黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选及P40的降尿酸作用研究

目的:观察25个黄酮类化合物对黄嘌呤氧化酶(XOD)的抑制作用,研究P40对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠尿酸的影响。方法:把10%肝匀浆和待测化合物孵育后离心,取上清液测定黄嘌呤氧化酶的活力,并计算待测化合物对黄嘌呤氧化酶的抑制率。腹腔注射尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾抑制尿酸酶活性,造成高尿酸血症小鼠,观察不同给药途径供试化合物对小鼠血清尿酸水平的影响。结果:P40、P32和P7在终浓度1.9×10-4mol/L时对小鼠肝匀浆中黄嘌呤氧化酶的活力有较好的抑制作用,抑制率分别为54.7%、46.7%、32.5%,较比等摩尔别嘌醇(抑制率为31.89%)的抑制作用强;而P28有一定的激活作用,抑制率为-39.5%。腹腔注射P40和别嘌醇(20 mg/kg)后显著降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,与模型对照组相比有显著性差异。灌胃给P40后,100和200 mg/kg剂量组均显著降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平235.9±34.9,194.6±49.8μmol/L,且呈剂量依赖性,与模型对照组(279.4±32.5μmol/L)相比,有显著性差异。结论:P40、P32和P7对黄嘌呤氧化酶有较好的抑制作用,其作用等效于或优于等浓度的别嘌醇,但浓度效应关系不明显。腹腔注射和灌胃P40均能显著降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠的尿酸水平。     

氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型的研究及评价

目的:通过对小鼠梯度给药,探讨氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症急性模型的用药剂量,并对不同的高尿酸血症动物模型进行比较,为高尿酸血症研究中动物模型的选择提供参考。方法:小鼠腹腔注射不同剂量氧嗪酸钾,诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行尾静脉采血,测定血清尿酸值,得到小鼠急性高尿酸血症模型氧嗪酸钾合适剂量;再利用实时荧光定量技术检测小鼠给药后肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶基因表达水平的变化。依据文献显示的大鼠和树鼩高尿酸血症动物模型氧嗪酸钾用量和肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶mRNA表达水平的变化对三种动物模型进行分析比较。结果:小鼠腹腔注射600 mg/kg的氧嗪酸钾在给药后1～2 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;腹腔注射氧嗪酸钾1.5h后,小鼠黄嘌呤氧化酶/脱氢酶mRNA的表达水平较对照组上升2.14倍。综合本实验结果和文献分析显示氧嗪酸钾致三种动物高尿酸血症的用药剂量不同,其中树鼩所需最小。结论:尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾均能诱导出大鼠、小鼠和树鼩急性高尿酸模型,但药物的敏感性差异较大,提示树鼩可作为一种潜在的高尿酸动物模型。     

金钱草提取物对高尿酸血症小鼠的影响

目的:研究金钱草水提取物对高尿酸血症小鼠影响。方法:选择化学诱导剂氧嗪酸钾盐作为尿酸酶抑制剂,ip小鼠造成高尿酸血症模型。采用磷钼酸还原法测定小鼠血清尿酸水平。不同剂量金钱草水提取物ig给药,持续3d。结果:金钱草水提取物(5.2,10.8,20.8g·kg^-1·d^-1)能显著地减少高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,而对正常小鼠的血清尿酸水平无显著性影响。结论:金钱草水提取物对高尿酸血症小鼠具有降低血清尿酸水平作用。     

银杏叶提取物降尿酸及对黄嘌呤氧化酶抑制作用研究

目的：探讨银杏叶提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及对黄嘌呤氧化酶（XOD）的抑制作用。方法：以银杏叶不同剂量提取物灌胃,观察氧嗪酸钾盐诱导的急性高尿酸血症小鼠血清尿酸及XOD的含量变化,以及提取物对正常小鼠血清尿酸的影响。结果：银杏叶提取物不同剂量给药组小鼠血清尿酸水平和肝脏XOD活性与高尿酸血症组相比均有显著下降。银杏叶提取物对正常小鼠血清尿酸水平没有显著影响。结论：银杏叶提取物能够降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸。,抑制XOD活性是其降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的可能机制。     

基于生化指标的小鼠高尿酸血症模型考察

目的:建立小鼠高尿酸血症模型。方法:采用氧嗪酸钾灌胃给药的方式,分别考察给药剂量为150、300、450、600、750、900、1 050mg/(kg·d),给药时间为1、3、5、7、9、11、13天时对小鼠高尿酸血症模型的影响。运用半自动生化分析仪检测小鼠血清中尿酸、尿素、肌酐含量,通过统计分析,确定小鼠高尿酸血症模型的最佳给药剂量及给药时间。结果:给药剂量为750mg/(kg·d)、给药时间为7天时,小鼠体内尿酸、尿素、肌酐含量与空白组比较差异均具有统计学意义(P0.05),表明小鼠高尿酸血症模型造模成功。结论:小鼠高尿酸血症模型的最佳给药剂量为750mg/(kg·d),最佳给药时间为7天。     

水蛭素抗痛风作用及其机制研究

目的探讨水蛭素抗痛风作用及其机制。方法利用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,尿酸钠诱导大鼠急性痛风性炎症模型,观察水蛭素对急性高尿酸血症尿酸水平及其诱导炎症的影响;利用氧嗪酸钾诱导小鼠慢性高尿酸血症模型,观察水蛭素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮水平及血清、肝脏黄嘌呤氧化酶活性,肾脏的病理学改变、C-反应蛋白(CRP)水平及葡萄糖转运体9(GLUT9)表达的影响。结果水蛭素可显著降低次黄嘌呤引起的高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,显著抑制由尿酸钠引起的大鼠足跖急性肿胀;可显著降低由氧嗪酸钾引起的慢性高尿酸小鼠血清高尿酸水平,降低血清尿素氮水平,显著抑制GLUT9的表达,减轻肾脏病理学损伤。结论水蛭素具有显著的抗高尿酸血症及抗痛风作用,其机制可能与保护肾脏作用及调节GLUT9表达有关。     

壮药大力王醇提物对高尿酸小鼠利尿作用及尿酸水平的影响

目的观察壮药大力王醇提物的利尿作用,及对氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症的影响。方法采用小鼠代谢笼法测量给药后各组小鼠的排尿量,观察大力王醇提物的利尿作用,制备氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症模型,连续7天灌胃给予大力王醇提物1.0、2.0、4.0 g/kg,采用尿酸酶抑制剂法观察各组小鼠血清尿酸及肝脏XOD活性。结果小鼠给药后1~2小时和2~3小时,低、中、高剂量组的排尿量显著高于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05);给予大力王醇提物灌胃后与模型组相比高尿酸血症模型小鼠血清中尿酸含量显著减少29.18%、40.88%、45.36%(P0.01),血清中黄嘌呤氧化酶的活性显著降低26.66%、34.24%、39.47%(P0.01),同时肝脏中黄嘌呤氧化酶的活性也显著降低16.99%、22.70%、31.69%(P0.05)。结论大力王醇提物对小鼠有一定的利尿作用,大力王醇提物可显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平,且其作用机制与抑制黄嘌呤氧化酶的活性密切相关。     

高尿酸血症动物模型的实验研究

[目的]制备稳定持续、简便易行的高尿酸血症动物模型。[方法]采用单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤、腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤、酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾不同药物与不同浓度进行实验,检测模型动物血清尿酸值。[结果]单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤模型组尿酸值升高,与空白组比较有差异,但模型不稳定,重复性差,个体差异较大。腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤模型组尿酸值与空白组比较无差异。酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾模型组尿酸值升高,与空白组比较有显著性差异(P0.01),且模型稳定,个体差异小。[结论]采用酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾复制高尿酸血症动物模型最佳。     

益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用

该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg·d)制备高尿酸血症模型, 并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200, 100, 50 mg·kg·d), 给予氧嗪酸钾1 h后给药, 连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid, SUA), 肌酐(serum creatinine, SCre), 尿中尿酸(uric acid, UA)及肾脏中相关转运体的表达水平, 研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比, 益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸, 肌酐的水平, 升高尿尿酸水平;同时, 益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1, URAT1), 葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9, GLUT9) mRNA 的表达, 上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter, OCT), 肉毒碱转运体(carnitine transporter, OCTN)mRNA的表达, 具有促进肾脏尿酸排泄的作用。     

高良姜总黄酮降尿酸作用研究

目的:探讨高良姜总黄酮对高尿酸血症小鼠的影响。方法:以高良姜总黄酮高、中、低剂量(500、250、125mg/kg)、别嘌醇(40mg/kg)、苯溴马隆(20mg/kg)连续8d给相对应组别小鼠灌胃,末次给药后采用腹腔注射氧嗪酸钾(模型A)和次黄嘌呤(模型B)的方法建立2种小鼠高尿酸血症模型,检测小鼠血清尿酸(UA)和肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)含量。结果:高良姜总黄酮高、中、低剂量均能显著降低高尿酸血症小鼠血清UA和XOD活性(P0.05),并且高良姜总黄酮高剂量降UA和抑制XOD作用最为显著(P0.01)。结论:高良姜总黄酮可通过尿酸排泄和抑制尿酸生成的方式降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平。     

泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾盐致大鼠高尿酸血症模型的影响

目的探讨泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾盐致大鼠高尿酸血症的作用。方法取SD大鼠40只,随机分成4组,每组10只,采用氧嗪酸钾造模,分别为空白组、模型组、别嘌醇组(30 mg/kg)、泽泻乙醇提取物组(5 g/kg),共给药30 d,分别于给药第0、15、30天取血,测定血清尿酸、血清肌酐、血清尿素氮。给药第30天,取肝组织匀浆后测定肝脏黄嘌呤氧化酶活性,取右肾进行病理切片。结果与模型组比较,泽泻乙醇提取物能够降低血尿酸与血清肌酐的水平,同时抑制黄嘌呤氧化酶的活性。病理切片结果显示,泽泻乙醇提取物无明显肾脏毒性,并且肾小管病变程度较模型组轻。结论泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾致大鼠高尿酸血症具有明显的改善作用,其作用机制可能是通过抑制黄嘌呤氧化酶活性。     

蒲公英对急性高尿酸血症大鼠的影响

目的蒲公英具有利尿通淋作用而国内并无其关于抗高尿酸血症的文献报道,研究蒲公英不同极性成分对急性高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响。方法以氧嗪酸钾联合次黄嘌呤给药构建大鼠急性高尿酸血症模型,采用生化分析仪检测血尿酸浓度变化。结果与空白对照组和阴性对照组对比,蒲公英不同极性提取物的高、中、低剂量组血清尿酸含量均显著下降(P0.01)。与阳性对照组对比,乙酸乙酯组高剂量及中剂量有显著性差异(P0.01),分别为(538.20±152.88)μmoL·L~(-1)和(506.40±104.50)μmoL·L~(-1)。结论蒲公英乙酸乙酯提取物对急性高尿酸血症大鼠具有良好的降尿酸作用。     

麝香保心丸对高尿酸血症大鼠炎症因子的影响

目的:观察麝香保心丸对高尿酸血症大鼠血清炎症因子(白介素-6)IL-6、(C反应蛋白)CRP和(单核细胞趋化蛋白-1)MCP-1的影响。方法:2%氧嗪酸钾饲料喂养诱导高尿酸血症模型,成功后大鼠随机分模型对照组和麝香保心丸干预组,用苦味酸法检测大鼠血清尿酸浓度,采用放射免疫法检测大鼠血清IL-6、CRP和MCP-1含量。结果:2%氧嗪酸钾饲料饮食可成功诱导高尿酸血症模型,与正常对照组相比,模型对照组血清炎症因子含量明显增加(P0.01),用麝香保心丸干预后,大鼠血清炎症因子含量有所下降(P0.01)。结论:麝香保心丸可抑制高尿酸血症大鼠诱导的炎症反应。     

清热排毒胶囊对高尿酸血症大鼠血尿酸及黄嘌呤氧化酶的影响

目的观察清热排毒胶囊对高尿酸血症大鼠血清尿酸及肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响,探讨其部分作用机理。方法选用健康SPF级SD雄性大鼠48只,随机分成空白组、模型组、别嘌醇组及清热排毒胶囊高、中、低剂量组,各组均予相应药物灌胃7d后,采用腹腔注射次黄嘌呤及皮下注射氧嗪酸钾制备大鼠高尿酸血症模型。检测大鼠血清尿酸（UA）及肝脏黄嘌呤氧化酶活性（XOD）。结果清热排毒胶囊高剂量组大鼠血清UA水平显著降低（P〈0.01）。清热排毒胶囊高、低剂量可抑制大鼠肝脏XOD活性,与模型组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论清热排毒胶囊可通过抑制肝脏黄嘌呤氧化酶活性而降低血清尿酸水平。     

枸杞提取物对慢性高尿酸血症的治疗作用及机制研究

目的:研究枸杞提取物对氧嗪酸钾联合酵母膏致慢性高尿酸血症小鼠的尿酸(Uric Acid,UA)代谢及黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)活性的影响。方法:KM小鼠予枸杞提取物(10、5、2.5 g/kg)预防给药1周,后边造模边给药3周,给药4周后检测各组小鼠血清UA、XOD活性、TNF-α及IL-1β水平并进行肾组织病理学检查。结果:与模型组相比,枸杞提取物高、中剂量组小鼠血清UA水平、XOD活性、TNF-α及IL-1β水平明显降低(P0.05)。肾小球萎缩情况有明显好转。结论:枸杞提取物对氧嗪酸钾联合酵母膏建立的慢性高尿酸血症模型有一定疗效且高剂量与别嘌醇作用相当,其作用机制可能与抑制炎症因子TNF-α、IL-1β有关。     

东革阿里乙醇提取物对氧嗪酸钾致高尿酸血症大鼠尿酸的影响

目的:评价东革阿里乙醇总提物对氧嗪酸钾致高尿酸血症模型大鼠的影响。方法:使用氧嗪酸钾诱导高尿酸血症大鼠模型,以大鼠血清中尿酸含量110μmol/L为造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型组、别嘌醇阳性对照组及东革阿里乙醇总提物高、低剂量组,给予相应药物处理。测定不同时间点大鼠血清尿酸水平。给药结束后检测大鼠肝脏和血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)活性。病理组织切片HE染色方法检查东革阿里乙醇总提物对大鼠肾脏组织病理学的影响。结果:东革阿里乙醇总提物能显著降低大鼠血清尿酸水平及肝脏和血清中XOD、ADA活性,改善肾脏组织病理学改变。结论:东革阿里乙醇总提物能显著降低高尿酸血症大鼠尿酸水平,改善肾脏组织病理学改变。     

芒果苷对高尿酸血症小鼠血尿酸及嘌呤代谢相关酶表达的影响

目的:研究芒果苷对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸的影响以及对磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS),磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT) mRNA表达水平的影响。方法:雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常组、高尿酸血症模型组、芒果苷1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg~(-1)组、别嘌醇组(1. 0 mg·kg~(-1)),每组10只。按10 m L·kg~(-1)每天灌胃给药2次,连续10次,给药后1 h再灌胃给予氧嗪酸钾(500. 0 mg·kg~(-1))诱导形成高尿酸血症小鼠。磷钨酸法测血清尿酸水平,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏PRPS,PRPPAT和脑组织中HGPRT mRNA的表达水平。结果:灌胃给予氧嗪酸钾后,与正常组比较,模型组小鼠血尿酸水平显著升高(P 0. 05);给予芒果苷和别嘌醇后,与模型组比较,芒果苷各剂量(1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg~(-1))和别嘌醇(1. 0 mg·kg~(-1))均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P 0. 05,P 0. 01);与正常组和模型组比较,芒果苷各剂量组小鼠肝脏PRPS和PRPPAT mRNA的表达没有显著性差异,小鼠脑组织中HGPRT mRNA表达水平也没有显著性差异。结论:在本实验条件下,芒果苷的降尿酸作用与嘌呤代谢相关酶PRPS,PRPPAT和HGPRT mRNA的表达无关。     

栀子苷降尿酸作用研究

目的：探讨栀子苷对高尿酸血症小鼠的影响。方法：用氧嗪酸钾连续7 天灌胃造成小鼠高尿酸血症模型,同时每天灌胃栀子苷（50、100、200 mg?kg-1）,检测小鼠血清尿酸（SUA）、尿尿酸（UUA）、肝脏黄嘌呤氧化酶活性（XOD）。结果：栀子苷中、高剂量能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平（P<0.01）。结论：栀子苷可通过促进尿酸排泄降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平。     

抑酸复合茶对高尿酸血症模型大鼠肾功能的影响及降尿酸作用机制研究

目的:采用高尿酸血症模型大鼠研究抑酸复合茶对高尿酸血症的防治作用,并探讨其降尿酸的作用机制。方法:大鼠适应性饲养1周后根据随机分组原则分为正常对照组、模型组、别嘌醇组及抑酸复合茶高、低剂量组,每组各12只。除正常对照组外,其余各组均采用腺嘌呤联合氧嗪酸钾连续灌胃3周以建立高尿酸血症模型,建模同时给予药物干预,观察各组大鼠给药前后血尿酸(UA)及给药后尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)、一氧化氮(NO)的变化。采用Western blot法检测抑酸复合茶对HEK293细胞URAT1和GLUT9表达的影响。结果:给药后,与模型组比较,抑酸复合茶高剂量组UA、BUN、Scr、Cys C均降低,NO升高,差异均有统计学意义(P 0.05);低剂量组UA、BUN降低,NO升高,差异亦有统计学意义(P 0.05);与别嘌醇组比较,抑酸复合茶高剂量组Cys C下降,NO升高,差异有统计学意义(P 0.05);抑酸复合茶还可使HEK293细胞中URAT1和GLUT9的表达量降低。结论:抑酸复合茶对高尿酸血症大鼠降尿酸作用明显,且对血管内皮细胞和肾功能具有一定的保护作用;其作用机制可能是通过下调肾脏URAT1和GLUT9蛋白表达而发挥。     

祛湿泄浊合剂对高尿酸血症模型小鼠血清尿酸以及肾脏XOD、ADA的影响

目的:观察祛湿泄浊合剂对高尿酸血症模型小鼠尿酸、肾功能以及肝脏的黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)的影响。方法:采用氧嗪酸钾混悬液按照400 mg·kg-1的剂量一次性腹腔注射制备小鼠高尿酸血症模型,将84只小鼠随机分为对照组、模型组、痛风定对照组、祛湿泄浊合剂低剂量组、中剂量组、高剂量组。自由饮食7 d,使用氧嗪酸钾混悬液腹腔注射,2 h后取各组小鼠,摘眼球取血测定尿酸、肾功能。24小时后取小鼠肝脏,进行均浆,测定肝组织中XOD、ADA的活性。结果:与模型组比较,祛湿泄浊合剂中剂量组能降低氧嗪酸钾盐所致的小鼠高血尿酸,差异有统计学意义(P0.05),与对照组比较,模型组能提高小鼠血尿酸水平,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,其余各组小鼠的黄嘌呤氧化酶及腺苷脱氨酶的活性均增高,差异具有统计学意义(P0.01);与对照组比较,模型组、祛湿泄浊合剂各剂量组黄嘌呤氧化酶及腺苷脱氨酶的活性明显改善,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:祛湿泄浊合剂能够有效降低高尿酸血症小鼠模型的血尿酸水平,可能与影响XOD、ADA酶的活性有关。