正常人骨髓CD34~＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，李秀森，唐佩弦，孔繁华关键词造血干细胞；骨髓中国图书资料分类号Ｒ５５１．１ＣＤ３４＋ＨＳＣ／ＨＰＣ因具有自我更新、多向分化及重建长期造血的独特生...     

粒细胞集落刺激因子对骨髓移植及外周血祖细胞保护的骨髓造血重建

１１ 例急性白血病及中－ 高恶性度非何杰金氏淋巴瘤患者，采用自体／异基因骨髓移植和外周血造血祖细胞保护的大剂量化疗。骨髓或外周血造血祖细胞回输后，开始使用Ｇ－ ＣＳＦ ２．５－ ５ μｇ／ｋｇ，１／日。Ｇ－ＣＳＦ使用天数分别为：外周血造血祖细胞保护组１１±２ ｄ；自体骨髓移植组１８±２ ｄ；异基因骨髓移植组２０±２ ｄ。骨髓涂片显示：骨髓增生活跃。外周血象恢复时间缩短，骨髓及外周血ＣＦＵ－ＧＭ ，ＢＦＵ－Ｅ， ＣＦＵ －ｍ ｉｘ 培养和ＣＤ３４＋ ＣＤ３８＋ 、ＣＤ３４＋ ＣＤ３８－ 细胞检测表明造血祖细胞恢复良好。Ｇ－ＣＳＦ能促进骨髓造血重建，缩短骨髓空虚期，减少严重感染的发生     

正常人骨髓CD34~＋造血干／祖细胞的超微特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的超微特征１０００３９北京军事医学科学院附属医院奚永志，张双喜，江飞子，唐佩弦，魏文，孔繁华关键词造血于细胞；超微结构中国书资料分类号Ｒ３２９．２４经典的干细胞概念仅基于细胞的功能方面，无任何形态学的特征。那么ＨＳ...     

两步法聚合酶链反应克隆编码CD34蛋白质胞外区的基因片段

两步法聚合酶链反应克隆编码ＣＤ３４蛋白质胞外区的基因片段刘明东马恩普韩颍刘秀珍北京放射医学研究所北京１００８５０ＣＤ３４抗原局限表达于造血干／祖细胞，在正常骨髓单个核细胞中仅有１％～３％的细胞表达ＣＤ３４，本研究通过逆转录后采用两次聚合酶链反应（ＰＣ...     

快速富集大量人类CD34~＋造血干／祖细胞的有效途径

快速富集大量人类ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的有效途径１００８５０北京军事医学科学院基础医学研究所李秀森，奚永志中国图书资料分类号Ｒ３９２．３３造血干细胞（ＨＳＣ）具有自我更新和多向分化的能力，能产生各系造血祖细胞。它在造血功能的维持与修复中所起的重要...     

脐血与成人外周血,骨髓中造血干／祖细胞数量汲增殖比较

应用免疫磁珠分离法及甲基纤维素体外集落培养法分别观赏了脐血、成人外周血及骨骨右ＣＤ３４＾＋细胞数疸和ＣＦＵ－Ｍｉｘ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成情况，并进行了比较研究，结果显示脐血造血干／祖细胞数量及增殖能力明显高于成人外周血和骨髓，脐血中ＣＤ３４＾＋细胞数分别是成人外周血和骨髓的２０￣４０倍和４￣５倍，脐血外周血的４倍和３倍，而与骨髓基本相当。     

流式细胞术对免疫磁珠法富集的CD34^＋造血干／祖细胞分析与鉴定

流式细胞术对免疫磁珠法富集的ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞分析与鉴定１００８５０北京军事医学科学院张双喜，奚永志，唐佩弦关键词造血干细胞；流式细胞术；细胞分离术中国图书资料分类号Ｑ３３ＣＤ３４＋造血细胞为造血调控的基础研究、骨髓移植与基因治疗的最理想的靶...     

脐带血造血干细胞的“质”“量”研究

目的 对脐带血造血干细胞移植的“质”“量”作出评估，使其更广泛有效地应用于临床。 方法 利用免疫磁珠分离法、ＦＡＣＳ分析与分选、体外液体培养，铺展贴壁等方法对脐带血ＣＤ３４＾＋造血干、粗细胞及其的数量、体外增殖分化性能、生长因子扩增效应，植入成人骨髓基质效率等进行研究，数据经ｔ检验。结果 脐带血有核细胞、ＣＦＣｓ、ＣＤ３４＾＋细胞及其亚群等的绝对数量明显低于常规骨髓移植所需的细胞数量，但脐带血ＣＤ     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血干细胞的辐射防护作用

目的：骨髓造血干细胞（ｈｅｍｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）损伤所致的造血抑制是急性骨髓型放射病死亡的重要原因之一，本实验旨在观察人基因工程重组超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）对ＨＳＣ有无辐射防护作用以及化学修饰对ｒｈＳＯＤ抗辐射作用的影响。方法：实验用照射小鼠的外源性脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）形成法。组间比较用ｔ检验。结果：ｒｈＳＯＤ和ＰＥＧ－ＳＯＤ均能明显提高ＣＦＵ－Ｓ形成数，其中ｒｈＳＯＤ在照射前１小时给药效果好，而ＰＥＧ－ＳＯＤ在照射前２～３小时给药作用更为明显。结论：ｒｈＳＯＤ具有对骨髓造血于细胞的辐射防护作用，化学修饰后ＳＯＤ的血浆半衰期延长而使药物作用持续时间延长。     

程序性细胞死亡调控蛋白P53、c一myc及bcl－2在人骨髓CD34~＋造血干祖细胞中的表达

程序性细胞死亡调控蛋白Ｐ５３、ｃ一ｍｙｃ及ｂｃｌ－２在人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干祖细胞中的表达１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，郝秀娟，唐佩弦，魏文，孔繁华关键词造血干细胞；基因表达中国图书资料分类号Ｑ３４３．１涉及到造血，人们更为关注...     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力

根据阳性选择策略，采用ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将其在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＳ）组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。经ＦＡＣＳ鉴定所富集的ＣＤ３４＋造血细胞纯度平均＞９０％。人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞，最高可扩增１７７０倍。与ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ相反，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ扩增量较低，最高仅为２．３６和２．４倍，且仅在第１周出现，随后迅速减少至停止。     

骨髓细胞经酸性成纤维细胞生长因子孵育后程序移植的实验研究

目的　充分利用酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ） 促进造血重建的作用,以进一步完善程序移植新方法。方法　以昆明种小鼠急性放射病为模型,进行了骨髓细胞（ＢＭＣ） 经自牛脑中制备的ａＦＧＦ孵育后程序移植对造血重建、急性移植物抗宿生病（ＧＶＨＤ） 的研究。结果　ａＦＧＦ 孵育后程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ ,存活率达４０％ ,比单纯一次移植ＢＭＣ１ ×１０７ 组高（３０％ ）,但不如单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 组（６０％ ）;另一方面,外周血白细胞、骨髓有核细胞计数、ＣＦＵＥ、ＣＦＵＧＭ、ＣＦＵＳ比一次骨髓移植１×１０７ 组和单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 回升快,而ＣＦＵＦ回升无差别;ＧＶＨＤ较一次骨髓移植１ ×１０７ 组轻,较骨髓程序移植４ ×１０６ 重。结论　引起ＧＶＨＤ 的主要原因是异基因Ｔ淋巴细胞,通过ａＦＧＦ孵育后程序移植可以更充分地发挥其促进造血重建的作用,而减轻ＧＶＨＤ。     

人正常骨髓CD34＋造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖…

根据阳性选择策略，彩ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。     

rhGM－CSF对狗骨髓辐射损伤治疗作用的定量病理研究

目的：为了解细胞因子对骨髓辐射损伤的治疗作用。方法：用＾６０Ｃｏγ射线以５．５Ｇｙ照射１４只比格狗条，静脉注射低剂量（１０μｇ／ｋｇ·ｄ）及高剂量（２０μｇ／ｋｇ·ｄ）ｒｈＧＭ－ＣＳＦ，连续２０天，动物于照射后３０天活杀取胸骨，采用Ｈ·Ｅ及Ａｇ－ｎｏｒ嗜银蛋白染色和图像分析等技术，定量研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血的促进作用。结果表明：高剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓辐射损伤后造血重建有明显的促     

胎肝基质细胞强化骨髓移植治疗急性放射病

目的为进一步提高骨髓移植效果。方法以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了胎肝基质细胞强化同种异基因骨髓移植，观察了小鼠造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及小鼠存活率。结果胎肝基质细胞移植可强化骨髓移植效果，与单纯骨髓移植组比较，于照射后第１１天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数，ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ、ＣＦＵ－Ｓ回升较快，ＣＦＵ－Ｆ已达正常，于照射后第１７天造血得以重建；ＧＶＨＤ较轻，存活率显著提高，达６０％。结论胎肝基质细胞改善了造血微环境，可能既改善了“龛位”，又增加了“龛位”使干细胞更多的植入，促进了造血重建，提高了骨髓移植效果，是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

异基因骨髓移植供者使用粒细胞集落刺激因子对骨髓重建与移植物抗宿主病的影响

异基因外周血干细胞移植，具有造血重建快，粒细胞缺乏和血小板减少期缩短，增加了移植期的安全性，由于输入Ｔ淋巴细胞数量较多，可能增加移植物抗宿主病（ｇｒａｆｔｖｅｒｓｕｓｈｏｓｔｄｉｓｅａｓｅ，ＧＶＨＤ）的发病率，特别是慢性ＧＶＨＤ［１］。在小鼠不相合的骨髓移植实验研究，提前使用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）动员供者骨髓，移植后降低了重症ＧＶＨＤ的发生，提高了生存率［２］。在自体骨髓移植中，加用少量外周血干细胞，可加速造血重建［３］。本文在ＨＬＡ相合的异基因骨髓移植中，提前给供者使用（Ｇ－ＣＳＦ）…     

rhGM－CSF对狗骨髓辐射损伤治疗作用的定量病理研究

目的；为了解细胞因子对骨髓辐射损伤的治疗作用。方法：用６０Ｃｏγ射线以５．５Ｇｙ照射１４只比格狗后，静脉注射低剂量（１０μｙ／ｋｇ·ｄ）及高剂量（２０μｇ／ｋｇ·ｄ）ｒｈＧＭ－ＣＳＦ，连续２０天，动物于照射后３０天活杀取胸骨，采用Ｈ·Ｅ及Ａｇ－ｎｏｒ嗜银蛋白染色和图像分析等技术，定量研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血的促进作用。结果表明：高剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓辐射损伤后造血重建有明显的促进作用，即ｒｈＧＭ－ＣＳＦ能使骨髓中有核细胞数显著增多；能使增殖活跃的单核系细胞亦增多，与照射对照组比，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。讨论：高剂量ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓造血功能的重建有促进作用。     

人脐血分次移植重症联合免疫缺陷小鼠的实验研究

目的：探讨提高脐血移植效果的新方法,进一步了解脐血造血干细胞体内生长特性。方法以经亚致死剂量γ射线照射后的重症联合免疫缺陷小鼠为动物模型,进行了冻存人脐血的分次移植。利用人粒－单系祖细胞培养及流式细胞仪,检测植入小鼠骨髓等器官中人源性细胞。结果与一次移植相比,分次移植相同细胞数时,小鼠骨髓中人ＣＤ４５＾＋、ＣＤ３４＾＋细胞水平明显提高;分次移植细胞数降低到２０％时,其造血及部分免疫功能恢复到相近水     

人工合成HDV抗原27肽的应用—血清抗HDV的检测

采用自行设计、选择含天然ＨＤＡｇ部分片段的人工合成２７肽建立ＥＩＡ检测抗ＨＤＶ方法，在国内８家医院检测各类人员中血清抗ＨＤＶ状况。ＨＤＶ抗原合成肽由中国科学院上海生物化学研究所合成。结果：献血员（３１５例），甲型肝炎（１１３例）和非乙型肝炎（１５４例）中２例阳性；在ＨＢＶ感染者中共检出抗ＨＤｖ（＋）为２ｌ５／１４８２（１４．５１％）。其中ＡｓＣ为１４／４１４（３．３８％）、ＡＨ为１１／７６（１４．４７％），ＣＰＨ为５／２８（１７．８６％）、ＣＡＨ为３２／１８１（１７．６８％）ＳＨ为１７／８６（１９．７７％），ＬＣ为５２／１４２（３６．６２％），ＰＨＣ为３０／１３０（２３．０８％），另５４／４２５（１２．７１％）未分型。同一单位抗ＨＤＶ的检出与已往用市售试剂结果基本一致，与Ａｂｂｏｔｔ试剂符合率为９４．９％（７４／７８）。提示本ＨＤＶ抗原２７肽具有ＨＤＶ抗原活性，能特异地为天然抗ＨＤＶ识别，可作为检测抗ＨＤＶ诊断试剂。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的：了解高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）骨髓红系组细胞增殖状况。方法：ＨＡＰＣ患者２５例，正常对照２２例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ）增殖能力，ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ对红细胞生成素（Ｅｐｏ）的反应能力，结果：ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ集落数分别高于正常对照。Ｅｐｏ对ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ集落数差异显著（Ｐ〈０．０１）。结论：ＨＡＰＣ