虹膜色素上皮细胞移植的研究进展

虹膜色素上皮(IPE)细胞是一种胚胎发育与视网膜色素上皮(RPE)细胞同源的生长细胞,不仅在结构上与RPE细胞有着惊人的相似之处,而且在吞噬视杆细胞外节段和分泌细胞因子等功能方面也有显著一致性.利用基因转染等方法 将IPE细胞移植到视网膜下腔不仅可以应用于遗传性视网膜变性,老年性相关变性等眼科疾病的治疗,同时还可以应用于神经退行性疾病的治疗.关注IPE细胞的功能特性及其移植方法 的研究现状和应用前景具有重要的临床意义.现就IPE细胞的功能特性及研究进展作一综述.     

转甲状腺素蛋白作为高度近视血清潜在分子标记物的研究

Objective To observe the abnormal expression of transthyretin in serum and vitreous of high myopia patients.Methods 116 patients(50 males and 66 females)with high myopia,diagnosed by retinoscopic reflex,slit-lamp microscope,indirect ophthalmoscope and Iol-Master,were enrolled.The patients had an average age of(49.7±12.3)years and average diopter of(-10±4.2)D.The control group had 86 healthy individuals(42 males and 44 females)with an average age of(48.5±10.5)years.According to the findings of indirect ophthalmoscope and optical coherence tomography(OCT)examination,the patients were classified as foveal detachment,macular hole,choroidal neovascularization,epimacular membrane.retinal scar and no significant pathological changes.2 ml peripheral blood samples were taken from all the subjects.The vitreous samples of high myopia patients with foveal detachment and macular hole (20 patients.20 eyes)were collected before pars plana vitrectomy.LTQ-MASS was performed on 16 serum samples of patients and 16 control serum samples.Western blot and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)were used to detect serum transthyretin expression in high myopia groups(n=100)and control group(n=80).Vitreous samples(n=20)and corresponding serum samples were further analyzed by ELlSA.Meanwhile,the relationship between visual acuity after surgery and transthyretin expression level in vitreous were analyzed.Results LTQ-MASS detected 4 proteins differentially expressed in the serum of patients and control group,transthyretin was the most significantly increased protein in high myopia patients.Western blot validated that serum transthyretin of high myopia group was much higher than that of the control group(t=3.68,P＜0.05).High myopia patients with macular hole and macular detachment had much higher serum and vitreous transthyretin than that of control group(F=9.28,P＜0.01).Patients with higher vitreous transthyretin had better postoperative visual acuity.Conclusions The transthyretin level increases significantly in serum and vitreous of high myopia patients,and it correlated with ocular pathologies and visual outcomes.     

视网膜新生血管动物模型的制备

目的制备视网膜新生血管动物模型,为今后的视网膜新生血管相关疾病的研究提供稳定的模型.方法以出生7d的C57BL/6J小鼠56只,雌雄兼有,随机将28只放入75%±2%高氧环境,控制室温23℃±2℃,日光照明,5d后返回空气环境;另一组28只置于23℃±2℃空气环境中饲养作为对照.随机于出生后12、14、17、21、22、25d取高氧组和空气组小鼠行视网膜铺片、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组化染色,观察VEGF的表达情况,并对出生后17d小鼠的视网膜铺片、石蜡切片HE染色、VEGF免疫组化染色.结果高氧诱导组出生后17d视网膜无血管区面积,穿过视网膜内界膜细胞核计数明显高于空气组.血管内皮细胞VEGF的表达从出生后14d开始有阳性表达,阳性表达逐渐增强,出生后17d达到高峰,之后逐渐下降,持续至出生后21d.结论该模型为一种合适的视网膜新生血管动物模型.     

实验性碱烧伤角膜新生血管的观察研究

目的利用碱烧伤诱导实验性角膜新生血管(CRNV)的发生,探讨定量分析CRNV和观察CRNV通透性的方法。方法取36只C57BL/6小鼠,随机分为:实验组(n=30):采用浸润l mol/L NaOH的滤纸片接触角膜5 s,诱导碱烧伤CRNV;对照组(n=6):不进行任何处理。于碱烧伤后第4、7、10、14天测量CRNV面积;第3、7、10、16、28天取眼球做切片的HE染色行组织学检查;第10天使用CD31抗体标记CRNV并计数,行荧光血管造影观察CRNV的通透性;每日观察角膜溃疡和前房积血等情况。结果实验性碱烧伤CRNV存在生长和消退的过程。无菌性角膜溃疡和前房积血较为常见,发生率分别为6.7%和10.0%。眼球切片的HE染色可观察到不同时间角膜组织的病理变化。碱烧伤后第10天,CD31抗体免疫组化标记并记数CRNV,荧光血管造影可观察到显著的CRNV渗漏。结论CD31抗体免疫组化标记、记数CRNV及联合CRNV面积测量,是CRNV定量分析较为客观的方法;荧光造影是观察和记录CRNV通透性可行的方法。     

后巩膜加固术在高度近视性黄斑病变手术中的应用

近视性黄斑病变致盲率高,常用治疗手段为玻璃体切割术,然而单纯玻璃体切割术对于已出现严重后巩膜葡萄肿的超高度近视患者疗效欠佳。近年来临床应用玻璃体切割术联合后巩膜加固术治疗高度近视继发眼底病变,特别在黄斑劈裂及黄斑裂孔病例中,疗效肯定,前景可期。我们针对近年来后巩膜加固术的材料与术式变迁作一全面综述,并进一步讨论其应用于眼底手术中的发展远景。     

PI3K/Akt信号通路介导的胰岛素促RPE细胞增生及分泌转化生长因子β2作用

背景 胰岛素具有促进近视发生的作用,胰岛素受体已被证实存在于视网膜色素上皮(RPE)细胞上,转化生长因子β2(TGF-β2)是RPE细胞分泌的重要的近视信号因子之一.目的 研究胰岛素是否通过磷脂酰肌醇-3-羟基酶/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)通路促进RPE细胞增生及分泌TGF-β2.方法 使用含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基常规培养人RPE细胞株ARPE-19细胞,分别将10×103 U(商品单位)/ml胰岛素、LY294002、10× 103 U/ml胰岛素+LY294002、Wortmanin和10× 103 U/ml胰岛素+Wortmanin20 μmol/L各20μl加入培养基,另设常规培养的细胞作为空白对照.作用后48 h,采用MTS法检测各组RPE细胞的增生情况,采用ELISA法检测各组RPE细胞上清液中TGF-β2质量浓度,以评估细胞分泌TGF-β2的能力;各种药物作用后1h和2h,采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测各组细胞中TGF-β2mRNA的相对表达量.结果 MTS结果显示,胰岛素+LY294002组RPE细胞的增生值(A值)明显低于胰岛素组(0.75±0.03 versus0.98±0.04),差异有统计学意义(P＜0.05),而胰岛素+Wortmanin组RPE细胞增生与胰岛素组相比,差异无统计学意义(0.97±0.07 versus 0.98±0.04,P＞0.05).ELISA法检测结果显示,胰岛素+LY294002组和胰岛素+Wortmanin组RPE细胞上清液中TGF-β2质量浓度分别为(11.59±2.85)pg/ml和(49.16±10.94) pg/ml,明显低于胰岛素组的(548.50±35.18) pg/ml,差异均有统计学意义(P＜0.05),且胰岛素+LY294002组细胞上清液中TGF-β2质量浓度的下降值明显高于胰岛素+Wortmanin组,差异有统计学意义(t=8.131,P=0.000).RT-PCR结果显示,药物作用后1h和2h,胰岛素+LY294002组和胰岛素+Wortmanin组细胞中TGF-β2mRNA的相对表达量均明显低于胰岛素组,差异均有统计学意义(P＜0.05),胰岛素+ LY294002组细胞中TGF-β2mRNA相对表达量的下降程度稍大于胰岛素+Wortmanin组,作用后1h差异有统计学意义(t=4.176,P=0.014),但作用后2h差异无统计学意义(t=0.756,P=0.492).结论 胰岛素可以通过PI3 K/Akt途径促进RPE细胞增生,并促进RPE细胞分泌TGF-β2以进行信号传递,可能是胰岛素促进近视发生的机制之一.     

青光眼引流阀植入术与小梁切除术对巩膜扣带术后难治性青光眼疗效

目的 评价Ahmed青光眼引流阀植入术与小梁切除术在巩膜扣带术后难治性青光眼治疗中的疗效比较.方法 接受滤过手术的巩膜扣带术后难治性青光眼41例(41眼).其中Ahmed青光眼引流阀植入术19例(阀门组),小梁切除术22例(小梁组).分析两组术后1年内的成功率、眼压降幅、视力、并发症和合并用药情况.结果 12个月阀门组的成功率为63.16％;小梁组为31.82％.阀门组成功率显著高于小梁组(X2=4.027,P=0.0427).阀门组术后12个月眼压均值为(16.5 ±4.9)mm Hg;小梁组术后12个月为(19.8 ±4.3)mm Hg.阀门组眼压显著低于小梁组(t=2.1102,P=0.0427).两组术后视力变化、并发症及合并青光眼药物使用情况均无差异.结论 Ahmed青光眼引流阀植入术较之小梁切除术,具有更为持久的降眼压作用和相似的安全性,是治疗巩膜扣带术后难治性青光眼的有效方法 .     

特发性黄斑裂孔手术后黄斑结构变化及其与视功能的关系

目的 观察分析特发性黄斑裂孔(IMH)患者手术前后黄斑结构变化及其与视功能预后的关系.方法 接受玻璃体切割手术治疗的47例IMH患者47只眼纳入研究.所有患者均经最小分辨角对数视力表(logMAR)最佳矫正视力(BCVA)、裂隙灯显微镜、间接检眼镜、光相干断层扫描(OCT)、B型超声及微视野检查确诊,并接受标准三切口经睫状体平坦部玻璃体切割手术治疗.手术后1、3、6个月,采用手术前相同设备和方法行相关检查,观察患者手术前后BCVA、黄斑区光敏感度、黄斑裂孔直径、光感受器内外节连接(IS/OS)缺损直径及外界膜(ELM)缺损直径变化,分析手术前后IS/OS缺损直径、ELM缺损直径、黄斑区敏感度与BCVA的相关性.结果 手术后1、3、6个月,患者平均logMAR BCVA均较治疗前提高,差异均有统计学意义(t=16.4,35.7,20.7;P＜0.05);平均黄斑裂孔直径较手术前明显减小,差异均有统计学意义(t=7.7,7.7,7.7;P＜0.05);平均IS/OS缺损直径均较治疗前减小,差异均有统计学意义(t=24.1,19.3,27.4;P＜0.05);平均ELM缺损直径均较治疗前减小,差异均有统计学意义(t=20.5,6.7,15.8;P＜0.05);黄斑区平均光敏感度均较治疗前提高,差异均有统计学意义(t=-13.8,-17.9,-2.5;P＜0.05).相关性分析发现,手术前IS/OS、ELM缺损直径均与手术前黄斑区敏感度相关(r=-0.55,-0.53;P＜0.05),而与手术前BCVA关系不明显(r=0.13,0.13;P＞0.05).手术后1、3、6个月IS/OS、ELM缺损直径与BCVA及黄斑区敏感度均有明显相关性(P＜0.05).结论 手术后IMH患者平均logMAR BCVA及黄斑区平均光敏感度提高,平均IS/OS缺损直径及平均ELM缺损直径减小.手术后IS/OS缺损直径、ELM缺损直径与BCVA、黄斑区敏感度相关.     

新的眼科临床考核模式探索

目的为促进以学生有效掌握理论知识,提高临床实践能力,通过新的眼科临床教学考核模式的探索,为临床教学模式的变革积累相关经验。方法 (1)实施基础:依托我科目前的眼科检查设备,常见眼科疾病的各项临床资料均可以通过相关检查设备进行采集、保存;(2)考核环境的建立:基于上述基础,通过临床病例题库的建立,相应的考核软件的编制,基于网络平台,建立模拟临床环境的考核环境;(3)初步实践:进行基于网络的新的考核模式的实际应用,获得相关反馈。结果 (1)以CBL教学理念,初步建立基于临床病例的考核题库;(2)通过信息技术,建立了基于网络平台的临床模拟考核系统;(3)进行相关初步实践,获得反馈信息。结论新的以临床为导向的眼科考核模式将有助于培养医学生的临床实践能力,有助于推动目前的临床教学模式改革的探索。     

激光多普勒血流仪的进展及其在眼科的应用

眼部血流动力学的观察方法很多,而其中能够直接测量视网膜血管血流速度,且对组织无损伤的方法只有激光多普勒血流仪（Ｌａｓｅｒ Ｄｏｐｐｌｅｒ Ｖｅｌｏｃｉｍｅｔｒｙ,ＬＤＶ）。近年来,随着激光及计算机技术的不断发展,ＬＤＶ的仪器设备也日趋完善,并逐渐成为眼科临床与科研不可缺少的方法。现就其设备的发展、工作原理及其应用作一综述。