色素上皮 (iris pigment epitheli-um,IPE)与 RPE具有相同的胚胎起源 ,可能具有 RPE的某些功能 ,于是人们也对 IPE进行了研究。本文对 RPE及 IPE培养与移植的最新进展进行简要综述。1　色素上皮的培养1.1　培养　由于 RPE生理状态下呈单层上皮细胞排列结构 ,具有极性 ,于是学者对…     

自体色素上皮细胞移植

随着视网膜色素上皮（RPE）细胞移植研究的不断深入，人们对于它可用于治疗老年性黄斑变性（ARMD）等视网膜色素上皮变性类疾病寄予了希望。但异种或同种异体的RPE细胞移植总不能完全避免免疫排斥反应，所以人们开始研究自体色素上皮细胞的移植，本对近年来有关自体色素上皮细胞（包括虹膜色素上皮细胞和视网膜色素上皮细胞）的形态、功能、取材及移植等方面的研究作一综述。     

兔眼虹膜和视网膜色素上皮细胞移植的形态学观察

目的 比较有色兔虹膜色素上皮及视网膜色素上皮细胞在白兔视网膜下腔的生长状况。 方法 分离培养有色兔的IPE及RPE细胞。采用内路法在8只白兔16眼中进行了IPE和RPE细胞悬液的移植,其中左眼移植IPE细胞,右眼移植来自同一供体兔的RPE细胞。8只兔分别在2周(n=3)、4周(n=3)和6周(n=2)时处死。对眼球壁做光镜和电镜检查。 结果 IPE和RPE细胞在异体视网膜下腔存活,绝大多数贴附在Bruch’s膜上,并具有极性,细胞基底部有大量的皱褶,细胞顶部有一些微绒毛。6周时未见移植细胞周围有炎性细胞浸润。 结论 移植的IPE和RPE细胞可以在视网膜下腔存活,它们的形态均和原先RPE细胞类似。IPE细胞有望替代RPE细胞用于移植。     

兔虹膜色素上皮细胞和视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子及其受体FLK-1 mRNA表达的对比研究

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (FLK 1)mRNA在健康兔眼虹膜色素上皮 (IPE)细胞和视网膜色素上皮 (RPE)细胞中的表达特征 ,探讨IPE细胞代替RPE细胞用于自体移植治疗年龄相关性黄斑变性 (ARMD)及RPE异常相关疾病的可行性。方法　分离成年健康有色家兔的IPE细胞和RPE细胞 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测其VEGF及其受体FLK 1mRNA的表达情况。结果　兔眼IPE细胞和RPE细胞均可表达VEGF和FLK 1mRNA。IPE细胞的VEGF和FLK 1mRNA含量低于RPE细胞。IPE细胞的VEGFmRNA的表达量约为RPE细胞的 4 4 6 2 % ,FLK 1mRNA的表达量约为RPE细胞的 5 2 36 % ,差异均有显著意义 (P <0 0 0 1)。结论IPE细胞VEGF及其受体FLK 1mRNA的表达水平比RPE细胞低 ,IPE细胞代替RPE进行细胞移植可能更为有利。     

虹膜周边切除手术标本的色素上皮细胞体外培养与超微结构研究

目的：体外培养虹膜周边切除标本中的色素上皮细胞(iris pigment epithelium，IPE)，并进行生物学检测。方法：用酶-显微解剖-酶分离法培养IPE细胞并传代，免疫组化方法鉴定，透射电镜观察超微结构。结果：酶-显微解剖-酶分离法在小标本可成功获得较高纯度和密度的IPE细胞。其形态与免疫标志物表达与视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞相似。结论：培养的IPE细胞为自体移植提供了较可靠的细胞来源。     

兔眼IPE与RPE细胞膜表面K-NPPase酶组织化学的电镜图像分析

目的:为了探讨自体虹膜色素上皮细胞(IPE)能否代替视网膜色素上皮细胞(RPE)移植到视网膜下腔执行物质转运功能,对兔眼IPE与RPE细胞膜表面的Na ,K -ATPase采用K-NPPase酶组织化学技术进行定位和分析比较。方法:家兔12只,取IPE和RPE组织固定,配制孵育液后进行K-NPPase酶组化孵育,制成电镜标本,采集图像,利用Metamorph/DP10/BX51系统进行分析。随机选取IPE细胞膜以及RPE细胞顶端相邻K-NPPase颗粒两点间的距离进行测量。计算每组样本的均值±标准差(x±s),进行成组设计材料的t检验。结果:有色素组与无色素组汇总后的IPE细胞膜上K-NPPase颗粒的距离平均值40.16±1.19nm,RPE顶端微绒毛细胞膜上K-NPPase颗粒的距离平均值为41.07±1.78nm,两者之间的差异无显著性意义(0.5>P>0.2)。结论:兔眼IPE细胞膜表面与RPE细胞顶端微绒毛膜表面均有Na ,K -ATPase分布,采用K-NPPas酶组化电镜观察到的兔眼IPE细胞与RPE细胞可能具有相似的物质转运功能。     

兔眼虹膜色素上皮细胞自体视网膜下移植的研究

目的探讨兔眼虹膜色素上皮(IPE)细胞的自体移植技术并进行术后移植区的细胞形态学观察。方法通过虹膜全切法获取10只新西兰白兔的虹膜,采用酶-机械分离-酶消化的方法分离IPE细胞,用5溴脱氧尿嘧啶(5-Brdu)标记原代或一代的细胞。将标记过的IPE细胞悬液通过内路法分别植入对侧眼的视网膜下腔。术后2、4、6周摘除眼球对移植区进行光镜、电镜检查。结果经免疫学鉴定纯化培养了兔眼IPE细胞。术后光镜显示移植的IPE细胞成单层贴附在原始的视网膜色素上皮(RPE)细胞上。电镜结果证实移植的IPE细胞尖端微绒毛与光感受器外节连接,邻近的光感受器细胞显示正常结构。结论采用内路法可成功地将细胞悬液植入家兔视网膜下腔。6周内移植的自体IPE细胞在视网膜下腔存活,与原先的RPE细胞生长状态类似,邻近的光感受器细胞无形态改变。     

虹膜色素上皮细胞移植的研究进展

虹膜色素上皮(IPE)细胞是一种胚胎发育与视网膜色素上皮(RPE)细胞同源的生长细胞,不仅在结构上与RPE细胞有着惊人的相似之处,而且在吞噬视杆细胞外节段和分泌细胞因子等功能方面也有显著一致性.利用基因转染等方法 将IPE细胞移植到视网膜下腔不仅可以应用于遗传性视网膜变性,老年性相关变性等眼科疾病的治疗,同时还可以应用于神经退行性疾病的治疗.关注IPE细胞的功能特性及其移植方法 的研究现状和应用前景具有重要的临床意义.现就IPE细胞的功能特性及研究进展作一综述.     

虹膜色素上皮细胞移植的研究进展

虹膜色素上皮(IPE)细胞是一种胚胎发育与视网膜色素上皮(RPE)细胞同源的生长细胞,不仅在结构上与RPE细胞有着惊人的相似之处,而且在吞噬视杆细胞外节段和分泌细胞因子等功能方面也有显著一致性.利用基因转染等方法 将IPE细胞移植到视网膜下腔不仅可以应用于遗传性视网膜变性,老年性相关变性等眼科疾病的治疗,同时还可以应用于神经退行性疾病的治疗.关注IPE细胞的功能特性及其移植方法 的研究现状和应用前景具有重要的临床意义.现就IPE细胞的功能特性及研究进展作一综述.     

兔虹膜和视网膜色素上皮细胞的体外培养比较

目的 观察比较有色素兔虹膜色素上皮(IPE)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的体外生长状况。方法 采用酶消化法及酶辅助机械分离法分别分离IPE和RPE细胞。观察培养的两种细胞的生长状况，并对其进行免疫组化鉴定。结果 原代IPE及RPE细胞大多呈圆形或六边形，细胞内充满了黑色素颗粒。随着传代的增加，呈梭形或纤维细胞样生长的细胞增多，细胞中的色素颗粒也逐渐减少。细胞角蛋白免疫组化染色显示IPE及RPE细胞绝大多数呈棕黄色阳性反应。Desmin兔疫组化染色显示IPE细胞中阳性细胞约占5％。结论 分离培养的IPE和RPE细胞纯度很高。IPE细胞中绝大多数为后层IPE细胞。IPE和RPE细胞的形态及体外生长特点类似。     

自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年黄斑变性近期疗效观察

目的 探讨自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植术治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效.方法 回顾性分析30例确诊为渗出性老年性黄斑变性的患者,采用脉络膜新生血管膜切除联合自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植手术方法.手术前后行视力、荧光素眼底血管造影、吲哚氰绿眼底血管造影、多焦视网膜电图、光学相干断层扫描检查评价疗效.结果 移植术后随访6个月时,25例(83.33%)患者视力获得提高,2例(6.66%)患者视力不变,3例(10%)患者视力下降;所有患者黄斑区RPE植片平铺在位,未见CNV复发.结论 自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效确切,是治疗渗出性老年性黄斑变性安全有效的手段之一.     

传代后视网膜色素上皮细胞MERTK基因表达变化的研究

目的:检测传代后的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)MERTK基因表达的变化,明确传代的异体RPE移植的可行性。方法:离体培养原代的人视网膜色素上皮细胞,将原代细胞以1∶3比例进行传代至第6代,以SYBRGreen I real time RT-PCR方法检测不同传代数的RPE细胞MERTK基因表达的水平,采用2-ΔΔCT方法计算定量PCR的数值进而比较各代MERTK基因表达的的变化。结果:原代及传代的RPE细胞均表达MERTK基因。第二代RPE细胞MERTK基因表达水平与原代相同,第3～6代RPE细胞MERTK基因表达水平均明显低于原代。结论:传代的RPE细胞可以作为异体视网膜色素上皮细胞移植的细胞来源,但以第二代的RPE细胞为最佳选择。     

自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年黄斑变性近期疗效观察

目的 探讨自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植术治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效.方法 回顾性分析30例确诊为渗出性老年性黄斑变性的患者,采用脉络膜新生血管膜切除联合自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植手术方法.手术前后行视力、荧光素眼底血管造影、吲哚氰绿眼底血管造影、多焦视网膜电图、光学相干断层扫描检查评价疗效.结果 移植术后随访6个月时,25例(83.33%)患者视力获得提高,2例(6.66%)患者视力不变,3例(10%)患者视力下降;所有患者黄斑区RPE植片平铺在位,未见CNV复发.结论 自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效确切,是治疗渗出性老年性黄斑变性安全有效的手段之一.     

自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年黄斑变性近期疗效观察

目的 探讨自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植术治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效.方法 回顾性分析30例确诊为渗出性老年性黄斑变性的患者,采用脉络膜新生血管膜切除联合自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植手术方法.手术前后行视力、荧光素眼底血管造影、吲哚氰绿眼底血管造影、多焦视网膜电图、光学相干断层扫描检查评价疗效.结果 移植术后随访6个月时,25例(83.33%)患者视力获得提高,2例(6.66%)患者视力不变,3例(10%)患者视力下降;所有患者黄斑区RPE植片平铺在位,未见CNV复发.结论 自体带Bruch膜视网膜色素上皮复合体移植治疗渗出性老年性黄斑变性近期疗效确切,是治疗渗出性老年性黄斑变性安全有效的手段之一.