西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响

目的考察西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组(空白组)、西洋参总皂苷低剂量组[低剂量组,50 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷中剂量组[中剂量组,100 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷高剂量组[高剂量组,200 mg/(kg·d)]和β-萘黄酮阳性药对照组[阳性药组,80 mg/(kg·d)],预处理11 d后,观察大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性、CYP1A2 mRNA表达和CYP1A2酶蛋白表达情况,研究CYP1A2特异性探针底物非那西丁在预处理大鼠体内的药动学变化。结果预处理后,大鼠肝微粒体CYP1A2活性、mRNA和蛋白表达随西洋参总皂苷剂量升高有增加趋势,非那西丁在预处理大鼠体内代谢速率加快。结论西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性有一定诱导作用。     

质子泵抑制剂对药物代谢酶CYP1A2、NAT2的影响分析

目的 以健康人群作为研究对象,从代谢表型探讨质子泵抑制剂与药物代谢酶CYP1A2、NAT2的关系.方法 以咖啡因作为药物代谢酶CYP1A2、NAT2的探针药物,用反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法测定尿液中咖啡因代谢物.结果 健康人群CYP1A2酶活性指标呈对数正态分布,NAT2酶活性活性指标呈两态分布.结论 以咖啡因探针法测定正常人肝脏药物代谢酶CYP1A2、NAT2活性的RP-HPLC梯度洗脱直接进样法,为国内深入开展CYP1A2、NAT2代谢酶的研究开拓了一种新方法.     

中国人肝微粒体中细胞色素P450酶含量和活性的个体间差异(英文)

目的:比较不同中国人肝微粒体中几种重要细胞色素P450(CYP)的酶含量和活性。方法:运用West-ern斑点分析和光密度扫描,对17个汉族、17个壮族和8个苗族受试者肝微粒体中的细胞色素P4501A2(CYP1A2)、2C9及3A4进行定量;非那西丁、甲磺丁脲、异喹胍和奥美拉唑分别用于体外测量CYP1A2、2C9、2D6及3A4的活性。结果:CYP1A2、2C9及3A4的含量和活性具有很大的个体间变异,另外CYP2D6的活性在各样本间也有很大差异;CYP3A4(32％)是中国人肝微粒体中含量最丰富的CYP,CYP2C9(19％)和CYP1A2(16％)的含量也很可观;除了CYP1A2的含量和活性具有一定的种族和性别差异外,未发现其它CYP具有种族和性别差异;CYP1A2、2C9和3A4的酶蛋白含量分别和它们的活性具有很好的相关性。结论:我们的结果为在中国人中进行药物代谢研究提供了非常有价值的信息。     

Cocktail探针药物法评价灯盏花素对大鼠CYP450体内代谢活性的影响

目的用Cocktail探针药物法研究灯盏花素对大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP2D6体内代谢活性的影响。方法将大鼠随机分为3组,空白对照组、低剂量组和高剂量组。低剂量组和高剂量组分别尾静脉给予灯盏花素粉针剂1.8,5.4 mg.kg-1.d-1,空白对照组给予生理盐水,共14 d。各组分别于第15 d注射Cocktail探针溶液,用HPLC检测各探针药物的血药浓度,用DAS2.0计算药代动力学参数,评价相应的CYP450亚型的体内代谢活性。结果高剂量组美托洛尔的AUC和t1/2显著高于空白对照组,CL显著低于空白对照组(P<0.05)。低剂量组美托洛尔虽然也有相同趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。各组咖啡因、氯唑沙宗和甲苯磺丁脲的主要药代动力学参数均无显著差异(P>0.05)。结论高剂量灯盏花素粉针剂可明显抑制大鼠CYP2D6的体内代谢活性,而对CYP1A2、CYP2E1和CYP2C9无显著性影响。     

HPLC法测定大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物含量及其应用

<正>细胞色素P450 1A2亚家族是近年来药物代谢研究领域的热点之一,与许多药物的相互作用有关[1]。非那西丁是CYP1A2酶的特异性底物,被广泛选择作为底物用于体内外测定酶活性[2]。本研究建立大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物对乙酰氨基酚含量的HPLC测定方法,并对血浆样品进行方法学考察,为进一步确证药物及化学异物对CYP1A2酶活性的影响提供可靠的方法学基础。同时,应用所建立的方法以体内、体外方式评价了甘草水提液对     

苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶5个亚型的体外抑制作用

目的研究苦碟子注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶的体外抑制作用。方法制备大鼠肝微粒体。将苦碟子注射液分别与混合探针药物非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、睾酮和氯唑沙宗共同孵育,UPLC-MS/MS法检测各探针药物的代谢物。结果在测定浓度范围内,苦碟子注射液对CYP2E1、CYP2C9和CYP2C19的活性抑制率小于50%;对CYP1A2、CYP3A4的IC_(50)值分别为12.68%、8.11%,远高于临床日用药浓度0.20%~0.80%。结论在正常剂量下,苦碟子注射液对大鼠CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19几乎不显示抑制作用,对CYP1A2、CYP3A4几乎没有抑制作用。     

人细胞色素P450 1A2的异源表达及代谢活性测定

目的 获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2(CYP1A2)重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究。方法 以人肝组织提取的总RNA为模板,RT- PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质粒pFastBac-CYP1A2,转化入DH10Bac 大肠杆菌,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-CYP1A2,以之转染草地夜蛾细胞(Sf9),与细胞色素氧化还原酶(CYPOR)进行共表达。利用蛋白质印迹分析鉴定其表达,并以非那西丁为底物,利用HPLC对其进行代谢活性测定。 结果 蛋白质印迹分析表明人CYP1A2蛋白在Sf9细胞中成功表达,且该重组酶对非那西丁的Km值为(82.04±11.39)μmol·L^-1(n=3),Vmax值为(1.78±0.26)nmol·min^-1·mg^-1蛋白(n=3),表观清除率Clint值为0.02 mL·min^-1·mg^-1蛋白。结论 利用杆状病毒/昆虫细胞系统,可获得具代谢活性的人CYP1A2重组酶,该酶可进一步用于其他底物的I相代谢研究。     

CYP2B和CYP3A参与药物代谢的影响因素及对氯胺酮代谢的影响

目的:为进一步研究氯胺酮在成瘾动物体内代谢动力学规律及细胞色素P_(450)活性的调控和相关性研究提供参考。方法:以"细胞色素P_(450)""性别""氯胺酮""CYP2B""CYP3A""Sex""Ketamine"等为关键词,组合查询1980-2016年在Pub Med、Elsevier、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献,对CYP2B和CYP3A参与药物代谢的诱导、抑制和性别等影响因素及对氯胺酮代谢的影响进行综述。结果与结论:共检索到相关文献256篇,其中有效文献62篇。CYP2B和CYP3A是重要的细胞色素P_(450),二者参与代谢了临床大多数药物,包括氯胺酮。诱导、抑制和性别差异等因素主要是通过改变细胞色素P_(450)的基因表达和蛋白表达来影响药物在动物体内代谢的。氯胺酮是一种被广泛滥用的药物,具有成瘾性和个体的耐受差异性。通过研究细胞色素P_(450)的基因表达和蛋白表达有利于指导研究氯胺酮在成瘾动物体内的特殊代谢动力学规律,以及为阐释成瘾动物体内的细胞色素P_(450)活性的调控机制和相关性研究提供理论支持。     

细胞色素P450的工具药选择及种属差异的研究进展

药物对代谢酶的影响以及代谢产生的药物相互作用与药物安全性密切相关。细胞色素P450(CYP)是参与内、外源性化合物I相代谢反应的重要超家族酶系。特异性探针、诱导剂、抑制剂以及实验动物模型广泛应用于CYP介导的代谢途径以及药物相互作用研究。已知CYP底物存在明显重叠性,且表达调控机制种属差异显著,故研究中选择适当的实验动物以及特异性的探针、诱导剂和抑制剂,成为影响数据外推的关键问题。本文简要综述了CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A4/5的常用体内外探针、诱导剂、抑制剂以及动物种属表达调控的差异。     

聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

目的采用Cocktail混合探针药物法,探究聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温80)对大鼠体内Cyp450同工酶活性的影响,为提高临床低生物利用度药物的疗效提供新的途径,也为药物研发领域研制新型制剂选择合适的辅料提供理论依据。方法选用非那西丁、奥美拉唑、安非他酮和咪达唑仑分别作为大鼠体内4种Cyp450酶(Cyp1a2、Cyp2c11、Cyp2b1、Cyp3a1)的探针药物。SD雄性大鼠连续尾静脉注射吐温80溶液14 d,第14日给药30 min后,尾静脉注射混合探针药物后于各时间点取血。采用LC-MS/MS法测定试验组和对照组混合探针药物的血药浓度,用DAS 2.0软件拟合药代动力学参数。结果吐温80连续尾静脉注射2周后,与空白对照组相比,非那西丁、奥美拉唑、安非他酮的代谢明显减慢,而咪达唑仑的代谢无明显差异。结论吐温80对大鼠体内Cyp2c11、Cyp2b1、Cyp1a2酶有明显抑制作用,而对大鼠体内Cyp3a1无明显影响。因此,在临床上吐温80与CYP1A2、CYP2B6、CYP2C19酶相关的底物合用时,应注意给药剂量,防止药物在体内的血药浓度过高从而导致不良反应。     

黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶活性影响的实验研究

目的通过体内和体外实验研究黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶的活性影响。方法建立体外"cocktail"反应体系,利用LC/MS/MS法测定酶代谢产物,计算黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9和CYP2C19亚酶活性的影响;大鼠随机分为对照组和实验组,不同浓度黄芪颗粒和黄芪注射液连续灌胃10 d,制备肝微粒体并进行"cocktail"反应,评价两种药物体内对大鼠CYP1A2、CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性影响。结果在体外"cocktail"实验中,黄芪颗粒和黄芪注射液明显地抑制了CYP2D6、CYP2C19和CYP1A2亚酶活性,而二者对于CYP2C9亚酶活性无影响。在大鼠灌胃给药实验中,黄芪颗粒在剂量32、160和800 mg.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性2.13、3.23和2.20倍,黄芪注射液在剂量0.16、0.8、4 g.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性1.65、2.26和2.89倍,而二者均未诱导CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性增加。结论黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP2D6、CYP2C19活性有抑制作用,对大鼠CYP1A2活性有诱导作用。     

重组肝CYP3A4与CYP3A29细胞微粒体药物代谢动力学比较

目的 比较巴马小型猪CYP3A29和人CYP3 A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体的药物代谢特征,在分子水平为巴马小型猪作为临床前药物代谢实验动物提供科学依据.方法 以CYP3A特异性代谢底物硝苯地平、睾酮及其抑制药酮康唑为探针药物,将探针药物与重组CYP3A4、CYP3A29细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,高效液相色谱法检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析.结果 巴马小型猪CYP3A29与CYP3A4在硝苯地平和睾酮代谢差异无统计学意义(P＞0.05).酮康唑的抑制活性为:当代谢底物为硝苯地平时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.090,0.132 μmol·L-1(P＜0.05);当代谢底物为睾酮时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.056,0.032 μmol·L-1(P＜0.05).结论 重组CYP3A29与CYP3 A4细胞微粒体对硝苯地平和睾酮活性差异不显著;酮康唑对重组CYP3A29与CYP3A4细胞微粒体硝苯地平和睾酮代谢活性有差异.     

Cocktail探针药物法评价胃炎灵颗粒对大鼠体内CYP450活性的影响

目的研究胃炎灵颗粒对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响。方法分别以右美沙芬(CYP2D6)、咪达唑仑(CYP3A4)、奥美拉唑(CYP2C19)、茶碱(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)和甲苯磺丁脲(CYP2C9)作为探针底物,大鼠6只,每日灌胃胃炎灵颗粒4 g/kg,采用LC-MS/MS测定给药前后大鼠体内6种探针药物的血药浓度。结果胃炎灵颗粒连续给药10 d后,与给药前相比,大鼠体内的右美沙芬(P <0. 01)、甲苯磺丁脲(P <0. 01)代谢减慢,氯唑沙宗(P <0. 01)代谢加快,奥美拉唑、咪达唑仑、茶碱的代谢无显著差异。结论胃炎灵颗粒在大鼠体内对CYP2D6酶产生中强抑制作用,对CYP2C9酶产生弱抑制作用,对CYP2E1酶产生轻微诱导作用,对CYP3A4、CYP2C19和CYP1A2基本没有影响。     

非那西丁探针法动态观测非酒精性脂肪肝大鼠发病进程中的CYP1A2活性

目的:建立探针法动态观测非酒精性脂肪肝大鼠发病进程中细胞色素(CY)P450酶系的活性。方法:制备非酒精性脂肪肝大鼠模型,分别于造模后第0、7、9、11、13、15、17周给予探针药物非那西丁并收集尿液,检测其中非那西丁代谢产物对乙酰氨基酚的各代谢指标以考察CYP1A2的活性变化情况,同时设立正常大鼠组为对照。含量检测采用高效液相色谱法,色谱柱为HypersilODS,流动相为甲醇-水(12.5∶87.5),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm。结果:对乙酰氨基酚的单位体重代谢量在第9周时达到最高,明显高于第0周和正常组((15.02±3.12)、(10.03±3.60)、(9.96±4.00)mg.kg-1),随后又逐渐降低,即CYP1A2的活性先升高后降低。结论:建立的探针法简便可靠,适用于大鼠尿中对乙酰氨基酚的测定以及CYP1A2活性的研究。     

细胞色素P450酶与维生素A的代谢

维生素A是人体必不可少的一种脂溶性维生素,在体内可以代谢为生物活性更高的视黄醛和视黄酸。细胞色素P450酶是重要的药物Ⅰ相代谢酶,在人体内有广泛的分布。它不仅参与了外源性物质的代谢,在内源性物质的代谢中也有重要的作用。CYP450酶在维生素A的代谢中扮演了重要的角色。人体内参与维生素A代谢的CYP450酶主要是CYP1,CYP2C,CYP2E,CYP3A和CYP26家族。同时其代谢物视黄酸可以与核受体(维生素A酸受体,视黄醇类X受体)相结合,诱导CYP450酶的表达和活性。本文通过对近几年来维生素A代谢的研究进展做一综述,阐述了CYP1、CYP2C、CYP2E、CYP3A和CYP26家族在维生素A代谢中的作用以及视黄酸诱导CYP450酶的分子机制。     

速效救心丸对大鼠体内CYP450酶活性影响的研究

目的采用Cocktail探针药物法研究速效救心丸对大鼠体内药物代谢酶CYP2E1和CYP3A4的影响,为临床用药提供参考。方法 Wistar大鼠,随机分为,①实验组:灌胃给予速效救心丸(给药体积0.5mL/100g,给药剂量64.8mg·kg-1);②对照组:灌胃给予等体积的纤维素钠混悬液。采用高效液相色谱法(HPLC)测定探针底物氯唑沙宗和咪达唑仑的血药浓度,计算其药代动力学参数,考察大鼠体内CYP2E1及CYP3A4酶的活性。结果实验组氯唑沙宗的代谢无显著性差异,咪达唑仑的代谢明显减慢。结论速效救心丸对大鼠的CYP2E1酶活性无明显影响,对CYP3A4酶活性有抑制作用。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。     

酮康唑对大鼠肝脏CYP450酶系的影响*

目的:观察酮康唑对大鼠肝细胞色素P450及其主要亚型的影响。方法:Sprague-Dawley大鼠用140,280,420μmol.kg-1.d-1酮康唑连续灌胃7 d,测定肝脏微粒体中总CYP450含量和CYP1A1,1A2,1B1,2B1/2,2E1和3A亚型活性。结果:不同剂量酮康唑给药后大鼠肝脏脏器系数、CYP1A1和1B1亚型活性明显增高(P<0.05,P<0.01);总CYP450含量和CYP3A活性显著降低(P<0.01);低剂量的酮康唑抑制CYP1A2和CYP2B1/2亚型的活性,高剂量却出现了诱导作用(P<0.05,P<0.01)。各剂量组对CYP2E1均无明显影响。结论:酮康唑对大鼠肝脏CYP450及主要药物代谢亚型CYP1A1,1A2,1B1,2B1/2和3A有影响,临床长期用药或与经肝脏CYP450代谢的药物联合应用时要注意监测血药浓度和肝脏功能,防止药物代谢减缓出现蓄积中毒或药物代谢加快而降低药效。     

人细胞色素P450 1A2的异源表达及代谢活性测定

目的获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2（CYP1A2）重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究。方法以人肝组织提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质粒pFastBac-CYP1A2,转化入DH10Bac大肠杆菌,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-CYP1A2,以之转染草地夜蛾细胞（Sf9）,与细胞色素氧化还原酶（CYPOR）进行共表达。利用蛋白质印迹分析鉴定其表达,并以非那西丁为底物,利用HPLC对其进行代谢活性测定。结果蛋白质印迹分析表明人CYP1A2蛋白在Sf9细胞中成功表达,且该重组酶对非那西丁的Km值为（82.04±11.39）μmol·L^-1（n=3）,Vmax值为（1.78±0.26）nmol·min^-1·mg^-1蛋白（n=3）,表观清除率Clint值为0.02mL·min^-1·mg^-1蛋白。结论利用杆状病毒/昆虫细胞系统,可获得具代谢活性的人CYP1A2重组酶,该酶可进一步用于其他底物的I相代谢研究。     

植物成分与细胞色素P450相互作用的研究进展

细胞色素P450（CYP450）是体内参与药物代谢的重要酶系,其活性在受到诱导或抑制后将干扰药物的作用。植物成分普遍存在于食物与药物中,与CYP450的相互作用将产生广泛影响。总结近年来植物成分与细胞色素P450的7个亚型CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4相互作用的研究结果,为临床上合理用药提供参考。