藤梨根诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的调节机制

目的研究藤梨根（Actinidia arguta）抑制人食管癌Eca-109细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法采用MTT比色法,检测藤梨根正丁醇药液在不同浓度（1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml等）及不同时间（24 h、48 h、72 h等）对Eca-109细胞生长抑制作用;采用免疫组化SP法,检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Caspase的表达。结果藤梨根正丁醇药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%。瘤细胞作用24 h﹑48 h﹑72 h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强（P〈0.01）;同时伴有Bcl-2表达减弱7,2 h后最明显,差异有显著意义（P〈0.01）。藤梨根正丁醇药液促进Caspase-3、Caspase-9表达明显增强,而对Caspase-8表达影响较小。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达,激活Caspase-9、Caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。     

茶多酚对食管癌Eca-109细胞生长的影响

目的:研究茶多酚对食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用。方法:采用MTT法检测茶多酚对食管癌Eca-109细胞生长活性的抑制,BrdU掺入实验分析茶多酚对食管癌Eca-109细胞增殖指数的影响,流式细胞分析仪分析茶多酚对食管癌Eca-109细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:MTT实验证实茶多酚对食管癌Eca-109细胞生长有抑制作用,且呈剂量-效应关系。BrdU掺入实验证实茶多酚可以降低食管癌Eca-109细胞的生长分数。流式细胞仪检测发现茶多酚可以阻滞食管癌Eca-109细胞的细胞周期,使其停滞于G0/G1期,并诱导食管癌Eca-109细胞凋亡。结论:茶多酚对食管癌Eca-109细胞有抑制作用,机制可能与降低食管癌Eca-109细胞的增殖指数、阻滞细胞及诱导细胞凋亡有关。     

南蛇藤提取物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡

[目的]观察南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物在体外对Hela宫颈癌细胞的凋亡作用。[方法]采用MTT法观察南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物对Hela宫颈癌细胞增殖的影响。应用FITC-AnnexinⅤ及碘化丙叮(PI)双重染色法,通过流式细胞仪(FCM)观察Hela细胞的凋亡率及p53基因表达情况。[结果]不同浓度的南蛇藤提取物(15、30、60、120μg/ml)对Hela细胞均有良好的抑制作用,呈剂量依赖性关系,并剂量依赖性地诱导肿瘤细胞凋亡。FCM检测发现随着南蛇藤提取物浓度的逐步上升,胞内p53蛋白表达亦逐渐上升。[结论]南蛇藤具有抑制Hela细胞增殖及诱导其凋亡作用,上调p53表达可能是其抗肿瘤作用的重要机制之一。     

尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响,研究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨尼美舒利诱导Eca-109细胞凋亡的作用机制.方法:尼美舒利作用Eca-109细胞后,MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化,Western blot检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果:尼美舒利(50～400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导Eca-109细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;尼美舒利可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论:尼美舒利可诱导人食管癌细胞株Eca-109凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Caspase-3表达有关.     

连翘提取物体外抗肿瘤活性的初步研究

目的:观察连翘根、叶和果3个部位各自的醇提物和水提物对食管癌细胞体外增殖和凋亡的影响,探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)的抗肿瘤机制。方法:分别制备连翘根、叶和果3个部位的醇提物和水提物,用MTT法检测6种连翘提取物对食管癌细胞TE-1、TE-13、Yes-2、Eca-109的增殖抑制作用;然后用不同浓度FSEER处理食管癌细胞24 h后用倒置相差显微镜和瑞氏-吉姆萨染色观察细胞的形态学变化,再分别用不同浓度FSEER处理TE-13细胞不同时间后,以Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪检测TE-13细胞凋亡率的变化,Western blot检测PARP蛋白表达变化。结果:6种连翘提取物对食管癌TE-13细胞均有增殖抑制作用(P0.05),其中FSEER效果最明显。经FSEER处理后,TE-13细胞显示典型的凋亡形态变化,与对照组相比凋亡率明显增高(P0.05),PARP蛋白出现了裂解片段的表达,且呈现一定的剂量和时间依赖性。结论:FSEER体外对人食管癌细胞的增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

In vitro anti-tumor activity of Forsythiasuspensa extract

目的:观察连翘根、叶和果3个部位各自的醇提物和水提物对食管癌细胞体外增殖和凋亡的影响,探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)的抗肿瘤机制.方法:分别制备连翘根、叶和果3个部位的醇提物和水提物,用MTF法检测6种连翘提取物对食管癌细胞TE-1、TE-13、Yes-2、Eca-109的增殖抑制作用;然后用不同浓度FSEER处理食管癌细胞24 h后用倒置相差显微镜和瑞氏-吉姆萨染色观察细胞的形态学变化,再分别用不同浓度FSEER处理TE-13细胞不同时间后,以Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪检测TE-13细胞凋亡率的变化,Western blot检测PARP蛋白表达变化.结果:6种连翘提取物对食管癌TE-13细胞均有增殖抑制作用(P＜0.05),其中FSEER效果最明显.经FSEER处理后,TE-13细胞显示典型的凋亡形态变化,与对照组相比凋亡率明显增高(P＜0.05),PARP蛋白出现了裂解片段的表达,且呈现一定的剂量和时间依赖性.结论:FSEER体外对人食管癌细胞的增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡有关.     

藤梨根正丁醇提取物通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路诱导乳腺癌细胞自噬和凋亡的实验研究

目的 探讨藤梨根正丁醇提取物体外对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡和自噬的影响及可能分子机制.方法 MTT法、Annexin V/PI双染法、Hoechst33342染色法检测藤梨根正丁醇提取物对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡活性的影响.转染pEGFP-LC3自噬指示质粒观察细胞内自噬流.Western b...     

刺五加叶皂苷联合冬凌草甲素对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用

目的 研究刺五加皂苷联合冬凌草甲素对体外培养的Eca-109细胞的增殖、细胞生长周期和诱导凋亡的影响.方法 以浓度0.75 g/L的刺五加皂苷与不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的Eca-109细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,观察细胞生长状态的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率.结果 两药联用时可明显的抑制Eca-109细胞的生长,流式细胞仪结果显示,各实验组S期细胞百分率明显升高,G0～G1期细胞百分比明显下降,细胞被阻滞于S期,细胞凋亡率升高.结论 刺五加皂苷与冬凌草甲素联合应用对Eca-109细胞的增殖具有明显抑制作用,对其细胞周期的影响及诱导细胞凋亡可能是其重要机制之一.     

去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制

目的:探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞的凋亡及其可能的作用机制.方法:去甲斑蝥素作用食管癌Eca-109细胞后,应用MTT法检测其对细胞的生长抑制作用, 透射电子显微镜下观察细胞超微结构的变化,琼脂糖凝胶电泳观察其对细胞凋亡的诱导作用,RT-PCR法检测caspase 8和caspase 3 mRNA的表达,Western 印迹法检测Fas、细胞型含死亡域的Fas结合蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cellular FADD-like interleukin-1β converting enzyme inhibitory protein,c-FLIP) 、caspase 8和caspase 3蛋白的表达.结果:去甲斑蝥素对人食管癌Eca-109细胞具有生长抑制作用,并呈时效和量效依赖关系.电子显微镜下观察发现, 食管癌Eca-109细胞趋于凋亡.DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带.RT-PCR检测显示,caspase 8和caspase 3 mRNA的表达水平明显上升 (P<0.01).Western 印迹法检测结果显示,与阴性对照组比较,去甲斑蝥素作用后,食管癌Eca-109细胞中Fas、caspase 3和caspase 8蛋白的表达明显上升(P<0.05),c-FLIP蛋白的表达水平明显下降(P<0.05).结论:去甲斑蝥素能够抑制食管癌Eca-109细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能是通过上调Fas、caspase 8、caspase 3的表达和下调c-FLIP的表达来实现的.